发酵罐安全操作流程通用版

操作规程编号：YTO-FS-PD456

发酵罐安全操作流程通用版

In Order T o Standardize The Management Of Daily Behavior, The Activities And T asks Are Controlled By The Determined Terms, So As T o Achieve The Effect Of Safe Production And Reduce Hidden Dangers.

标准/ 权威/ 规范/ 实用

Authoritative And Practical Standards

发酵罐安全操作流程通用版

使用提示：本操作规程文件可用于工作中为规范日常行为与作业运行过程的管理，通过对确定的条款对活动和任务实施控制,使活动和任务在受控状态，从而达到安全生产和减少隐患的效果。文件下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用。

一、准备工作

1、检查蒸汽发生器，确保已开启；

2、检查空气源，保证供气压力在0.4~0.7MPa之间，相对湿度应小于60%；再调节空气减压阀，使其出口压力在0.2~0.25MPa之间；

3、检查各管道、阀门是否有泄漏，进料口、补料口硅胶垫是否需要更换，如有请及时修整；

4、检查各压力表是否归零，不能归零的予以更换；

5、检查罐内是否清洗干净；

6、查看控制系统、传动系统是否良好；

7、检查完毕进行打压试漏：压力0.15MPa保持

30min，如果出现压力下降，请用肥皂水查找泄漏点，并进行修复；

8、安装已标定的PH电极、溶氧电极等其他检测设备，确保已安装到位、螺母旋紧；

9、检查一切无问题，如实填写记录并签字；

二、空气过滤器消毒

1、首先关闭空气过滤器前的进蒸汽阀，缓慢卸掉空气过滤器内压力；

2、打开蒸汽过滤器下端的排污阀（排净冷凝水后微开），缓缓开启蒸汽阀，排净管道内冷凝水后调整蒸汽阀大小，保证蒸汽压力0.2MPa以上；

3、打开空气过滤器下端的排污阀，慢慢打开过滤器前的蒸汽阀，待排尽冷凝水后排污阀微开；

4、开启过滤器后的排气阀门，通过调整其与蒸汽阀的大小，维持压力0.12~0.14MPa消毒30min；

5、消毒结束调小排气阀与排污阀的开度，迅速关闭蒸汽阀同时打开进空气阀（换气过程中保证压力不掉零），调整空气阀大小保持压力在0.08~0.1MPa，以便吹干空气过滤器；

6、约20~30min过滤器吹干后（过滤器外壁温度降至常温，手试吹出的空气干燥、细腻、滑润），关闭过滤器下端的排污阀及排气阀，保持正压；

三、罐空消

1、首先打开夹套下端的排水阀，排尽夹套中的水；

2、依次打开取样阀、蒸汽阀，排尽管道内冷凝水后将取样阀转为微开；稍开罐排气阀，再缓慢开启罐底隔膜阀使蒸汽徐徐进入发酵罐；

3、在灭菌过程中时刻注意并控制罐压在

0.11~0.12MPa内，罐压的控制通过蒸汽阀和排气阀来实现；

4、空消30~50min后，关闭蒸汽阀和罐底隔膜阀，关闭后压力会迅速下降，为防止罐内产生负压，需将进空气阀打开，维持罐压0.03~0.05MPa或者压力下降至零时将排气阀打开自然冷却；待温度降至80℃以下时排尽罐内冷凝水；

四、实消

1、将标定好的PH电极、溶氧电极等检测设备安装，检查确保安装到位，旋紧螺母；

2、关闭罐底隔膜阀，微通风、开低转速，按工艺要求将配制好的培养基加入罐内，检查无漏加原料后将加料口螺母适度拧紧；

3、打开夹套排水阀，排尽夹层水；关闭夹套进出水阀门；缓慢打开夹套进蒸汽阀（打开过快夹层容易产生异响）进行预热，保证夹层压力小于0.1MPa；

4、待罐内温度达到90℃以上（某些培养基在

70~90℃时容易起泡沫，注意观察）时关闭夹套蒸汽阀；

5、关闭搅拌、通风，排气阀微开；依次打开取样阀、蒸汽阀，排尽管道内冷凝水后将取样阀转为微开，打开罐底隔膜阀，将蒸汽缓缓通入罐内（注意料液翻滚）；再打开进风管道上的蒸汽阀门，通过控制罐底隔膜阀、风管蒸

汽阀、排气阀调节罐压至0.11~0.12MPa，维持121℃灭菌30min（加料口、补料口等均稍微排气，以彻底消除死角，时刻注意罐压）；6、灭菌过程中校正溶氧电极零点，30min灭菌完毕后，依次关闭加料口、补料口、罐底隔膜阀、风管蒸汽阀；关闭夹套排水阀，打开循环进出水阀（变换要迅速，时刻注意罐压变化，防掉零）；此时在控制柜中找到对应罐，开启“冷却手动”和“转速”按键，开始冷却降温；

7、降温时罐压将迅速下降，当降至0.05MPa时开启风管进气阀，随时保持压力在0.05MPa；

五、无菌接种

1、当料液温度降至工艺要求时，按照工艺要求将转速、通风量调至最大，并维持罐压稳定几分钟后，标定溶氧电极满度；

2、用酒精棉擦拭接种口和接种者双手，火圈加入酒精套在接种口上，关闭搅拌转速，降低通风量，维持罐压在0.01~0.02MPa（不能掉零，否则容易引起污染），点燃火圈，用工具扳手缓慢拧下接种口螺母（快速开启，容易出现危险），螺母不能离开火焰；

3、接种者将菌种瓶口在火焰上稍微烧一会儿，拔下瓶塞迅速将菌种倒入罐内；

4、拧紧接种口螺母，熄灭火焰，并用酒精棉将接种口

擦拭干净；按工艺要求调好转速、通风量、罐压，并点击“开始发酵”按键开始计时培养；

六、取样操作

关闭蒸汽阀、全开取样阀，开启罐底隔膜阀进行取样；取样完毕后微开取样阀和蒸汽阀，用少量蒸汽进行封口，保持无菌状态；

七、罐的清洗

1、发酵罐在使用前和使用后要及时清洗干净；打开两边清洗口，用水管清洗余料，若不能清洗干净则需拆开罐盖；

2、拆洗前首先关闭电源，拧开周边螺丝，两人小心地同时将罐盖垂直向上取出（注意：请不要抓传动轴，以免影响机械密封和轴的传动稳定性），水平放置平整的地面上，并防止滚动；

3、彻底清洗干净后，将罐盖按原位轻轻放入发酵罐内，拧上周边螺丝（注意：对角拧螺丝，松紧基本一致）；

4、安装完毕后通入空气（0.15MPa）,检查管道和罐的密封性，如有泄漏则需修复；

5、如不接着进入下一批发酵，请将溶氧电极拆下清洗干净，放回安全处保存；PH电极清洗干净浸泡在3mol/L 的KCL溶液中保存；