岛津液相色谱仪维护教材
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岛津液相色谱仪维护教材
岛津企业管理（中国）有限公司 分析中心
第一部分 液相色谱故障排除经验 液相色谱常见问题
精品课件
液相色谱简易流程图
溶剂
进样器 输液泵
色谱柱 柱温箱
检测器 废液
数据处理
精品课件
1
储液瓶
2
脱气机
3
泵单元
4 手动进样器
5
色谱柱
6Leabharlann Baidu
检测器
7
废液瓶
1.等度系统
精品课件
2.低压梯度系统
PEEK接头 主要用于色谱柱、检测器的连接 易于安装 能承受 250 kgf/cm2压力 容易产生死体积
精品课件
垫圈 不锈钢接头
PEEK接头
死体积
死体积可能会引起分离度变差和重现性变差等问题. 公螺母 死体积
好的连接
管线
精品课件
差的连接
流动相
选择原则 1、采用 “HPLC” 级溶剂 2、避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂 3、对试样有适宜的溶解度 4、溶剂粘度要小 5、与检测器相匹配
精品课件
压力高
首先要确认是色谱柱堵塞还是系统堵塞 色谱柱堵时，确认可能造成堵塞的样品的性质，相应选择 合适的清洗溶剂。 系统堵塞，首先应确认是哪一部份堵塞，依据情况由后向 前进行排除。
精品课件
容易发生堵塞的部件
➢ 保护柱及色谱柱 ➢ 线路过滤器 ➢ 混合器过滤组件 ➢ 管路连接处 ➢ 进样器 ➢ 检测器流通池
硬件问题： —输液泵 —进样器 —检测器
精品课件
日常保养
-做好平常的保养可以有效的降低故障的发生率 -做好平常的保养可以延长仪器的使用寿命
常做的保养 —保证仪器的使用环境（经常清洁仪器，尤其是灰尘） —泵的保养（使用缓冲盐时要清洗柱塞，水和盐不要长期 保存在泵里） —进样器要经常清洗，避免污染物吸附或堵塞管路 —尽量进行样品前处理 —色谱柱要定期清洗，保证柱效及使用寿命 —系统中不要长期保存水和盐，长时间不用时应将仪器所 有部分全部更换为70％以上的甲醇，避免细菌的滋生及 盐的析出。
• 当不能确认故障原因时 —采用排除法逐一考察可能引起故障的因素
• 确定故障能否自行处理 —不要贸然拆卸不熟悉的部件
精品课件
常见故障因素
仪器环境： —实验室的温度、湿度、酸度等 —实验室震动、灰尘等问题 —电源及地线问题
使用条件： —流动相（pH值、均匀度、气泡等） —样品（样品分解、氧化、样品溶剂等） —色谱柱（污染、堵塞、塌陷等）
精品课件
溶剂的等级 HPLC级 优级纯 分析纯
流动相
微量分析、梯度洗脱
都经过蒸馏和0.45 μm过滤(除纤维毛,未溶解的机械颗粒） 优级纯的纯度比分析纯大,但里面含有防腐剂和抗氧化剂 HPLC级经过0.22 μm过滤,且除去有紫外吸收的杂质
精品课件
流动相
鬼峰的出现
鬼峰
水 / 甲醇梯度 ODS 柱
基线漂移
流动相污染，变质或由低品质溶剂配成 流动相不均匀(脱气，使用纯度更高的溶剂) 温度波动 系统平衡时间不够 流通池被污染或有气泡 流通池窗口破裂
精品课件
死体积太大
峰形问题
柱子被污染或堵塞
色谱柱塌陷
色谱柱化学或次级保留（硅羟基效应或重金属污染）
流动相缓冲不足或不合适
样品溶剂选择不当，与流动相之间极性差异太大
精品课件
压力低
如果压力为零： 泵头中没有液体，充满气泡 单向阀完全堵死 柱塞杆折断 压力传感器损坏(流动相流动正常，但无压力)
如果有压力但是压力比正常时低： 漏液 单向阀堵塞
精品课件
压力波动
压力在短时间内剧烈波动。 泵头中有气泡 单向阀脏 柱塞密封圈漏液
精品课件
经常漏液的部件
泵： 柱塞密封圈 排液阀
PEEK (可用于所有连接) 能承受高达 250 kgf/cm2压力 可在整个pH范围(pH 1-14)内使用 不适用于高溶解性溶剂如氯仿等
Teflon (用于柱后阻尼管、反应管和排液管) 化学惰性大 能承受 5 kgf/cm2 压力
精品课件
接头
不锈钢接头 / 垫圈 主要用于输液泵、进样器的连接 能承受 400 kgf/cm2压力 一旦固定，垫圈不可再动
材料
不锈钢 Teflon PEEK (聚醚醚酮)
尺寸
0.1 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.3 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.5 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.8 mmI.D. x 1.6 mmO.D.
精品课件
管线材料
不锈钢 (可用于所有连接) 能承受几千 kgf/cm2 压力 酸性或高浓度盐环境中易腐蚀 (尤其在pH小于2时)
1
储液瓶
2
脱气机
3
低压梯度单元
4
泵单元
5
混合器
6
自动进样器
7
色谱柱
8
检测器
9
废液瓶
精品课件
3.高压梯度系统
1
储液瓶
2
脱气机
3
泵单元
4
混合器
5
自动进样器
6
色谱柱
7
检测器
8
废液瓶
精品课件
液相色谱故障排除经验
• 故障的确定 —至少要重复出现两次以上
• 初步判断故障引起的原因 —方法或硬件
• 由经验或平时的积累确定故障原因 —平时做好观察和记录
精品课件
液相色谱常见问题
压力异常（偏高、波动） 漏液 保留时间漂移 基线问题（漂移、噪声） 峰形异常
精品课件
压力
压力是液相色谱中最重要的指标，要经常关注压力的变化。 保留时间的变化经常是由于压力问题引起的。 不同溶剂即使在相同流速和温度的情况下压力也是不同的。 记下仪器正常状态时，在固定条件下（流动相、流速、温度等）的 压力显示值。
样品过载（浓度或体积）
柱温过低
精品课件
鬼峰
流动相被污染 进样阀残余峰 样品中未知物 色谱柱中的污染物
精品课件
第二部分 日常使用注意点 硬件基础知识 容易出故障的部件及常见故障的排除
精品课件
液相系统维护流程图
线路过滤器
单向阀
柱塞密封圈
吸滤头
色谱柱
检测器
手动进样器
精品课件
一、输液部分
精品课件
管线选择
手动进样器：转子密封圈磨损 检测器： 流通池窗口（垫片损坏、透镜破碎） 接头处漏液：（接头松动，接头脏，接头磨损，部件不匹配）
精品课件
保留时间不稳定
吸滤头脏 泵输液不正常（压力波动、气泡等） 流动相组分变化 流动相缓冲能力不够 色谱柱平衡时间不够 柱温的变化 柱子问题
精品课件
噪音大
流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 漏液 流动相、泵、检测器流通池内有气泡 流动相各溶剂不相溶或混和不均匀 检测池能量不足 流通池被污染 温度影响（检测器和柱温差别太大） 其他电子设备的影响或电精源品、课件地线等
1 mL/min, 10 mins 内，0-100% 甲醇， 在最高点保持5 mins.
岛津企业管理（中国）有限公司 分析中心
第一部分 液相色谱故障排除经验 液相色谱常见问题
精品课件
液相色谱简易流程图
溶剂
进样器 输液泵
色谱柱 柱温箱
检测器 废液
数据处理
精品课件
1
储液瓶
2
脱气机
3
泵单元
4 手动进样器
5
色谱柱
6Leabharlann Baidu
检测器
7
废液瓶
1.等度系统
精品课件
2.低压梯度系统
PEEK接头 主要用于色谱柱、检测器的连接 易于安装 能承受 250 kgf/cm2压力 容易产生死体积
精品课件
垫圈 不锈钢接头
PEEK接头
死体积
死体积可能会引起分离度变差和重现性变差等问题. 公螺母 死体积
好的连接
管线
精品课件
差的连接
流动相
选择原则 1、采用 “HPLC” 级溶剂 2、避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂 3、对试样有适宜的溶解度 4、溶剂粘度要小 5、与检测器相匹配
精品课件
压力高
首先要确认是色谱柱堵塞还是系统堵塞 色谱柱堵时，确认可能造成堵塞的样品的性质，相应选择 合适的清洗溶剂。 系统堵塞，首先应确认是哪一部份堵塞，依据情况由后向 前进行排除。
精品课件
容易发生堵塞的部件
➢ 保护柱及色谱柱 ➢ 线路过滤器 ➢ 混合器过滤组件 ➢ 管路连接处 ➢ 进样器 ➢ 检测器流通池
硬件问题： —输液泵 —进样器 —检测器
精品课件
日常保养
-做好平常的保养可以有效的降低故障的发生率 -做好平常的保养可以延长仪器的使用寿命
常做的保养 —保证仪器的使用环境（经常清洁仪器，尤其是灰尘） —泵的保养（使用缓冲盐时要清洗柱塞，水和盐不要长期 保存在泵里） —进样器要经常清洗，避免污染物吸附或堵塞管路 —尽量进行样品前处理 —色谱柱要定期清洗，保证柱效及使用寿命 —系统中不要长期保存水和盐，长时间不用时应将仪器所 有部分全部更换为70％以上的甲醇，避免细菌的滋生及 盐的析出。
• 当不能确认故障原因时 —采用排除法逐一考察可能引起故障的因素
• 确定故障能否自行处理 —不要贸然拆卸不熟悉的部件
精品课件
常见故障因素
仪器环境： —实验室的温度、湿度、酸度等 —实验室震动、灰尘等问题 —电源及地线问题
使用条件： —流动相（pH值、均匀度、气泡等） —样品（样品分解、氧化、样品溶剂等） —色谱柱（污染、堵塞、塌陷等）
精品课件
溶剂的等级 HPLC级 优级纯 分析纯
流动相
微量分析、梯度洗脱
都经过蒸馏和0.45 μm过滤(除纤维毛,未溶解的机械颗粒） 优级纯的纯度比分析纯大,但里面含有防腐剂和抗氧化剂 HPLC级经过0.22 μm过滤,且除去有紫外吸收的杂质
精品课件
流动相
鬼峰的出现
鬼峰
水 / 甲醇梯度 ODS 柱
基线漂移
流动相污染，变质或由低品质溶剂配成 流动相不均匀(脱气，使用纯度更高的溶剂) 温度波动 系统平衡时间不够 流通池被污染或有气泡 流通池窗口破裂
精品课件
死体积太大
峰形问题
柱子被污染或堵塞
色谱柱塌陷
色谱柱化学或次级保留（硅羟基效应或重金属污染）
流动相缓冲不足或不合适
样品溶剂选择不当，与流动相之间极性差异太大
精品课件
压力低
如果压力为零： 泵头中没有液体，充满气泡 单向阀完全堵死 柱塞杆折断 压力传感器损坏(流动相流动正常，但无压力)
如果有压力但是压力比正常时低： 漏液 单向阀堵塞
精品课件
压力波动
压力在短时间内剧烈波动。 泵头中有气泡 单向阀脏 柱塞密封圈漏液
精品课件
经常漏液的部件
泵： 柱塞密封圈 排液阀
PEEK (可用于所有连接) 能承受高达 250 kgf/cm2压力 可在整个pH范围(pH 1-14)内使用 不适用于高溶解性溶剂如氯仿等
Teflon (用于柱后阻尼管、反应管和排液管) 化学惰性大 能承受 5 kgf/cm2 压力
精品课件
接头
不锈钢接头 / 垫圈 主要用于输液泵、进样器的连接 能承受 400 kgf/cm2压力 一旦固定，垫圈不可再动
材料
不锈钢 Teflon PEEK (聚醚醚酮)
尺寸
0.1 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.3 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.5 mmI.D. x 1.6 mmO.D. 0.8 mmI.D. x 1.6 mmO.D.
精品课件
管线材料
不锈钢 (可用于所有连接) 能承受几千 kgf/cm2 压力 酸性或高浓度盐环境中易腐蚀 (尤其在pH小于2时)
1
储液瓶
2
脱气机
3
低压梯度单元
4
泵单元
5
混合器
6
自动进样器
7
色谱柱
8
检测器
9
废液瓶
精品课件
3.高压梯度系统
1
储液瓶
2
脱气机
3
泵单元
4
混合器
5
自动进样器
6
色谱柱
7
检测器
8
废液瓶
精品课件
液相色谱故障排除经验
• 故障的确定 —至少要重复出现两次以上
• 初步判断故障引起的原因 —方法或硬件
• 由经验或平时的积累确定故障原因 —平时做好观察和记录
精品课件
液相色谱常见问题
压力异常（偏高、波动） 漏液 保留时间漂移 基线问题（漂移、噪声） 峰形异常
精品课件
压力
压力是液相色谱中最重要的指标，要经常关注压力的变化。 保留时间的变化经常是由于压力问题引起的。 不同溶剂即使在相同流速和温度的情况下压力也是不同的。 记下仪器正常状态时，在固定条件下（流动相、流速、温度等）的 压力显示值。
样品过载（浓度或体积）
柱温过低
精品课件
鬼峰
流动相被污染 进样阀残余峰 样品中未知物 色谱柱中的污染物
精品课件
第二部分 日常使用注意点 硬件基础知识 容易出故障的部件及常见故障的排除
精品课件
液相系统维护流程图
线路过滤器
单向阀
柱塞密封圈
吸滤头
色谱柱
检测器
手动进样器
精品课件
一、输液部分
精品课件
管线选择
手动进样器：转子密封圈磨损 检测器： 流通池窗口（垫片损坏、透镜破碎） 接头处漏液：（接头松动，接头脏，接头磨损，部件不匹配）
精品课件
保留时间不稳定
吸滤头脏 泵输液不正常（压力波动、气泡等） 流动相组分变化 流动相缓冲能力不够 色谱柱平衡时间不够 柱温的变化 柱子问题
精品课件
噪音大
流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 漏液 流动相、泵、检测器流通池内有气泡 流动相各溶剂不相溶或混和不均匀 检测池能量不足 流通池被污染 温度影响（检测器和柱温差别太大） 其他电子设备的影响或电精源品、课件地线等
1 mL/min, 10 mins 内，0-100% 甲醇， 在最高点保持5 mins.