植物组织培养复习重点
植物组织培养考试快速复习
外植体：在植物组织培养过程中，由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子等器官以及各种组织、细胞或原生质体等统称为外植体。
热处理脱毒：利用病毒和植物细胞对高温忍耐性不同，选择适当的高温处理染病植株，使植株体内的病毒部分或全部失活，而植株本身仍然存活。
平板培养法：是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合，平铺一薄层在培养基底上的培养方法。
消毒：指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。
玻璃化现象：在长期的离体培养繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水渍状，这种现象称为玻璃化。
脱毒苗：是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。
灭菌：是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有生命的物质全部杀死。
褐变：是指外植体在培养中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质，有时使整个培养基变褐，从而抑制其他酶的活性，影响材料的培养。
纸桥培养：将培养基中放入滤纸，再将材料置于滤纸上进行培养称为纸桥培养。
微尖嫁接：指在人工培养基上培养实生砧木，嫁接无病毒茎尖以培养脱毒苗的技术。
主要程序：无菌砧木培养—茎尖准备—嫁接—嫁接苗培养—移栽。
植物组织培养：在无菌和人工控制的环境下，利用适当的培养基，对离体的植物器官，组织，细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。
脱分化:成熟的细胞转变或回复到分生状态的过程，而进行分裂形成愈伤组织的过程。
极性:细胞的结构或物质分布形成轴性梯度，产生不对称极的特性。
脱分化：也称去分化，指离体条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或不分化细胞的过程。
母液:俗称苦卤是在化学沉淀或结晶过程中分离出沉淀或晶体后残余的饱和溶液。
驯化:在人工选择条件下，生物体的性状向人类所要求的方向变化的过程。
初代培养基：是指用来第一次接种外植体的培养基。
植物组织培养复习笔记【最新】
植物组织培养复习资料第一章绪论一、概念：植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官.组织，细胞以及原生质体. 培养在人1:培养基上和人工控制的环境中，使其生长，分化，增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。
外植体：在无菌条件下，离体培养于人工培养基上的，用于达到某种培养目的的原始植物材料C培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人匚配制的营养基质即为培养基。
细胞全能性：植物体每一个细胞都含有该植物全部的遗传信息，在合适的条件下，具有形成完整植株的能力。
脱分化：一个成熟细胞恢复到分生状态或胚性细胞状态的现象。
再分化：是脱分化细胞重新恢复细胞分化能力，沿若正常的发育途径，形成具有特定结构和功能的细胞C二、组织培养的类型，不同分类依据（根据培养材料不同）可分为植株培养，胚胎培养，器官培养，组织或愈伤组织培养.细胞或原生质休培养5类：（根据培养目的）可分为试管嫁接，试管受精，试管加倍，试管育种等：（根据培养方法）可分为平板培养，微室培养，悬浮培养，单细胞培养等：（根据培养过程）可分为初代培养和继代培养：（根据培养基类型）可分为固体培养和液体培养。
三、三个发展阶段的关键人物1,haberlandt-一于1902年提出植物细胞全能性理论，被称为“组织培养之父”。
2,white—于1943年出版《植物组织培养手册》。
3,murashine和skoog -- 在1962年筛选出MS培养基。
四、植物全能性表达的过程培养一►脱分彳~再分化一培养五、组织培养的特点：1、植物基础学科研究的良好系统。
2、生物技术的基础。
3、经济高效.管理方便，利于自动化。
4、技术含量高，实验误差小，人工控制能力强。
5、生长周期短，生长速度快，实验重复性好。
6、实验材料经济，来源单一。
六、缺点：需要设备负复柴，投入资金多，电能消耗大：对人员技术水平要求高，对实验场所要求也高，不能代替田间试验。
第二章植物组织培养设备与培养条件一、实验室的组成及主要仪器和设备准备室：干燥箱，高压灭菌锅，电子天平，酸度计，水浴锅，冰箱。
植物组织培养复习资料
1、植物组织培养：在无菌条件下，对植物组织，器官，细胞原生质体等离体活材料进行培养促使其生长发育，并再生成完整植株的过程。
2、外植体：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。
（如器官、组织、细胞、原生质体、种子等）3、愈伤组织：在离体培养的条件下，经过植物细胞脱分化和不断增殖所形成的无特定结构的细胞团或组织。
4、玻璃化现象：在组织培养过程中，培养物叶片或嫩梢呈透明或半透明的水渍状现象。
5、脱分化：一个成熟细胞转化为分生状态并形成为分化的愈伤组织的现象6、再分化：指脱分化形成的愈伤组织细胞在十一的培养条件下，又分化为胚状体，或直接分化出根和芽等器官形成完整植株的过程。
7、细胞的全能性：植物体的每一个生活细胞都具备母体的全套基因，在一定条件下可以发育成完整植株的能力。
8、人工种子：指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位9、植物离体培养：利用植物细胞的全能性，在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。
10、种子败育：是指由于植物自身的原因导致植物胚胎在发育过程中的任何一个阶段死亡或者即使幼胚发育为成熟种子胚、但在常规条件也不能萌发的现象。
11、双极性：表示具有双向极性电平的脉冲信号激素分类：生长素类细胞分裂素赤霉素脱落酸水杨酸植物组织培养{组织培养、器官培养？胚胎培养？细胞培养、原生质体培养}—--次生代谢物的生产、种植创新和品种选育、植物的快速繁殖、无病毒苗木的培育、人工种子的生产、种质资源的离体保存植物组织培养的大致过程是：在无菌条件下，将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下来，用纤维素酶与果胶酶处理用以去掉细胞壁，使之露出原生质体，然后放在适当的人工培养基上进行培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。
组培复习资料
1、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞或原生质体等进行培养，使其生长、分化并再生成完整植株的技术2、组培苗：根据植物细胞具有全能性的理论，利用外植体在无菌和适应的人工条件下培育的完整植株。
3、外植体：凡是用于离体培养的植物组织器官、组织、细胞或原生质体统称为外植体。
4、细胞全能性：植物体的每一个具有完整细胞核的细胞都具有该物种全部遗传的物质，在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。
全能性的条件：①体细胞与完整植株分离，脱离完整植株的控制；②创造理想的适于细胞生长和分化的环境，包括营养、激素、光、温、气、湿等因子。
5、植株再生过程即为植物细胞全能性表达的过程，一般经过脱分化和再分化两个阶段。
6、脱分化: 指植物组织培养中构成离体植物器官和组织的成熟细胞或已分化的细胞转变成为分生状态的过程，即诱导成为愈伤组织的过程。
7、愈伤组织: 指在人工培养基上经诱导后外植体表面上长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
脱分化的难易程度与植物的种类、组织和细胞的状态有关。
8、再分化:指由脱分化的组织或细胞转变为各种不同的细胞类型，由无结构和特定功能的细胞团转变为有结构和特定功能的组织和器官，最终再生成完整植株的过程。
9、一般而言，诱导外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历3个时期：启动期、分裂期和分化期。
（1）启动期：又称诱导期，是指细胞准备进行分裂的时期。
启动期的长短，因植物种类、外植体的生理状态和外部因素而异。
诱导启动的因素主要有外源激素，最常用的有2,4-D、NAA、IAA和细胞分裂素等。
其中，2,4-D 在诱导细胞分裂过程中，效果最明显。
（2）分裂期：是指外植体细胞经过诱导后脱分化,不断分裂、增生子细胞的过程。
分裂期的愈伤组织的特点是：细胞分裂快，结构疏松，缺少有组织的结构，颜色浅或呈透明状。
愈伤组织常呈不规则的馒头状。
(3)分化期：是指停止分裂的细胞发生生理代谢变化而形成不同形态和功能的细胞过程。
植物组织培养复习题库
总题库园艺植物组织培养-题库1、茎段培养用于快速繁殖的优点在于培养技术简单易行，繁殖速度（较快）；芽生芽方式增殖的苗木质量好，且无病，性状均一；解决不能用（种子繁殖）的无性繁殖植物的快速繁殖问题等。
2、生根培养的目的是使再生的大量试管苗形成根系，获得完整的植株。
创造适于根的发生和生长的条件，主要是降低或除去（细胞分裂素）而加入生长素；MS培养基含盐浓度要适当加以（稀释），降低到1/2，1/3或1/4，甚至更低的水平。
3、翻译precocious germination（早熟萌发）4、翻译heterotrophy period（异养期）5、翻译autotrophy period（自养期）6、翻译endosperm culture（胚乳培养）7、翻译fertilization invitro（离体受精）8、翻译test tube fertilization （试管受精）9、翻译intraovarian pollination（子房内授粉）10、离体胚培养包括胚胎发生过程中不同发育期的胚，一般可分为（成熟胚）和幼胚培养。
11、成熟胚一般指（子叶期）后至（发育完全）的胚。
它培养较易成功，在含有无机大量元素和糖的培养基上，就能正常生长成幼苗。
12、幼胚是指（子叶期）以前的幼小胚，由于幼胚培养在（远缘杂交）育种上有极大的利用价值，因此，其研究和应用越来越深入和广泛。
13、幼胚培养，胚胎发育过程分为两个时期：一为（异养期），即幼胚由胚乳及周围的组织提供养分；二为（自养期），此时的胚已能在基本的无机盐和蔗糖培养基上生长。
14、在幼胚培养中，带有（胚柄）结构有利于幼胚的生长。
但一般较难与胚一起分离出来。
使用生长调节物质，如5mg/L（赤霉素）能有效地取代胚柄的作用。
15、根据无菌花粉授于离体雌蕊的位置，可将离体授粉分为三种方式，即离体柱头授粉、（离体子房授粉）和（离体胚珠授粉）。
16、子房内授粉可分为两种类型，即（活体子房内）授粉和（离体子房内）授粉。
植物组织培养知识点总结
堂清日结31、原生质是细胞内生命物质的总称。
原生质层指的是细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质。
去掉细胞壁的植物细胞就是原生质体，所以一个动物细胞就相当于一个原生质团。
2、原生质层的融合过程体现了细胞膜的流动性。
3、植物体细胞融合的实质：原生质体的融合，植物体细胞融合完成的标志：细胞壁的再生。
新细胞壁的产生与细胞内高尔基体相关。
4、植物组织培养中愈伤组织的形成是细胞分裂的结果。
5、植物细胞工程通常所采用的技术手段：植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术。
6、植物体细胞杂交的过程：1）酶解法去除细胞壁，获得原生质体2）利用物理或者化学法诱导原生质体的融合3）再生细胞壁，获得杂种细胞。
4）利用植物组织培养技术，通过脱分化和再分化获得杂种植物。
7、微型繁殖技术：也叫快速繁殖技术即快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
该技术与传统繁殖技术相比，具有：①繁殖速度快；②“高保真”（因为是无性繁殖）；③不受自然生长季节的限制（因为在具有一定人工设施的室内生产）等特点。
堂清日结41、作物脱毒材料：分生区细胞作物脱毒方法：进行植物组织培养作物脱毒结果：获得脱毒苗脱毒苗的特点：不会或极少感染病毒。
2、人工种子的组成：胚状体（或不定芽或顶芽或腋芽）+人工薄膜；要获得人工种子，需将离体的器官、组织或细胞培养至再分化阶段。
3、人工种皮中应具有的有效成分：适量的养分、无机盐、有机碳源、农药、抗生素、有益菌等，为了促进胚状体的生长发育，还可以向人工种皮中加入植物生长调节剂。
4、单倍体育种原理：染色体变异方法：花药离体培养采用的技术：植物组织培养技术优点：后代无性状分离、明显缩短育种年限突变体的利用育种原理：突变（基因突变、染色体变异）优点：能够产生新性状植物体细胞杂交育种原理：染色体变异优点：克服远缘杂交不亲和的障碍5、植物组织培养中易获得突变体的原因：培养的细胞一直处于分生的状态，易受培养条件和外界压力（如射线、化学物质等）的影响。
植物组织培养技术考试复习题解析
植物组织培养技术考试复习题一、填空题1、组织培养的理论依据是：植物细胞的全能性。
2、根据培养的外植体材料不同，可将植物组织培养分为以下几种类型：愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞培养、原生质体培养、遗传转化。
3、植物组织培养实验室一般划分为洗涤室、培养基配置室、缓冲室、无菌接种室、培养室、观察室、驯化室等分室，其中植物组织培养实验室对无菌条件要求最严格的区域是无菌接种室。
4、培养基成分主要包水分、无机盐类、有机营养成、植物生长调节物质、天然物质、pH 、凝固剂。
5、目前应用最广泛的组培基本培养基是MS培养基。
6、培养基最常用的碳源是糖类物质，使用浓度在1%-5%常用3 %。
7、培养基中加入活性炭的目的：减少外植体的褐变8、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向，其比值高则有利于根的形成:其比值低则有利于芽的形成。
9、一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象称为"J兑分化_"10、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行（高压蒸汽）灭菌,而要进行过滤方法灭菌。
11、确定花粉发育时期最简捷有效的方法是压片镜检法。
12、液体培养基和固体培养基最主要的区别是：固体培养基中添加了琼脂粉，而液体培养基一般不添加。
13、细胞悬浮培养的方法有分批培养和连续培养。
14、外植体灭菌常用的消毒剂是酒精，使用浓度一般为70—75%。
15、具有防止褐变作用的维生素是抗坏血酸（维生素c）。
16、常用防止褐变的试剂有有机酸、硫代硫酸钠。
17、组培中按照污染的对象分，常见的污染类型有细菌性污染_、真菌性污染。
18、在使用超净工作台进行无菌操作前，应先将借种器械放进超净工作台，并打开紫外线灯和风机组工作进行消毒20分钟左右。
19、配制培养基调节pH值时常用氢氧化钠溶液和稀盐酸溶液。
20、某溶液在使用前已配制成100倍的母液，在使用时，若需要配制1/2 L的培养基，则需要吸取母液的量是5ml。
植物组织培养复习
植物组织培养复习1、概念：组织培养：利⽤植物离体器官、组织或细胞(包括原⽣质体)，在适宜的⼈⼯培养基上和⽆菌条件下进⾏培养，使其⽣长、增殖、进⽽发育形成⼩植株的⽅法。
也称之为离体培养（In vitro culture）。
愈伤组织：原指植物在受伤后，于伤⼝表⾯形成的⼀团薄壁细胞。
在组织培养中，指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。
外植体：由活植物体上切取下来的可以⽤于组织培养的组织或器官2、为什么说愈伤组织是最为常见的培养⽅式？原因：⼤部分组织培养经历callus再⽣途径长出植株；callus可以⽤于悬浮培养和原⽣质体培养。
3、组织培养的类型有哪些？a按培养⽅法：固体培养、液体培养、看护培养、微室培养、包埋培养等b按培养过程：初代培养、继代培养4、组织培养在园艺业（农业）上的应⽤有哪些？a倍性育种：花药培养、胚乳培养b突变体筛选：愈伤组织培养c创造新种质：细胞融合d克服胚败育：胚培养e植物性药物和⽣物制品的⽣产5、在组织培养技术的发展中做出巨⼤贡献的⼈。
6、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些基本仪器？有何⽤途？烘箱，冰箱，灭菌锅，超净⼯作台，酸度计，摇床，显微镜，天平，培养箱。
玻璃器⽫，微孔过滤器，细胞计数器，接种⽤具。
7、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些房间？洗涤室（区），制备室（区），灭菌室（区），贮放室（区），操作室（区），培养室（区），观察室（区），药品室（区）8、详细叙述组织培养过程中的基本技术规程洗涤，灭菌，⽆菌操作~9、培养基的类型有哪些？a按性质分：基本培养基，完全培养基b按状态分：固体培养基，液体培养基10、培养基的主要成分有哪些？各有何作⽤？a⽆机营养成分：⼤量元素（氮，磷，钾，钙，镁，硫）微量元素（硼、锰、锌、钼、铜、钴、氯、铁）b有机营养成分：含氮有机物（维⽣素、氨基酸）碳源和能源，植物激素c其他成分：活性炭，琼脂，抗⽣素，缓化剂11、配制培养基的基本步骤及注意事项有哪些？选择，配置（取样，加成分，测PH）12、什么是⼈⼯种⼦？有哪些特点与优点？⼈⼯种⼦：(artificial seeds)亦称体细胞种⼦。
植物组织培养复习重点
考试重点（大部分是课后作业）：题型：填空，判断，名词解释，问答（1）植物组织培养的广义和狭义概念？答：广义概念是指对植物的器官，组织，细胞及原生质体进行离体培养的技术。
狭义概念是指对植物的组织（如分生组织，表皮组织、薄壁组织等）及其培养产生的愈伤组织进行离体培养的技术。
（2）植物组织培养分类及其主要特点？答：根据外植体来源和培养对象不同，植物组织培养的研究类型可以分为5种，分别是器官培养，组织培养，细胞培养，胚胎培养，原生质体培养。
主要特点：⑴无菌条件；⑵成分完全确定的人工培养基；⑶起始材料处于离体状态；⑷克隆；⑸组培苗叶片表面一般都缺乏角质层或蜡质层，且气孔都是张开的；⑹环境温度、光照强度和时间等都是人为设定的；（3）植物组织培养的应用及展望？答：应用：植物离体快繁，无病毒苗木培育，培育新品种或创制新品种，次生代谢物生产，种质资源保存及制作人工种子。
展望：组培容器大型化，组培技术简单化，组培环境自然化（4）细胞全能性、脱分化、再分化概念？答：细胞全能性：离体细胞在适当条件下分化形成再生植株的能力。
脱分化：也称去分化，是指在离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。
再分化：是指离体培养的植物细胞和组织可以由脱分化状态重新进行分化，形成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至形成完整植株的过程。
（5）植物激素配比模式？答：生长素/细胞分裂素：高有利于根的形成；中无定向结构生长；低有利于芽苗生长；（6）体细胞胚胎发生的概念、方式、机理和特点？答：概念：植物离体培养细胞产生胚状体的过程。
方式：直接途径：从外植体某些部位的胚性细胞直接诱导分化出体细胞胚胎。
间接途径：外植体先脱分化形成愈伤组织，再从愈伤组织的某些细胞分化出体细胞胚胎。
机理：特点：①双极性；②（与母体组织或外植体的维管束系统无直接联系，处于较为孤立状态，）即存在生理隔离。
植物组织培养复习资料
植物组织培养复习资料1、植物组织培养：在⽆菌和⼈⼯控制的环境条件下，利⽤⼈⼯培养基，对植物的胚胎、器官、组织、细胞、原⽣质体等进⾏离体培养，使其再⽣发育成完整植株的过程。
由于外植体已脱离了母体，植物组织培养⼜叫植物离体培养。
2、植物组织培养的特点：⽆菌条件下进⾏；多数情况下是利⽤成分完全不确定的⼈⼯培养基进⾏时；材料为离体状态；可以不断增殖，并通过调整成分控制实验的⽬的；在封闭的容器中进⾏，⽓体通过封⼝材料进⾏交换；环境、温度、光照强度都可⼈为控制。
3、植物组织培养的类型：按培养对象分：植株培养：对完整植株材料的离体⽆菌培养；胚胎培养：从果实或⼦房中分离出成熟或未成熟的胚进⾏离体⽆菌培养的技术；器官培养：以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体⽆菌培养技术；组织培养：对植物体的各部分组织如茎尖分⽣组织、形成层、⽊质部、韧⽪部、表⽪组织、胚胎组织和薄壁组织等，或对植物器官培养产⽣的愈伤组织进⾏培养，⼆者均通过再分化诱导形成植株；细胞培养：对植株器官或愈伤组织上分离出的单细胞、花粉单细胞或很⼩的细胞团进⾏培养，形成单细胞⽆性系或再⽣植株的技术；原⽣质体培养：对⽤酶、物理等⽅法除去植物细胞壁的、裸露的、有活性的原⽣质体团进⾏培养的技术；按培养过程分：初代培养、继代培养；按培养基的物理状态分：固体培养、液体培养。
4、植物组织培养在农林中的应⽤：植株离体快繁、⽆病毒苗⽊培育、次⽣代谢物的产⽣、培育新品种或创造新品种、植物种质资源的离体保存、⼈⼯种⼦、基因⼯程的应⽤。
5、外植体：植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的⽚段。
在继代培养时，将培养的组织切段移⼊新的培养基时，这种切段也称外植体。
6、愈伤组织：指在植物受伤后的伤⼝处或在植物组织培养中外植体切⼝处产⽣的⼀团不定形的薄壁组织。
7、脱分化：指离体培养条件下⽣长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂，逐渐失去原来的结构和功能⽽恢复分⽣状态，形成⽆组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。
植物组织培养复习提纲
《植物组织培养》复习提纲一、名词解析1、植物组织培养：是将植物的离体材料无菌培养，使其生长‘分化’增值，再长出完整植株或生产次生代谢物质的技术。
2、植物器官培养：是以植物的根、叶、花、果实等植物器官为外植体进行的离体培养。
3、细胞全能性：4、植物组培苗工厂化生产：5、微繁技术：6、外植体：7、脱分化：8、灭菌：9、无菌操作：10、根芽激素理论：11、器官培养：12、褐变：13、玻璃化：14、无菌的范畴：15、污染：16、愈伤组织：二、填空选择1、超净工作台按气流的组织形式，可分为垂直层流和水平层流两种工作台。
2、在利用植物组织培养实际生产过程中，理论上年生产量(Y)决定于每瓶苗数(m)、每周期增殖倍数(X)和年增殖周期数(n)，其公式为 Y=mX n。
3、MS培养基中，蔗糖浓度一般为 1％～5％，琼脂浓度一般为 0.6%～0.8% ，pH值一般调到 5.0～6.0 ，常用和调节pH。
4、在外植体接种前应该进行严格的灭菌，所用的消毒剂氯化汞的浓度一般为 0.1％～1％，是由重金属汞离子作用来达到灭菌的；次氯酸钙的浓度一般为，次氯酸钠的浓度一般为，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生氯气来杀菌的。
酒精的浓度一般为。
5、植物组织培养过程中培养材料的污染病原主要分为和两大类。
6、植物组织培养外植体愈伤组织的形成需要两个必须的条件，一是，二是。
7、在植物组织培养中，一个成熟细胞或分化细胞转变为分生状态的过程，即诱导形成愈伤组织的过程，叫做。
8、体细胞胚发生一般要经历4个发育阶段，分别是：、、、。
9、在MS培养基中，提供外植体生长发育所需的碳架和能源的培养基成分是（蔗）糖。
10、植物组织培养过程中，常用的生长激素有、、、，其活性强度为＞＞＞，配制成母液时多用或助溶。
11、植物组织培养过程中，常用的细胞分裂素有、、、，其活性强度为＞＞＞，配制成母液时多用助溶。
12、组织培养过程中，从外植体上诱导形成的一团无序生长的薄壁组织是。
植物组织培养理论复习资料
四、合子胚与体细胞胚发生的比较
A. 相同点：
a.
b. c. B.不同点：
胚胎发育过程一致；
发育中都有极性与生理隔离； 功能一致，都可发育成植株；
（一个胚代表一个植株）
a. 结构不同：胚状体存在多子叶现象； 无典型胚柄结构。 b. 生理特征：干物质含量不同（糖、脂、蛋白质）；
生活力不同。
五、影响体细胞胚发生的因子
2 植物激素
细胞分裂素：
常用：BA、KT、BAP、ZT、2-ip
浓度范围：0.5-30 mg/L，
一般适应浓度为1-2 mg/L
生长素
常用：NAA、IBA
适宜浓度：0.1-1 mg/L
注：2，4-D在以茎尖或腋芽诱导芽时不宜使用
2、常见问题
⑴褐变
⑵ 玻璃化苗
⑴褐变
酚类物质
多酚氧化酶
1、植物激素（P74）
（1）生长素 胚状体诱导过程分为增殖培养与成胚培养两阶段 i、增殖培养： 使用含生长素的培养基，多用2,4-D; ii、成胚培养： 去（降）生长素的培养基;
2、N源 培养基中N的供给形式对体细胞胚的发生 有重要影响。
NH4
+
—N
NO3 —N
-
①单独添加某一种N源： i. 单NO3- ，必须高浓度才能成胚，且数量少； 如：White＋2,4-D2.0 （差）； (好)。 White＋2,4-D2.0+KNO3 1700 则大量成胚；
TJ（番茄汁）、香蕉、马铃薯等。
植物激素：指一些在植物体内合成，对生长发育产
生显著作用的微量有机物
生长素（auxin）
诱导细胞分裂，促进根分化；并与细胞分裂素互作
植物组织培养 复习资料
第一章绪论植物组织培养类型根据培养材料不同分为：（1）完整植株培养：对幼苗和较大植株等的培养。
（2）胚胎培养：包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。
（3）器官培养：包括离体根、茎、叶、果实、种子、花器官的培养。
（4）组织培养：如分生组织、薄壁组织、输导组织培养。
（5）细胞培养：指对单细胞或较小的细胞团进行培养。
（6）原生质体培养：指对去掉细胞壁后所获得的原生质体进行培养。
根据再生途径分为：（1）器官发生途径（2）体细胞胚胎发生人工种子：是指植物离体培养产生的胚状体或不定芽被包裹在含有营养和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒体。
作为繁殖材料。
植物组织培养技术的应用：1、优质种苗的快速无性繁殖1）无性繁殖作物及不易繁殖作物的快速繁殖2）通过茎尖培养生产脱毒健康种苗2、用于植物遗传育种包括种质资源离体保存；花粉花药培养产生单倍体；胚乳培养产生三倍体；胚培养拯救杂种胚克服远缘杂交障碍；原生质体培养进行体细胞杂交；植物体细胞无性系变异诱导和筛选；用于植物基因转移操作等。
3、大规模植物细胞、组织和器官培养生产次生代谢物质4、用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等第二章植物组织培养的基本技术组培实验室：包括化学实验室或准备室、接种室以及培养室三部分，并且按顺序排列。
在化学实验室与接种室之间应留有缓冲空间。
（1）准备室：用于培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和灭菌、试管苗的出瓶及整理等工作。
冰箱、天平、高压灭菌锅、pH计、干燥箱、实验台、水槽、凉干架、药品柜、离心机、水浴锅、微波炉、电炉、磁力搅拌器、蠕动泵、移液器、各种玻璃器皿（烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶、三角瓶等）及培养基分装用品等。
（2）接种室：植物材料的灭菌、接种以及培养物的继代转接等。
超净工作台、紫外灯、小推车、搁架、磁盘、接种工具（各种镊子、解剖刀、手术剪、普通剪刀接种针、酒精灯、手持喷雾器、细菌过滤器等）等。
植物组织培养复习
一、什么叫植物组织培养技术？它有哪些类型？其理论依据是什么？（1）广义的植物组织培养（plant tissue culture）是指在无菌和人工预知的控制条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织或细胞进行离体培养，使其再生细胞或生长、分化成完整植株的技术。
狭义的植物组织培养仅指对植物的组织（如分生组织、表皮组织、薄壁组织等）及培养产生的愈伤组织（callus）进行离体培养的技术。
（2）类型：植株的培养；胚胎培养；器官培养；组织培养；细胞培养；原生质体培养。
（3）植物细胞全能性（totipotency）是植物组织培养的理论基础。
它是指一个生活的植物细胞，只要有完整的膜系统和细胞核，它就会有一整套发育成一个完整植株的全部遗传信息，在适当的条件下，这些信息可以表达，再生成一个完整植株。
三、试述目前植物组织培养的应用。
答：（1）植物离体快繁、（2）无病毒苗木培育、（3）培育新品种或创制新物种、（4）次生代谢物生产、（5）种质资源保存（6）人工种子。
一、简述培养基和器具的灭菌方法和技术。
培养基的灭菌方法：高压蒸汽灭茵法：培养基消毒灭菌时间不宜过长，也不可超过灭菌锅规定的压力范围（1.15kgf·cm-2或O.15MPa ，温度126 ℃)；否则，培养基中的蔗糖、有机物质，特别是维生素类物质就会分解，导致培养基变质、变色，甚至难以凝固。
过滤除菌法：过滤灭菌的原理是溶液通过滤膜后，细菌的细胞和孢子等因大于滤膜孔径而被阻。
器具的灭菌方法：（1）干热灭菌法干热灭菌法是将器具长时间放在高温下消除杂菌的一种方法。
其具体做法是将需要灭菌的器具(玻璃器皿或器械)先用铝箔包好，放入温度设定为150℃的恒温干燥箱内，保温2h，取出冷却后便可以使用。
（2）高压蒸汽灭茵法高压蒸汽灭菌法是将需灭菌的玻璃器皿、器械或培养基等放在高压蒸汽灭菌锅内，通过高温高压进行灭菌的一种方法。
一般在1.06 kg／cm2的压力下(121 ℃)下保持15～20min，就可达到灭菌效果。
组培复习资料
植物组织培养复习资料一、名词解释。
（每个3分，共24分）１、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或发育成完整植株的技术。
又称植物离体培养。
２、细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。
3、脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞，经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。
4、外植体：从活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。
5、单细胞培养：对分离的到的单个细胞进行培养，诱导其分裂增殖，形成细胞团，再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体，直至长成完整植株的技术。
6、胚状体：亦称体细胞胚。
指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。
它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。
7、平板培养：是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中，使其与培养基充分配合，再倒入培养皿中进行培养的方法。
8、人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒状。
9、次生代谢产物：指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。
10、再分化：细胞经过脱分化形成的愈伤组织再次分化，进行器官形成，产丛生芽或胚状体，形成完整植株的过程。
11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在____C_____. A 30~40%；B 50~60%；C 70~80%；D 80~90% 2. 下列不属于生长素类的植物激素是____A D____。
A Kt；B IAA；C NAA；D ZT3. 影响培养基凝固程度因素有_______A B C D__.A 琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度；D 培养基的PH4. 活性炭在组织培养中的作用有_______ABC_。
植物组织培养知识点归纳
植物组织培养知识点归纳1第1章植物组织培养:指植物器官、组织、细胞、原生质体等的培养。
体内使用人工培养基使它们生长成完整的植物2，外植体:在植物组织培养中，为无菌细胞、组织、器官等。
从活植物中提取并接种在培养基上的称为外植体。
3，愈伤组织:指在人工培养基上无序地从外植体中生长出来的大量薄壁细胞。
4.1的应用。
1农业应用。
幼苗的快速繁殖。
无病毒培养3。
(1)倍性育种，缩短育种年限，具有明显的杂种优势；(2)克服远缘杂交(胚胎培养)的不亲和性和不育性；(3)种质保存(4)变异2的创造，在遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等方面的应用。
用于基因工程创造植物新种质用于植物生长发育的理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学、细胞和分子生物学等。
3。
使用组织培养材料作为植物生物反应器第2章1，全能性:任何具有完整细胞核的植物细胞都具有形成完整植物所必需的所有遗传信息以及发育成完整植物的能力。
2，细胞分化:指导致细胞形成不同结构和功能变化或潜在发育模式的过程3，去分化:指在体外生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构，恢复分生组织状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织的过程4，再分化:指去分化细胞恢复其分化能力并形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚至植物的过程5，植物组织培养中经常遇到的问题及解决方法1，污染与预防:1，真菌污染后，如果孢子已经形成，必须在高压灭菌后丢弃然而，在细菌污染的情况下，只要及时发现，材料仍然可以使用，并且材料上部不易受细菌影响的部分被切割和转移。
2.用抗生素等抗菌剂处理会影响植物材料的正常生长第二，的褐变和防止(1)选择合适的外植体(2)适宜的培养条件(3)用抗氧化剂连续转移(4)，玻璃化和防止(1)提高培养基中的溶质水平和降低培养基中的水势；(2)减少培养基中氮化合物的量；(3)增加光照；(4)增加容器通气量和施用CO2肥料对降低试管苗玻璃化有明显效果。
植物组织培养知识点归纳
植物组织培养知识点归纳第⼀章1、植物组织培养：是指在离体条件下，利⽤⼈⼯培养基对植物的器官、组织、细胞、原⽣质体等进⾏培养，使其长成完整植株2、外植体：在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物上提取下来的、接种在培养基上的⽆菌细胞、组织、器官等均称为外植体。
3、愈伤组织：指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。
4、应⽤⼀、农业上的应⽤1. 种苗快速繁殖(rapid propagation)2.⽆病毒苗(virus free)的培养3.在育种上的应⽤(breeding)（1）倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显；（2）克服远缘杂交的不亲合性和不孕性（胚培养）；（3）保存种质（4）创造变异⼆、在遗传学、分⼦⽣物学、细胞⽣物学、组织学、胚胎学、基因⼯程、⽣物⼯程等⽅⾯的应⽤。
⽤于基因⼯程技术创造植物新种质。
⽤于植物⽣长发育理论研究，包括⽣理学、病理学、胚胎学和细胞与分⼦⽣物学等。
三、利⽤组织培养材料作为植物⽣物反应器第⼆章1、细胞全能性（Totipotency）：指任何具有完整的细胞核的植物细胞都拥有形成⼀个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能⼒。
2、细胞分化（cell differentiation）：指导致细胞形成不同结构，引起功能或潜在的发育⽅式改变的过程。
3、脱分化（Dedifferentiation）：指离体条件下⽣长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构和功能⽽恢复分⽣状态，形成⽆组织结构细胞团或愈伤组织的过程。
4、再分化（Redifferentiation）：指脱分化的细胞重新恢复分化能⼒，形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚⾄植株的过程。
5、植物组织培养中常遇到的问题以及解决措施⼀、污染及防治：1、真菌污染后，如果已形成孢⼦，则必须经⾼压灭菌后扔掉。
但若是细菌污染，只要及时发现，将材料上部未感菌的部分剪下转接，材料仍可使⽤。
2、⽤抗⽣素等杀菌药剂的处理，会影响植物材料正常⽣长。
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组培复习材料
一、名词解释
1、培养基：是离体植物（外植体）赖以生长、分化的基础，是根据植物的需求，人工配制的含有各种营养成分的营养液。
2、液体培养：把细胞或生物体的一部分，置于液体培养基中使其发育，并不断振荡，使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。
3、种子培养：是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。
4、叶培养：从母体植株上将叶组织（包括叶原基在内）切下，放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。
5、热处理脱毒：在一定范围内，用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。
6、花药培养：是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花粉的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成杯状体，然后再生植株，或形成愈伤组织，由愈伤组织再分化成植株。
7、连续培养：是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。
（培养过程中，不断注入新鲜培养基，排掉等体积用过的培养基，或者抽取悬浮培养物，使培养物的营养物质得到不断补充，从而保持其恒定体积的培养。
——
8、分批培养：指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。
（细胞生长在固定体积的培养基中，当主要营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长即停止。
）
二、简答题
1、MS培养基特点。
答：MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，具有高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐用量大，还有一定数量的铵盐，其养分的数量和比例合适，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，加速愈伤组织和培养物的生长，当培养物就不转移时仍可维持其生存。
目前应用最广泛。
2、植物组培生产特点。
答：①和传统的生产方式相比，具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点；
②具有人为可控性，可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质；
③具有很高的生产效率。
3、外植体消毒（灭菌）程序。
答：①冲洗、刷洗材料：用毛笔等在流水下冲洗，也可蘸少量肥皂水刷洗，再用清水洗净。
②材料的表面灭菌：在超净工作台上，用70%乙醇浸泡数秒，幼嫩材料2s左右，成熟组织可10-30s，最后用无菌水冲洗干净。
③材料深层灭菌：在超净工作台上，利用灭菌剂来进行内部组织的灭菌。
或答外植体灭菌的步骤如下所示：
外植体取材→自来水冲洗→70%乙醇表面灭菌→无菌水冲洗→灭菌剂处理→无菌水充分洗净→备用
4、湿度对组培苗玻璃化的影响。
答：湿度包括瓶内的空气湿度和培养基的含水量。
瓶内湿度与通气条件密切相关，如果用瓶盖或不透气的封口膜封口，不利于气体的交换，瓶内处于不透气的高湿条件下，苗的生长势快，但玻璃化的发生频率也相对较高。
一般来说在单位容积内，培养的材料越多，苗的长势越快，玻璃化出现的频率就越高。
5、组培快繁的对象株。
答：能够进行组培快繁的植物很多，但是能够进行商业化生产，能够快繁形成产业的植物必须具有以下性质：
①通过培养生产不带病毒的种苗，使生产力得到大幅度的提高，如马铃薯；
②有性繁殖时变异幅度大的品系，可以从这些群体中选择优良的个体，进行无性繁殖，生产出整齐划一的大量种苗，如兰花；
③雌雄异株植物，通过组培快繁技术繁殖具有更高栽培价值的雌性植株或雄性植株；
④需要用较大量的目的产品作为种苗材料进行种植的物种，如大蒜；
⑤组培快繁技术简单、繁殖系数高的植物，如胡萝卜；
⑥在野生或传统的栽培条件下个体繁殖效率低下的植物，如兰花。
三、计算题
例题：
1、培养基的配方是1/2MS＋BA0.5+NAA0.3＋2.5%糖，要配制1000ml， MS母液的浓度分别是：大量元素20倍，微量元素500倍，铁盐100倍，有机物50 倍，BA1 mg/ml ，NAA0.1mg/ml。
要吸取各种母液各多少ml？糖称取多少克。
解：∵1000ml MS母液的量分别为：大量元素50ml微量元素 2ml铁盐 10ml 有机物 20ml ∴1000ml 1/2MS 吸取的量为：大量元素50/2=25ml 微量元素 2/2= 1ml
铁盐 10/2= 5ml 有机物20/2= 10ml
∵BA 1 mg/ml→BA 0.5mg/L
∴ 1 mg/ml ×？= 0.5mg/L ×1000ml ？=0.5ml
∵NAA0.1mg/ml→NAA0.3mg/L
∴0.1mg/ml ×？= 0.3mg/L ×1000ml ？=0.3ml
∵2.5%糖，配制1000ml
∴1000ml ×2.5%=25g
答：吸取大量元素25ml，微量元素1ml，铁盐5ml，有机物10ml，BA0.5ml，NAA0.3ml，糖25g。
一、论述
1、如何提高茎尖成苗率和脱毒率？
答：必须掌握下列关键环节：
①茎尖外植体的大小：茎尖越大，成活率越高，但带毒的可能性也就越高。
所以，需切取适当大小的茎尖外植体进行培养室很重要的；
②材料热处理：材料是否进行热处理以及热处理的方法直接影响到茎尖无毒区的大小，无毒区越大，茎尖外植体带毒的可能性越小；
③培养基成分：适于茎尖生长的培养基能显著提高茎尖培养的成活率，但茎尖培养对培养基没有特殊要求。
在培养中可以采用低浓度的生长素和细胞分裂素，也可采用赤霉素；
④培养条件：主要影响茎尖成活率。
温度应尽量接近该种植物正常生长的适宜温度，初期光照不宜太强；
俗外植体的生理状况：生长迅速的茎尖不仅具有较大的无毒区域，而且组织的生活力强，从而具有相对更高的培养成活率。
2、组培苗是否脱毒如何检测。
答：①目测症状法：脱毒苗叶色浓绿，均匀一致，长势好。
带毒株长势弱，叶片表现褪绿条斑、扭曲、植株矮化，花叶或明脉、脉坏死、卷叶等。
根据症状诊断要注意区分病毒病症状与植物的生理性障碍、机械损伤、虫害及药害等表现。
②指示植物法：指接种某种病毒后表现特有症状的植物。
主要植物有巴西牵牛、千日红等。
指示植物分为两种类型，一种在接种后产生的症状可扩大到非接种部分，另一种则只在接种部位产生病斑。
③血清学鉴定法：最常见的反应时利用抗原和抗体的体外结合，产生特异性沉淀。
利用荧光素、酶标记或在电子显微镜下直接观察抗原抗体的结合。
④电子显微镜鉴定法：其分辨能力增强至0.5nm，可观察到薄样品或部分春花的悬浮液中的病毒。
电子显微镜可直接观察有无病毒颗粒的存在，并观察到病毒颗粒的大小、形状及结构。
通常用投影法、背景染色法、表面复型的制备与扫描电镜法和超薄切片法。
⑤酶联免疫吸附法：用酶标记抗原或卡尼的微量测定方法。
抗体固定在支持物上，加入待检查植物组织提取液，加入酶标记的抗体，再加入底物，催化后，吸收波长发生变化，用分光光度计鉴定。
⑥免疫吸附电镜法：电镜结合血清学检测病毒的方法，又称陷入法。
少量稀释的抗血清加到电镜铜网膜上，待血清抗体蛋白质被吸附在膜上，除去过量蛋白质，加一滴病毒悬浮液或感染组织提取液，待原来吸附在铜网上的抗体陷入同源的病毒颗粒上，在电镜下可见到病毒粒子。
二、部分填空题
1、低温保存通常分为常低温保存（0~15℃）和低温保存（-80~0℃）两种。
2、影响单细胞培养因子为培养基和细胞密度。
3、悬浮培养的三个条件：愈伤化的细胞分散性良好；细胞均一性好，细胞有用成分含量高；增值速度迅速。
4、单倍体二倍化（加倍）的途径有3种：自发加倍；人工加倍；从愈伤组织再生加倍植株。
5、花药培养成功大多局限于茄科、禾本科、十字花科3个科的植物。
6、在试管苗多带的继代培养中，会产生两种现象，即驯化现象和衰退现象。