第九章非发酵革兰阴性杆菌 - 苛养菌是指对营养要求苛刻.
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第十章 苛养菌及人兽 共患病原菌
苛养菌是指对营养要求苛刻，在普
通培养基上不生长或难以生长的一类
细菌；体外培养需添加特殊因子或其 他营养成分。
第一节 苛养菌
一、嗜血杆菌属
为一群无动力、无芽孢的G-细小杆菌；呈球 杆状，有时呈丝状或多形态。属于巴斯德菌科, 嗜血杆菌属。与临床有关的有9个：流感嗜血 杆菌、副流感嗜血杆菌、溶血嗜血杆菌、副溶 血嗜血杆菌、杜克雷嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌、 嗜沫嗜血杆菌、副嗜沫嗜血杆菌、迟缓嗜血杆 菌。模式菌为流感嗜血杆菌。
布鲁菌(又称流产布鲁菌)、猪布鲁菌、绵
羊布鲁菌、狗布鲁菌、森林鼠布鲁菌等6
个种，但经DNA-DNA杂交研究只有一种,
(四)微生物检验
4. 抗原检测：可做荚膜肿胀试验 , 取抗 体与菌悬液混匀，加美蓝混合后，室温10 分钟用油镜观察，如菌体呈蓝色，周围绕 有膨大空白圈为阳性。 5. 核酸检测：即取囊性纤维化病人 的痰，采用 DNA 杂交的方法，检查流感嗜 血杆菌的外膜蛋白，比传统的培养方法阳 性率高。
6. 药物敏感试验 流感嗜血杆菌 引起的感染性疾病，若β- 内酰胺酶阴 性，则首选氨苄青霉素、阿莫西林， 次选磺胺及增效剂 (TMP-SMZ) 、二、三 代头孢菌素、红霉素及氨曲南。应选 用专用培养基 (HTM) ，检测β- 内酰胺 酶，如阳性提示对青霉素、氨苄西林 和阿莫西林均耐药。 b 型与非 b 型相比， b型产生β-内酰胺酶比非b型高两倍。
(二) 微生物特性
1 ．根据不同感染分别采取血液、脑脊液、鼻 咽分泌物，采集后立即送检。 2 ．直接镜检 查到 G- 短小杆菌或多形态杆菌， 结合临床症状，可做初步诊断。 3.分离培养 巧克力琼脂中加入抗生素(万古霉 素、杆菌肽、氯林可霉素)，可提高本菌的阳 性率。经18～24h培养出现小、无色透明的菌 落。因为葡萄球菌能合成Ｖ因子释放，促进 本菌的生长，故与金黄色葡萄球菌一起培养 时，可见到靠近葡萄球菌的菌落较大，而远 离的菌落较小，称为“卫星现象”。
二、鲍特菌属
(一)分类 包括百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌、 支气管鲍特菌、鸟鲍特菌、欣氏鲍特菌、 霍氏鲍特菌，前三种 DNA 同源性高达 72 ％～ 94％， DNA的 G+C mol％为 66 ～ 70 ， 是临床常见的致病菌，而后三种临床致 病报道较少。
(二)临床意义
百日咳的致病菌，人是惟一的传染源，通
1.为G-短小球杆菌，无芽孢、无鞭毛、有荚膜 菌株，毒力较强。 2.需氧或兼性厌氧，最适生长温度为35℃，pH 以7．6-7．8为最佳。培养时必须供给含有X、 V 因子的新鲜血液。最佳培养基是巧克力琼 脂：因为加热可使V因子释放。 3.根据荚膜多糖抗原可分为6个血清型，其中b 型的致病性最强，f型次之。 4.抵抗力弱，加热50℃30分钟被杀死。消毒剂 敏感，干燥易死亡。 DNA 的 G+Cmol ％为 37— 44。
2. 副流感嗜血杆菌 引起人类咽炎及心内膜炎， 是寄居健康人体上呼吸道细菌之一。 3．溶血嗜血杆菌 存在于人体的鼻咽部，常引 起儿童上呼吸道感染； 4．埃及嗜血杆菌 有高度的传染性，易侵犯儿 童。常存在于细胞内。 5．副嗜沫嗜血杆菌 属于正常菌群，引起心内 膜炎、败血症、脑脓肿、脑膜炎。 6 ．杜克氏嗜血杆菌 为性传播病菌。常引 起外阴脓疱、溃疡、淋巴结肿大。
（一）临床意义
本菌属存在于上呼吸道，定植可达人群 的50％。 1．流感嗜血杆菌 常引起源自文库炎、咽炎、中 耳炎、肺炎。在G-杆菌中引起肺炎者占到第 三位。脑膜炎、心包炎、骨髓炎、关节炎也 可分离到该菌。有荚膜b型对人致病性最强， 脑膜炎病人中检出率最高，同时还可引起菌 血症。其主要致病物质是内毒素、荚膜、菌 毛和酶类。荚膜有杭吞噬作用，菌毛能粘附 于人类口咽部细胞。致病力强的流感嗜血杆 菌菌株具有lgA蛋白酶，能水解SIgA。
（四）微生物检验
1 ． 标本采集
①咳碟法：患者对准打开的鲍 金氏培养基平板咳嗽数次，直接收集病人咳 出的飞沫培养。②鼻咽拭子法：将拭子进入 鼻咽部采集标本。 2．革兰染色直接镜检为G-小杆菌。 3．初次分离对营养要求较高，需要半胱氨酸和 组氨酸等，并产生过多的脂肪酸可抑制生长， 因此应加入15％-25％血、活性炭吸附多余的 脂肪酸；2—3天可形成细小光滑、灰色不透明 的露滴状菌落，并有狭窄的溶血环。
过飞沫传染。
感染后传染性强，患者出现阵发性剧烈咳
嗽，直至咳出粘稠的痰液或呕吐为止。
病后及预防接种后可产生较持久的免疫力。
本菌粘附在气管和支气管上皮细胞 上并迅速繁殖释放毒素：①百日咳毒素 是主要毒力因子，与阵发性咳嗽、支气 管痉挛有关。②丝状血细胞凝集素能促 进病原菌粘附在纤毛上皮细胞上。③腺 嘌呤环酶毒素可使吞噬活性受抑，导致 免疫力减低。④气管细胞毒素对纤毛上 皮细胞有特殊亲和力，抑制纤毛摆动并 使细胞坏死脱落。
4.抗原检测： （1）以荧光标记抗体检测菌体，外周呈 绿色荧光，中心暗的球杆菌为阳性。 （2）可用 ELISA的方法测特异性脂多糖 抗原。 5.核酸检测： 检测百日咳鲍特菌的DNA, 有高度特异性。
(五)临床治疗
首选红霉素类；次选氨曲南及磺胺 增效剂(SMZ-TMP)，对青霉素不敏感。 该菌感染的控制以预防接种为主， 小于6个月的婴儿患病时应注意并发肺 炎、脑膜炎及呼吸衰竭。
(三)微生物特性
该菌属为G-小杆菌，无芽胞，有荚膜。 专性需氧，最适生长温度为35℃—37℃， O 抗原为共同抗原， K 抗原的因子 7 为百日咳、副百日咳和支气管炎鲍特菌 所共有。经多次传代后，菌落变为粗糙 而呈多形性；失去荚膜变为无毒株。 抵抗力弱，但在低温能生存，对紫 外线敏感，日光照射60分钟可死亡。
第二节 人兽共患病原菌
大多数引起动物感染的微生物，不能引起 人类感染。但有少数微生物既能感染动物也 能感染人，被称为人兽共患微生物。包括病 毒、细菌、螺旋体、立克次体等。
人兽共患炭疽细菌包括芽胞杆菌、鼠疫耶 尔森菌、布鲁菌属、巴斯德菌届、弗朗西斯 菌属等。
一、布鲁菌属
包括羊布鲁菌(又称马尔他布鲁菌)、牛
苛养菌是指对营养要求苛刻，在普
通培养基上不生长或难以生长的一类
细菌；体外培养需添加特殊因子或其 他营养成分。
第一节 苛养菌
一、嗜血杆菌属
为一群无动力、无芽孢的G-细小杆菌；呈球 杆状，有时呈丝状或多形态。属于巴斯德菌科, 嗜血杆菌属。与临床有关的有9个：流感嗜血 杆菌、副流感嗜血杆菌、溶血嗜血杆菌、副溶 血嗜血杆菌、杜克雷嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌、 嗜沫嗜血杆菌、副嗜沫嗜血杆菌、迟缓嗜血杆 菌。模式菌为流感嗜血杆菌。
布鲁菌(又称流产布鲁菌)、猪布鲁菌、绵
羊布鲁菌、狗布鲁菌、森林鼠布鲁菌等6
个种，但经DNA-DNA杂交研究只有一种,
(四)微生物检验
4. 抗原检测：可做荚膜肿胀试验 , 取抗 体与菌悬液混匀，加美蓝混合后，室温10 分钟用油镜观察，如菌体呈蓝色，周围绕 有膨大空白圈为阳性。 5. 核酸检测：即取囊性纤维化病人 的痰，采用 DNA 杂交的方法，检查流感嗜 血杆菌的外膜蛋白，比传统的培养方法阳 性率高。
6. 药物敏感试验 流感嗜血杆菌 引起的感染性疾病，若β- 内酰胺酶阴 性，则首选氨苄青霉素、阿莫西林， 次选磺胺及增效剂 (TMP-SMZ) 、二、三 代头孢菌素、红霉素及氨曲南。应选 用专用培养基 (HTM) ，检测β- 内酰胺 酶，如阳性提示对青霉素、氨苄西林 和阿莫西林均耐药。 b 型与非 b 型相比， b型产生β-内酰胺酶比非b型高两倍。
(二) 微生物特性
1 ．根据不同感染分别采取血液、脑脊液、鼻 咽分泌物，采集后立即送检。 2 ．直接镜检 查到 G- 短小杆菌或多形态杆菌， 结合临床症状，可做初步诊断。 3.分离培养 巧克力琼脂中加入抗生素(万古霉 素、杆菌肽、氯林可霉素)，可提高本菌的阳 性率。经18～24h培养出现小、无色透明的菌 落。因为葡萄球菌能合成Ｖ因子释放，促进 本菌的生长，故与金黄色葡萄球菌一起培养 时，可见到靠近葡萄球菌的菌落较大，而远 离的菌落较小，称为“卫星现象”。
二、鲍特菌属
(一)分类 包括百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌、 支气管鲍特菌、鸟鲍特菌、欣氏鲍特菌、 霍氏鲍特菌，前三种 DNA 同源性高达 72 ％～ 94％， DNA的 G+C mol％为 66 ～ 70 ， 是临床常见的致病菌，而后三种临床致 病报道较少。
(二)临床意义
百日咳的致病菌，人是惟一的传染源，通
1.为G-短小球杆菌，无芽孢、无鞭毛、有荚膜 菌株，毒力较强。 2.需氧或兼性厌氧，最适生长温度为35℃，pH 以7．6-7．8为最佳。培养时必须供给含有X、 V 因子的新鲜血液。最佳培养基是巧克力琼 脂：因为加热可使V因子释放。 3.根据荚膜多糖抗原可分为6个血清型，其中b 型的致病性最强，f型次之。 4.抵抗力弱，加热50℃30分钟被杀死。消毒剂 敏感，干燥易死亡。 DNA 的 G+Cmol ％为 37— 44。
2. 副流感嗜血杆菌 引起人类咽炎及心内膜炎， 是寄居健康人体上呼吸道细菌之一。 3．溶血嗜血杆菌 存在于人体的鼻咽部，常引 起儿童上呼吸道感染； 4．埃及嗜血杆菌 有高度的传染性，易侵犯儿 童。常存在于细胞内。 5．副嗜沫嗜血杆菌 属于正常菌群，引起心内 膜炎、败血症、脑脓肿、脑膜炎。 6 ．杜克氏嗜血杆菌 为性传播病菌。常引 起外阴脓疱、溃疡、淋巴结肿大。
（一）临床意义
本菌属存在于上呼吸道，定植可达人群 的50％。 1．流感嗜血杆菌 常引起源自文库炎、咽炎、中 耳炎、肺炎。在G-杆菌中引起肺炎者占到第 三位。脑膜炎、心包炎、骨髓炎、关节炎也 可分离到该菌。有荚膜b型对人致病性最强， 脑膜炎病人中检出率最高，同时还可引起菌 血症。其主要致病物质是内毒素、荚膜、菌 毛和酶类。荚膜有杭吞噬作用，菌毛能粘附 于人类口咽部细胞。致病力强的流感嗜血杆 菌菌株具有lgA蛋白酶，能水解SIgA。
（四）微生物检验
1 ． 标本采集
①咳碟法：患者对准打开的鲍 金氏培养基平板咳嗽数次，直接收集病人咳 出的飞沫培养。②鼻咽拭子法：将拭子进入 鼻咽部采集标本。 2．革兰染色直接镜检为G-小杆菌。 3．初次分离对营养要求较高，需要半胱氨酸和 组氨酸等，并产生过多的脂肪酸可抑制生长， 因此应加入15％-25％血、活性炭吸附多余的 脂肪酸；2—3天可形成细小光滑、灰色不透明 的露滴状菌落，并有狭窄的溶血环。
过飞沫传染。
感染后传染性强，患者出现阵发性剧烈咳
嗽，直至咳出粘稠的痰液或呕吐为止。
病后及预防接种后可产生较持久的免疫力。
本菌粘附在气管和支气管上皮细胞 上并迅速繁殖释放毒素：①百日咳毒素 是主要毒力因子，与阵发性咳嗽、支气 管痉挛有关。②丝状血细胞凝集素能促 进病原菌粘附在纤毛上皮细胞上。③腺 嘌呤环酶毒素可使吞噬活性受抑，导致 免疫力减低。④气管细胞毒素对纤毛上 皮细胞有特殊亲和力，抑制纤毛摆动并 使细胞坏死脱落。
4.抗原检测： （1）以荧光标记抗体检测菌体，外周呈 绿色荧光，中心暗的球杆菌为阳性。 （2）可用 ELISA的方法测特异性脂多糖 抗原。 5.核酸检测： 检测百日咳鲍特菌的DNA, 有高度特异性。
(五)临床治疗
首选红霉素类；次选氨曲南及磺胺 增效剂(SMZ-TMP)，对青霉素不敏感。 该菌感染的控制以预防接种为主， 小于6个月的婴儿患病时应注意并发肺 炎、脑膜炎及呼吸衰竭。
(三)微生物特性
该菌属为G-小杆菌，无芽胞，有荚膜。 专性需氧，最适生长温度为35℃—37℃， O 抗原为共同抗原， K 抗原的因子 7 为百日咳、副百日咳和支气管炎鲍特菌 所共有。经多次传代后，菌落变为粗糙 而呈多形性；失去荚膜变为无毒株。 抵抗力弱，但在低温能生存，对紫 外线敏感，日光照射60分钟可死亡。
第二节 人兽共患病原菌
大多数引起动物感染的微生物，不能引起 人类感染。但有少数微生物既能感染动物也 能感染人，被称为人兽共患微生物。包括病 毒、细菌、螺旋体、立克次体等。
人兽共患炭疽细菌包括芽胞杆菌、鼠疫耶 尔森菌、布鲁菌属、巴斯德菌届、弗朗西斯 菌属等。
一、布鲁菌属
包括羊布鲁菌(又称马尔他布鲁菌)、牛