第二节基因突变和诱变育种
食品微生物 第5章 微生物遗传变异与菌种选育第二节

携带供体部分遗传物质(DNA片段)的噬菌体称为 转导噬菌体。
普遍性转导
细菌转导的二种类型:
特异性转导
1、普遍性转导(generalized transduction)
通过极少数完全缺陷噬菌体对供体菌基因组上任何小片段 DNA进行误包,而将其遗传性状传递给受体菌的现象,称普遍 性转导。 (1) 意外的发现
保藏期 3-6 月
1-2 年 1-10 年 5-15 年
菌种保藏机构
ATCC采用的菌种保藏法:
( American Type Culture Collection ,美国典型菌种保藏中心)
冷冻干燥保藏法 液氮保藏法 CCCCM采用的菌种保藏法:
( China Committee for Culture Collections of Microorganism, 中国微生物菌种保藏委员会)
转化(transformation)
转化:受体细胞直接吸收供体细胞的DNA片段, 并与其染色 体同源片段进行遗传物质交换,使受体细胞获得新的遗传性 状的现象。
转化因子
吸附吸收
受体细胞 高1000倍 感受态
整合
转化子
(2) 转化过程
供体(strR)
ds DNA
感受态受体(strS) 酶解与吸收单链
将遗传性状不同的两种菌(种内、间、属间)融合 为一个新细胞的技术。
五、基因工程技术用于工业菌种改良
基因工程技术:基因操作、基因克隆、DNA重组。将含 目的基因DNA片段经体外操作与载体连接,转入一个受 体细胞并使之扩增、表达的过程。
•目的基因 •载体选择 •体外重组 •导入细胞 •筛选 •鉴定
分离、合成、逆转为cDNA、PCR扩增等 质粒、噬菌体、病毒
第五章 工业微生物诱变育种

株时,应选择多种遗传类型的菌株作为出发菌株比较
稳妥,容易在较短时期内达到育种目的。
8. 菌种代谢特点
了解菌种代谢特点有助于选择有效的出发菌株。 有人曾研究过肌苷酸产生菌的代谢特性,发现肌苷 酸的生物合成过程与肌苷、肌苷酸及核苷酸、磷酸 化酶的活性有关,如果从产生肌苷酸野生型的枯草 杆菌中筛选到降解酶活性低而磷酸化酶活性强的作 为诱变出发菌株,一般都能得到良好的诱变效果。
6. 药品和原材料质量
药品规格和原材料来源不同,都会影响菌种的质量。
四、了解菌种有效产物中的 各种组分在代谢 合成过程中与培养条件的关系
由棘孢小单孢菌(Micromonospora echinopora) 产生的庆大霉素,其中C1是有效的组分; C2是无效
的。在发酵过程中加入适量的磷或蛋白胨以及加大 通 风量都有利于C1的合成;反之,C2的比例就上升。
菌悬液由出发菌株的孢子或菌体细胞与生理盐水或 缓冲液制备而成。对菌悬液的制备有如下的要求:
1、供试菌株的孢子或菌体要年轻、健壮。
细胞要新培养的,细胞生理活性方面既要同步, 又要处在最旺盛的对数期,这样突变率高,重现性也 好。 霉菌孢子浓度约为:106ml-1,放线菌孢子浓度约 为:106~107ml-1。菌悬液通常采用生理盐水制备。如 果用化学诱变剂处理时,应采用相应的缓冲液配制, 以防处理过程中pH变化而影响诱变效果。
1. 对一般出发菌株的要求
(1)从自然界样品中分离筛选出来的野生菌株,虽 然产量较低,但对诱变因素敏感,变异幅度大,
正突变率高;
(2)在生产中使用的,具有一定生产能力,并且在 生产过程经过自然选育的菌株; (3)采用具有有利性状的菌株,如生长速度快、营 养要求低以及产生孢子早而多的菌株;
遗传育种课后重点及答案

第二章基因突变及其机制1.突变(Mutation):遗传物质核酸(DNA或病毒中的RNA)中的核苷酸序列突然发生了稳定的可遗传的变化。
2.突变型:由于突变体中DNA碱基序列的改变,所产生的新的等位基因及新的表现型称为突变型。
3.染色体畸变:染色体结构的改变,多数是染色体或染色单体遭到巨大损伤产生断裂,而断裂的数目、位置、断裂端连接方式等造成不同的突变。
包括染色体缺失、重复、倒位和易位等。
涉及到DNA分子上较大范围的变化,往往会涉及到多个基因。
4.基因突变;是指一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变,包括一对或少数几对核苷酸的缺失、插入或置换,分为碱基置换(转换和颠换)和移码突变。
转换transition:DNA链中一个嘌呤(嘧啶)被另一个嘌呤(嘧啶)所置换。
颠换transversion:DNA链中一个嘌呤(嘧啶)被一个嘧啶(嘌呤)所置换。
5.错义突变missense mutation:由于突变后的密码子代表另一种氨基酸,从而造成个别碱基的改变导致多肽链上某个氨基酸为另一种氨基酸所取代。
6.同义突变:由于遗传密码的简并性,突变后的密码子编码的仍是同一种氨基酸。
碱基序列发生改变而氨基酸序列未发生改变的隐蔽突变。
7.无义突变:突变后的密码子变成终止密码子,是一类是引起遗传性状改变的突变。
8.移码突变frameshift mutation:在DNA序列中由于一对或少数几对核苷酸的插入或缺失,而使其后全部遗传密码的阅读框架发生移动,进而引起转录和转译错误的突变叫移码突变。
一般只引起一个基因的表达出现错误。
9.条件致死突变型:在某一条件下具有致死效应,而在另一条件下没有致死效应的突变型。
如:温度敏感突变型。
10.回复突变:突变基因通过再次突变回复到野生型基因的表型性状。
11.沉默突变:表型不发生改变的基因突变,包括同义突变和氨基酸序列发生改变而不影响蛋白质功能的错义突变。
12.突变率(mutation rate):每个细胞每一世代中发生突变的概率。
高中生物常见的七种育种方法和原理
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高中生物常见的七种育种方法和原理1诱变育种(1)原理:基因突变(2)方法:用物理因素(如X射线、γ射线、紫外线、中子、激光、电离辐射等)或化学因素(如亚硝酸、碱基类似物、硫酸二乙酯、秋水仙素等各种化学药剂)或空间诱变育种(用宇宙强辐射、微重力等条件)来处理生物。
(马上点标题下“高中生物”关注可获得更多知识干货,每天更新哟!)(3)发生时期:有丝分裂间期或减数分裂第一次分裂间期(4)优点:能提高变异频率,加速育种进程,可大幅度改良某些性状,创造人类需要的变异类型,从中选择培育出优良的生物品种;变异范围广。
(5)缺点:有利变异少,须大量处理材料;诱变的方向和性质不能控制。
改良数量性状效果较差,具有盲目性。
(6)举例:青霉素高产菌株、太空椒、高产小麦、“彩色小麦”等2杂交育种(1)原理:基因重组(2)方法:连续自交,不断选种。
(不同个体间杂交产生后代,然后连续自交,筛选所需纯合子)(3)发生时期:有性生殖的减数分裂第一次分裂后期或四分体时期(4)优点:使同种生物的不同优良性状集中于同一个个体,具有预见性。
(5)缺点:育种年限长,需连续自交才能选育出需要的优良性状。
(6)举例:矮茎抗锈病小麦等3多倍体育种(1)原理:染色体变异(2)方法:秋水仙素处理萌发的种子或幼苗。
(3)优点:可培育出自然界中没有的新品种,且培育出的植物器官大,产量高,营养丰富。
(4)缺点:结实率低,发育延迟。
(5)举例:三倍体无子西瓜、八倍体小黑麦4单倍体育种(1)原理:染色体变异(2)方法:花药离体培养获得单倍体植株,再人工诱导染色体数目加倍。
(3)优点:自交后代不发生性状分离,能明显缩短育种年限,加速育种进程。
(4)缺点:技术相当复杂,需与杂交育种结合,其中的花药离体培养过程需要组织培养技术手段的支持,多限于植物。
(5)举例:“京花一号”小麦5基因工程育种(转基因育种)(1)原理:基因重组(2)方法:基因操作(目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定)(3)优点:目的性强,可以按照人们的意愿定向改造生物;育种周期短。
基因突变与诱变育种
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突变真的与选择压力无关吗?
适应性突变(adaptive mutability)和高频突变(hypermutation )
Benson S. Adaptive mutation: a general phenomenon or special case? Bioessays. 1997 Jan;19(1):9-11. Review. Galitski T, Roth JR. A search for a general phenomenon of adaptive mutability. Genetics. 1996 Jun;143(2):645-59. Dan I. Andersson, E. Susan Slechta, and John R. Roth Evidence That Gaptive Mutability of the Bacterial lac Operon。 Science 1998 November 6; 282: 1133-1135. Godoy VG, Fox MS. Transposon stability and a role for conjugational transfer in adaptive mutability. Proc Natl Acad Sci U S A. 2000 Jun 20;97(13):7393-8. Bull HJ, McKenzie GJ, Hastings PJ, Rosenberg SM. Evidence that stationary-phase hypermutation in the Escherichia coli chromosome is promoted by recombination. Genetics. 2000 Apr;154(4):1427-37.
微生物遗传育种课件,基因突变

3、一个基因的不同突变位点是在这个突变基因座位符号后,按分离先后次序 用数字来表示,如果不知道这些突变属于哪一个基因座位,则用“—”来代替。
如trp A 23,trp —54
4、表型特性同样用3个字母来表示,但第一个字母大写,以便于基因符号清楚 的区别。
第二章 基因突变和诱变育种
第一节 概述: 突变的定义及其分类
一、突变的定义
突变的概念最早是由荷 兰植物学家 H. de. Vries于 1901年提出的。他在自家的 菜地上找到一种野生型的拉 马月见草(Oenothera lamarckiana)这种植物具 有惊人的产生遗传新类型的 性质, de.Vries把这些新
5、细菌对抗生素和phage的抗性突变表示为r,野生型的菌对抗生素和phage均 为敏感型s,写突变体基因型可以写strr或str-r或strB strA,写表型时,Strr。
6、一般用“+”表示一个座位野生型等位基因,“—”表示突变型等位基因, 一般不写“—”。
7、菌株用简单的序号表示,不同的实验室采用不同的英文字母作字首,菌株 编号不用斜体。一个菌株第一次在论文中出现时,应详细描述其基因型及相关 表型。
7、从基因突变所带来的表型改变来看分为选择性突变和非选择性突变。
选择性突变
营养缺陷型 抗性突变型 条件致死型
突变株 的表型
非选择性突变
形态突变型 抗原突变型 产量突变型
第二节 基因突变的规律
一、不对应性 即突变的性状与引起突变
的原因无直接对应关系。
第二节 基因突变的规律
1. 波动试验(Fluctuation test) 又称变量 试验或彷徨试验
微生物 诱变育种
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紫外损伤的光复活作用
DNA损伤的修复
切补修复 切补修复是在内切核酸酶、
外切核酸酶、DNA聚合酶以及 连接酶的协同作用下将嘧啶 二聚体酶切除去,继而重新 合成一段正常的DNA链以填补 酶切所留下的缺口,使损伤 的DNA分子恢复正常的修复方 式。由于整个过程不依赖于 可见光,所以切补修复也称 暗修复。切补修复几乎存在 于所有的微生物中。
也可用长了菌落的平板直接照射。 一般照射剂量4~10万伦琴。
此外还能引起染色体畸变,即因 染色体断裂引起染色体的倒位、 缺损和重组等。但发生了染色体
断裂的细胞常常不稳定。
化学诱变因素
化学诱变剂用量很少,诱变时设
备简单,只要一般实验室的玻璃 器皿就行,所以其应用发展较快。
碱基类似物
碱基类似物是指与DNA结构中的四种碱基 A、T、G、C在化学结构上相似的一类物 质。如5-溴尿嘧啶(BU)和5-溴脱氧尿
紫外损伤的切补修复
紫外线照射的操作方法
在暗室中安装的15瓦紫外线灯管最 好装有稳压装置,以求剂量稳定。
处理时,可将5毫升菌悬液放在直径 5厘米的培养皿中,置磁力搅拌器上, 使培养皿底部离灯管30厘米左右, 培养皿底要放平,处理前应先开灯 20~30分钟预热稳定。照射时启动磁 力搅拌器,以求照射均匀。
诱变育种
第一节基因突变
突变泛指细胞内(或病毒颗粒 内)的遗传物质的分子结构或 数量突然发生的可遗传的变化。
突变往往导致产生新的等位基 因及新的表现型。狭义的突变 专指基因突变,也称点突变, 而广义的突变则包括基因突变 和染色体畸变。
突变的几率一般很低,约为106~10-9。
突变是工业微生物产生变种 的根源,是育种的基础,但 也是菌种发生退化的主要原 因。
食品营养与检测《突变与育种诱变育种的几个原则》

食品营养与检测《突变与育种诱变育种的几个原则》突变育种是一种利用诱变剂诱发植物基因突变,进而筛选出具有优良性状的变异体,并通过杂交、选择、筛选等手段进行育种的方法。
近年来,随着分子生物学、遗传学等学科的不断发展,突变育种在食品营养与检测中的应用越来越广泛。
突变育种在食品营养与检测中的应用主要有以下几个方面。
首先,突变育种可以提高食品中有益营养物质的含量。
通过诱导植物基因突变,可以获得含有更多维生素、矿物质、蛋白质等营养物质的新品种。
例如,通过突变育种获得的玉米品种,其维生素A的含量提高了2倍以上。
这对解决人类日益增长的营养需求具有重要意义。
其次,突变育种可以改善食品品质。
通过诱导植物基因突变,可以获得具有更好的口感、色泽、香味等品质特点的新品种。
例如,通过突变育种获得的苹果品种,其果肉更加鲜嫩多汁,口感更好。
这对提高食品的市场竞争力和消费者满意度具有重要作用。
再次,突变育种可以增强食品的抗性和适应性。
通过诱导植物基因突变,可以获得对病虫害、逆境条件等具有较高抗性和适应性的新品种。
例如,通过突变育种获得的水稻品种,在干旱条件下仍能保持较高的产量。
这对解决全球气候变化和粮食安全问题具有重要意义。
最后,突变育种可以研究食品中有害物质的产生机制。
通过诱导植物基因突变,可以获得突变体,进一步研究对特定物质的合成、积累和降解等关键基因的功能。
从而揭示食品中有害物质的产生机制,为食品安全评估和食品加工提供科学依据。
在进行突变育种时,需要遵循一些基本原则。
首先,选择合适的诱变剂和诱变方法。
诱变剂的选择应根据目标物质的性质和突变效果的需求来确定,同时要考虑对植物的毒性和突变后代的生存能力。
诱变方法应根据植物的生物学特性和繁殖方式来选择,如辐射诱变、化学诱变等。
其次,进行合理的突变剂量和处理时间。
突变剂量和处理时间的选择应根据目标物质的突变效果和突变率的需求来确定,过高的突变剂量和处理时间可能导致植株的突变频率过高或突变的不稳定性。
高中生物必修二第5章-基因突变及其他变异知识点
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第5章基因突变及其她变异★第一节基因突变与基因重组一、生物变异得类型●不可遗传得变异(仅由环境变化引起)●可遗传得变异(由遗传物质得变化引起)基因重组染色体变异二、可遗传得变异(一)基因突变1、概念:DNA分子中发生碱基对得替换、增添与缺失,而引起得基因结构得改变,叫做基因突变。
类型:自然突变与诱发突变发生时期:主要就是细胞分裂间期DNA分子复制时。
2、原因:外因物理因素:X射线、紫外线、r射线等;化学因素:亚硝酸盐,碱基类似物等;生物因素:病毒、细菌等。
内因:DNA复制过程中,基因中碱基对得种类、数量与排列顺序发生改变,从而改变了基因得结构。
3、特点:a、普遍性b、随机性(基因突变可以发生在生物个体发育得任何时期;基因突变可以发生在细胞内得不同得DNA分子上或同一DNA分子得不同部位上);c、低频性d、多数有害性e、不定向性注:体细胞得突变不能直接传给后代,生殖细胞得则可能4、意义:它就是新基因产生得途径;就是生物变异得根本来源;就是生物进化得原始材料.(二)基因重组1、概念:就是指在生物体进行有性生殖得过程中,控制不同性状得基因得重新组合。
2、类型:a、非同源染色体上得非等位基因自由组合b、四分体时期非姐妹染色单体得交叉互换c、人为导致基因重组(DNA重组)如目得基因导入质粒3、意义:形成生物多样性得重要原因之一;为生物变异提供了极其丰富得来源,对生物进化具有重要意义基因重组不能产生新得基因,但能产生新得基因型。
基因突变既能产生新得基因,又能产生新得基因型.有性生殖后代性状多样性得主要原因就是基因重组。
传统意义上得基因重组就是在减数分裂过程中实现得,但精子与卵细胞得结合过程不存在基因重组。
人工控制下得基因重组(1)分子水平得基因重组,如通过对DNA得剪切、拼接而实施得基因工程.(2)细胞水平得基因重组,如动物细胞融合技术以及植物体细胞杂交技术下得大规模得基因重组。
再如肺炎双球菌得转化。
第二节染色体变异一、染色体结构变异:实例:猫叫综合征(5号染色体部分缺失)类型:缺失、重复、倒位、易位(瞧书并理解)1●●细胞中得在形态与功能上各不相同,携带着控制生物生长发育得全部遗传信息得形态与功能各不相同;一个染色体组携带着控制生物生长得全部遗传信息(3)染色体组数得判断:★染色体组数=细胞中形态相同得染色体有几条,则含几个染色体组例1:以下各图中,各有几个染色体组?答案:32 5 1 4★ 染色体组数= 基因型中控制同一性状得基因个数例2:以下基因型,所代表得生物染色体组数分别就是多少?(1)Aa______ (2)AaBb _______(3)AAa _______(4)AaaBbb _______(5)AAAaBBbb _______(6)ABCD______答案:3、单倍体、二倍体与多倍体由配子发育成得个体叫单倍体.有受精卵发育成得个体,体细胞中含几个染色体组就叫几倍体,如含两个染色体组就叫二倍体,含三个染色体组就叫三倍体,以此类推。
诱变育种概述

工业上遇到的霉菌大多数不产生有性孢子,没有典型的有性过程。
细胞杂交得到的分生孢子还是无性孢子,形态上无特殊变化。
准性循环(体细胞杂交)的三个连续过程
准性生殖:
霉菌杂交:指通过体细胞的核融合和遗传因子的重组, 即通过准性过程而不是通过性细胞的融合。
工业上遇到的霉菌大多数不产生有性孢子,没有典型的有性过程。
四、原生质体融合技术
原生质体:有时指去了壁的细胞,是生 活细胞内全部具有生命的物质的总称, 由原生质所构成。原生质体一般由细 胞膜、细胞质和细胞核三部分组成, 是细胞内各类代谢活动的主要场所。
四、原生质体融合技术
定义:将遗传性状不同的两种菌(包括种间、种内及属间)融合 为一个新细胞的技术。即实现遗传重组。
↓ ——观察单菌落形态并统计其形态变异率 挑取单菌落传种斜面
摇瓶初筛 ↓ ——对照组 挑出高产斜面 ↓ 菌种保藏(砂土管、冻干管或制备固体孢子) ↓ 传种斜面(或直接用固体孢子) 摇瓶复筛(复筛次数及摇瓶数以及培养基种类根据情况决定) ↓ ——对照组 挑出高产菌株 作稳定性试验和菌种特性考察 ↓ 放大试验罐、中试考察 ↓ 大型投产试验
菌悬液的细胞浓度一般控制为: 真菌孢子或酵母细胞106107个/ml,放线菌或细菌108个/ml。 菌悬液一般用生理盐水(0.85%NaCl)稀释。
诱变处理
诱变剂及诱变剂量选择
在诱变处理前,一般应预先做诱变剂用量对菌体死亡数量的致死曲 线,选择合适的处理剂量。
不同微生物,使用的剂量不同;诱变率随诱变剂剂量的增加而提高 。但达到一定剂量后,再加大剂量反而会使突变率下降。
乙基磺酸乙酯(EMS)、亚硝基胍、 亚硝酸、氮芥等。
生物诱变剂
噬菌体、转座因子
诱变育种
诱变育种

多倍体育种
• 定义:
– 通过增加染色体组数以改造生物遗传基础,从而培育出符合人类 需要新品种的方法
• 最常用、最有效的多倍体育种方法是用秋水仙素或低温诱 导来处理萌发的种子或幼苗。秋水仙素能抑制细胞有丝分 裂时形成纺锤体,但不影响染色体的复制,使细胞不能形 成两个子细胞,而染色数目加倍。属于染色体组工程的研 究范畴。 • 多倍体产生机制:通过卵细胞第二极体的保留或受精 卵早期有丝分裂的抑制而实现。[1]
辐射育种
• 生物育种的一种方法,利用电离辐射处理 生物,以诱发突变,从中选出优良变异个 体,通过一系列育种程序,培育出新品种。 可利用的电离辐射有X射线、紫外线、中子 及质子等。
辐射育种与其他方法不同,它们有的是 与细胞中的原子、分子发生冲撞、造成 电离或激发;有的则是以能量形式产生 光电吸收或光电效应;还有的能引起细 胞内的一系列理化过程。这些都会对细 胞产生不同程度的伤害。对染色体的数 目、结构等都会产生影响,使有的染色 体断裂了;有的丢失了一段,有的断裂 后在“自我修复”的过程中头尾接倒了 或是“张冠李戴”分别造成染色体的倒 位和易位。当然射线也可作用在染色体 核苷酸分子的碱塞上,从而使基因(遗 传密码)发生突变。
人工诱变 + 单倍体育种
幼苗 秋水仙 (A) 素处理 早熟 品种 (AA) 早熟 品种 (aa)
迟熟 人工 品种 (AA)
诱变
杂合 花药离 子 (Aa)
体培养
幼苗 秋水仙 (a) 素处理
离体诱导 植物细胞具有潜在的再生性和全能性,能发育为完整植株,故应用组 织培养技术对特定组织进行离体培养,可诱导产生单倍体。方法是将一 定发育阶段的花药、子房或幼胚,通过无菌操作接种在培养基上,使单倍体 细胞分裂形成胚状体或愈伤组织,然后由胚状体发育成小苗或诱导愈伤 组织发育为植株。 此外对大麦、小麦还可利用染色体消失法。即将球茎大麦 (Hordeum bulbosum)花粉授予普通大麦或小麦,授粉两周后将幼胚 置于培养基上进行离体培养。在胚胎发育的早期,球茎大麦的染色体消 失,从而获得大麦或小麦单倍体植株。 离体培养用的人工培养基,除含无机盐、蔗糖、维生素和水等外, 还需加入植物激素和其他有机物作诱导物质。诱导出的愈伤组织或胚状 体要转移到含量减少或无诱导物质、蔗糖浓度降低的分化培养基上,才 能分化出根、芽以至长成小苗。以上过程都在试管内进行。再生单倍体 植株的培养则须将小苗从试管取出移栽到小盆中。培养基的成分、培养 的方法和条件(如温度、光照等)、供体的基因型和生理状态以及大、 小孢子的发育时期等,是影响诱导频率的主要因素。植株经用秋水仙碱 溶液处理等方法,使染色体数加倍后,即成为能结实的纯合二倍体(见倍 数性育种)。在离体培养过程中,也会自交产生一些二倍体,但数量很少。
高中生物几种育种原理及方法分析

高中生物几种育种原理及方法分析1诱变育种(1)原理:基因突变(2)方法:用物理因素(如X射线、γ射线、紫外线、中子、激光、电离辐射等)或化学因素(如亚硝酸、碱基类似物、硫酸二乙酯、秋水仙素等各种化学药剂)或空间诱变育种(用宇宙强辐射、微重力等条件)来处理生物。
操作:射线或化学药品处理(萌发的种子或幼苗)、从大量变异个体中选择所需类型(3)发生时期:有丝分裂间期或减数分裂第一次分裂间期(4)优点:能提高变异频率,加速育种进程,可大幅度改良某些性状,创造人类需要的变异类型,从中选择培育出优良的生物品种;变异范围广。
(5)缺点:有利变异少,须大量处理材料;诱变的方向和性质不能控制,具有盲目性。
(6)举例:青霉素高产菌株、太空椒、高产小麦、“彩色小麦”等备注:太空育种简介太空育种主要是利用返回式卫星和高空气球所能达到的空间环境,通过强辐射、微重力和高真空等条件诱发植物种子的基因发生变异的作物育种新技术。
经历过太空遨游的农作物种子返回地面后再进行种植,不仅植株明显增高增粗,果型增大,而且品质也得到提高。
我国从1987年开始太空育种。
1987年8月5日我国发射的第9颗返回式卫星首次搭载了青椒、小麦、水稻等一批种子,开始了我国太空育种的尝试。
至今,我国已先后8次进行了太空育种试验。
经过太空育种的青椒、番茄、黄瓜、水稻等作物,高产优质、抗病性强。
美国曾进行过玫瑰的太空育种,希望获得玫瑰油产量高的突变体;俄罗斯曾经进行过圣诞树的太空育种,现在大面积种植在西伯利亚和哈萨克斯坦地区,从太空回来的圣诞树长得非常高大。
2杂交育种(1)原理:基因重组(2)方法:连续自交,不断选种。
(不同个体间杂交产生后代,然后连续自交,筛选所需纯合子)操作:选亲本杂交,杂交得F1、F1自交得F2、选择自交(3)发生时期:有性生殖的减数分裂第一次分裂后期或四分体时期(4)优点:使同种生物的不同优良性状集中于同一个个体,具有预见性。
(5)缺点:育种年限长,需连续自交才能选育出需要的优良性状。
基础知识 课时23第一节 杂交育种和诱变育种、第二节基因工程及其应用

课时23 第一节杂交育种和诱变育种、第二节基因工程及其应用一、杂交育种与诱变育种1.杂交育种(1)概念:将两个或多个品种的优良性状通过交配集中在一起,再经过选择和培育,获得新品种的方法。
(2)原理:基因自由组合,产生新的基因型,从而控制相应新的表现型。
(3)过程:选择具有不同优良性状的亲本通过杂交获得F1,F1连续自交或杂交,从中筛选获得需要的类型。
(4)优点:可将不同优良性状集中在一起。
(5)缺点:杂交育种只能利用已有基因的重组,按需选择,并不能创造新基因。
杂交后代会出现性状分离,育种进程缓慢,过程繁琐。
(6)应用:改良作物品质,提高农作物单位面积产量;培育优良的家畜,家禽。
2.诱变育种(1)概念:利用物理因素或化学因素处理生物,使生物发生基因突变,从而获得优良变异类型的育种方法。
(2)原理:基因突变,产生新基因。
(3)优点:可以提高突变率,在较短时间内获得更多的优良变异类型。
(4)缺点:因为基因突变具有不定向性所以诱变育种有一定的盲目性,需处理大量的生物材料,再进行选择培育。
(5)应用:在农业生产上可培育出抗病力强、产量高、品质好的新品种;在微生物育种方面也发挥重要作用。
二、基因工程及应用1、基因工程的定义(1)、基因工程又叫__________。
它是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因__________出来,加以饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,__________生物的遗传性状。
这是在DNA上进行的__________水平的设计施工。
基因工程需要的基本工具有“__________”、“__________”、“__________。
(2)、基因工程的优点是:可以按照人们的意愿直接__________改变生物的性状,培育出新品种。
2、基因工程的基本工具(1)、基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶(简称限制酶)①存在:主要在微生物体内。
②特性:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子。
基因突变和诱变育种
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基因突变和诱变育种1. 内容1.基因突变(1)基因突变的定义:一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变,包括一对或少数几对碱基的缺失、插入或置换,而导致的遗传变化称为基因突变(gene mutation),其发生变化的范围很小,所以又称点突变(point mutati on)或狭义的突变。
广义的突变又称染色体畸变(chromosomal aberration),包括大段染色体的缺失、重复、倒位。
(2)基因突变的特点:自发性、不对应性、稀有性、独立性、可诱变性、稳定性(3)基因突变的类型⏹按发生方式:自发、诱发;⏹按突变表型:营养缺陷型、抗药性突变型、条件致死突变型、形态突变型;⏹按遗传物质的结构改变:染色体畸变、基因突变;⏹按碱基变化与遗传信息的改变:同义突变、错义突变、无义突变、移码突变。
(4)基因突变自发性和不对应性的证明实验:Luria的变量实验、Newcombe的涂布实验、Lederberg等的影印平板实验。
(5)紫外线对DNA损伤及修复紫外线对DNA损伤:嘧啶对紫外线比嘌呤敏感得多,其光化学反应产物主要是嘧啶二聚体和水合物,相邻嘧啶形成二聚体后,造成局部DNA分子无法配对,从而引起微生物的死亡或突变。
紫外线对DNA损伤的修复:光复活作用、切除修复。
2.诱变育种⏹诱变育种原则:简便有效诱变剂、优良出发菌株、单孢处理、最适诱变量、利用复合处理的协同效应、注意形态生理和产量的相关指标、设计高产筛选方案、运用高效筛选方法。
突变株筛选方法:产量突变株筛选、抗药突变株筛选、营养缺陷型筛选。
2. 练习一、选择1. 已知DNA的碱基序列为CATCATCAT,什么类型的突变可产生如下碱基序列的改变:CACCATCAT?()A.缺失B.插入C.颠换D.转换答案:D2. 以下碱基序列中哪个最易受紫外线破坏?()A.AGGCAAB.CTTTGAC.GUAAAUD.CGGAGA答案:B二、填空1. DNA分子中一种嘧啶被另一种嘌呤取代称为______________。
高三生物基因突变和基因重组;染色体变异;杂交育种与诱变育种人教实验版知识精讲

高三生物基因突变和基因重组;染色体变异;杂交育种与诱变育种人教实验版【本讲教育信息】一. 教学内容:基因突变和基因重组染色体变异杂交育种与诱变育种二. 教学重点:(1)基因突变的概念及特点。
(2)基因突变的原因。
(3)染色体数目的变异(4)遗传和变异规律在改良农作物和培育家畜品种等方面的应用。
三. 教学难点:(1)基因突变和基因重组的意义。
(2)染色体组的概念。
(3)二倍体、多倍体和单倍体的概念及其联系。
(4)各种育种方法的比较四. 具体内容(一)基因突变和基因重组1. 基因突变(1)基因突变的定义:由于DNA分子中发生碱基对的增添,缺失或改变而引起的基因结构的改变叫基因突变。
(2)基因突变的结果:使一个基因变成它的等位基因(产生新的基因)可以引起一定的表现型变化(3)基因突变的时间:主要发生在DNA复制时。
(4)基因突变的意义:提供了新的基因(有可能产生前所未有的新性状)为生物进化提供了最初的原材料,是变异的根本来源(5)基因突变如何产生的?(诱因)(6)基因突变的主要特点:①普遍性:只要内因(基因变化)和外因(诱导因素)同时存在控制任何性状的基因都可以发生突变②随机性:只要是在DNA复制时,在生物个体发育中的任何时期任何细胞都可以发生基因突变。
③突变率很低:(低频性)原因:自然状态下DNA分子结构相对稳定,具有严格的复制机制。
如生殖细胞的突变率为10—5—10—8④有害性:由于生物是长期进化的产物,已与环境取得了高度的协调,因此基因突变往往是有害的,如人类的遗传病,植物的白化苗,但也有少数突变是有利的,如植物的抗病性耐旱性突变,微生物的抗药性突变等。
另外,突变的有害和有利,有时可以针对不同个体而言,如微生物的抗药性对人类有害,但对生物生存有利,同时突变的有利和有害还与环境因素有关,在一种环境条件下的有利突变可能会由于环境的改变而成为有害突变。
⑤不定向性:一个基因可以向不同的方向发生突变,产生一个以上的等位基因,但基因突变只能在控制同一性状的范围突变A1A2AA3aa12. 基因重组(1)概念:生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因的重新组合。
基因突变和诱变育种

用去除嘧啶二聚体,随后重新合成一段正常DNA链
的核酸修复方式。
酶 切
切开
切除
合 成
聚合
连接
二、突变与育种
(一)自发突变与育种
(breeding by spontaneous mutation)
1. 从生产中育种
在生产第一线易获得较优良的生产菌株。
2. 定向培育优良菌株 定向培育是一种利用微生物自发突变,并采用
1949年,H.B.Newcombe在《NATURE》上发表了 一篇与变量试验属同一观点的但实验方法更为简单 的涂布试验结果。
3.平板影印培养试验(replica plating)
1952年,J.
Lederberg夫妇发表
了一篇著名的《平板 影印培养法和细菌突 变株的间接选择》论 文,它更好地证明了
和转译错误的一类突变。
由移码突变所产生的突变株,称为移码
突变株(frame-shift mutant)。
DNA分子的微小损伤
点突变
能引起移码突变的有效诱变剂——吖啶类染料
吖啶黄 原黄素 α -氨基吖啶 ICR类的化合物
吖啶橙
由吖啶类化合物诱发的移码突变及其回复突变图示:
(双线部分代表正常密码子,单线部分表示不正常)
可移动遗传因子(mobile genetic element)。
插入序列(insertion sequence,IS) 转 座 因 子
原核生物
转座子(transposon,Tn)
Mu噬菌体(mutator phage)
E. coli
转座噬菌体(transposable phage)
转座作用的频率为10-5~10-7
注 意
在一般的微生物中都存在光复活作用,在利用
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引起移码突 变的诱变剂:主
要是吖啶类染料,
如吖啶黄、吖啶 橙等等。
这类化合物
都是平面型的三
环分子,它们的
结构与一个嘌 呤—嘧啶对十分 相似。
丫啶类化合物的诱变机制:
至今还不很清楚。
有人认为,由于它们是一种平面型三环分子,结构与 一个嘌呤–嘧啶对十分相似,故能嵌入两个相邻DNA碱 基对之间,造成双螺旋的部分解开(两个碱基对原来 相距0.34nm,当嵌入一个丫啶分子时,就变成
因的减少或增加; – 如发生倒位或易位时,则可造成基因排列顺序的改变, 但数目却不改变。 – 倒位--------是指断裂下来的一段染色体旋转180后, 重新插入到原来染色体的原位置上,从而使其基因顺 序与其它的基因顺序相反;
– 易位--------是指断裂下来的一小段染色体再顺向或
逆向地插入到同一条染色体的其它部位上。 染色体间畸变:指非同源染色体间的易位。
转座:有些DNA片段不但可在染色体上移动,还可从一个 染色体跳到另一个染色体,从一个质粒跳到另一个质粒或染
色体,甚至还从一个细胞转移到另一个细胞。在这些DNA 顺序的跳跃过程中,往往导致DNA链的断裂或重接,从而 产生重组交换或使某些基因启动或关闭,结果导致突变的发 生。
转座因子(transposible element):在染色体组中或染色体 组间能改变自身位置的一段DNA顺序。也称作跳跃基因 (jumping gene)或可移动基因(movable gene)。
2.自发突变机制
自发突变是指在没有人工参与下生物体自然发生的突变。 产生原因:
由背景辐射和环境因素引起,如天然的宇宙射线等 微生物自身有害代谢产的诱变效应,如过氧化氢。
(过氧化氢是普遍存在于微生物体内的一种代谢产物。它对
Neurospora(脉孢菌)有诱变作用,这种作用可因同时加入 过氧化氢酶而降低,如果在加入该酶的同时又加入酶抑制剂 KCN,则又可提高突变率。)
染色体畸变在 高等真核生物 中一般很容易
观察,但在微
生物中,尤其 在原核生物中, 还是近年来才 证实的。
许多理化诱变
剂的诱变作用 都不是单一功 能的。
由40年代B. McClintock对玉米粒色素斑点变异的遗传研究而 发现染色体易位,自1967年以来,已在微生物和其它生物中
得到普遍证实,并已成为分子遗传学研究中的一个热点。
基因突变的原因是多种多样的,可以是自发的或诱发 的,诱变又可分为点突变和畸变。具体类型可归纳如下:
1. 诱发突变
诱发突变(诱变):通过人为的方法,利用物理、化 学或生物因素显著提高基因字符突变频率的手段。
诱变剂(mutagen):凡能提高突变率的任何理化因子,
就称为诱变剂
种类:诱变剂的种类很多,作用方式多样。即使是同 一种诱变剂,也常有几种作用方式。
涂布试验中突变率的计算
初始接种量:5 × 104 个/皿 培养5小时,繁殖了12.3代,每个微菌落约含5100个细菌 这时,每个平皿上的细胞数为:
5100 × 5 × 104 ≈ 2.6 ×108个/皿
在6个平板上,比接种时增加的细胞数为: 6 ×(2.6 × 108 5 × 104)= 15.6 ×108 在未涂布的平板上共发现28个突变,故 突变率 = 28/15.6 ×108 = 1.8 ×108
第二节 基因突变和诱变育种
一、基因突变
突变( mutation ):指生物体的表型突然发生的可遗 传变化。 染色体畸变——细胞学上可以看到染色体的变化 突变 基因突变——细胞学上看不到遗传物质的变化 突变体(mutant):发生了突变的微生物细胞或菌株 野生型(wild type):从自然界分离到的任何微生物在其发
3. 平板影印培养试验 (replica plating)
平板影印培养不仅
在微生物遗传理论
的研究中有重要应 用,而且在育种时 间和其它研究中均 有应用。
在根本未接触过任何一点链霉素的情况下,就可 以筛选到大量抗链霉素的突变株,充分说明了突变是 自发产生的,链霉素只是起到了一种检出作用。
(五)基因突变及其机制
变率。在同一个细胞中同时发生两个基因突变的几率是极低的, 因为双重突变型的几率只是各个突变几率的乘积。 由于突变的几率一般都极低,因此,必须采用检出选择性 突变株的手段,尤其是采用检出营养缺陷型的恢复突变株 (back mutant或reverse mutant)或抗性突变株特别是抗药性突 变株的方法来加以确定。
由DNA复制过程中碱基配对错误引起。
(六)紫外线对DNA的损伤及其修复
发现较早和研究得较深入的是紫外线(U.V.,ultraviolet ray)的作用。
嘧啶对紫外线的敏感性要比嘌呤强得多。嘧啶的光化产
物主要是二聚体和水合物。其中了解较清楚的是胸腺嘧 啶二聚体的形成和消除。
紫外线的主要作用是使同链DNA的相邻嘧啶间形成共价 结合的胸腺嘧啶二聚体。二聚体的出现会减弱双链间氢 键的作用,并引起双链结构扭曲变形,阻碍碱基间的正 常配对,从而有可能引起突变或死亡。在互补双链间形 成嘧啶二聚体的机会较少。但一旦形成,就会妨碍双链
用。
(2)移码突变
frame-shift mutation 或 phase-shift mutation,指诱变剂使
DNA分子中增加(插入)或缺失一个或少数几个核苷酸, 从而使该部位后面的全部遗传密码发生转录和转译错误的 一类突变。
由移码突变所产生的突变株,称为移码突变株(frame-shift mutant)。与染色体畸变相比,移码突变也只能算是DNA 分子的微小损伤。 丫啶类染料,包括原黄素、丫啶黄、丫啶橙和α-氨基丫啶 等,以及一系列称为ICR类的化合物,都是移码突变的有 效诱变剂。
机制分成以下两类来 讨论。
★直接引起置换的诱变剂
定义:一类可直接与核酸的碱基发生化学反应的诱变剂, 不论在机体内或是在离体条件下均有作用。
种类:例如亚硝酸、羟胺和各种烷化剂(硫酸二乙酯,甲
基磺酸乙酯,N-甲基-N’硝基-N-亚硝基胍,N-甲基-N-亚 硝基脲,乙烯亚胺,环氧乙酸,氮芥等)。
作用:它们可与一个或几个核苷酸发生化学反应,从而引 起DNA复制时碱基配对的转换,并进一步使微生物发生 变异。
按照遗传物质结构变化的特点讨论几种有代表性的诱 变剂的作用机制。
(1)碱基置换(substitution) 对DNA来说,碱基的置换属于一种染色体的微小损伤 (microlesion),一般也称点突变(point mutation)。它只
涉及一对碱基被另一对碱基所置换。
分类:转换(transition;颠换(transversion 诱变剂即可同时 引起转换与颠换,也 可只具其中的一种功 能。根据化学诱变剂 是直接还是间接地引 起置换,可把置换的
主要是在DNA复制时碱基类似物插入DNA中,引起碱基 对配对错误,造成碱基置换。 以5-溴尿嘧啶(5-BU)为例: 5-BU是胸腺嘧啶(T)的 的类似物 ,酮式的5-BU可以和A配对,烯醇式的5-BU 可以和G配对,在DNA分子复制的过程中,由于5-BU的 插入和互变异构导致碱基置换。
5-BU引起的转换
– –
羟胺只引起G┇C→A : T, 其余都是可使G┇C=A : T发生互变的。
–
能引起颠换的诱变剂很少,只是部分烷化剂才有。
碱基转换的分子机制——以亚硝酸为例 亚硝酸可以使碱基发生氧化脱氨作用。 HNO2
胞嘧啶(C) 腺嘌呤(A)
尿嘧啶(U) 次黄嘌呤(H)
HNO2
HNO2
鸟嘌呤(G)
黄嘌呤(X)
于解决了这场纷争。
1. 变量试验fluctuation test
变量试验
又称波动试 验或彷徨试 验。
1943年,S.
E. Luria 和
M. Delbrü ck 根据统计学
原理,设计
了左方的实 验。
2.涂布试验 计 算 突 变 率 。
原 理 与 变 量 试 验 相 同 , 方 法 更 为 简 便 , 且 可
(三)突变的特点
适用于整个生物界,以细菌的抗药性为例。 自发性:突变可在没有人为诱变因素处理下自发地产生。 不对应性:突变性状与突变原因之间无直接的对应关系。 稀有性:突变率低且稳定。
独立性:各种突变独立发生,不会互相影响。
可诱变性:诱变剂可提高突变率。 稳定性:变异性状稳定可遗传。 可逆性:从原始的野生型基因到变异株的突变称为正向突 变(forward mutation),从突变株回到野生型的 过程则称为回复突变或回变(back mutation或 reverse mutation)。
条件致死突变型——突变后在某种条件下可正常生长繁殖, 而在另一条件下却无法生长繁殖的突变型
抗原突变型——因突变而引起的抗原结构发生改变
产量突变型——通过基因突变而产生的在代谢产物产量上明 显有别于原始菌株的突变株。
★按是否比较容易、迅速地分离到发生突变的细胞来分: 选择性突变株(selective mutant):具有选择标记(如营养缺 陷性、抗性突变型、条件致死突变型),只要选择适当的环 境条件,如培养基、温度、pH值等,就比较容易检出和分离 到。 非选择性突变株(non-selective mutant):无选择标记(如产
这些反应及形成物均可在DNA复制中产生影响,主要 是使碱基对发生转换。
亚硝酸引起的AT-GC转换细节
★间接引起置换的诱变剂 这类诱变剂主要是一些碱基类似物 ,如:5-溴尿嘧啶(5BU)和5-氨基尿嘧啶(5—AU)、叠氮胸腺嘧啶(AIT) 等等; 作用方式:通过活细胞的代谢活动参入到DNA分子中,
★染色体结构上的变化:
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