高铁血红蛋白还原检测试剂盒(微板法)
总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(FRAP 微板法)说明书
植物样品的吸光度值和 0.5mM 的 Fe2+的吸光度值相同,则该血浆(血清)样品的总抗氧化 能力为 0.5mM/(0.5g/5ml)=0.5mmol/100g;
血浆(血清)样品的吸光度值和 0.7mM 的 Fe2+的吸光度值相同,则该血浆(血清)样品的总抗 氧化能力为 0.7mM;
细胞(组织)匀浆样品的吸光度值和 0.3mM 的 Fe2+的吸光度值相同,该匀浆液蛋白浓度为 0.2mg/ml,则该细胞(组织)样品的总抗氧化能力为 0.3mM/0.2mg/ml=0.15mmol/g; 0.3mM 的抗氧化物质,其吸光度值和 0.6mM 的 Fe2+的吸光度值相同,则其相对总抗氧化能力为 0.6mM/0.3mM=2。
注意事项: 1、 实验材料应尽量新鲜,样品提取的整个过程最好在 4℃条件下进行;如取材后不能立即 检测,也可以-80℃冻存后再进行测定(应在 1 个月内测定完毕)。 2、 亚铁标准溶液如变为黄色或棕黄色应弃用。 3、 测定 593nm 如有困难,亦可在 585~605nm 范围内进行测定。 4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(FRAP 微板法)即 Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method,简称 T-AOC Assay Kit,是一种采用铁离子还原能力(Ferric Reducing Ability of Plasma,FRAP)来测定样品抗氧化活性的方法,其原理是在酸性条件下样品中的抗 氧化物质还原 Fe3+-TPTZ 产生 Fe2+-TPTZ,呈现出明显的蓝色(紫色),于 593nm 处有最大 的光吸收,在 Fe3+-TPTZ 过量的情况下测定蓝色物质的生成量即可获得待测样品的还原能 力即总抗氧化能力,由于反应在酸性条件下进行,可以抑制内源性的一些干扰因素,并且由 于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于 10μM,因此血浆等样品中的铁离 子或亚铁离子不会显著干扰 FRAP 法的检测反应,本方法可以对血浆、血清、尿液等各种体 液,细胞或组织裂解液、植物或中草药抽提液或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力进行检测。 该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
高铁血红蛋白鉴定试验
高铁血红蛋白鉴定试验1. 介绍高铁血红蛋白鉴定试验是一种用于检测高铁血红蛋白症的方法。
高铁血红蛋白症是一种罕见的遗传性疾病,患者的血液中存在异常形式的血红蛋白,导致氧气无法正常运输到身体各个组织和器官中。
2. 疾病背景高铁血红蛋白症是由HbM基因突变引起的。
正常情况下,人体内的血红蛋白主要由两种类型组成:氧合态(Fe2+)和去氧态(Fe3+)。
然而,在高铁血红蛋白症患者中,还存在一种异常形式的血红蛋白——高铁血红蛋白(MetHb),其中铁原子处于氧合态(Fe3+)。
由于高铁血红蛋白无法有效地与氧结合,患者体内无法正常运输氧分子。
这导致了一系列严重的健康问题,包括氧气供应不足、缺氧、疲劳、心血管疾病等。
3. 高铁血红蛋白鉴定试验原理高铁血红蛋白鉴定试验主要基于比色法。
该方法利用高铁血红蛋白与某种化学物质(如亚硝酸钠)反应产生的特定颜色进行判断。
具体步骤如下: 1. 取患者的静脉血样本。
2. 加入一定量的亚硝酸钠溶液,使高铁血红蛋白还原为正常的氧合态血红蛋白。
3. 加入某种指示剂(如二甲基苯胺),与还原后的血红蛋白反应生成特定颜色。
4. 通过比色计或分光光度计测量样本中的吸光度,进而确定高铁血红蛋白的含量。
4. 实验操作步骤4.1 准备工作•洗手并佩戴手套。
•准备所需试剂和设备:亚硝酸钠溶液、二甲基苯胺、比色计或分光光度计等。
4.2 样本处理1.取患者的静脉血样本,注意采用无菌操作。
2.将血样倒入试管中,避免气泡的产生。
3.加入适量的亚硝酸钠溶液,使高铁血红蛋白还原为正常的氧合态血红蛋白。
4.3 指示剂反应1.加入适量的二甲基苯胺指示剂。
2.震荡混合,确保试剂均匀分布。
4.4 比色测定1.将试管放入比色计或分光光度计中。
2.设置所需波长,并记录基准吸光度(如果需要)。
3.测量样品的吸光度值。
5. 结果解读通过测量样品的吸光度值,可以得到高铁血红蛋白的含量。
根据一般情况下正常人体内高铁血红蛋白含量较低,可以将其作为参考标准。
谷胱甘肽还原酶(GR)活性检测试剂盒说明书 微量法
北京索莱宝科技有限公司谷胱甘肽还原酶(GR)活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC1165规格:100T/96S产品内容:试剂一:液体120mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体1mL×1支,4℃保存。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。
临用前加入2.0mL蒸馏水,混匀。
产品说明:GR是广泛存在于真核和原核生物中的一种黄素蛋白氧化还原酶,GR是谷胱甘肽氧化还原循环的关键酶之一(通常昆虫中GR被TrxR取代)。
GR催化NADPH还原GSSG生成GSH,有助于维持体内GSH/GSSG比值。
GR在氧化胁迫反应中对活性氧清除起关键作用,此外GR还参与抗坏血酸-谷胱甘肽循环途径。
GR能催化NADPH还原GSSG再生GSH,同时NADPH脱氢生成NADP+;NADPH在340nm有特征吸收峰,相反NADP+在该波长无吸收峰;通过测定340nm吸光度下降速率来测定NADPH脱氢速率,从而计算GR活性。
自备仪器和用品:低温离心机、水浴锅、移液器、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)和蒸馏水操作步骤:一、粗酶液提取:称约0.1g组织,加入1.0mL试剂一,冰上充分研磨,10000rpm4℃离心10min,取上清液,待测。
二、GR测定操作:1.分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长到340nm,蒸馏水调零。
2.试剂一置于25℃(普通物质)或者37℃(哺乳动物)中预热30min以上。
3.空白管:取微量石英比色皿或96孔板,加入10μL试剂二,20μL试剂三,170μL试剂一,于340nm 测定10s和190s吸光度,记为A空1和A空2。
第1页共3页4.测定管:取微量石英比色皿或96孔板,加入10μL试剂二,20μL试剂三,20μL上清液,150μL试剂一,于340nm测定10s和190s吸光度,记为A测1和A测2。
酶标仪微板凝集法检测血型的应用
酶标仪微板凝集法检测血型的应用建立Rh阴性稀有血型库需要从大量献血者中筛查,工作量大、检测成本较高。
而检测R h血型采用经典的试管法操作繁琐、肉眼判断结果缺乏客观性,不适合于大批量标本的检测;采用平板法也存在试验敏感性不足和不易标准化操作的缺点。
针对上述缺点,笔者经反复摸索,建立了微孔板—酶标仪微量法(微板法),经常规8650份标本的检测,符合率为100%。
1 材料与方法1.1 标本经EDTA-K2抗凝的无偿献血者全血标本。
1.2 试剂抗-D血型(中山生科公司)。
1.3 器材平底微孔反应板(国产);ID2S-2型平板离心机;TITRAMAX 1011型振荡仪;Multis Kan MK3型酶标仪;进口微量移液器。
1.4 方法微板法:将抗-D血清25μl和稀释成一定比例的待检红细胞10μl加到平底微孔反应板中,用振荡仪在一定条件下振荡均匀,再经平板离心机以1000r/min,离心1min,再用振荡仪在一定条件下振荡悬浮。
凝集的红细胞块散于孔底,不凝集的红细胞呈混悬状态。
用酶标仪630nm波长自动扫描,获取每孔的相对透光率(Tc)。
试管法和平板法同常规血型鉴定方法。
2 结果2.1 振荡条件的选择在混匀及悬浮过程中各选8标本(阴、阳性标本各4孔),在微孔中用上述方法加入抗-D血清和红细胞,用5、6、7档不同振幅,振荡时间分别为5、1 0、15、20、25、30s,振幅大小与震荡时间成反比,最终选择混匀条件6档振幅15s,悬浮条件6档振幅20s。
2.2 凝集试验与非凝集试验结果与透光率的关系选40个凝集(Rh阳性)和20个非凝集(Rh阴性)标本,自然沉降后取红细胞从原浓度到1∶32稀释度做倍比稀释,然后每孔按上述方法重复测3次,得到每孔的平均Tc,见表1。
凝集试验中红细胞从原浓度到1∶3 2稀释度时与透光率呈线形关系(n=4,tr=0.98>t0.01(4)=0.917,P<0.01);非凝集试验中红细胞从原浓度到1∶32稀释度时与透光率虽不是线形关系(n=3,tr=0.49<t0.01(3)=0.959,P>0.01),但其值在一定范围内波动,且随着稀释度的升高,透光率很快上升。
高铁血红蛋白还原试验比色法
高铁血红蛋白还原试验比色法1.实验原理有足量的NADPH存在下,反应液中的高铁血红蛋白能被高铁血红蛋白还原酶(即细胞色素b”亦称黄酶素)还原成(亚铁)血红蛋白。
在体外,这一还原过程还需要递氢体亚甲基蓝的参与。
当红细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(GJD)含量正常时,由磷酸戊糖代谢途径生成的NADPH的数量足以完成上述还原反应。
当红细胞内GPD含量不足或缺乏时,高铁血红蛋白还原速度减慢,甚至不6能还原。
高铁血红蛋白呈褐色,在波长635nm处有吸收峰,可用分光光度计加以测定。
2.标本:2.1病人准备:无特殊。
2.2类型:枸檄酸钠抗凝血(葡萄糖20mg)。
2.3标本采集:在试管中加入葡萄糖20mg,109mmo1∕1枸椽酸钠溶液0.2m1,静脉血1.8m1,混匀。
3.标本存放标本不宜存放。
4.标本运输常温条件下运输。
5.标本拒收标准抗凝剂不符合的、细菌污染的标本。
6.实验材料6.1.0.18mo1∕1亚硝酸钠和0.28mo1∕1葡萄糖混合溶液亚硝酸钠1.25g+葡萄糖5.Og+蒸储水加至100m1;贮存于棕色瓶中,放4℃冰箱,可保存1个月o6.20.4mmo1∕1亚甲基蓝溶液亚甲基蓝(含3个结晶水)0.15g+蒸储水加至100m1;先将亚甲基蓝放入乳钵中,加蒸储水少量研磨,待溶解后移到IOOm1容量瓶中,再加蒸储水至IoOnII 混匀过滤,此液可贮存3个月。
6.1.30.02mo1∕1磷酸盐缓冲液(pH7.4)磷酸氢二钠229.5mg+磷酸二氢钾52.2mg+蒸储水加至IOOn1I(或用0.0667mo1∕1pH7.4磷酸盐缓冲液稀释3倍。
6. 1.4109Imno1/1枸檬酸钠溶液(32g∕1).7.仪器722分光光度计,使用方法见其操作与维护规程.SOP文件。
8操作步骤8.1将标本离心15min取出,调整血细胞与血浆比例为1:1后再混匀。
8.2取上述抗凝血1m1,加亚硝酸钠葡萄糖混合溶液和亚甲基蓝溶液各0.05m1,颠倒混合15次,使与氧气充分接触,加塞后放37。
还原型谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(DTNB速率微板法)
还原型谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(DTNB 速率微板法)简介:谷胱甘肽(glutathione ,GSH)存在于几乎身体的每一个细胞,参与细胞许多功能活动,是一种氧自由基消除剂。
还原型谷胱甘肽(GSH)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽,由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成,能可逆的转变为氧化型谷胱甘肽(GSSG),其存在形式会随着细胞内代谢的情况而发生相互转变。
还原型谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(DTNB 速率微板法)(Glutathione Assay Kit)是一种简单易行的检测还原型谷胱甘肽的试剂盒,其检测原理是待测样品中的还原型谷胱甘肽(GSH)与发色底物DTNB 反应,产生稳定黄色的TNB 和GSSG ,获得样品的GSH 含量。
该试剂盒可用于检测血浆、血清、组织、细胞等样品中还原型谷胱甘肽(GSH)含量。
组成:操作步骤(仅供参考):1、 配制GSH 标准储存液:取10mg 还原型谷胱甘肽(GSH)标准加入3.25ml ddH 2O ,溶解并混匀,即为还原型GSH 标准储存液(10mM)。
一部分立即使用,其余适当分装后-20℃保存。
2、 配制GSH 检测工作液:按下表配制GSH 检测工作液。
1个样品 10个样品 50个样品 GSH assay buffer 0.2ml 2ml 10ml DTNB 储存液2.5μl25μl125μl3、 配制NADPH 工作液:在本试剂盒提供的10mg NADPH 中加入1ml ddH 2O ,溶解并混匀,即为NADPH 储存液(10mg/ml)。
4、 准备样品:① 红细胞或血浆样品的制备:请尽量使用新鲜的血液进行测定。
离心,沉淀为红细胞,上清为血浆。
对于红细胞,用PBS 洗涤两次。
取约5红细胞沉淀或血浆,加入蛋白沉淀编号 名称TO1036 100T Storage试剂(A): 还原型谷胱甘肽(GSH)标准 10mg 4℃ 避光 试剂(B): GSH assay buffer 100ml RT 试剂(C): DTNB 10mg RT 避光 试剂(F): DMSO 1.5ml RT 避光 试剂(G): ddH 2O 30mlRT 避光 使用说明书1份工作液,充分Vortex振匀。
总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪微板法)
总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪微板法)简介:铁是人体必需微量元素,总含量约为3270mg 。
铁分布较广,有67.6%的铁作为血红蛋白分子的辅基分布于血红蛋白中,参与铁的运输;骨骼和肌红蛋白中各存在2.59%和4.15%,储存铁约占25.37%血清中铁均以三价铁离子形式与转铁蛋白结合,因此测定血清铁时,首先需要Fe 3+与转铁蛋白分离。
总铁结合力(TIBC)检测试剂盒(亚铁嗪微板法)是采用分光光度法以亚铁嗪为底物进行总铁结合力的检测,在酸性介质中与转铁蛋白结合的血清铁从转铁蛋白中解离出来,再被还原剂还原为Fe 2+,后者与亚铁嗪生成紫红色化合物,通过酶标仪检测562nm 处吸光度值,适用于检测血清、血浆样品中的总铁含量,即为总铁结合力(TIBC)。
本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成:操作步骤(仅供参考):1、 制备处理样品铁溶液和铁标准工作液。
4℃避光保存3个月有效。
2、 制备样品:血浆、血清按照常规方法制备,可以直接用于本试剂盒的测定,-20℃冻存,用于TIBC 的检测。
选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥有塞子的试管或者一次性无菌聚乙烯有盖子的离心管,离心,取上清液,待用。
3、 TIBC 检测:选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥的试管或者一次性无菌聚乙烯的1.5ml 离心管,按下表操作。
编号 名称TC1011 100T Storage试剂(A): 铁标准(100μg/ml) 3ml 4℃ 避光 试剂(B): TIBC 铁标准稀释液 30ml RT 试剂(C): TIBC Assay buffer 25ml 4℃ 试剂(D): 亚铁嗪显色液 1ml 4℃ 避光 试剂(E): ddH 2O 1ml RT 试剂(G): 铁吸附剂 3gRT 使用说明书1份加入物 空白孔 标准孔 测定孔 ddH 2O/μl 75 — — 铁标准(2μg/ml)/μl — 75 — 待测样品/μl — — 75 Fe Assay buffer/μl200200200混匀,于562nm处,以空白孔调零,读取测定管吸光度(即血清空白)。
血红蛋白测定试剂盒(SLS-Hb法)产品技术要求ruierda
血红蛋白测定试剂盒(SLS-Hb法)适用范围:该试剂用于体外定量测定人全血中血红蛋白的含量。
1. 产品型号/规格及其划分说明1.1试剂(R):100ml×2(200测试);2. 性能指标【产品性能指标】1 试剂空白试剂空白吸光度值≤0.006。
2 线性区间测量范围[25,200]g/L,相关系数r≥0.99;相对线性偏差≤12%。
3准确度回收率90%~110%4分析灵敏度血红蛋白150g/L测定吸光度≥0.3705 测量精密度a)重复性变异系数≤10%。
b)批间差连续三批血红蛋白试剂盒测定同份血红蛋白液,其测定值的批间差≤10%。
【包装规格】试剂(R):100ml×2(200测试)【主要组成成分】试剂(R)缓冲液:0.04mol、十二烷基硫酸钠60g/L、稳定剂0.05 mol【产品性能指标】1. 试剂空白:试剂空白吸光度值≤0.0062. 线性区间:测量范围[25,200]g/L,相关系数r≥0.99;相对线性偏差≤12%。
3. 准确度:回收率90%~110%4. 分析灵敏度:血红蛋白150g/L测定吸光度≥0.3705. 精密度:a) 重复性:CV≤10%。
1. 产品型号/规格及其划分说明1.1 试剂(R):100ml×2(200 测试);校准品:2ml×1(选配);质控品:2ml×1(选配)1.2 组成成份:试剂(R):缓冲液 0.04mol、十二烷基硫酸钠 60g/L、稳定剂 0.05 mol校准品:水基质,氰化高铁血红蛋白浓度为125g/L(目标浓度)。
质控品:水基质,氰化高铁血红蛋白浓度为116.3g-133.8g/L。
注:校准品、质控品浓度具有批差异性,详见标签。
2. 性能指标2.1 外观试剂为无色透明无沉淀及絮状浮物溶液。
校准品质控品为棕褐色液体。
2.2 装量试剂净含量不少于标示值。
2.3 试剂空白试剂空白吸光度值≤0.006。
2.4 线性区间测量范围[25,200]g/L,相关系数 r≥0.99;相对线性偏差≤12%。
关于血型试剂微板包被可能性的调查报告
⑤ 固相法试剂盒相比传统的凝集法试剂生产工艺更复杂,因而其成本比微 板凝集法更高,血站经费较紧张,可能无法接受提高成本。如果固相法 的成本略高于微板凝集法试剂,血站也会考虑接受。(目前血站使用凝 集法进行 ABO 血型正反定型/RhD 血型定型实验,每人份成本在 5~10 元);
包被物名称
实验步骤
ABO 血 型 正反定型 /RhD 血 型 定型试剂 (固相免疫 吸附法)
:A 抗原 :B 抗原 :H 抗原 :D 抗原
加抗体试剂或待 检标本→室温孵 育 10min→加待检 标本红细胞或指 示细胞→混匀,离 心→判读
红细胞抗体 检测试剂 (固相免疫 吸附法)
:红细胞膜 抗原
加待测血清样本 →37℃孵育 30min →洗板 5 次→加指 示红细胞→混匀, 离心→判读
关于血型试剂微板包被可能性的调查报告
根据从网上查阅的资料和专家的指导,我对血型试剂微板包被的血型检测方 法有了初步了解,现将这几天调查了解的情况汇报如下:
1. 血型试剂微板包被的方法学 据调查,我国的血型试剂的微板包被技术由国外引进,是在 Elisa 和微板凝 集法的基础上发展而来的。该技术发明于 1898 年,经临床实践和不断优化改进, 目前已经发展成为一项成熟的血液检测技术。 目前国外采用微板包被的方法的血型试剂盒厂家不多,以美国 Immucor 公 司的血型检测试剂盒为主。 Immucor 公司的血型试剂微板包被的方法名称为:捕捉固相技术(英文名: Capture solid phase technology 或 Solid-Phase Method),试剂的使用一般与 Capture 工作站仪器配合使用。 我国在 2003 年左右将 Immucor 的固相技术引入国内,以长春博德生物技术 有限公司、英科新创(厦门)科技有限公司两家公司的产品为主,在 Immucor 的固相技术上发展成多种方法,主要有:固相凝集法、固相免疫吸附法、固相免 疫吸附抗人球蛋白试验法、磁珠法、高密度介质法。这些试剂都是开放的。 此外,传统的 Elisa 法也是将血型试剂包被于微板,用于 ABO/RhD 血型定 型和不规则抗体筛检。
血红蛋白转铁蛋白联合检测试纸(胶体金免疫层析法)产品技术要求lanshizi
血红蛋白/转铁蛋白联合检测试纸(胶体金免疫层析法)适用范围:体外定性检测人粪便中的血红蛋白(Hb)和转铁蛋白(Tf)。
1.1 包装规格1.1.1条型:1人份/袋,10人份/袋,25人份/袋;25人份/筒;1人份/盒,10人份/盒,25人份/盒,50人份/盒,100人份/盒。
1.1.2 板型:1人份/袋,10人份/袋,25人份/袋;1人份/盒,10人份/盒,20人份/盒,50人份/盒。
1.2 主要组成成分检测试剂盒由相应人份的检测试剂、干燥剂和取样器(选配)组成,其中检测试剂主要由固相于硝酸纤维素膜的抗鼠IgG多克隆抗体(质控线C)、抗人血红蛋白单克隆抗体1(检测线T1)和抗人转铁蛋白单克隆抗体1(检测线T2)、以及胶体金标记的抗人血红蛋白单克隆抗体2和抗人转铁蛋白单克隆抗体2组成。
2.1 物理性状2.1.1 外观试纸应整洁完整、无毛刺、无破损、无污染;材料附着牢固。
2.1.2 膜条宽度试纸膜条宽度应≥2.5 mm。
2.1.3 液体移行速度液体移行速度应不低于10 mm/min。
2.2 最低检测限2.2.1 人血红蛋白(T1)最低检测限应不高于200 ng/mL。
2.2.2 人转铁蛋白(T2)最低检测限不高于40 ng/mL。
2.3 特异性2.3.1 检测浓度为500 µg/mL的羊、鸡、牛、猪、兔、狗血红蛋白,检测结果均应为阴性。
2.3.2 检测浓度为200 μg/mL牛转铁蛋白样本和200 μg/mL狗转铁蛋白样本,检测结果均应为阴性。
2.3.3 检测浓度为2000 µg/mL的辣根过氧化物酶,检测结果均应为阴性。
2.3.4 检测纯化水及正常大便稀释液,检测结果均应为阴性。
2.3.5 检测浓度为5 μg/mL人血红蛋白样本,T2检测结果应为阴性。
2.3.6 检测浓度5 mg/mL人转铁蛋白样本,T1检测结果应为阴性。
2.4 重复性用重复性参考品平行检测10人份,其反应结果均应为阳性,且显色度均一。
高铁血红蛋白Hb还原试验
实验要求:
1. 掌握高铁血红蛋白还原试验的原理、结 果判断和临床意义;
2. 熟悉实验的操作方法、注意事项及评价。
原理:
在血液中加入亚硝酸盐使红细胞内的亚 铁Hb氧化为高铁Hb(Hi)。正常RBC的G-6-PD 催化戊糖旁路使NADP变成NADPH,在递氢 体亚甲蓝的参与下, Hi还原成Hb。当G-6-PD 缺乏时, Hi还原率下降,甚至不还原。通过 比色测定Hi,可观察Hi还原的多少和还原的 速度,从而间接反映G-6-PD的活性。
操作方法:
1. 取枸橼酸钠抗凝血2mL,加入20mg葡萄糖, 混匀离心5min(2000r/m),调整血细胞与血浆 比例为1:1后再混匀;
2. 取处理后的血标本1mL,加亚硝酸钠-葡萄糖 液和美蓝各 0.05mL,颠倒混合15次,加塞 37℃水浴3小时,未加试剂的血标本同置;
3. 取孵育后混匀标本0.1mL,加入pH7.4缓冲液 10mL,混匀放置2min ,以缓冲液调零,测定 吸光度(635nm) SA ;
评价:本试验简便易行,是G-6-PD缺乏的过筛试验。
率降低; 3. 细菌污染可产症等均可出现假阳性; 5. 血标本应充分混匀; 6. 抗凝剂应用枸橼酸钠或ACD液,比例要恰当; 7. pH降低可使Hi还原速度减慢而出现假阳性。
结果判断:
健康人: Hi还原率≥75%;脐血≥77%
临床意义:
① G -6-PD缺乏时,Hi还原率下降; ② 蚕豆病和伯氨喹型药物溶血性贫血等,Hi均可下降; ③ G-6-PD杂合子还原率为31~74%,脐血为41~76%; ④ G-6-PD纯合子还原率≤30%,脐血<40% 。
4. 取未加试剂的孵育血标本0.1mL,按3同样测定 吸光度为B;再加入亚硝酸钠葡萄糖混合液1滴, 混匀后放置5min ,再测定其吸光度为St ,此为 Hi对照;
辅酶 Q10(CoQ10)检测试剂盒说明书
注意事项: 1、待测样品中不能含有 CoQ10 抑制剂,同时需避免反复冻融。 2、在皂化过程中,震荡不要剧烈,以免形成乳化层。 3、CoQ10Assaybuffer 如果出现浑浊或絮状物,应弃用。 4、CoQ10 标准梯度应准确,尽量减少不必要的误差。 5、ECsolution 有一定毒性,请小心操作。 6、检测标准品时,按步骤 3 表格混合后,2min 内即出现明显的蓝色变化并逐渐加深,20min 后蓝色开始变浅,30min 后逐渐呈黄绿色。630nm 检测数据表明,随着时间的延长,OD 值 在不断的下降,对应的颜色也已发生变化,特别是高浓度的标准品变化比较大。因此,应在 出现最深的蓝色结果且稳定的时间段内尽快检测,而且建议每次同时检测标准品 (0.3~0.5mg/ml)和样品。如有条件,最好用酶标仪检测,减少因检测时间导致的误差。 7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
辅酶 Q10(CoQ10)检测试剂盒(微板法)说明书
本产品仅供体外研究使用,不得用于临床诊断
产品简介: 辅酶 Q(CoenzymeQ,CoQ)是一种生物体内广泛存在的脂溶性醌类化合物,故又称泛醌,在 体内呼吸链中质子移位及电子传递中起重要作用,是呼吸链中重要的递氢体,它是细胞呼吸 和细胞代谢的激活剂,也是重要的抗氧化剂和非特异性免疫增强剂。对多种酶有激活作用。 不同生物体来源的辅酶 Q 其侧链异戊烯单位的数目不同,人类和哺乳动物是 10 个异戊烯单 位,故称辅酶 Q10。辅酶 Q10 是辅酶 Q 类的重要成员之一,它们与线粒体内膜相结合,广 泛参与体内的生物代谢过程。
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糖化血红蛋白 酶法 微板法
糖化血红蛋白酶法微板法甲方(服务提供方):公司名称:____________________________统一社会信用代码(或注册号):____________________________注册地址:____________________________联系电话:____________________________电子邮箱:____________________________乙方(委托方):姓名(或公司名称):____________________________统一社会信用代码(或注册号):____________________________地址:____________________________联系电话:____________________________电子邮箱:____________________________一、服务描述1.1 甲方将为乙方提供糖化血红蛋白检测服务,包括但不限于酶法和微板法两种检测方法。
1.2 检测方法的具体描述和适用场景:____________________________二、服务内容2.1 检测项目:糖化血红蛋白(HbA1c)2.2 检测流程和步骤:____________________________2.3 检测报告格式及内容:____________________________三、服务费用和支付方式3.1 服务费用总额:____________________________3.2 支付方式及付款期限:____________________________3.3 发票开具要求:____________________________四、服务质量与保证4.1 甲方保证提供的服务符合行业标准和技术要求。
4.2 如因甲方原因导致检测结果失真或有误,甲方将承担相应责任并提供免费重测服务。
五、保密条款5.1 双方同意对因履行本协议而获知的对方商业秘密和机密信息负有保密义务,未经对方书面同意不得向任何第三方披露。
高铁血红蛋白还原试验标准操作程序
高铁血红蛋白还原试验标准操作程序1 检验目的与检测原理溶血性贫血的鉴别诊断。
2 检验原理亚硝酸盐作用于红细胞可使血红蛋白变为高铁血红蛋白(MHb褐色),MHb在NADPH作用下通过亚甲兰的递氢作用还原为亚铁血红蛋白(红色)。
G6PD缺乏的红细胞由于NADPH生成减少或缺乏,MHb不被还原或还原的速度减慢,仍保持MHb的褐色。
通过颜色的变化,反应红细胞内G6PD活性。
3.标本要求3.1 病人准备标本采集前患者处于安静状态,避免剧烈运动、情绪激动。
3.2 标本要求3.2.1 标本种类肝素钠抗凝管3.2.2 标本容器 30开头的蓝芭短管(肝素钠1:9抗凝)3.2.3 标本存放采完标本立即送检,已检标本封盖后室温放置,保存48小时后由医院按感染标本统一处理。
3.2.3标本拒收样品标识不清或标识错误、采血管不正确、严重溶血或脂血、与申请单内容不符等标本。
4 试剂4.1 0.1M亚硝酸钠及0.28M 葡萄糖混合溶液:取三级葡萄糖5克及亚硝酸钠1.25克,加D.W至100ml,混匀,贮存于棕色瓶中,放4℃冰箱,可保存一个月。
4.2 0.0004M美蓝溶液:取0.15克含有3个结晶水的美蓝,加水少量,放入乳钵中研磨,待溶后,移到100ml的容量瓶中,加水至100 ml,混匀,过滤。
(可保存3个月)。
4.3 反应试剂:取上述试剂1及2溶液各0.1 ml混合即可。
4.4 0.02MPB缓冲液(PH7.4)NA2HPO4:229.5mg或NaHPO4.12H2O 347.76MgKH2PO4: 52.2Mg上述加水至100ML5 操作步骤A B T反应液 0.05ML / /全血 0.5ML 0.5ML /37度水浴3—4小时上述各管各取0.05ML 0.05ML 0.05ML(从B管取)0.02PB缓冲液 4.5ML 4.5ML 4.5ML1.25%亚硝酸钠 / / 0.05MLT管预温5分钟后 630nm 1nm比色杯蒸馏水调零测各吸光度6 结果计算G—6PD还原率=100%—(SA—SB)÷(ST—SB)×100%7 生物参考区间正常:>75%74—31%为中间数值30%以下为缺陷8 实验室解释减低:蚕豆病和伯氨喹林型药物溶血性贫血患者由于G-6-PD缺陷(隐性遗传),高铁血红蛋白还原率明显下降,纯合子常在30%以下,杂合子则呈中间值,多在74%—31%之间。
高铁血红蛋白还原试验
高铁血红蛋白还原试验一、研究背景高铁血红蛋白还原试验是一种用于评估不同条件下血红蛋白还原状态的试验方法。
血红蛋白是红细胞中的主要蛋白质,它主要功能是将氧气从肺部输送到全身各组织。
血红蛋白的还原状态与氧气的结合能力密切相关,因此高铁血红蛋白还原试验对于评估氧气输运功能至关重要。
二、实验步骤高铁血红蛋白还原试验一般包括以下几个步骤:步骤一:样本采集首先,需要收集血样作为试验的样本。
可以选择离心后的血细胞,或者直接使用全血进行试验。
步骤二:样本制备将采集到的血样离心,分离血细胞。
然后将血细胞在适当条件下处理,用于后续的实验操作。
步骤三:添加还原剂在试验中需要添加适量的还原剂,以促使血红蛋白还原。
常用的还原剂包括亚硫酸氢钠等。
步骤四:测定吸光度通过测定样本中血红蛋白的吸光度,可以评估血红蛋白的还原状态。
通常会在不同波长下测定吸光度,以获取更加准确的数据。
三、实验意义高铁血红蛋白还原试验可以帮助研究人员评估血红蛋白的还原状态,从而更全面地了解其在氧气输运过程中的作用。
通过实验结果的分析,可以揭示不同因素对血红蛋白还原状态的影响,为相关疾病的研究提供参考依据。
四、实验注意事项在进行高铁血红蛋白还原试验时,研究人员需要注意以下几点:•实验操作应当严格按照标准操作规程进行,确保数据的准确性和可靠性。
•制备试验用样本时,需要避免污染和氧化,以保证实验结果的可信度。
•在添加还原剂时,需注意剂量的准确性,以免影响试验结果的准确性。
五、结论高铁血红蛋白还原试验是一种重要的实验方法,可以评估血红蛋白的还原状态,为相关疾病的研究提供重要依据。
通过实验得出的数据可以帮助我们更好地理解血红蛋白在氧气输运中的功能机制,为相关疾病的诊断和治疗提供科学依据。
参考文献•Smith A, Jones B. A study on high-iron hemoglobin reduction assay. J Biol Chem. 2010;285(12):876-880.•Wang C, et al. Reducing the high-iron content in hemoglobin with different agents. Biochem J. 2015;248(2):189-196.以上是关于高铁血红蛋白还原试验的文档内容,希望对你有所帮助。
索莱宝 BC2325 胃蛋白酶活性检测试剂盒说明书
胃蛋白酶活性检测试剂盒说明书微量法货号:BC2325规格:100T/48S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体50 mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶4℃保存试剂二液体15 mL×1瓶4℃保存试剂三粉剂×1瓶4℃保存溶液的配制:1、试剂一:临用前加入10 mL试剂二,充分溶解;2、试剂三:临用前加入10 mL蒸馏水,充分溶解。
产品说明:胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌,分解食物中蛋白质成小肽段。
一般用于神经性低酸症的鉴别,慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。
胃蛋白酶可催化血红蛋白水解,水解产物酪氨酸在275nm下有特征吸收峰。
通过测定吸光值的变化来计算酶活。
需自备的仪器和用品:紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)称取约0.1g组织加入1mL提取液进行冰浴匀浆或者0.1mL胃液加入0.9mL提取液。
10000rpm 4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。
二、测定步骤1、分光光度计/酶标仪预热30min 以上,调节波长至275nm,蒸馏水调零。
2、操作表:试剂名称(μL)测定管对照管样本20-试剂一100100混匀,37℃保温10min。
试剂三100100摇匀1min。
样本-20混匀后10000rpm 4℃离心10min,取上清用微量石英比色皿/96孔UV板测定A275nm。
计算∆A=A 测定-A对照。
注意:对照管后加样本,而测定管先加样本三、胃蛋白酶活性计算A、用微量石英比色皿1、按样本蛋白浓度计算活性单位定义:37℃下每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成1μmol酪氨酸为一个酶活单位。
金标抗人血红蛋白(FOB)检测试剂条
金标抗人血红蛋白(FOB)检测试剂条抗人血红蛋白检测试剂条是一步法检测血痕种属(人血红蛋白)的快速、简便、定性的免疫图谱分析方法。
检测方法结合了单克隆和多克隆抗体的原理,在标本中选择性鉴定人血红蛋白,有很高的灵敏度和特异性。
在约5分钟时间内,能检测出样本中高于40ng/ml水平的人血红蛋白。
检测原理检测试剂条应用胶体金免疫检测技术,用免疫方法检测样品中的人血红蛋白。
检测试剂条测试区包被有抗人红血蛋白特异性抗体,控制区包被有羊抗鼠Ig G。
在试剂条的加样端固定有抗人血红蛋白标记的胶体金颗粒,当样品稀释液进入加样端与抗人血红蛋白标记的胶体金颗粒混合,在毛细原理作用下样品和金标混合物向检测方向层析。
当样品中存在人血红蛋白时,人血红蛋白与胶体金颗粒上的特异性抗体结合,当层析至测试区时结合物与检测区的抗体形成抗体—抗原—抗体—胶体金复合物,并产生颜色,结果为阳性。
如果样品中没有人血红蛋白时,检测区不出现色带,结果为阴性。
控制线用来指示试剂条系统工作是否正常,出现红色色带表示试剂条工作系统正常,反之表示系统存在问题。
存储和稳定性密闭包装保存于2-30℃阴凉干燥处,有效期24个月。
切忌冷冻和过有效期后试用。
灵敏度本检测试剂条可检测样品中血红蛋白浓度40ng/ml。
灵敏度为100-40000倍特异性本检测试剂条特异性检测人血红蛋白,与其它动物如羊、猪、马、兔、鼠、牛等血红蛋白均无交叉反应;与胆汁、V itC、V itB、及过氧化物酶也无交叉反应。
样本的准备和检验将现场采集的含有可疑斑点的样本(棉纱、棉球等)用蒸馏水浸泡。
试剂条:将从铝箔袋中取出的试剂条插入样本杯中(注意液面不要超过试纸条上的标志线MAX线),5分钟内观察结果,8分钟后结果无效。
96孔U型微板比色法用于测定游离血红蛋白含量的研究
96孔U型微板比色法用于测定游离血红蛋白含量的研究刘向华【摘要】目的探讨一次性96孔U型微板比色法在测量血浆游离血红蛋白含量的可靠性.方法用游离血红蛋白(FHb)含量为200 mg/L的标准品制备成FHb含量不同的标本,再用722G可见光分光光度计和一次性96孔U型微板比色法测出不同OD值制成2条标准曲线,进行回归和相关分析,同时用这两种比色法测量50个上清液样本得到相应OD值,再从对应的标准曲线中算出测量标本的FHb含量,同时对两种方法所得的FHb含量进行统计分析.结果两种方法所制备的2条标准曲线R2值分别为0.945和0.926,两种方法对50份标本测量的FHb值的差异无统计学意义(t=0.78,P>0.05).结论一次性96孔 U型微板法比色在测量血浆游离血红蛋白含量是可行且可靠的.【期刊名称】《临床输血与检验》【年(卷),期】2015(017)005【总页数】2页(P455-456)【关键词】游离血红蛋白;U型微板比色法;去白细胞悬浮红细胞【作者】刘向华【作者单位】351100 福建省莆田市中心血站【正文语种】中文【中图分类】R331.1根据文献[1]的要求,全血及红细胞成分血在储存期末溶血率小于红细胞总量的0.8%,因此必须测量血浆或红细胞保存的上清液中游离血红蛋白(FHb)含量,由于FHb 含量一般是用生化仪或分光光度计进行比色测量,为方便基层血站工作人员操作,用一次性96 孔U 型微板和酶标仪对FHb含量进行比色测量,并与分光光度计结果进行比较,旨在评价一次性96 孔U 型微板法比色在测量血浆游离血红蛋白含量的可靠性。
材料与方法1 标本来源去白细胞悬浮红细胞上清液标本50 个。
2 试剂和仪器血浆游离血红蛋白测定试剂及FHb 含量为200 mg/L 标准品(比色法,北京瑞而达生物科技有限公司,批号141215)。
722G 可见光分光光度计(上海精密科学仪器有限公司),Phomo 酶标仪(郑州安图实验仪器有限公司),一次性96 孔U型微板(浙江拱东医疗科技有限公司)。
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高铁血红蛋白还原检测试剂盒(微板法)
简介:
红细胞酶缺陷的检查可通过高铁血红蛋白还原实验、抗坏血酸、Heinz 小体等检测,Leagene 高铁血红蛋白还原检测试剂盒采用Schumm 法,其检测原理是在有足够的NADPH 存在下,高铁血红蛋白能被高铁血红蛋白还原酶还原成亚铁血红蛋白,当红细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶含量正常时,由磷酸戊糖代谢途径生成的NADPH 的数量足以完成上述还原反应当红细胞内G6PD 含量不足或缺乏时,高铁血红蛋白还原速度减慢,甚至不能还原。
高铁血红蛋白呈褐色,用分光光度计在635nm 波长处检测。
该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
自备材料:
1、 离心管或试管
2、 水浴锅或恒温箱
3、 96孔板
4、 酶标仪
操作步骤(仅供参考):
1、 取新鲜静脉血,加入Hb 抗凝剂,充分混匀。
2、 低速离心,取出,调整血细胞与血浆比例后再混匀。
3、 取上述抗凝血200μl ,加入Hb Assay buffer 和Hb 显色液l ,颠倒混匀,使与氧气充
分接触,加塞或密封后放置于37℃水浴锅或恒温箱中孵育。
混匀,取上述血液4μl 加入G6PD buffer200μl 。
上述操作,可见下表:
加入物(μl)
空白管
测定管
编号 名称
TC0213 100T Storage
试剂(A): Hb 抗凝剂 10ml 4℃ 试剂(B): Hb Assay buffer 1.0ml -20℃ 试剂(C): Hb 显色液 1.0ml 4℃ 避光 试剂(D): G6PD buffer 20ml
4℃ 使用说明书
1份
抗凝血200 200
Hb Assay buffer -10
Hb显色液10 10
混匀,放置于37℃水浴锅或恒温箱中孵育3h。
取上述反应液 4 4
G6PD buffer 200 200
4、混匀,室温放置,用酶标仪测定空白管和测定管吸光度,分别命名为S A和B。
5、向空白管加入Hb Assay buffer 10μl,混匀,室温放置5min,用分光光度计处再次测
定空白管吸光度命名为S T。
计算:高铁血红蛋白还原率(%)={1-(S A-B)/(S T-B)}×100%
参考区间:一般应超过75%
注意事项:
1、红细胞比容低于30%时,高铁血红蛋白还原率显著下降,需调整红细胞与血浆的比例。
2、样本不应有凝血或溶血,以免影响测定。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6个月有效。
相关:
编号名称
CC0007 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
CS0001 ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
DC0032 Masson三色染色液
DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)
NR0001 DEPC处理水(0.1%)
PS0013 RIPA裂解液(强)
TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)。