吸光光度分析tang10
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波长范围 (nm) 610~780 595~610 560~595 500~560
光的颜 色 青色 蓝色 紫色
波长范围 (nm) 480~500 435~480
400~435
可见色光的互补性
不同物质对各种波长光的吸收具有选择性
该溶液对该波长范围的光都不吸收,则溶液 无色透明。 如果溶液选择性的吸收了某种颜色的光,则 溶液将呈现出它的互补色 。 如: 高锰酸钾溶液因吸收了绿色光而呈现紫色, 氯化钠溶液让日光全部透过而呈无色透明。
操作简便;
缺点是标准色阶不易保存,常需临时配制。主 观误差较大。
二、可见分光光度法
可见分光光度法是以钨丝灯发出的光作光源,灯光 经单色器色散,取所需波长的单色光通过被测溶液,测 得溶液的吸光度,然后进行分析的方法。
图11-4 721型分光光度计结构示意图 1.光源 2.透镜 3.反光镜 4.狭缝 5.准光镜 6.棱镜 7.吸收池 8.光门
(1)溶液对不同波长光的吸收有选择性。 (2)同一溶液不同浓度的吸收曲线形状相似,
(3)在最大吸收波长附近(不一定在λmax处), 即使浓度较低时,吸光度A也有较大的数值。
物质对光的吸收程度可用最大吸收波长下 的摩尔吸光系数εmax表示。 εmax <104,测定的灵敏度低;104<εmax <5104属中等灵敏度; 5104<εmax <105属高灵敏度;εmax >106 属超高灵敏度。
第二节 基本原理
一、光的本质与溶液的颜色 二、光的吸收定律 三、吸收光谱曲线
一、光的本质与溶液的颜色
表11-1 电磁波谱
区域
波长范围
x射线 10-3~10(nm)
跃迁类型 内层电子跃迁
远紫外 10~200(nm) 价电子和非键电子
紫外 200~400(nm)
跃迁
光谱类型
x射线吸收、发射、衍射,荧光光谱、 光电子能谱
(2)当溶液浓度c的量纲为molL-1时,比例常数 ɑ改用符号ε表示,称为摩尔吸光系数,量纲为 Lmol-1cm-1,朗伯-比尔定律表示为:
A=εbc
(11-7)
ɑ和ε可以通过下式换算:
ε=ɑM
(11-8)
式中:M为吸光物质的摩尔质量。
三、吸收光谱曲线
吸收光谱曲线又称吸收曲线,它是溶液吸光度随入射 光波长变化的曲线。
远紫外吸收光谱,光电子能谱 紫外-可见吸收和发射光谱
可见光 400~750(nm)
近红外 0.75~2.5(μm)
分子振动
近红外吸收光谱
红外 2.5~1000(μm)
分子振动
红外吸收光谱
微波 0.1~100(cm) 分子转动、电子自 旋
微波光谱,电子顺磁共振
各种色光的近似波长范围
光的颜色 红色 橙色 黄色 绿色
二、光的吸收定律
1.透光率T 和吸光度A
I0=Ia+It (11-1)
I0为入射光的强度,Ia为吸收光的强度,It为透过光的 强度。
T%=
It ×100
I0
A=1g
1 T
=-1gT
ห้องสมุดไป่ตู้
=1g
I0 It
2.光的吸收定律——朗伯-比尔定律
朗伯定律 A=k1b (11-4) 比尔定律 A=k2c (11-5) 朗伯-比尔定律 A=ɑbc (11-6)
9.保护玻璃 10.光电管
分光光度计主要由光源、单色器、吸收池、 检测器、显示器等五个部件构成。
(1)光源 以6~12V的钨丝灯作光源,单色光的波长范围为360~ 800nm。
(2)单色器 单色器的作用是将钨丝灯发出的复合光分解为单色光。 单色器由入射狭缝、色散元件(棱镜或光栅)、准光镜和出光狭缝组 成。
图11–2 不同浓度KMnO4溶液的吸收曲线
第三节 分析方法
一 目视比色法
1 目视比色法原理
目视比色法的理论依据是朗伯-比尔定
律。当日光透过组成相同的两个有色溶液时,
如果液层的厚度相等,则颜色深浅相同(吸
光度相等)的溶液浓度相等。
2.目视比色法的测定方法
测定时将标准溶液按照由少至多的顺序依次加入到 一套(6~10个)比色管中,加入等量的显色剂,加水 稀释至刻度,摇匀可得一系列颜色由浅至深的标准色 阶。另取一比色管,加入一定量的试液,在相同条件 下显色并稀释至刻度。将该比色管与标准色阶进行比 较,根据颜色相同,浓度相同的原理,可求得试液的 浓度。
(3)吸收池 吸收池又称比色杯或比色皿,它是由无色透明的耐腐 蚀玻璃制成,用来盛放被测溶液和参比溶液。每台仪器通常配有厚度 为0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm、5.0cm等规格的吸收池供选用。
(4)检测器 分光光度计常用的检测器是光电管或光电倍增管,光 电管是一个二极管,管内装有一个阳极和一个光敏阴极
可表述为:当一束平行的单色光通过均匀、无 散射的溶液时,在单色光强度和溶液温度等条 件不变的情况下,溶液的吸光度正比于溶液浓 度与液层厚度的乘积。
上述的k1、k2、ɑ均为比例常数,又称为吸光 系数,它表示物质对光的吸收能力。
3.吸光系数与摩尔吸光系数
(1)当溶液浓度c的量纲为gL-1时,则吸光系数 ɑ的量纲为Lg-1cm-1。
第十一章 吸光光度法
§11.1 吸光光度法概述
吸光光度法是光学分析法的一种,也称为吸收 光谱法。它是基于物质对光的选择性吸收而建 立起来的分析方法。
吸光光度法分类: 比色法、可见光分光光度法、紫外分光光
度法、红外光谱法和原子吸收分光光度法。 吸光光度法意义:定性、定量分析
吸光光度法的特点
(5)显示器 显示器的作用是把放大的讯号以适当的方法显示或记 录下来,721型分光光度计的显示器是指针式的微安电表,在微安电 表的标尺上刻有透光率和吸光度两种刻度,
第四节 溶液浓度的测定方法
一、标准曲线法 二、比较法
(1)灵敏者度高 可用于测定微量组分的含 量,测定下限可达10-5-10-6mol·L-1。
(2)准确度较高 比色法的相对误差为5%20%,分光光度法的相对误差为2%-5%。
(3)简便快速 吸光光度法所使用的仪器设 备简单,价格便宜,一般实验室都能具备。
(4)应用范围广 几乎所有的无机离子和有 机化合物都可直接或间接的用分光光度法进行 测定。