实验常用培养基和基本特性
常用培养基及基本特性
常用培养基及基本特性1、RPMI-1640MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。
主要用于悬浮细胞培养。
其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用2、Minimum Essential Medium（MEM）也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。
成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。
MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。
3、DMEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。
适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。
4、DMEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。
低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。
5、DMEM/F12DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。
F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM 以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DME/F12medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。
该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。
为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES缓冲液。
16、McCoy’s5A9McCoy’s5A Medium主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。
细菌生化实验报告
一、实验目的1. 了解细菌生理生化反应的基本原理和实验方法。
2. 掌握常见细菌生理生化反应的检测方法，如糖发酵、吲哚产生、甲基红反应等。
3. 学会通过生理生化反应对细菌进行初步鉴定。
二、实验原理细菌生理生化反应是指细菌在生长繁殖过程中，利用酶催化底物发生的一系列化学反应。
通过检测细菌对特定底物的利用能力、酶的产生以及代谢产物的生成，可以判断细菌的种类和特性。
三、实验材料1. 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形杆菌等。
2. 培养基：葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）、吲哚试剂、甲基红试剂等。
3. 仪器：酒精灯、接种环、培养皿、试管、试管架、滴管等。
四、实验方法1. 糖发酵实验：将待测菌接种于糖发酵培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
观察菌落周围是否出现透明圈，判断细菌是否能发酵该糖。
2. 吲哚产生实验：将待测菌接种于蛋白胨水培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
取培养液滴加吲哚试剂，观察是否产生红色沉淀，判断细菌是否能产生吲哚。
3. 甲基红反应实验：将待测菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
取培养液滴加甲基红试剂，观察颜色变化，判断细菌是否能产生有机酸。
五、实验结果与分析1. 糖发酵实验结果：- 大肠杆菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阴性。
- 金黄色葡萄球菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阴性。
- 枯草芽孢杆菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阴性。
- 变形杆菌：葡萄糖发酵阳性，乳糖发酵阳性。
2. 吲哚产生实验结果：- 大肠杆菌：吲哚产生阴性。
- 金黄色葡萄球菌：吲哚产生阳性。
- 枯草芽孢杆菌：吲哚产生阴性。
- 变形杆菌：吲哚产生阳性。
3. 甲基红反应实验结果：- 大肠杆菌：甲基红反应阴性。
- 金黄色葡萄球菌：甲基红反应阴性。
- 枯草芽孢杆菌：甲基红反应阳性。
- 变形杆菌：甲基红反应阳性。
根据实验结果，我们可以初步判断：- 大肠杆菌为革兰氏阴性菌，发酵葡萄糖，不产生吲哚和有机酸。
实验室常用的酸碱和基本特性
名称 化学式 含量 基本性质
氟硼酸 HBF4 40% 常压沸点为 130℃（分解），在密闭容器中不需要高压就能获得比氢氟酸更 高的温度，且酸不分解。特别适宜消解那些需要分解硅酸盐和需高温条件 的含有无机基体的样品。 适用范围 硅酸盐，地质样品 名称 化学式 含量 基本性质 王水 HCl:HNO3 3:1 沸点 112℃，在 0.7MPa 下温度可达 145℃。一种有效的氧化剂，能产生氯 化亚硝酰。王水需现配现用。王水可用来溶解许多金属和合金，也可从硅 酸盐基质中酸洗出部分金属，但无法有效的加以完全溶解。除王水外，硝 酸和盐酸还常以另外的比例混合在一起使用，所谓的乐福特王水，也叫逆 王水，是三份硝酸与一份盐酸的混合物。常用来溶解氧化硫和黄铁矿。 适用范围 适用于无机物，特别是金矿、铂矿，快速分解硫化物、砷化物、硒化物以 及锑氧化物；也常用此消化废水，植物样品。
名称 化学式 含量 基本性质 适用范围 名称 化学式 含量 基本性质
浓硝酸、双氧水组合酸 HNO3+H2O2 5:1 一种优良的强氧化剂组合酸 主要用于消解各类化妆品，油脂和植物及动物组织；也常常消化石油产品.
浓硝酸、浓硫酸组合酸 HNO3+H2SO4 3:2 或 1:1 HNO3 虽氧化能力强，但沸点较低，与硫酸二者组合后，易于形成硫酸盐 络合物，并具有更强的脱水性和氧化能力。起始反应完成后加入 H2O2 可使 反应完全。 适用范围 聚合物、果酱、油脂和有机材料，使用时需严格遵守微波辅助消化相应的 要求。 名称 化学式 含量 基本性质 适用范围 浓硝酸、氢氟酸组合酸 HNO3+HF 1:5 或 1:1 难熔金属及高硅材料的有效溶剂。 对于溶解金属钛、铌、锆、铪、钨及其合金特别有用，也可用来分解锡及 合金、硼化物、钨矿石、硅酸盐、熔岩、灰熔渣以及高含量硅成分的植株 体。 浓硝酸、浓盐酸、氢氟酸组合酸 HNO3 +HCl +HF 5:15:3 或 10:3:2 用时常先配制王水或逆王水，再与 HF 混合而成。 消解合金、岩石、硅酸盐、煤灰、渣土、冷却水垢，玻璃纤维、高岭土、 沸石和陶瓷等。 浓硫酸、浓磷酸组合酸 H2SO4+ H3PO4 1:1 或 2:3 在低压条件下产生极高的温度，需小心适用；H3PO4 有助溶剂的功效。 a-氧化铝、耐火材料，铬铁矿和一些含 Al 高的陶瓷。
l15培养基成分
l15培养基成分
L15培养基是一种常用的细菌培养基，其成分对于细菌的生长和繁殖起着重要的作用。
L15培养基的主要成分包括无机盐、有机物质和缓冲剂等。
一、无机盐类：L15培养基中含有多种无机盐，如氯化钠（NaCl）、磷酸二氢钾（KH2PO4）、硫酸镁（MgSO4）等。
这些无机盐提供了细菌所需的微量元素，维持了细菌体内的正常生理功能。
二、有机物质：L15培养基中的有机物质主要包括葡萄糖、氨基酸和维生素等。
葡萄糖是细菌的主要能源来源，为其提供能量进行生长和繁殖。
氨基酸是构成细菌蛋白质的基本单元，维生素则是细菌正常生长所必需的辅助因子。
三、缓冲剂：L15培养基中的缓冲剂主要是碳酸氢钠（NaHCO3）。
缓冲剂的作用是维持培养基的酸碱平衡，保持细菌生长环境的稳定性。
L15培养基的配方经过精心设计，能够提供细菌生长所需的各种营养物质。
在培养细菌时，我们可以根据需要添加其他成分，如抗生素等，以达到特定的研究目的。
L15培养基是一种优良的细菌培养基，其成分的合理配比为细菌的生长和繁殖提供了良好的条件。
通过对L15培养基成分的了解，我们可以更好地理解细菌的生长机制，并为相关研究提供基础支持。
LB培养基
一、基本原理：LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。
碳源和能源：酵母提取物，氮源：磷酸盐、蛋白胨，无机盐：NaCl。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。
由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基的配方如下：酵母提取物5g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂15～20g、水1000mL、pH 7.4～7.6二、实验用品试剂：酵母提取物，蛋白胨，NaCl，琼脂，1mol/L NaOH，1mol/L HCl；仪器：试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻棒，牛角匙，pH试纸（pH 5.5～9.0），培养基分装器，天平，高压蒸汽灭菌锅，棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。
三、实验步骤1．称量按培养基配方比例依次准确地称取酵母提取物、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
蛋白胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。
另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。
2．溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化的药品中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。
最后补足所失的水分。
3．调pH在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH 达7.6。
反之，则用1mol/L HCl进行调节。
注意pH值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响培养基内各离子的浓度。
培养基的分类特点及用途
培养基的分类特点及用途一、培养基的分类培养基是指营养成分经科学配合后所制成的供细菌、真菌、细胞等生物体生长和繁殖所需的环境。
根据所含的成分和用途，培养基可以分为以下几类：1. 基本培养基：没有添加特定生物体需要的营养成分，只含有最基本的几种营养成分，如碳源、氮源、矿物质等。
基本培养基通常被用作通用培养基，可以养殖多种微生物。
2. 选择培养基：为了满足一些特定生物体的生长和繁殖所需要的营养成分，而专门配制的培养基。
选择培养基对微生物有筛选作用，能够筛选出需要的生物群体。
如：用特定的培养基培养肠道杆菌，能够抑制和筛选出其他细菌，只有肠道杆菌才能够在这种培养基上繁殖。
3. 差异培养基：在培养基中添加一些特定物质，使得不同的微生物产生不同的代谢产物，从而区分不同的微生物。
如：利用大豆胰蛋白分解物和胆绿素琼脂制成的苦味培养基，利用胆绿素这种特殊物质，能够区分肠道菌群中不同的菌种。
4. 液体培养基：培养基为液体状态，在培养菌体时，需要静置或搅拌等。
5. 固体培养基：固体培养基多用琼脂作为固化剂，用于菌落计数、鉴定分离纯化菌株。
6. 挑菌培养基：挑菌法是分离细菌的基本方法，其目的是从混合物中分离出单个细胞，并培养出其单克隆，挑菌培养基即为完成挑菌有需求。
7. 健康、营养、创新型培养基：随着现代社会的发展和对微生物的研究日益深入，健康型、营养型和创新型培养基不断涌现出来。
这些培养基更加符合人类和生物的自然需求，正在越来越广泛地用于医药、食品、环保等领域的研究。
二、培养基的特点1. 包含生物体所需的营养成分：根据微生物的不同需求，添加不同组成的营养成分，如碳源、氮源、矿物质等，满足生物体生长和繁殖的需求。
2. 能够控制微生物的生长速度：培养基中的某些成分可以控制微生物的生长速度，从而保持微生物处于最适生长状态，并且使培养物的浓度最大化。
3. 包括抗生素：在培养基中加入一定量的抗生素能够控制其他微生物的生长，是创造无菌环境或筛选特定细菌不可或缺的工具。
细菌培养实验报告分析
一、实验背景细菌培养是微生物学实验中一项基本且重要的技术，通过对细菌进行培养，可以观察其生长特性、分离纯化、鉴定以及进行各种生化实验等。
本实验旨在通过平板划线法分离培养细菌，并对所分离的菌落进行形态观察、生化实验和药敏试验，以分析细菌的种类和特性。
二、实验材料与方法1. 实验材料（1）菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等。
（2）培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基、琼脂平板等。
（3）试剂：酚红指示剂、葡萄糖、乳糖、靛基质、甲基红、V-P试剂、革兰氏染色液等。
2. 实验方法（1）平板划线法分离细菌：将待分离的细菌接种于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，用无菌接种环进行划线操作，重复划线直至菌落分离。
（2）观察菌落特征：观察分离的菌落形态、大小、颜色、边缘、表面等特征。
（3）进行生化实验：对分离的菌落进行葡萄糖发酵、乳糖发酵、靛基质试验、甲基红试验、V-P试验等生化实验。
（4）药敏试验：采用纸片扩散法进行药敏试验，观察细菌对多种抗生素的敏感性。
三、实验结果与分析1. 菌落特征通过平板划线法分离，我们得到了形态各异的菌落。
大肠杆菌菌落呈白色、光滑、圆形、边缘整齐；金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色、光滑、圆形、边缘整齐；枯草芽孢杆菌菌落呈白色、粗糙、圆形、边缘不整齐。
2. 生化实验结果（1）葡萄糖发酵：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均能发酵葡萄糖，产生红色沉淀；枯草芽孢杆菌不发酵葡萄糖。
（2）乳糖发酵：金黄色葡萄球菌能发酵乳糖，产生红色沉淀；大肠杆菌、枯草芽孢杆菌不发酵乳糖。
（3）靛基质试验：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均产生靛基质，使培养基呈蓝绿色；大肠杆菌不产生靛基质。
（4）甲基红试验：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均呈阴性反应；大肠杆菌呈阳性反应。
（5）V-P试验：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均呈阴性反应；大肠杆菌呈阳性反应。
3. 药敏试验结果大肠杆菌对氨苄西林、头孢噻肟、头孢曲松等抗生素敏感；金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺等抗生素敏感；枯草芽孢杆菌对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟等抗生素耐药。
微生物实验室常见20种培养基配方大全
微生物实验室常见20种培养基配方大全1.肉汤培养基成分：牛肉膏或牛肉汤500克，葡萄糖10克，胰蛋白胨10克，NaCl5克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于各种需有机氮源的细菌的培养。
2.十倍腌盐水成分：NaCl300克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于耐盐真菌和嗜盐细菌的培养。
3.果胶培养基成分：果胶5克，葡萄糖5克，NaNO32克，K2HPO40.2克，MgSO4·7H2O0.1克，CaCO30.02克，FeSO4·7H2O0.01克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于果胶酶产生菌的培养。
4.大肠杆菌选择性培养基成分：土豆提取物4克，蛋白胨2克，乳糖10克，NaCl10克，胆盐0.75克，碱性蓝2克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于分离大肠杆菌的选择性培养。
5.卡波培养基成分：石蜡300克，肉浸膏100克，大豆酪蛋白胨20克，NaCl5克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于致病真菌的培养。
6. Nutrient Broth培养基成分：肉膏1克，酵母提取物2克，葡萄糖2克，NaCl5克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于细菌和真菌的常规培养。
7. Luria-Bertani（LB）培养基成分：酵母提取物5克，酪蛋白胨10克，NaCl10克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于E. coli等细菌的培养。
8. Sabouraud葡萄糖琼脂培养基成分：葡萄糖40克，醇20克，琼脂15克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于真菌的培养。
9. MacConkey琼脂培养基成分：鱼精膏20克，胆盐胆红素15克，玛琪琼脂25克，NaCl5克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于肠道杆菌的培养、分离。
10.马加提琼脂培养基成分：马加提琼脂50克，蒸馏水1000毫升。
用途：适用于细菌、酵母和霉菌的常规培养。
11.酵母醇葡萄糖琼脂培养基成分：葡萄糖20克，醇30克，琼脂20克，蒸馏水1000毫升。
几种常见培养基作用
几种常见培养基作用培养基是细菌学和微生物学实验的基础，用于培养、繁殖和研究细菌和其他微生物。
不同的培养基具有不同的特性和作用。
下面将介绍几种常见的培养基及其作用：1.营养琼脂基本培养基：这是最常用的培养基之一，它提供了细菌生长所需的各种营养物质，包括碳源、氮源、矿物质和维生素。
该培养基能够满足细菌的基本营养需求，促进其繁殖和生长。
2.差异性培养基：差异性培养基的作用是区分不同细菌的生长和代谢特点。
例如，大肠杆菌选择性培养基能够抑制其他菌群的生长，只允许大肠杆菌生长，从而帮助鉴定和分离大肠杆菌。
3.选择性培养基：选择性培养基的作用是选择性地培养其中一类细菌。
根据细菌对不同抑制剂和抗生素的敏感性，可以选择性地促进或抑制一些细菌的生长。
例如，巴氏杆菌选择性培养基会抑制大多数菌群的生长，只允许巴氏杆菌生长。
4.富集培养基：富集培养基的作用是加强其中一类细菌的生长。
富集培养基通常会包含一些特定成分，如特定营养物质或抗生素，以促使目标菌株的繁殖。
例如，革兰氏阳性杆菌富集培养基中含有高浓度的碳源和氮源，有助于改善革兰氏阳性杆菌的生长。
5.不含营养物质的培养基：不含营养物质的培养基还被称为无机培养基或基本盐蔗糖培养基(BSC)。
这种培养基只提供细菌生长所需的无机物质和一定浓度的蔗糖，不含有机营养物质。
这种培养基的作用是用于检测细菌对不同抗生素和化合物的敏感性，从而为抗生素临床应用提供参考。
6.非选择性培养基：非选择性培养基是一种通用的培养基，适用于不同种类的细菌。
它提供了细菌生长所需的各种营养物质，并不含有可能抑制菌群向生长的物质。
这种培养基通常用于分离和纯化未知细菌，以便进一步研究其特性和功能。
7.复合培养基：复合培养基是由多种不同成分组成的培养基，包括富集培养基、选择性培养基和差异性培养基等。
复合培养基的作用是兼顾多种细菌的营养需求和特性，为细菌的培养和研究提供全面的支持和条件。
总结起来，不同的培养基具有不同的作用，能够满足细菌的基本营养需求、区分不同细菌的生长和代谢特点、选择性地培养或抑制一些细菌、加强其中一类细菌的生长，或用于检测细菌对抗生素和化合物的敏感性。
微生物的实验室培养
微生物的实验室培养一、引言微生物是一类微小的生物体，广泛存在于自然界中，包括细菌、真菌、病毒等。
微生物在医学、农业、环境保护等领域具有重要的应用价值。
为了更好地研究微生物的生理、代谢、遗传等特性，需要对其进行实验室培养。
本文将介绍微生物实验室培养的基本原理、方法和应用。
二、微生物实验室培养的基本原理1.营养物质：微生物对营养物质的需求因种类而异，一般包括碳源、氮源、矿物质、维生素等。
不同微生物对营养物质的种类和浓度有不同的要求。
2.培养基：培养基是供给微生物生长繁殖的营养基质，一般包括水、碳源、氮源、矿物质等。
根据微生物对营养物质的需求，可以设计不同类型的培养基。
3.培养条件：微生物的生长繁殖受到温度、pH、氧气、湿度等环境因素的影响。
实验室培养时，需要根据微生物的生长特性，调整培养条件，以利于其生长。
4.无菌技术：微生物实验室培养过程中，需要严格遵循无菌操作规程，防止外来微生物的污染。
无菌技术包括消毒、灭菌、无菌操作等。
三、微生物实验室培养的方法1.液体培养：液体培养是将微生物接种于液体培养基中，使其在液相中生长繁殖。
液体培养适用于大量繁殖微生物，常用于生产发酵产品、制备菌种等。
2.固体培养：固体培养是将微生物接种于固体培养基中，使其在固体表面生长繁殖。
固体培养适用于观察微生物的菌落特征、分离纯化微生物等。
3.深层培养：深层培养是将微生物接种于含有固体填充物的液体培养基中，使微生物在填充物表面生长繁殖。
深层培养适用于研究微生物的生理、代谢特性等。
4.挂壁培养：挂壁培养是将微生物接种于培养瓶内壁，使其在瓶壁表面生长繁殖。
挂壁培养适用于研究微生物的附着、生长特性等。
5.模拟自然环境培养：模拟自然环境培养是将微生物接种于模拟其自然生长环境的培养基中，使其在人工环境中生长繁殖。
模拟自然环境培养适用于研究微生物在自然环境中的生长、繁殖特性等。
四、微生物实验室培养的应用1.微生物分离纯化：通过实验室培养，可以从复杂的微生物群落中分离纯化出特定的微生物种类，为后续研究提供基础。
观察细菌的实验报告
一、实验目的1. 了解细菌的基本形态和结构；2. 掌握细菌的染色方法；3. 观察细菌在不同培养基上的生长情况。
二、实验原理细菌是单细胞微生物，具有独特的形态和结构。
通过染色和显微镜观察，可以了解细菌的基本特征。
细菌在适宜的培养基上可以生长繁殖，观察其生长情况有助于了解其生物学特性。
三、实验材料与仪器1. 材料：牛肉膏、酵母膏、琼脂、葡萄糖、细菌培养箱、显微镜、细菌培养皿、无菌水、无菌棉签、酒精灯、接种环等。
2. 仪器：酒精灯、培养箱、显微镜、接种环等。
四、实验步骤1. 准备培养基（1）牛肉膏酵母膏琼脂培养基的制备：称取牛肉膏10g、酵母膏5g、葡萄糖5g、琼脂15g，加入1000ml无菌水，加热溶解，分装于培养皿中，高压灭菌。
（2）葡萄糖培养基的制备：称取葡萄糖20g，加入1000ml无菌水，加热溶解，分装于培养皿中，高压灭菌。
2. 细菌接种（1）用无菌棉签蘸取细菌，涂布于牛肉膏酵母膏琼脂培养基上；（2）用接种环蘸取细菌，接种于葡萄糖培养基上。
3. 培养与观察（1）将接种好的培养皿放入细菌培养箱中，培养24小时；（2）用显微镜观察细菌在不同培养基上的生长情况，记录细菌的形态、大小、颜色等特征。
4. 细菌染色（1）将培养24小时的细菌涂片，晾干；（2）用酒精灯对涂片进行轻微加热，使细菌固定；（3）滴加革兰氏染色液，染色1分钟；（4）用水冲洗，去除染色液；（5）滴加碘液，染色1分钟；（6）用水冲洗，去除碘液；（7）滴加酒精，脱色1分钟；（8）用水冲洗，去除酒精；（9）滴加复红，染色1分钟；（10）晾干，观察细菌的染色结果。
五、实验结果与分析1. 细菌在牛肉膏酵母膏琼脂培养基上的生长情况观察发现，细菌在牛肉膏酵母膏琼脂培养基上呈均匀分布，菌落呈白色，表面光滑，边缘整齐。
2. 细菌在葡萄糖培养基上的生长情况观察发现，细菌在葡萄糖培养基上呈簇状分布，菌落呈白色，表面光滑，边缘整齐。
3. 细菌的染色结果观察发现，革兰氏阳性菌被染成紫色，革兰氏阴性菌被染成红色。
细菌培养实训报告
一、实验目的1. 掌握细菌培养的基本原理和操作技术。
2. 熟悉实验室无菌操作规范，提高实验操作能力。
3. 通过细菌培养，了解细菌的生长特性和代谢产物。
二、实验原理细菌培养是利用人工方法，在适宜的培养基上使细菌生长繁殖，从而获得纯种细菌的过程。
培养基中含有细菌生长所需的营养物质，如碳源、氮源、无机盐和水等。
无菌操作是防止杂菌污染的关键，实验过程中要严格按照无菌操作规程进行。
三、实验材料1. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基、琼脂平板培养基。
2. 实验器材：无菌试管、无菌培养皿、无菌移液管、酒精灯、接种环、酒精棉球、无菌生理盐水、无菌滤纸等。
3. 实验菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌。
四、实验步骤1. 培养基制备：按照实验要求，将牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基、琼脂平板培养基分别配制，并分装到无菌试管和培养皿中。
2. 灭菌：将配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌器中，121℃灭菌15分钟。
3. 无菌操作：打开无菌操作台，点燃酒精灯，用无菌移液管吸取无菌生理盐水，分别加入灭菌后的培养基中，轻轻摇匀。
4. 接种：用接种环取少量实验菌种，分别接种到牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基和琼脂平板培养基上。
5. 培养：将接种后的培养基放入恒温培养箱中，37℃培养24小时。
6. 观察结果：观察培养基上细菌的生长情况，记录细菌的形态、颜色、生长速度等特征。
五、实验结果与分析1. 牛肉膏蛋白胨培养基：接种后24小时，培养基上出现均匀分布的菌落，菌落呈白色，表面光滑，边缘整齐。
2. 营养肉汤培养基：接种后24小时，肉汤出现浑浊，菌液呈乳白色，表明细菌在肉汤中生长良好。
3. 琼脂平板培养基：接种后24小时，平板上出现圆形、白色、光滑、边缘整齐的菌落。
根据实验结果，可以判断大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基和琼脂平板培养基上均能生长。
六、实验总结1. 通过本次实验，掌握了细菌培养的基本原理和操作技术，熟悉了实验室无菌操作规范。
常用培养基及基本特性
个人收集整理-ZQ广泛应用于哺乳动物,特殊造血细胞,正常或恶性增生地白细胞,杂交瘤细胞地培养,是目前应用十分广泛地培养基.主要用于悬浮细胞培养.其它像等成淋巴细胞细胞淋巴瘤细胞以及上皮细胞等均可参考使用.()也称最低必需培养基,它仅含有种必需氨基酸,谷氨酰胺和种维生素.成分简单,可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方地哺乳动物细胞类型地培养一般用于培养一些难培养细胞类型,而其它没有特殊之处地细胞株则几乎均可采用来培养.高糖(标准型)是一种应用十分广泛地培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养.适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点地克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和转染地转化细胞地培养.低糖(标准型)是一种应用十分广泛地培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养.低糖适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快,附着性较差地肿瘤细胞培养.培养基适于克隆密度地培养培养基成分复杂,含有多种微量元素,和以结合,称为培养基(),作为开发无血清配方地基础,以利用含有较丰富地成分和含有较高浓度地营养成分为优点.该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养.为了增强该培养基地缓冲能力,改良之一是在()中加入缓冲液.'' 主要为肉瘤细胞地培养所设计,可支持多种(如骨髓,皮肤,肺和脾脏等)地原代移植物地生长,除适于一般地原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养,一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞地生长支持.例如大鼠肉瘤成纤维细胞,人淋巴细胞等上皮细胞.' ()和将' 改良为' ,用于培养红细胞和巨噬细胞前体.此种培养液含有硒,额外地氨基酸和维生素,丙酮酸钠和.并用硝酸钾取代了硝酸铁还能够促进小鼠淋巴细胞刺激地细胞,骨髓造血细胞细胞和淋巴瘤细胞地生长为营养非常丰富地培养液,因此可以用于高密度细胞地快速增殖培养.年成功研制出具有确定化学成分地细胞培养液,即,主要用于鸡胚成纤维细胞培养.此培养液必须辅以血清才能支持长期培养可用于培养多种种属来源地细胞,并能培养转染地细胞. ()培养液适用于快速增殖瘤细胞地培养,用于在缺乏地情况下培养肿瘤细胞株.此培养液采用磷酸盐缓冲体系,氨基酸组成进一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖.' 培养基:适应小鼠细胞,人类二倍体地培养.' 培养基:可以在加入很少血清地情况下应用,特别适合单细胞培养和克隆化培养,是无血清培养中常用地基础培养液.' :用于大鼠肝上皮细胞地长期细胞培养.培养液:用于培养内皮细胞.:用于培养造血细胞.,植物血凝素():增加细胞转化和合成.1 / 1。
培养基的种类范文
培养基的种类范文培养基是在实验室中为细菌、真菌、植物组织或动物细胞提供生长环境的营养物质。
根据不同的需求，培养基可以分为多种类型。
下面我将详细介绍几种常见的培养基。
1.基础培养基：基础培养基是最基本的培养基类型，提供细菌或细胞生长所需的基本营养物质，如碳源、氮源、无机盐和水等。
常见的基础培养基包括液态LB培养基（用于细菌培养）、液态DMEM培养基（用于动物细胞培养）和固体MS培养基（用于植物细胞培养）。
2. 选择性培养基：选择性培养基是通过添加特定化合物或抑制剂来选择性地促进或抑制其中一种细菌或真菌的生长。
这种培养基可用于筛选特定菌种、分离纯菌或抵制有害微生物。
常见的选择性培养基包括MacConkey培养基（用于分离大肠杆菌）、Sabouraud培养基（用于真菌培养）和MTL培养基（用于胃溃疡杆菌的分离）。
3. 差异培养基：差异培养基是通过添加其中一种化合物来促进一些细菌的可见特征表现，如颜色、形态或结构等。
差异培养基常用于鉴定和鉴别微生物。
常见的差异培养基有MacConkey-Sorbitol培养基（用于分离致病性大肠杆菌），青绿培养基（用于鉴别青霉和念珠菌）和EMB培养基（用于分离发酵杆菌）。
4.增殖培养基：增殖培养基是为了促进细胞或组织的增殖而设计的。
这类培养基通常会添加植物生长素或动物细胞因子，以促进细胞分裂或组织再生。
常见的增殖培养基有MS培养基（用于植物离体培养）和DMEM/F12培养基（用于动物细胞培养）。
5.工业培养基：工业培养基用于工业生产中的微生物发酵过程。
这类培养基通常会优化营养物质的组成，以提高产物的产量和纯度。
常见的工业培养基有液态SGG培养基（用于啤酒发酵）和液态YPG培养基（用于酵母发酵）。
除了上述几种常见的培养基类型，还存在其他一些特殊用途的培养基，如鉴别培养基（用于鉴别微生物的特定代谢能力）、低营养培养基（用于维持微生物菌株的纯度）、分离培养基（用于从混合物中分离纯菌）等。
细胞培养实验基础知识和相关无菌操作流程
细胞培养实验基础知识和相关无菌操作流程细胞培养实验是指将动植物组织或细胞从体内分离并在无菌条件下培养的一种技术手段。
这种技术可以用于研究细胞的生物学特性、疾病的发生机制以及药物的筛选等方面。
以下是细胞培养实验的基本流程和无菌操作的相关知识。
一、细胞培养的基本知识1.细胞培养的种类：常用的细胞培养种类有原代细胞培养、细胞株的维持和传代培养以及细胞系的培养。
2.细胞培养的培养基：细胞培养的培养基可以分为无血清培养基和含血清培养基。
其中，无血清培养基是通过添加一定的生长因子和营养物质来满足细胞生长的需要，而含血清培养基则是使用含有细胞生长因子和营养物质的胎牛血清来供养细胞。
3.传代培养的液氮保存：为了保持细胞株的可用性，可以将细胞株保存在液氮中，以备将来使用。
4.细胞培养中的无菌操作：细胞培养实验需要在无菌条件下进行操作，以防止细胞污染和外源性菌落的输入。
1.工作台和操作区域的消毒：操作前，需要用75％的酒精或其他合适的消毒剂彻底清洁工作台面、培养箱、玻璃器皿等操作区域。
2.培养器具的消毒：需要对培养器具如离心管、移液枪、显微镜等进行高温高压的无菌处理。
3.培养基的制备和滤过：制备培养基时需要将培养基溶液进行高温高压的杀菌处理，并使用0.22微米的滤膜滤过杂质。
4.无菌技术的掌握：在细胞培养实验中，需要学习和掌握无菌技术，如无菌操作台、细菌灯和无菌手套等的正确使用方法。
5.细胞的分离和悬浮：将组织样本放入消化液中，进行细胞的分离和悬浮，并通过离心和过滤的方式获得单个细胞悬浮液。
6.细胞培养的接种：将细胞悬浮液接种在含有培养基的培养皿或离心管中，放入培养箱中进行培养。
7.细胞传代的操作：当细胞达到一定密度后，需要进行细胞传代操作。
传代操作时，需要将细胞悬浮液转移到新的培养皿中，并加入新的培养基进行细胞的维持和生长。
总之，细胞培养实验是生物学研究中不可或缺的一项实验技术，掌握细胞培养的基本知识和无菌操作流程对实验结果的准确性和可靠性至关重要。
各种培养基的配方
各种培养基的配方在微生物学中，培养基是为微生物提供营养和生长所必需的营养物质的混合物，可以根据微生物的特性和需求来设计不同成分的培养基。
不同种类的微生物需要不同的培养基来生长和繁殖，为了获得最佳的生长效果，需根据微生物的特性制备相应的培养基。
下面介绍几种常用的培养基及其配方。
1. 加尔沙基培养基（Luria-Bertani，LB培养基）LB培养基是一种常用的细菌培养基，适用于大多数细菌的培养。
其成分包括牛肉浸出物、酵母提取物和氯化钠，PH为7.0。
配方：- 水：1000ml-氯化钠：10g-酵母提取物：5g-牛肉浸出物：10gLB培养基的主要特点是富含氨基酸和碳源，适合于细菌的快速生长。
2. PDA培养基（Potato Dextrose Agar）PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基，成分简单易得。
它主要包括马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂。
PDA培养基是一种半固体培养基，适合于真菌的产孢。
配方：-马铃薯提取物：200g-葡萄糖：20g-琼脂：20g-静置180s后，灭菌PDA培养基适合于真菌和霉菌的生长，常用于菌落计数和生长的研究中。
3.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于多种微生物的培养。
它主要包括蛋白水解物、酵母提取物、氯化钠和琼脂。
配方：-蛋白水解物：5g-酵母提取物：1g-氯化钠：5g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌营养琼脂培养基适合于大多数微生物的生长，是最常用的培养基之一4. 马尼特尔-梅尔特培养基（Mannitol-Salt Agar，MSA）MSA培养基是一种选择性培养基，主要用于金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的分离和鉴定。
它的成分包括马尼托尔、氯化钠、酵母提取物和琼脂。
配方：-马尼托尔：5g-氯化钠：75g-酵母提取物：1g-琼脂：15g- 水：1000ml-蒸馏后灭菌MSA培养基在金黄色葡萄球菌的生长过程中，可以通过红色菌落的形成来进行识别。
DMEM、RIPA1640、F12、L15等细胞培养基的基本知识
尽管很多实验室在细胞系的培养基中常规加入抗生素作继代培养，但仍建议不要在原代培养中加入抗生素，其理由之一是获得的细胞是无菌的，原代培养时的细菌污染很少发生。其次，尽管认为抗生素对细胞代谢的影响可忽略，但最好避免使用它们，以免细胞生长环境的不稳定。最重要的是要意识到培养中主要污染物的类型，它们通常暗示了问题的来源。
在所有这些培养基中，谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度，这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源。对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸（若培养基中这两种物质缺乏时）。MEM与F12均要用5%的CO2来平衡，DMEM含更高浓度的NaCO3，要用10%的CO2来平衡，当然也可以在较低CO2浓度下使用。这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的，但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果。
四、抗生素
在细胞培养中最常用的抗生素是青霉素（常用浓度是25~100ui/ml）与链霉素（25~100μg/ml）。这两种抗生素常混合使用。在一些实验室里，它们常规加入所有的培养基中。庆大霉素（10~100μg/ml）通常有广谱抗菌效应，并具有溶液稳定性，故也被一些实验室使用，特别是当有低水平的污染存在时更是这样。以上这些试剂对霉菌与酵母菌的污染均无效。
五、抗有丝分裂剂
某些DNA合成抑制剂对分裂细胞有毒，但对没有DNA合成的细胞仅有轻微影响。由于神经元通常缺乏DNA合成能力，因此对抗有丝分裂剂没有多大反应。这样的试剂常常用于神经元的培养，以消除或减少非神经元群体。若要杀死所有的非神经元细胞，可以先加入血清或生长因子来保证有高比例的非神经元细胞进行DNA合成，此时再加入抗有丝分裂剂。但是，某些细胞在它的细胞周期的某些时相时对抗有丝分裂剂是不敏感的。不过，可以重复的将抗有丝分裂剂使用于增殖的细胞群体。在CNS神经元的培养中抗有丝分裂剂常常在星形细胞形成单层后加入，此时，星形细胞由于接触抑制而终止了DNA的合成（即细胞停止增殖），它们不会因抗有丝分裂剂的加入而死亡。原代培养中用这种方法阻止成纤维细胞的过度增殖是十分必要的。有两种抗有丝分裂剂常用于神经元的培养：Fluorodexyuridine，是胸苷合成酶抑制剂，一般使用浓度为～10μM。尿苷（10μM）也常使用，可阻止不分裂细胞的RNA合成。另外，阿糖胞苷也常被使用，其使用浓度为5～50μM。使用任何一种抗有丝分裂剂，都必须考虑它的神经原毒性，应该确定最低效应的使用浓度。阿糖胞苷在很低的浓度下，也会对某些种类的神经元有毒性，可以造成特定神经原的死亡。其他的抗有丝分裂剂尚未表现出这种毒性。
微生物检验的基本内容
微生物检验的基本内容微生物检验是指对样本中的微生物进行检测和分析的过程。
微生物检验的基本内容涵盖了样品采集、培养、鉴定和药敏试验等步骤。
本文将依次介绍微生物检验的基本内容，以帮助读者了解微生物检验的全过程。
1. 样品采集微生物检验的第一步是样品采集。
样品可以是各种来源的生物体组织、体液、环境样品等。
在采集样品时要注意消毒和无菌操作，以避免外部微生物的污染。
不同类型的样品需要采用不同的采集方法和容器，以确保样品的完整性和可靠性。
2. 培养培养是微生物检验的核心步骤之一。
通过培养，可以将样品中的微生物分离出来并进行纯化。
常用的培养基包括琼脂、肉汤、血琼脂等，根据不同的微生物需求选择适当的培养基。
培养条件如温度、湿度、氧气浓度等也会对微生物的生长产生影响，需要根据不同的微生物特性进行调控。
3. 鉴定鉴定是确定微生物种类的过程。
通过观察微生物的形态、生理特性和生化反应等，可以确定微生物的分类和鉴定结果。
常用的鉴定方法包括显微镜观察、生化反应试验、分子生物学技术等。
鉴定结果可以帮助医生或研究人员判断微生物的致病能力、药物敏感性等重要信息，为临床诊断和治疗提供依据。
4. 药敏试验药敏试验是评估微生物对不同抗生素的敏感性的方法。
通过将微生物培养在含有不同抗生素的培养基上，观察微生物的生长情况和抑菌效果，可以确定微生物对不同抗生素的敏感性。
药敏试验结果可以指导临床医生选择合适的抗生素治疗感染病例，避免抗生素滥用和耐药菌株的产生。
5. 数据分析和报告微生物检验的最后一步是对实验结果进行数据分析和报告。
通过统计和分析实验结果，可以得出结论并向相关人员提供报告。
报告中应包括检验的方法和步骤、微生物的鉴定结果、药敏试验结果以及相应的临床意义等信息。
准确清晰的报告可以帮助医生或研究人员做出正确的决策和判断。
总结起来，微生物检验的基本内容包括样品采集、培养、鉴定和药敏试验等步骤。
通过这些步骤，可以从样品中分离出微生物并确定其种类和特性，为临床诊断和治疗提供重要依据。
玻片细菌培养实验报告
一、实验目的1. 学习细菌的培养技术。
2. 掌握玻片培养的基本方法。
3. 观察细菌的生长特征，了解细菌的生长周期。
二、实验原理细菌培养是微生物学的基础实验之一，通过在适宜的培养基上培养细菌，可以观察其生长特征，了解其生理特性。
玻片培养是一种简便的细菌培养方法，适用于观察细菌的生长过程。
三、实验材料1. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂平板培养基。
2. 实验器具：无菌玻片、接种环、酒精灯、无菌试管、无菌棉签、镊子、培养箱等。
3. 菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。
四、实验步骤1. 准备培养基（1）牛肉膏蛋白胨培养基：称取牛肉膏10g、蛋白胨10g、氯化钠5g，加蒸馏水1000ml，加热溶解后，调节pH值为7.0-7.2，过滤后分装于无菌试管中，每管10ml，高压灭菌15分钟。
（2）琼脂平板培养基：称取琼脂20g，加蒸馏水1000ml，加热溶解后，加入牛肉膏蛋白胨培养基（灭菌后的），加热溶解，待冷却至50-60℃时，倒入无菌平板中，凝固后备用。
2. 接种（1）将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，培养24小时。
（2）用无菌接种环挑取少量菌液，涂布于琼脂平板培养基上，分别标记为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。
3. 玻片培养（1）将无菌玻片放在培养箱中预热至37℃。
（2）用无菌镊子夹取接种好的琼脂平板培养基，将菌落轻轻转移至玻片上。
（3）将玻片放在培养箱中，37℃培养24小时。
4. 观察与记录（1）观察细菌的生长情况，记录菌落形态、颜色、大小等特征。
（2）比较金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的生长差异。
五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨培养基上培养24小时后，菌落呈黄色，表面光滑、湿润、隆起，边缘整齐。
2. 大肠杆菌在牛肉膏蛋白胨培养基上培养24小时后，菌落呈白色，表面光滑、湿润、隆起，边缘整齐。
3. 观察到金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在琼脂平板培养基上的生长形态与牛肉膏蛋白胨培养基上的生长形态基本一致。
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常用培养基及基本特性1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。
主要用于悬浮细胞培养。
其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。
2、Minimum Essential Medium（MEM）也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。
成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。
MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。
3、DMEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。
适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。
4、DMEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。
低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。
5、DMEM/F12DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。
F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DME/F12medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。
该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。
为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES缓冲液。
6、McCoy’s 5AMcCoy’s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。
例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。
7、Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM)Guilber 和Iscove将Dulbecco’Medium 改良为Iscove’s Medium，用于培养红细胞和巨噬细胞前体。
此种培养液含有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和HEPES。
并用硝酸钾取代了硝酸铁。
IMDM还能够促进小鼠B淋巴细胞，LPS刺激的B细胞，骨髓造血细胞，T细胞和淋巴瘤细胞的生长。
IMDM为营养非常丰富的培养液，因此可以用于高密度细胞的快速增殖培养。
8、M-199 Medium1950年，Morgan成功研制出具有确定化学成分的细胞培养液，即M-199，主要用于鸡胚成纤维细胞培养。
此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。
M-199可用于培养多种种属来源的细胞，并能培养转染的细胞。
9、Leibovitz Medium （L-15）L-15培养液适用于快速增殖瘤细胞的培养，用于在CO2缺乏的情况下培养肿瘤细胞株。
此培养液采用磷酸盐缓冲体系，氨基酸组成进一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。
10、Ham’s F-10培养基：适应小鼠细胞、人类二倍体的培养。
11、Ham’s F-12培养基：可以在加入很少血清的情况下应用，特别适合单细胞培养和克隆化培养，是无血清培养中常用的基础培养液。
12、William’s Medium E：用于大鼠肝上皮细胞的长期细胞培养。
13、MCDB 131 培养液：用于培养内皮细胞。
14、Opti-MEM I Reduced Serum Media：用于培养造血细胞。
15、植物血凝素（PHA）：增加细胞转化和DNA合成。
如何正确选择细胞培养基细胞培养是实验室里最常见和最基本的实验了，但却不是最简单的。
别小看细胞培养，这里可蕴含着大学问。
有时候细胞状态不好，转染、药筛这些实验根本就没办法做。
影响细胞培养的因素很多，让我们先从培养基和血清说起。
经典的培养基有很多种，Invitrogen(GIBCO)、thermo fisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。
其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用最广泛的培养基。
其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。
◆ MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的，其中增加了组分的范围及浓度。
◆ Dulbecco改良的BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的，现在常用于贴壁细胞的培养。
DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍，维生素浓度是MEM的4倍，采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。
最初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L，后来为了某些细胞的生长需要，将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L，这就是大家常说的低糖和高糖了。
◆ aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸，它可广泛应用于各种细胞类型，包括对营养成分要求苛刻的细胞。
◆ Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的，现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。
F12还可以与DMEM等体积混合使用，得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物，这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。
◆ RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的，现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
以前经常听到有人问，这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单，也可以好复杂。
此话怎讲?如果这种细胞是购自ATCC或其他的细胞库，那很简单，问供应商就行了。
或者找到相关的文献，作为参考。
Invitrogen 网站上有一个Cell Line Database的工具，也很好用。
选择你感兴趣的细胞类型，它就会弹出推荐的培养基、血清和转染试剂等，有时还有优化好的转染步骤，很方便。
Sigma网站上也有一个Media Expert，包括了培养基所有成分的功能描述、使用推介和参考文献等，它还是一个解决问题能手，对于细胞培养中的常见问题，如细胞贴壁不好、培养基变色等，它都会列出可能的原因，并提供补救办法。
这个Expert果然不简单!但如果你是着手建立一种全新细胞的培养体系，根本找不到任何参考，那你就得花点时间自己试验了。
万事开头难嘛。
因为没有一个标准答案。
在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。
总之，首选MEM做贴壁细胞培养、RPMI 1640做悬浮细胞培养会是一个好的开始。
你也可以购买几种培养基来，然后花大约两周的时间做一个简单的细胞生长实验，来选择其中最适合的。
有时候你会惊讶地发现你的最佳培养条件与文献报道的不同，就算是同一种培养条件，细胞的生长状态也时好时坏，这是很正常的。
因为试剂、水、不同批号的血清之间都存在着差异。
要提高培养基的稳定性，可以从培养基和血清两方面入手。
以前大部分实验室都是用干粉培养基，但配制过程就较为繁琐，要溶解、调pH值，过滤，过程中可能会产生一些浓度误差，而且有些实验室的水质并不理想，所以培养的效果会有差异。
如果使用液体培养基，这种人为的误差会减少，因为毕竟是大批量工业化生产的，批间差会很小。
大家是不是感觉液体培养基会贵很多，以前是这样，但现在非也。
HyClone和Invitrogen都在国内建立了液体培养基的生产基地，生产和运输成本大幅降低，所以现在的价格也只是50-60元/500ml，比干粉培养基贵不了多少，而且还帮你省了过滤器和时间。
血清含有生长因子可促进细胞的繁殖，含有附着因子可促进细胞的贴壁，同时还具有抗胰酶活性。
血清同时也是矿物质、脂类及激素的来源。
最常用的血清有小牛血清、新生牛血清、胎牛血清和马血清等。
牛血清是按照采血时间的早晚来分类的。
采血时间越早，营养物质越丰富，所含抗体也越少，因而胎牛血清适合要求高的细胞系和克隆化培养。
由于疯牛病的原因，到目前为止，我国政府仍然禁止从北美洲、欧洲和日本等地区进口牛血清，因此市面上的牛血清大多来自澳洲、南美洲，或是国产的。
而血清批次间的差别就是不可避免的，这种差异来源于不同的制备方法和除菌方法、动物的年龄差别及血清的储存条件等，而且与取血动物的来源关系密切。
不同的牧场、不同的气候天气及其他环境因素都可能影响血清的质量。
因此选好了一种血清就要尽可能长期使用它。
在需要更换时，也要尽量保持与原有的一批血清相似。
现在很多公司都提供血清预留，你一旦选定了某个批次的血清，最好备足一年的量，这样可以避免很多麻烦。
血清固然是细胞培养中不可或缺的成分，但正如上文所说，血清的批间差异大，更换血清时需要做大量的测试以取保替换的血清与原来的相似。
而血清的供应也是必须要考虑的因素。
由于气候或疯牛病的影响，说不定哪天血清就突然没得卖了，那对实验的影响可非同小可。
另外，血清的价格也很昂贵，虽说现在也有便宜的国产血清，但是高品质的澳洲血清价格仍旧高企。
因此，也有一些实验室开始换用无血清培养基。
无血清培养基(Serum-Free Media)，通常以SFM表示，顾名思义，就是在细胞培养中不需要添加血清，但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。
无血清培养基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等，能减少上述血清带来的不利因素，使细胞培养的条件更稳定。
但它也不是完美的，从有血清培养过渡到无血清培养的条件并不像想象中那么直截了当。
处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方，对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。
而且在去除血清的同时，也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用，因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。
另外，它的价格也比普通的培养基贵很多。
现在有很多厂家生产无血清培养基。
GIBCO这个细胞培养的金字招牌当然少不了，它也是最早研制无血清培养基的。
目前已经开发了ES细胞、杂交瘤、CHO、293、昆虫细胞、神经细胞、淋巴细胞、角质细胞、内皮细胞等多种细胞的无血清培养基。
上个月还推出了首个间充质干细胞的无血清培养基，能使MSC维持未分化状态超过9代。
HyClone公司也有CHO、293、杂交瘤细胞、昆虫细胞、病毒疫苗细胞的多种无血清培养基。
Sigma则刚刚收购了澳大利亚JRH公司，有了JRH 的EX-CELL系列，无血清培养基的选择也更多了。
这么多种，要选择起来也是个头疼的事情。
除了部分培养基是公开配方的，如用于培养内皮细胞的MCDB 131(Sigma)，大部分液体培养基都是专利配方的，也就是说其中的成分是保密的。
那么你只能是检索文献、让供应商推荐，然后用自己的细胞做几次传代培养来选出最合适的培养基。