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排气口
冷却水出口
冷却水进口
放料口
培养液 无菌空气
图5-14 发酵罐的结构示意图
二、发酵工程的概念和内容
(一)发酵工程的概念 ▪ 采用现代工程技术手段,利用微生物的某
些特定功能,为人类生产有用的产品,或 者直接把微生物应用于工业生产的一种新 技术。 ▪ (二)发酵工程的内容包括:
▪ 菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养 和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。
▪ 哪些条件能影响菌体的发酵呢?
发酵生产中温度、pH、溶氧量、转速等对发酵过程 有重大影响。
▪ 环境中有哪些非生物因素可能影响谷氨酸发酵?
▪ 温度 30-37℃ ▪ PH 7.0-8.0 ▪ 溶氧 ▪ 通气量 ▪ 转速
▪ pH呈酸性:乙酰谷氨酰胺; ▪ 溶氧不足:乳酸或琥珀酸。
▪ 营养物质的浓度:
药 品
白细胞介素-2
抗血友病因子
2.在食品工业上的应用 – ①生产传统的发酵产品 • 啤酒、果酒、食醋等
②生产食品添加剂
添加剂
举例
酸味剂 鲜味剂 色素 甜味剂
L-苹果酸、柠檬 酸、乳酸 肌苷酸、谷氨酸
β-胡萝卜素、红曲素
高果糖浆、甜菜糖
③解决粮食短缺问题
细菌蛋白质占干重的60%-80% 酵母菌的占45%-65% 单细胞蛋白:通过发酵工程获得的微生 物菌体
控制因素 作用机理
控制方法
pH ①影响酶的活性 加入缓冲溶 ②影响细胞膜的带 液,补加氨
电情况,导致细胞 水、尿素、
膜通透性改变从而 CaCO3、 影响对营养物质的 NH4HCO3 吸收和产物的排出 等来控制pH ③影响培养基营养
物质的分解
控制因素
溶 解 氧
作用机理 ①促进需氧型微生物 的呼吸 ②抑制厌氧型微生物 代谢
控制方法 通过无菌空 气的通气量 和搅拌速度 来控制
6、分离、提纯
▪ 菌体本身,如酵母菌和细菌等
采用过滤、沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来
▪ 代谢产物
采用蒸馏、萃取、离子交换等方法进行提取。
三、发酵工程的应用
▪ 应用特点
▪ 生产条件温和 ▪ 原料来源丰富 ▪ 价格低廉 ▪ 产物专一 ▪ 废弃物对环境污染小容易处理等
接合成的产物
•如果生产的是一般微生物
不能合成的产品
可以从自然界中先分离出相 应的菌种,再用物理或化学 的方法使菌种产生突变,从 突变个体中筛选出符合生产 要求的优良菌种。
可用基因工程、细胞工程的方法 对菌种的遗传特性进行定向改造, 以构建工程细胞或工程菌,从而 达到生产相应产品的目的
2、培养基的配制
(2)培养基:液体(天然)培养基(原料:豆 饼或马铃薯等的水解液、玉米浆、 尿素、磷酸氢二钾、氧化钾、硫酸 镁、生物素(生长因子)等) 发酵罐连续培养
(3)发酵过程 控制条件:温度、PH、 溶氧量、搅拌
(4)提取:用Na2CO3中和后, 过滤、分离
谷氨酸棒状杆 菌是好氧菌
加料口 搅拌器
电动机 pH检测及 控制装置
3、灭菌
▪ 发酵工程所用的菌种大多是单一的纯种, 整个发酵过程中不能混入杂菌。这是为 什么呢?
▪在发酵过程中如混入其他微生物,将与菌种 形成竞争关系,对发酵过程造成不良影响。
▪例如:如果在谷氨酸发酵过程中混入放线菌, 则放线菌分泌的抗生素就会使大量的谷氨酸 棒状杆菌死亡。如果在青霉素生产过程中污 染了杂菌,这些杂菌则会分泌青霉素酶,将 合成的青霉素Βιβλιοθήκη Baidu解掉。
1.在医药工业上的应用
抗生素(应用最多,利润最高)
药品
维生素 动物激素 复合维生素片
青霉素 头孢霉素 红霉素 四环素
药用氨基酸 核苷酸(肌苷)
生长素释放抑制因子
是一种人脑激素,治疗肢端肥大症,
50万个羊脑提取5mg.
工程菌:7.5L培养液可得到5mg.
基
因 人生长激素
工 重组乙肝疫苗
程 单克隆抗体
流程图: 从自然分离的菌种
诱变育种 基因工程 细胞工程
生产用菌种
原料
扩大培养
培养基配制
接种 发酵罐发酵 条件控制
灭菌
分离 提纯
微生物菌体 代谢产物 产品
1、菌种的选育
▪ 要想通过发酵工程获得在种类、产量和质量等
方面符合人们要求的产品,最重要的是要有优
良的菌种。
怎样才能得到
•如果生产的是微生物直 优良的菌种呢?
▪ 那如何防止杂菌的污染呢?
要在发酵前对培养基和发酵设施进行严格 的灭菌处理。
▪ 怎样才算灭菌彻底呢?
用高温、高压的方式,杀死所有杂菌的胞体、 芽孢和孢子。
4、扩大培养和接种
▪ 如何得到发酵生产所需要的大量菌体来 缩短生产周期呢?
经过多次的扩大培养。
▪ 如何对菌种进行扩大培养呢?
扩大培养是将培养到对数期的菌体分开, 分头进行培养,以促使菌体数量快速增加, 能在短时间里得到大量的菌体。
第三节-发酵工程简介
微生物学的奠基人——伟大的巴斯德(法)
▪ 我国的传统发酵产品酱油、 醋、腐乳等享誉世界
▪ 我国的酿酒已经有4000多 年的历史
▪ 我国的酱油距今已有3000 年的历史
▪ 1857年巴斯德证明发酵是 由于微生物的作用
密闭式发酵罐
一、应用发酵工程的生产实例 谷氨酸发酵
(1)菌种:谷氨酸棒状杆菌或黄色短杆菌等
▪ 如C/N=3:1时,谷氨酸棒状杆菌大量合成谷氨酸; C/N=4:1时,谷氨酸棒状杆菌菌体大量繁殖,产谷氨酸较少。
控制 因素
温 度
作用机理
①影响酶的活性 ②影响生物合成途径 ③影响培养基的理化
性质以及菌种对营 养物质的分解吸收 ④影响微生物生长
控制方法
通过控制 产热与散 热的平 衡来控制 培养基的 温度
▪ 要进行发酵生产,有了优良的菌种还需 要有与菌种相适应的培养基。在配制培 养基时应该注意哪些事情呢?
▪(1)根据不同的菌种,应选择不同的材料配制培 养基。配制的培养基应满足微生物在碳源、氮源、 生长因子、水、无机盐等方面的营养要求,并为微 生物提供适宜的pH。 ▪(2)培养基的营养要协调,以利于产物的合成。 ▪(3)培养基在满足微生物的营养需求的基础上应 尽量降低生产成本,以得到更高的经济效益。
5、发酵过程
中心阶段
▪ 将菌体接种到装有培养液的发酵罐中,还需
要对发酵过程进行检测和对发酵条件进行控
制。这是为什么呢?
发酵产物主要在菌体生长的稳定期产生。因此,要 在发酵过程中随时取样检测培养液中细菌数目、产 物浓度以了解发酵进程,及时添加必需的培养基成 分来延长菌体生长稳定期的时间,以得到更多的发 酵产物。同时,还应对发酵条件进行严格控制。
冷却水出口
冷却水进口
放料口
培养液 无菌空气
图5-14 发酵罐的结构示意图
二、发酵工程的概念和内容
(一)发酵工程的概念 ▪ 采用现代工程技术手段,利用微生物的某
些特定功能,为人类生产有用的产品,或 者直接把微生物应用于工业生产的一种新 技术。 ▪ (二)发酵工程的内容包括:
▪ 菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养 和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。
▪ 哪些条件能影响菌体的发酵呢?
发酵生产中温度、pH、溶氧量、转速等对发酵过程 有重大影响。
▪ 环境中有哪些非生物因素可能影响谷氨酸发酵?
▪ 温度 30-37℃ ▪ PH 7.0-8.0 ▪ 溶氧 ▪ 通气量 ▪ 转速
▪ pH呈酸性:乙酰谷氨酰胺; ▪ 溶氧不足:乳酸或琥珀酸。
▪ 营养物质的浓度:
药 品
白细胞介素-2
抗血友病因子
2.在食品工业上的应用 – ①生产传统的发酵产品 • 啤酒、果酒、食醋等
②生产食品添加剂
添加剂
举例
酸味剂 鲜味剂 色素 甜味剂
L-苹果酸、柠檬 酸、乳酸 肌苷酸、谷氨酸
β-胡萝卜素、红曲素
高果糖浆、甜菜糖
③解决粮食短缺问题
细菌蛋白质占干重的60%-80% 酵母菌的占45%-65% 单细胞蛋白:通过发酵工程获得的微生 物菌体
控制因素 作用机理
控制方法
pH ①影响酶的活性 加入缓冲溶 ②影响细胞膜的带 液,补加氨
电情况,导致细胞 水、尿素、
膜通透性改变从而 CaCO3、 影响对营养物质的 NH4HCO3 吸收和产物的排出 等来控制pH ③影响培养基营养
物质的分解
控制因素
溶 解 氧
作用机理 ①促进需氧型微生物 的呼吸 ②抑制厌氧型微生物 代谢
控制方法 通过无菌空 气的通气量 和搅拌速度 来控制
6、分离、提纯
▪ 菌体本身,如酵母菌和细菌等
采用过滤、沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来
▪ 代谢产物
采用蒸馏、萃取、离子交换等方法进行提取。
三、发酵工程的应用
▪ 应用特点
▪ 生产条件温和 ▪ 原料来源丰富 ▪ 价格低廉 ▪ 产物专一 ▪ 废弃物对环境污染小容易处理等
接合成的产物
•如果生产的是一般微生物
不能合成的产品
可以从自然界中先分离出相 应的菌种,再用物理或化学 的方法使菌种产生突变,从 突变个体中筛选出符合生产 要求的优良菌种。
可用基因工程、细胞工程的方法 对菌种的遗传特性进行定向改造, 以构建工程细胞或工程菌,从而 达到生产相应产品的目的
2、培养基的配制
(2)培养基:液体(天然)培养基(原料:豆 饼或马铃薯等的水解液、玉米浆、 尿素、磷酸氢二钾、氧化钾、硫酸 镁、生物素(生长因子)等) 发酵罐连续培养
(3)发酵过程 控制条件:温度、PH、 溶氧量、搅拌
(4)提取:用Na2CO3中和后, 过滤、分离
谷氨酸棒状杆 菌是好氧菌
加料口 搅拌器
电动机 pH检测及 控制装置
3、灭菌
▪ 发酵工程所用的菌种大多是单一的纯种, 整个发酵过程中不能混入杂菌。这是为 什么呢?
▪在发酵过程中如混入其他微生物,将与菌种 形成竞争关系,对发酵过程造成不良影响。
▪例如:如果在谷氨酸发酵过程中混入放线菌, 则放线菌分泌的抗生素就会使大量的谷氨酸 棒状杆菌死亡。如果在青霉素生产过程中污 染了杂菌,这些杂菌则会分泌青霉素酶,将 合成的青霉素Βιβλιοθήκη Baidu解掉。
1.在医药工业上的应用
抗生素(应用最多,利润最高)
药品
维生素 动物激素 复合维生素片
青霉素 头孢霉素 红霉素 四环素
药用氨基酸 核苷酸(肌苷)
生长素释放抑制因子
是一种人脑激素,治疗肢端肥大症,
50万个羊脑提取5mg.
工程菌:7.5L培养液可得到5mg.
基
因 人生长激素
工 重组乙肝疫苗
程 单克隆抗体
流程图: 从自然分离的菌种
诱变育种 基因工程 细胞工程
生产用菌种
原料
扩大培养
培养基配制
接种 发酵罐发酵 条件控制
灭菌
分离 提纯
微生物菌体 代谢产物 产品
1、菌种的选育
▪ 要想通过发酵工程获得在种类、产量和质量等
方面符合人们要求的产品,最重要的是要有优
良的菌种。
怎样才能得到
•如果生产的是微生物直 优良的菌种呢?
▪ 那如何防止杂菌的污染呢?
要在发酵前对培养基和发酵设施进行严格 的灭菌处理。
▪ 怎样才算灭菌彻底呢?
用高温、高压的方式,杀死所有杂菌的胞体、 芽孢和孢子。
4、扩大培养和接种
▪ 如何得到发酵生产所需要的大量菌体来 缩短生产周期呢?
经过多次的扩大培养。
▪ 如何对菌种进行扩大培养呢?
扩大培养是将培养到对数期的菌体分开, 分头进行培养,以促使菌体数量快速增加, 能在短时间里得到大量的菌体。
第三节-发酵工程简介
微生物学的奠基人——伟大的巴斯德(法)
▪ 我国的传统发酵产品酱油、 醋、腐乳等享誉世界
▪ 我国的酿酒已经有4000多 年的历史
▪ 我国的酱油距今已有3000 年的历史
▪ 1857年巴斯德证明发酵是 由于微生物的作用
密闭式发酵罐
一、应用发酵工程的生产实例 谷氨酸发酵
(1)菌种:谷氨酸棒状杆菌或黄色短杆菌等
▪ 如C/N=3:1时,谷氨酸棒状杆菌大量合成谷氨酸; C/N=4:1时,谷氨酸棒状杆菌菌体大量繁殖,产谷氨酸较少。
控制 因素
温 度
作用机理
①影响酶的活性 ②影响生物合成途径 ③影响培养基的理化
性质以及菌种对营 养物质的分解吸收 ④影响微生物生长
控制方法
通过控制 产热与散 热的平 衡来控制 培养基的 温度
▪ 要进行发酵生产,有了优良的菌种还需 要有与菌种相适应的培养基。在配制培 养基时应该注意哪些事情呢?
▪(1)根据不同的菌种,应选择不同的材料配制培 养基。配制的培养基应满足微生物在碳源、氮源、 生长因子、水、无机盐等方面的营养要求,并为微 生物提供适宜的pH。 ▪(2)培养基的营养要协调,以利于产物的合成。 ▪(3)培养基在满足微生物的营养需求的基础上应 尽量降低生产成本,以得到更高的经济效益。
5、发酵过程
中心阶段
▪ 将菌体接种到装有培养液的发酵罐中,还需
要对发酵过程进行检测和对发酵条件进行控
制。这是为什么呢?
发酵产物主要在菌体生长的稳定期产生。因此,要 在发酵过程中随时取样检测培养液中细菌数目、产 物浓度以了解发酵进程,及时添加必需的培养基成 分来延长菌体生长稳定期的时间,以得到更多的发 酵产物。同时,还应对发酵条件进行严格控制。