儿童再生障碍性贫血淋巴细胞亚群及与血常规中部分项目相关性的研究实践
血液检验在儿童贫血诊断与鉴别诊断中的应用价值探讨 谢雨桐
血液检验在儿童贫血诊断与鉴别诊断中的应用价值探讨谢雨桐发表时间：2017-10-18T14:12:37.433Z 来源：《健康世界》2017年16期作者：谢雨桐[导读] 通过血液检验可有效诊断及鉴别出不同类型的贫血，对鉴别和预防贫血具有重要价值和意义。
青海省妇女儿童医院青海西宁 810007摘要：目的：研究血液检验在儿童贫血诊断与鉴别诊断中的应用价值。
方法：选取我院2014年3月-2017年3月接收的64例贫血患儿作为研究对象，其中缺铁性贫血患儿42例（作为试验1组），地中海贫血患儿22例（作为试验2组），两组患儿均给予血细胞水平检测，观察两组患者的血液检测结果。
结果：对比两组患儿的平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白量（MCH），差异不显著，无统计学意义（P>0.05）；两组患者的平均血红蛋白浓度（MCHC）、平均红细胞分布宽度（RDW）之间进行比较，差异有显著性，具有统计学意义（P<0.05）。
结论：通过血液检验可有效诊断及鉴别出不同类型的贫血，对鉴别和预防贫血具有重要价值和意义。
关键词：血液检验；儿童贫血诊断；鉴别诊断；应用价值贫血系指机体外部周围血红细胞容量降低至正常参考范围以下的情况[1]，小儿贫血的患者因其年龄小、尚处于生长发育时期，贫血的发生不仅会出现一系列不良症状影响患儿的正常生活，还可能对患儿的生长发育造成不良影响。
对其进行早期诊断、鉴别具有重要意义。
但是一方面，患病早期合并轻度贫血的患儿临床症状往往并不十分明显，容易被家长忽视，造成诊断治疗延误；另一方面，不同类型的贫血（缺铁性贫血、地中海贫血）的诊断结果存在较高的相似性，鉴别的难度也比较大[2]。
本文就血液检验在儿童贫血诊断与鉴别诊断中的应用价值展开分析、探讨，现将结果做如下报告。
1、资料及方法1.1一般资料随机选取2015年3月-2017年3月我院接收的64例贫血患儿作为研究对象。
所有患儿均符合贫血诊断标准，其中男性患儿36例，女28例，按照不同贫血类型进行分组：缺铁性贫血组42例，地中海贫血组22例，年龄介于２～12岁，平均年龄为7.0岁；64例患儿主要的临床表现有食欲不佳、头晕以及疲劳乏力等。
淋巴细胞亚群及血细胞抗体检测在再生障碍性贫血中的临床意义
淋巴细胞亚群及血细胞抗体检测在再生障碍性贫血中的临床意义高泽莉;汪宏云;叶梅;李莉;周丽;郭峰【摘要】目的：探讨再生障碍性贫血患者外周血淋巴细胞亚群及血细胞抗体水平的变化及临床意义。
方法采用流式细胞仪检测25例再生障碍性贫血患者（重型再生障碍性贫血7例，非重型再生障碍性贫血18例）及20例健康志愿者（对照）外周血淋巴细胞亚群（CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD4＋／CD8＋、CD3－CD19＋、CD3－CD16＋ CD56＋）及血细胞抗体（抗血小板抗体、抗红细胞抗体及抗粒细胞抗体）。
结果再生障碍性贫血组患者CD4＋ T 淋巴細胞百分比、CD4／CD8比值，CD56＋百分比明显降低（P＜0．05）；血细胞抗体（血小板抗体、红细胞抗体、粒细胞抗体）阳性率明显高于对照组（P＜0．05）。
结论再生障碍性贫血患者细胞免疫功能异常，同时血细胞膜上抗体阳性率高，提示体液免疫也存在异常。
%Objective To investigate of the change of peripheral blood lymphocyte sub sets and blood cell antibodies in aplas‐tic anemia and its clinical significance .Methods The lymphocyte subsets CD3+ ,CD3+ CD4+ ,CD3+ CD8+ ,CD4+ /CD8+ ,CD3-CD19+ ,CD3-CD16+CD56+ from 25 aplastic anemia(including SAA 7 cases ,NSAA18 cases) ,and hematocyte antibody detection (granulocyte ,erythrocyte ,platelet cytomembrane) and 20 controls were examined by flow cytometry .Results CD4+ T lymphocyte percentage ,CD4/CD8 ratio ,the percentage of CD56+ in aplastic anemia patients significantly decreased(P<0 .05) .Blood cell anti‐bodies (platelet antibody ,erythrocyte antibody ,granulocyte antibody) were significantly higher than the control group (P<0 .05) . Conclusion Aplastic anemiacellular immune function in patients is abnormal ,and antibody positive rate is high ,and it prompt that humoral immunity is also abnormal .【期刊名称】《重庆医学》【年(卷),期】2016(045)007【总页数】3页(P903-904,908)【关键词】再生障碍性贫血;淋巴细胞亚群;血细胞抗体【作者】高泽莉;汪宏云;叶梅;李莉;周丽;郭峰【作者单位】四川省攀枝花学院附属医院血液科 617000;四川省攀枝花学院附属医院血液科 617000;四川省攀枝花学院附属医院血液科 617000;四川省攀枝花学院附属医院血液科 617000;四川省攀枝花学院附属医院血液科 617000;四川省攀枝花学院附属医院血液科 617000【正文语种】中文【中图分类】R556.5再生障碍性贫血(aplastic anemia，AA)是一类主要由T淋巴细胞介导造血组织损伤而导致的骨髓造血衰竭综合征。
再生障碍性贫血 病情说明指导书
再生障碍性贫血病情说明指导书一、再生障碍性贫血概述再生障碍性贫血（aplastic anemia，AA）简称再障，是一种可能由不同病因和机制引起的骨髓造血功能衰竭症。
主要表现为骨髓造血功能低下、全血细胞减少及所致的贫血、出血、感染综合征等。
非重型再障（NSAA）治疗及时得当，多数可缓解甚至治愈，但重型再障（SAA）发病急、病情重，死亡率偏高。
英文名称：aplastic anemia，AA。
其它名称：无。
相关中医疾病：暂无资料。
ICD疾病编码：暂无编码。
疾病分类：暂无资料。
是否纳入医保：部分药物、耗材、诊治项目在医保报销范围，具体报销比例请咨询当地医院医保中心。
遗传性：最新研究表示可能有一定遗传性。
发病部位：骨髓。
常见症状：贫血、出血、感染。
主要病因：多数病因不明。
检查项目：体格检查、血常规、骨髓检查、发病机制检查、肝肾甲状腺功能检查、病毒学检测、血清铁蛋白检测、叶酸检测、维生素B12检测、免疫相关检测、细胞遗传学检查。
重要提醒：出现贫血、出血、感染症状请及时就医，否则病情严重时可危及生命。
临床分类：1、根据病人的病情、血象、骨髓象及预后分类可分为重型（SAA）和非重型（NSAA）。
有学者进一步将非重型分为中间型和轻型，还有学者从重型中分出极重型（VSAA）。
2、根据病因分类可分为先天性（遗传性）和后天性（获得性）。
获得性AA又可根据是否有明确病因分为继发性和原发性。
二、再生障碍性贫血的发病特点三、再生障碍性贫血的病因病因总述：再障可由遗传因素引起，为先天性再障。
但绝大多数患者是获得性的，可能由化学药物因素、电离辐射因素、病毒因素、免疫异常因素等引起。
超过半数的再障患者无明显病因可查。
基本病因：1、病毒感染，特别是肝炎病毒、微小病毒B19等。
2、化学药物因素，特别是氯霉素类抗生素、磺胺类药物、抗肿瘤化疗药物以及苯等。
抗肿瘤药与苯对骨髓的抑制与剂量相关，但抗生素、磺胺类药物及杀虫剂引起的再障与剂量关系不大，与个人敏感有关。
TNF―α,INF―γ的诊断意义
TNF―α,INF―γ的诊断意义摘要：目的为更好地为儿童急性再生障碍性贫血体内细胞因子浓度变化提供证据。
方法采再障组（46例）和对照组（48例）静脉血，用酶联免疫吸附法测定所取血样标本中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和干扰素-γ（INF-γ）的含量。
并用独立样本t检验分析两组外周血中细胞因子是否存在显著性差异。
结果再障组患儿外周血TNF-α和INF-γ的含量均高于对照组儿童。
结论通过对TNF-α和INF-γ的监测，可以有效的了解再障患儿疾病进展，治疗效果和预后情况。
关键词：再生障碍性贫血；肿瘤坏死因子-α；干扰素-γ再生障碍性贫血可分为急性再障和慢性再障两型。
其中急性再生障碍性贫血发病急、进展快，骨髓衰竭是其主要病理过程，常伴内脏出血、严重感染，常危及生命，预后不良。
但是现在大部分的病例被诊断为特发性免疫异常导致的再生障碍性[1]。
细胞因子失调，包括肿瘤坏死因子（TNF-α），干扰素（INF-γ），今年来研究发现在再生障碍性贫血的发病机制中起到了重要的作用[2]。
儿童再生障碍性贫血已经成为继儿童白血病之后，儿童死亡率较高的一种血液系统疾病[3]。
本研究为了给临床上提供更好的关于儿童急性再障体内细胞因子浓度变化的证据。
现报告如下：1 资料与方法1.1一般资料2010年6月～2013年6月我院诊治的46名急性再生障碍性贫血患儿。
符合我国小儿再生障碍性贫血的诊断及分型标准[4]。
患儿均为急性再生障碍性贫血发作。
其中男20例，女26例，中位年龄6.3（2～14）岁。
对照组选择同期到我院体检中心体检的正常儿童，共48例，男21例，女27例，中位年龄7（2～16）岁。
两组儿童的年龄比较和性别比例上无显著性差异，P≥0.05。
1.2方法1.2.1标本收集用肝素钠抗凝管采集静脉血5ml用于TNF-α测定。
取用无肝素采集管采集静脉血15ml用于INF-γ测定。
1.2.2TNF-α含量的测定以鼠源性的抗TNF-α单抗以每孔400ng的量，在PH值为9的碳酸-碳酸钠缓冲液中包被96孔板中，置4℃环境过夜。
再生障碍贫血报告模板
再生障碍贫血报告模板引言再生障碍性贫血（AA）是一种罕见但严重的造血系统疾病，其特征为造血干细胞数量减少和造血功能受损。
本报告旨在提供关于再生障碍性贫血的详细信息，包括病因、发病机制、临床表现、诊断和治疗等方面的内容。
通过深入了解这一疾病，可以为医生和患者提供更好的医疗决策和管理。
1. 病因再生障碍性贫血的病因尚不明确，但家族聚集性和暴露于某些环境和化学物质的因素似乎与其发病有关。
感染（如乙型肝炎病毒、Epstein-Barr病毒等）、药物暴露（如苯扎贝特、卡马西平等）和自身免疫反应等也可能导致该疾病的发生。
2. 发病机制在再生障碍性贫血中，骨髓中的造血干细胞和祖细胞受到损害，导致红细胞、白细胞和血小板生成减少或中断。
这种损害可以是由于免疫介导的T淋巴细胞攻击造血干细胞，也可以是由于骨髓中异常造血细胞的增加而导致的。
3. 临床表现再生障碍性贫血的临床表现因个体差异而有所不同，但常见的症状包括贫血、易出血和易感染。
患者可能会出现乏力、头晕、皮肤苍白以及瘀点、瘀斑、鼻出血、牙龈出血等出血倾向。
由于白细胞数量减少，患者容易感染，并可能出现发热、咽痛、咳嗽等症状。
此外，由于血小板减少，患者可能有易瘀斑、皮肤淤血、鼻出血、月经过多等表现。
4. 诊断再生障碍性贫血的诊断需要排除其他可能的病因，如先天性骨髓发育异常、骨髓浸润等。
诊断依据包括骨髓活检结果、血液学检查、染色体分析、免疫学检查和免疫组织化学等。
其中，骨髓活检是确诊此疾病的关键检查。
5. 治疗再生障碍性贫血的治疗策略根据患者的临床表现和病情的严重程度而定。
治疗的目标是恢复造血功能、改善贫血、控制出血和感染，以及提高患者的生活质量。
治疗方法包括药物治疗、免疫抑制疗法、造血干细胞移植和对症治疗等。
6. 预后再生障碍性贫血的预后取决于许多因素，包括患者年龄、病情的严重程度、治疗的及时性和有效性等。
对于一些轻度病例，约30％的患者在没有治疗的情况下可以自愈。
流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识(2019完整版)
流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识（2019完整版）流式细胞术（flow cytometry,FCM）是一种对单细胞或生物颗粒进行多参数、定量分析的技术，具有速度快、精度高、准确性好等优点。
目前FCM广泛应用于临床医学，在疾病的预防、诊断、治疗及预后判断中具有重要作用。
但是淋巴细胞亚群在不同年龄阶段有不同的正常参考范围[1]，并且其结果受多种因素的影响，造成临床判读相对困难。
为科学合理应用FCM协助诊治儿科疾病，"流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用共识"在多个学术组织的协作下于2016年正式发表[2]。
该共识提高了医务工作者对FCM在儿科临床应用的认识，促进了临床诊疗水平的提高。
医学技术飞速发展，FCM的应用也有了一定的进展。
为适应医学发展和临床应用的需要，多个学术组织的专家讨论撰写了"流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识（2019版）"。
一、淋巴细胞亚群分析常规检测项目和报告内容淋巴细胞亚群分析是临床开展最多的FCM检测项目，是指借助各种荧光染料标记的单克隆抗体测定各类淋巴细胞胞膜或胞内独特的分化抗原（cluster of differentiation,CD），对淋巴细胞的各个亚群进行分析。
原国家卫生部发布的FCM检测外周血淋巴细胞亚群指南（WS/T 360－2011）对于规范FCM在外周血淋巴细胞亚群分析中的应用具有重要指导意义。
检测过程需注意标本采集和运输、免疫荧光染色、检测和分析、结果报告和审核等方面。
常规检测的淋巴细胞亚群包括T细胞（CD3+）、B细胞（CD3－CD19+）和NK细胞（CD3－CD16+CD56+）；T细胞又分为2个亚群：辅助性T细胞（CD3+CD4+）和杀伤性T细胞（CD3+CD8+）。
淋巴细胞亚群分析报告应提供各个亚群细胞的相对计数（百分比）和绝对计数。
FCM可以直接测得各淋巴细胞亚群的相对计数。
流式细胞仪检测健康儿童T淋巴细胞亚群及其绝对计数的研究
流式细胞仪检测健康儿童T淋巴细胞亚群及其绝对计数的研究【摘要】目的建立健康儿童T淋巴细胞亚群及其绝对计数的正常参考值。
方法采用流式细胞术，通过四色荧光标记，在绝对计数管（TruCount tube）内进行T淋巴细胞亚群的检测及绝对计数分析。
结果健康儿童T淋巴细胞（CD3+细胞群体）占淋巴群体的百分率为(65.16±7.05)%，绝对计数为(2029.75±718.85)个/μl全血，辅助性T淋巴细胞（CD3+CD4+细胞群体）占淋巴群体的百分率为(38.61±6.15)%，绝对计数为(1226.00±482.44)个/μl全血，抑制性T淋巴细胞（CD3+CD8+细胞群体）占淋巴群体的百分率为(23.38±7.31)%，绝对计数为(639.30±270.77)个/μl全血，CD4/CD8比值为1.86±0.80。
结论利用流式细胞仪进行外周血T淋巴细胞亚群检测及绝对计数分析，快速、客观、准确，可作为临床常规检验项目，辅助诊疗。
【关键词】流式细胞术；T淋巴细胞亚群；细胞绝对计数【Abstract】 Objective To establish the normal range of T lymphocyte subset and absolute count in child. Methods Flow cytometric analysis with four color fluorescence staining in Trucount tube.Results In child， T lymphocyte (CD3+) percentage and absolute count is 65.16±7.05 and 2029.75±718.85 r espectively， CD3+CD4+ subset is38.61±6.15 and 1226.00±482.44 respectively，CD3+CD8+ subset is23.38±7.31 and 639.30±270.77 respectively， CD4/CD8 ratio is1.86±0.80. Conclusion Flow cytemetry determined detection of T lymphocyte subset and absolute count seems to be rapid objective and precise method， and as clinical test item， it aids to diagnosis and therapy.【Key words】 flow cytometry；T lymphocyte subset；absolute countT淋巴细胞亚群与机体的免疫功能相关，当免疫功能紊乱时，T淋巴细胞亚群在相对百分含量及绝对计数的数值检测上会出现异常。
重视小儿再生障碍性贫血的早期诊断
移 植 或 ＩＴ 治 疗 的 １ 年 生 存 率 分 别 为 ９ ％ 和 Ｓ Ｏ ｌ
８ ％ 。多因素 分 析结果 显 示 ， 断后 接受 ａ ｏＨ Ｃ ｌ 诊 ｌ．ＳＴ ｌ
其 中 ＜１ 儿童 接 受 Ｈ Ａ全 相合 同胞供 体 （ Ｓ ６岁 Ｌ Ｍ Ｄ）
Ｓ Ａ 由于外 周血 三 系下 降非 常 明显 ， 要 依 赖输 血 Ａ 需 维持 生命 ， 染 和 出 血倾 向非 常 严 重 ， 不 积 极 治 感 如 疗， 则短 期 内死 亡 率 可 高 达 ７ ％ ５ 儿 童血 液病 临床 医师 的高度重 视 。 １２ 病 因与发 病 机 制 目前认 为 ， 致 再 障 的病 ． 导
骨髓 衰 竭 综 合 征 ，ｎ ｅｉ ｄｂ ｎ ｒ ｗ ｆ ｌｒ ｓｎ ｉｈｒｅ ｏｅｍａｒ ａ ｕｅ ｙ－ ｔ ｏ ｉ
ｔｅａｙＩＴ 治疗再 障获得成 功 ， 是再 障的免 疫 介 ｈｒｐ ， ） Ｓ 也 导致病 机制 的 有力 佐 证 － Ｊ ６ 。虽 然 异基 因造 血 干 细 胞移植 （ｌ． Ｓ Ｔ 是治疗 再 障 的有效 疗法 ， 由于 ａｏＨ Ｃ ） ｌ 但 ａｏＨＳ Ｔ受到 供 体 来 源 困难 、 疗 难 度 与 风 险 较 ｌ— Ｃ ｌ 治
ａｅ ｉ，Ａ）先 天性角化不 良（ ｙｋ ｒ ｏｉ ｃｎ ｅｉ ， ｎ ｍ ａＦ 、 ｄｓｅａ ｓ ｏｇｎｔ ｔ ｓ ａ
Ｄ ） Ｓ ｗ ｃｍａ—ｉ ｏｄ综合 征 等 。在 欧美 国家 Ｃ 和 ｈ ａｈ ｎＤａ ｎ ｍ 中 ， ＭＦ Ｉ Ｓ的 发生 率较 高 ， 占再 障 的 ２ ％ ～３ ％ ， Ｂ 约 ０ ０ 而亚 洲 地 区相 对 较 低 ， 占 ５ Ｌ ］ 因 此 ， 国儿 约 ％ ｌ。 ４ 我 童再 障 中 ， 大 多 数 为 后 天 获 得 性 再 障 （ｃｕｒｄ 绝 ａｑｉ ｅ
再生障碍性贫血治疗
再生障碍性贫血治疗综述包括病因治疗、支持疗法和促进骨髓造血功能恢复的各种措施。
慢性型一般以雄激素为主，辅以其他综合治疗，经过长期不懈的努力，才能取得满意疗效，不少病例血红蛋白恢复正常，但血小板长期处于较低水平，临床无出血表现，可恢复轻工作。
急性型预后差，上述治疗常无效，诊断一旦确立宜及早选用骨髓移植或抗淋巴细胞球蛋白等治疗。
另外，也有部分患者采用我国医学发明家刘同庆发明的“克癌7851”进行治疗，取得了十分满意的效果。
支持疗法凡有可能引起骨髓损害的物质均应设法去除，禁用一切对骨髓有抑制作用的药物。
积极做好个人卫生和护理工作。
对粒细胞缺乏者宜保护性隔离，积极预防感染。
输血要掌握指征，准备做骨髓移植者，移植前输血会直接影响其成功率，尤其不能输家族成员的血。
一般以输入浓缩红细胞为妥。
严重出血者宜输入浓缩血小板，采用单产或HLA相合的血小板输注可提高疗效。
反复输血者宜应用去铁胺排铁治疗。
雄激素为治疗慢性再障首选药物。
常用雄激素有四类：①17α-烷基雄激素类：如司坦唑（康力龙，Stanozolone）、甲氧雄烯醇酮、羟甲烯龙（oxymetholonE）、氟甲睾酮（fluoxymetholonE）、大力补（Dianabol）等；②睾丸素酯类：如丙酸睾酮、庚酸睾酮、环戊丙酸睾酮、十一酸睾酮（安雄）和混合睾酮酯（丙酸睾酮、戊酸睾酮和十一烷酸睾酮）又称"巧理宝"；③非17α-烷基雄激素类：如苯丙酸诺龙和葵酸诺龙等；④中间活性代谢产物：如本胆脘醇酮和达那唑（Danazol）等。
睾酮进入体内，在肾组织和巨噬细胞内，通过5α-降解酶的作用，形成活力更强的5α-双氢睾酮，促使肾脏产生红细胞生成素，巨噬细胞产生粒巨噬细胞集落刺激因子；在肝脏和肾髓质内存在5β-降解酶，使睾酮降解为5β-双氢睾酮和本胆烷醇酮，后两者对造血干细胞具有直接刺激作用，促使其增殖和分化。
因此雄激素必须在一定量残存的造血干细胞基础上，才能发挥作用，急性、严重再障常无效。
血常规各指标参考范围及临床意义
1、红细胞计数(RBC)[正常参考值]男：4.0～5.5 ×10的12次方/L(400万-550万个/mm3)。
女：3.5～5.0 ×10的12次方/L(350万-500万个/mm3)。
新生儿：6.0~7.0 ×10的12次方/L(600万-700万个/mm3)。
[临床意义]红细胞减少①红细胞生成减少，见于白血病等病：②破坏增多：急性大出血、严重的组织损伤及血细胞的破坏等③合成障碍：缺铁，维生素B12的缺乏等红细胞增多常见于身体缺氧、血液浓缩、真性红细胞增多症、肺气肿等。
2、血红蛋白测定(HB或HGB)[正常参考值] 男：120～160g/L(12-16g/dL)。
女：110～150g/L(11-15g/dL)。
儿童：120～140g/L(12-14g/dL)。
[临床意义] 血红蛋白减少多见于种贫血，如急性、慢性再生障碍性贫血、缺铁性贫血等。
血红蛋白增多常见于身体缺氧、血液浓缩、真性红细胞增多症、肺气肿等。
3、白细胞计数(WBC)[正常参考值]成人：4～10 ×10的9次方/L(4000-10000/mm3)。
新生儿：15～20 ×10的9次方/L(15000-20000/mm3)。
[临床意义]生理性白细胞增高多见于剧烈运动、进食后、妊娠、新生儿。
另外采血部位不同，也可使白细胞数有差异，如耳垂血比手指血的白细胞数平均要高一些。
病理性白细胞增高多见于急性化脓性感染、尿毒症、白血病、组织损伤、急性出血等。
病理性白细胞减少再生障碍性贫血、某些传染病、肝硬化、脾功能亢进、放疗化疗等。
4、白细胞分类计数(DC)[正常参考值]白细胞分类（DC）英文缩写占白细胞总数的百分比嗜中性粒细胞N 0.3 ～0.7中性秆状核粒细胞 0.01 ～0.05 (1%-5%)中性分叶核粒细胞0.50 ～0.70 (50%-70%)嗜酸性粒细胞E 0.005～0.05 (0.5%-5%)嗜碱性粒细胞B 0.00 ～0.01 (0～1%)淋巴细胞L 0.20 ～0.40 (20%-40%)单核细胞M 0.03 ～0.08 (3%-8%)[临床意义]中性杆状核粒细胞增高见于急性化脓性感染、大出血、严重组织损伤、慢性粒细胞膜性白血病及安眠药中毒等。
临床血液学检验技术课程中“再生障碍性贫血”课堂设计与教学体会
临床血液学检验技术课程中“再生障碍性贫血”课堂设计与教学体会作者：许涛张英杰郝艳梅禹莉徐慧马芳曹蕴李玉云来源：《右江医学》2021年第10期【关键词】临床血液学检验;再生障碍性贫血;课堂设计;教学体会中图分类号：R-05 文献标志码：B DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.10.018临床血液学检验技术是医学检验技术专业的主干专业课程，主要是以临床血液病为研究对象，涵盖化学、物理、免疫和分子生物学等检验技术和方法，为临床血液病的诊断、治疗和预后判断提供实验依据[1]。
临床血液学检验技术是一门多学科交叉课程，具有较强的理论性和实践性，是医学检验技术所有专业课程中与临床实践关联性最为紧密的综合性临床学科[2]。
课程中涉及大量的血液和骨髓细胞形态学知识和血液系统疾病相关知识，被学生公认为学习难度最大的专业课程之一[3]。
临床血液学检验技术课程主要培养学生掌握造血和血液基本理论知识，血细胞形态学相关检验技术能对红细胞疾病、白细胞疾病、血栓与出血疾病等进行鉴别诊断[4]。
再生障碍性贫血（aplastic anemia，AA）是常见红细胞疾病之一，由多种因素导致的骨髓造血功能衰竭引起的一组造血干细胞疾病。
在我国年发病率为0.74/10万人口，可发病于各年龄组和性别[5]。
由于再生障碍性贫血的发病机制尚不十分明确，以及骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes，MDS）等其他疾病也可表现为全血细胞减少，需要与再生障碍性贫血鉴别。
因此，学生在校期间掌握再生障碍性贫血基础理论及检验技术，为以后从事临床检验工作奠定坚实的基础。
本研究以临床血液学检验技术课程中“再生障碍性贫血”为例，從教学背景与学情分析、临床案例导入新课程、课程思政和回归教育本质等方面介绍，为临床血液学检验技术课堂教学提供新的思路和参考。
探索出一种以教师和学生为共同主体的教学模式，将学生融入课堂中，成为课堂教学不可分割的一部分，充分调动学生学习主动性，提高教学效果，师生共同教好和学好这门课程。
儿童再生障碍性贫血诊断指南与操作规范
儿童再生障碍性贫血诊断指南与操作规范【诊断与分型标准】1•诊断标准：需要符合下列5项条件:(1)全血细胞减少，如只有1〜2系下降，贝帰有血小板计数降低。
(2)一般无脾肿大。
(3)骨髓至少1个部位增生减低或重度减低，伴有巨核细胞明显减少(全片＜7个)。
如有增生活跃现象，须有巨核细胞明显减少，骨髓小粒非造血细胞增多。
有条件者尽量行骨体活检,显示造血组织减少，脂肪组织增多，巨核细胞减少。
对于临床表现和外周血象符合再障，但骨髓涂片检查不符合者，必须进行骨髓活检以利及时确诊。
(4)能除外引起全血细胞减少的其它疾病。
如阵发性睡眠性血红蛋白尿、骨髓异常增生综合征、特发性血小板减少性紫癜、急性造血功能停滞、骨髓纤维化、恶性组织细胞病和急性白血病等。
(5)一般抗贫血药治疗无效2•分型标准：同时符合下列三项血象标准中的两项者，应诊断为重型再障(SAA)：(1)网织红细胞＜1%,绝对计数＜15X109/L O(2)中性粒细胞绝对计数vO・5X109/L O(3)血血小板＜20X109/L。
根据分型标准，再障一般可分为三种类型：①急性再障(重型再障一I型，SM—I)：病情进展迅速，外周血象下降较快，一般在3个月内达到SAA标准者。
②慢性重型再障(重型再障-II型，SAA-II)：病情较缓慢，＞3个月进展到上述SAA标准者。
③一般慢性再障(CAA)：外周血象未达到SAA标准者。
3•其它参考分型：(1)极重型再障(VerySevereAplasticAnemia,VSAA):国夕卜Camitta诊断标准中，将SAA外周血中性粒细胞绝对计数＜0.2X10/L者，定为VSAA。
(2)中型再障(Moderate，AA)：近年国外文献又将未达到SAA标准，但造血功能已下降到一定程度的患者视为中等程度再障,标准为：①髓细胞成分＜50%；②加以下三条中的两条：a・中性粒细胞计数V1・0X109/L；b ・网织红细胞绝对值＜30X109/L；c・血小板计数＜60X109/L，持续6周以上。
儿童传染性单核细胞增多症异型淋巴细胞及淋巴细胞亚群的研究
(1) The ratio of heterotypic lymphocytes in children infected with infectious mononucleosis was significantly higher than that in normal children.
儿童传染性单核细胞增多症异型淋巴细胞及淋巴细胞亚群的研究
摘 要
目的：
探讨儿童传染性单核细胞增多症异型淋巴细胞及淋巴细胞亚群的变化及其意义。
方法：
选取2016年12月-2017年12月青岛大学附属医院儿科治疗的41例传染性单核细胞增多症作为实验组，同期选取60例健康儿童作为对照组。所有受试者取空腹静脉血，提取 DNA后采用荧光定量 PCR测定全血EBV的拷贝数，并进行异型淋巴细胞的比值的测定及血细胞计数分析，采用流式细胞术测定淋巴细胞亚群（CD3+T淋巴细胞、 CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、 NK细胞、B细胞等），比较两组的差异，进行异型淋巴细胞与淋巴细胞亚群之间的相关性分析。采用SPSS19.0统计软件包进行数据处理。计量资料采用均数±标准差（s）表示，符合正态分布及方差齐性的组间计量资料比较采用t检验，不符合者采用非参数检验。计数资料采用百分数（%）表示；组间计数资料采用 x2 检验；相关性分析采用Spearman相关性检验。P≤0.05差异有统计学意义。
Objective:
To explore the change of heterosexual lymphocytes andlymphocyte subsets and their clinical value in infectious mononucieosis children.
儿童淋巴细胞亚群检测意义
儿童淋巴细胞亚群检测意义
嘿，各位家长朋友们！今天咱来聊聊儿童淋巴细胞亚群检测这事儿。
这可真是个重要的玩意儿，就好像是孩子健康的“秘密侦探”一样呢！
你想啊，孩子们的身体就像一个奇妙的小世界，里面有着各种各样的细胞在工作着。
淋巴细胞亚群就是其中很关键的一部分呀！它们就像是守护孩子健康的小战士，各自有着不同的职责和任务。
通过这个检测，我们就能知道这些小战士们是不是都在好好干活呢！比如说，如果检测结果显示某种淋巴细胞的数量不对劲，那不就像是一支军队里少了某个重要兵种一样嘛，这可不行呀！这就提醒我们要格外注意孩子的身体状况啦。
这检测不就像是给孩子的免疫系统做了一次全面“体检”嘛！它能让我们及时发现问题，早早采取措施。
不然等孩子真的生病了，那得多心疼呀！而且呀，这检测又不是什么可怕的事情，就是抽一点点血而已，咱可不能因为心疼孩子就不做呀。
你再想想，要是孩子经常生病，或者身体老是有些小毛病，那是不是得找找原因呀？这时候淋巴细胞亚群检测不就能派上大用场了嘛！它能帮我们找到那些隐藏在身体里的小问题，然后我们就能对症下药，让孩子的身体尽快好起来。
咱做家长的，不就是希望孩子能健健康康的嘛！那这个检测可就是帮助我们守护孩子健康的重要手段之一呀。
可别小瞧了它，它说不定就能在关键时刻给我们指明方向呢！所以呀，要是医生建议给孩子做这个检测，咱可别犹豫，这都是为了孩子好呀！反正我觉得，为了孩子的健康，这点小小的检测算什么呢，对吧？儿童淋巴细胞亚群检测真的很有意义呀，咱做家长的可得重视起来呀！。
流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识(2019完整版)
流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识（2019完整版）流式细胞术（flow cytometry,FCM）是一种对单细胞或生物颗粒进行多参数、定量分析的技术，具有速度快、精度高、准确性好等优点。
目前FCM广泛应用于临床医学，在疾病的预防、诊断、治疗及预后判断中具有重要作用。
但是淋巴细胞亚群在不同年龄阶段有不同的正常参考范围[1]，并且其结果受多种因素的影响，造成临床判读相对困难。
为科学合理应用FCM协助诊治儿科疾病，"流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用共识"在多个学术组织的协作下于2016年正式发表[2]。
该共识提高了医务工作者对FCM在儿科临床应用的认识，促进了临床诊疗水平的提高。
医学技术飞速发展，FCM的应用也有了一定的进展。
为适应医学发展和临床应用的需要，多个学术组织的专家讨论撰写了"流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识（2019版）"。
一、淋巴细胞亚群分析常规检测项目和报告内容淋巴细胞亚群分析是临床开展最多的FCM检测项目，是指借助各种荧光染料标记的单克隆抗体测定各类淋巴细胞胞膜或胞内独特的分化抗原（cluster of differentiation,CD），对淋巴细胞的各个亚群进行分析。
原国家卫生部发布的FCM检测外周血淋巴细胞亚群指南（WS/T 360－2011）对于规范FCM在外周血淋巴细胞亚群分析中的应用具有重要指导意义。
检测过程需注意标本采集和运输、免疫荧光染色、检测和分析、结果报告和审核等方面。
常规检测的淋巴细胞亚群包括T细胞（CD3+）、B细胞（CD3－CD19+）和NK细胞（CD3－CD16+CD56+）；T细胞又分为2个亚群：辅助性T细胞（CD3+CD4+）和杀伤性T细胞（CD3+CD8+）。
淋巴细胞亚群分析报告应提供各个亚群细胞的相对计数（百分比）和绝对计数。
FCM可以直接测得各淋巴细胞亚群的相对计数。
小儿急性淋巴细胞白血病血小板计数与平均血小板容积的改变及其临床意义
小儿急性淋巴细胞白血病血小板计数与平均血小板容积的改变
及其临床意义
谢杨卿;唐锁勤;谭汉君;刘风英
【期刊名称】《临床血液学杂志》
【年(卷),期】1992(5)4
【摘要】近年来,国外学者发现血小板计数(BPC)与平均血小板容积(MPV)在某些疾病时的变化特点,有助于诊断并可能指导治疗,国内尚未见有关报道。
自1988年12月至1989年12月,我们观察了18例小儿急性淋巴细胞白血病(ALL)不同时期BPC与MPV的变化,现报告如下:一般资料一.病例选择:18例初诊或复发高危组ALL患儿,男8例,女10例,年龄4～8岁,其中初诊或复发期检测8例,诱导缓解1～2疗程中检测16例,完全缓解期白细胞恢复过程中检测18例,共测118人次。
【总页数】2页(P172-173)
【关键词】白血病;儿童;血小板计数;MPV
【作者】谢杨卿;唐锁勤;谭汉君;刘风英
【作者单位】中国人民解放军总医院小儿科;中国人民解放军总医院临检科
【正文语种】中文
【中图分类】R733.704
【相关文献】
1.白血病患者血小板计数与平均血小板容积的改变及其临床意义 [J], 郭超;李志春;高红
2.小儿急性特发性血小板减少性紫癜血小板平均容积改变及其临床意义探讨 [J], 巴静;吴伟
3.254例白血病血小板计数及其平均容积的改变与临床意义 [J], 李志春;高红
4.监测未足月胎膜早破孕妇血中血小板计数血小板平均容积C反应蛋白及白细胞介素-6水平的临床意义 [J], 王爱花
5.血小板计数及其平均容积在儿童ITP中的改变与临床意义 [J], 王立萍
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儿童再生障碍性贫血淋巴细胞亚群及与血常规中部分项目相关性的研究实践
儿童再生障碍性贫血淋巴细胞亚群及与血常规中部分项目相关性的研究实践摘要】目的：探究儿童再生障碍性贫血淋巴细胞亚群及与血常规的相关性。
方法：选取40例再生障碍性贫血患儿和40例确定无再生障碍性贫血的健康体检儿童分别作为观察组与对照组，对其外周血淋巴细胞亚群指标进行对比，并分析与血常规的相关性。
结果：观察组儿童的各项指标与对照组相比，均存在显著性异常(P＜0.01)；观察组儿童淋巴细胞中CD3+CD8+所占百分比与HB计数水平均呈正相关，CD3+CD4+/CD3+CD8+与HB，WBC，N计数水平均呈负相关(P＜0.01)。
结论：AA患儿的淋巴细胞亚群比例失调，细胞免疫系统异常，且与部分同期血常规检测指标存在一定相关性。
【关键词】再生障碍性贫血；淋巴细胞亚群；血常规；相关性【中图分类号】R556 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2017）23-0025-02Study?on?the?regeneration?of?children?practice?part?of?the?project?correlation?be tween?anemia?and?lymphocyte?subsets?in?bloodZhang?Lin?1,?Li?Ying?2,?beam?2,?Qi?Liu?Wen?2.?1?Affiliated?Hospital?of?Nanchong?health?school?Sichuan?637000,China??2?Affiliated?Hospital?of?Chuanbei?Medical?College?Nanchong?637000,China? 【Abstract】Objective To explore children aplastic anemia blood lymphocyte subsets and the conventional correlation. Methods 40 cases of children with aplastic anemia and 40 cases of aplastic anemia checkup children as observation group and control group respectively, the index of peripheral blood lymphocyte subsets were compared, and the correlation analysis and routine blood. Results Compared with control group, the various indexes of the observation group children have significant abnormal (P <0.01); CD3 + CD8 + lymphocytes in observation group children percentage countingand HB levels were positively correlated, CD3 +, CD4 + / CD3 + CD8 + with HB, negatively correlated with the level of WBC, N count (P < 0.01). Conclusion The lymphocyte subsets imbalance AA children, abnormal cellular immune system, and routine blood test index over the same period of part there is a certain correlation. 【Key words】Aplastic anemia; Lymphocyte subsets; Routine blood; The correlation 再生障碍性贫血，一般简称为再障(AA)，是一类骨髓衰竭病症，主要发病特点为全血细胞不断减少，在临床上一般表现为机体贫血、感染、出血以及无肝脾淋巴结肿大等。
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儿童再生障碍性贫血淋巴细胞亚群及与血常规中部分项目相关性的研究实践发表时间：2017-09-11T14:46:14.253Z 来源：《心理医生》2017年23期作者：张琳李英梁琦刘文[导读] 探究儿童再生障碍性贫血淋巴细胞亚群及与血常规的相关性。
（1南充卫生学校附属医院四川南充 637000）（2川北医学院附属医院四川南充 637000）【摘要】目的：探究儿童再生障碍性贫血淋巴细胞亚群及与血常规的相关性。
方法：选取40例再生障碍性贫血患儿和40例确定无再生障碍性贫血的健康体检儿童分别作为观察组与对照组，对其外周血淋巴细胞亚群指标进行对比，并分析与血常规的相关性。
结果：观察组儿童的各项指标与对照组相比，均存在显著性异常(P＜0.01)；观察组儿童淋巴细胞中CD3+CD8+所占百分比与HB计数水平均呈正相关，CD3+CD4+/CD3+CD8+与HB，WBC，N计数水平均呈负相关(P＜0.01)。
结论：AA患儿的淋巴细胞亚群比例失调，细胞免疫系统异常，且与部分同期血常规检测指标存在一定相关性。
【关键词】再生障碍性贫血；淋巴细胞亚群；血常规；相关性【中图分类号】R556 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2017）23-0025-02Study?on?the?regeneration?of?children?practice?part?of?the?project?correlation?between?anemia?and?lymphocyte?subsets?in? bloodZhang?Lin?1,?Li?Ying?2,?beam?2,?Qi?Liu?Wen?2.?1?Affiliated?Hospital?of?Nanchong?health?school?Sichuan?637000,China??2?Affiliated?Hospital?of?Chuanbei?Medical?College?Nanchong?637000,China?【Abstract】Objective To explore children aplastic anemia blood lymphocyte subsets and the conventional correlation. Methods 40 cases of children with aplastic anemia and 40 cases of aplastic anemia checkup children as observation group and control group respectively, the index of peripheral blood lymphocyte subsets were compared, and the correlation analysis and routine blood. Results Compared with control group, the various indexes of the observation group children have significant abnormal (P < 0.01); CD3 + CD8 + lymphocytes in observation group children percentage counting and HB levels were positively correlated, CD3 +, CD4 + / CD3 + CD8 + with HB, negatively correlated with the level of WBC, N count (P < 0.01). Conclusion The lymphocyte subsets imbalance AA children, abnormal cellular immune system, and routine blood test index over the same period of part there is a certain correlation.【Key words】Aplastic anemia; Lymphocyte subsets; Routine blood; The correlation再生障碍性贫血，一般简称为再障(AA)，是一类骨髓衰竭病症，主要发病特点为全血细胞不断减少，在临床上一般表现为机体贫血、感染、出血以及无肝脾淋巴结肿大等。
其致病原因是多方面的，目前医学界认为免疫介导对造血功能的抑制为主要原因，其中T淋巴细胞的异常参与是发生AA的一项重要原因，不同亚群的淋巴细胞对细胞免疫调节发挥的作用存在较大差异，一旦失衡就会令细胞免疫过程出现异常，同时自然杀伤细胞(NK)与产生抗体的B淋巴细胞对造血干细胞的克隆形成具有抑制作用。
本文对40例AA患儿的外周血淋巴细胞亚群的表达予以检测，并对其与相应外周血常规的相关性予以分析，进而探讨淋巴细胞亚群分布与功能对AA发病的影响。
1.资料与方法1.1 一般资料1.1.1研究对象从本院2013年1月—2015年12月间收治的AA患儿中随机选取40例作为观察组，均符合相关诊断标准。
其中男22例，女18例；年龄3～12周岁，平均(6.5±0.8)周岁；重型AA患儿14例，非重型AA患儿26例。
从同一时期于本院体检中心接受健康检查且确定无AA的儿童中随机选取40例作为对照组，其中男21例，女19例；年龄4～14周岁，平均(7.2±0.6)周岁。
两组儿童的一般资料比较无显著性差异(P＞0.05)，故有可比性。
1.1.2主要仪器与试剂流式细胞仪：美国贝克曼公司生产，型号Beckman Gallions；血细胞分析仪：美国贝克曼公司生产，型号COULTER LH780；淋巴细胞亚群试剂盒与血细胞试剂盒：均由美国贝克曼公司提供，试剂为鼠抗人单克隆抗体，编号为6607073，溶血素采用全血溶血试剂，编号为A11895；质控品：流式细胞仪用质控品由贝克曼公司生产，货号为6607077，血细胞分析仪用质控品由山东卓越生物科技有限公司生产，批号为E5112。
1.2 方法1.2.1淋巴细胞亚群的检测对观察组患儿初次诊断之时与后期免疫治疗随访阶段的外周静脉血的血样予以检测，方法为：从患儿外周静脉血管处采集3mL血样，抗凝剂采用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)，标记方法采用直接免疫荧光法，之后于流式细胞仪的作用下检查淋巴细胞亚群的表达情况，得出各淋巴细胞亚群的百分数。
对照组儿童同样采取前述方法，于相同时期采集外周静脉血的血样予以检测，并对比分析两组儿童外周血淋巴细胞亚群的相关指标。
1.2.2血常规检测对观察组患儿与淋巴细胞亚群检测同期的血常规指标予以检测，方法为：从AA患儿外周静脉血管处采集3mL血样，抗凝剂采用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)，于血细胞分析仪(瑞典麦道尼克公司生产)中对各项血常规指标进行检测。
判断观察组患儿外周血淋巴细胞亚群与同期血常规的相关性。
1.3 观察指标外周血淋巴细胞亚群检测指标：T淋巴细胞CD3+，CD3+CD4+，CD3+CD8+，CD3+CD4+/CD3+CD8+；NK细胞CD(16+56)+和B淋巴细胞CD19+。
血常规检测指标：血红蛋白(HB)、红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、中性粒细胞(N)和血小板(PLT)计数水平。
1.4 统计学处理将所得数据通过SPSS20.0统计软件进行处理分析，其中计量资料以(x-±s)表示，组间比较采用t检验；计数资料以百分率(%)表示，组间比较采用χ2检验。
P＜0.05视为差异具有统计学意义。
2.结果2.1 组间外周淋巴细胞亚群检测指标比较观察组患儿的CD3+CD4+，CD3+CD4+/CD3+CD8+，CD19+检测值均显著低于对照组儿童(P＜0.01)，同时CD3+CD8+与NK细胞CD(16+56)+检测值均显著高于对照组儿童(P＜0.01)；组间CD3+检测值比较无显著性差异(P＞0.05)。
具体见表1。
2.2 观察组患儿的外周淋巴细胞亚群与血常规相关性CD3+CD8+检测值与HB，WBC计数水平均呈正相关(P＜0.01)；CD3+CD4+/CD3+CD8+检测值与HB，WBC，N计数水平均呈负相关(P＜0.01)。
具体见表2。
注：*表示P＜0.01。
3.讨论AA在低年龄段儿童中的发病率相对较高，在临床上主要表现为全血细胞减少。
目前普遍认为AA的发病机制主要有以下几种：第一，机体造血干细胞本身存在缺陷；第二，造血微环境中的支持功能发生障碍；第三，免疫异常反应对造血干细胞造成损伤[1]。
对绝大多数患者而言，其机体免疫调节系统都存在不同程度的紊乱，作为细胞免疫系统中的主要效应细胞，T淋巴细胞的异常是导致AA发病的重要因素。
有报道显示[2]，AA患儿体内的T淋巴细胞不仅存在数量异常现象，其亚群分布与功能也存在显著变化。
由于所分泌的细胞因子不同，CD3+CD4+和CD3+CD8+细胞可分为Th1，Th2与Tc1，Tc2两个亚群，T淋巴细胞通过不同亚群分泌不同的IL细胞因子介导各类免疫应答反应。
其中Th1与Tc1亚群细胞主要分泌IL-2，IL-12，TNF-α及IFN-γ等细胞因子，Th2与Tc2亚群细胞则主要分泌IL-4，IL-5，IL-6及IL-10等细胞因子。
另外，Th1亚群细胞主要参与调节和细胞毒性或局部炎症相关的免疫应答反应，Th2亚群细胞则主要参与调节相关的体液免疫反应。
随着研究的不断深入，人们发现CD4+Thl亚群细胞中存在着部分细胞毒性淋巴细胞(CTL)，具有明显的细胞毒作用，这类细胞会通过旁观者效应对靶细胞产生损伤。
另外，有研究显示，AA患者的外周静脉血中Th1/Th2与Tcl/Tc2的比例均显著升高，由此说明AA患者体内的Th 与Tc细胞亚群的平衡状态遭到破坏，致使分泌出的TNF-α与IFN-γ等造血负调节因子明显增多，同时对机体造血干细胞产生直接毒性作用[3]。
此次研究以40例AA患儿为观察对象，对其外周淋巴细胞亚群相关指标予以检测，并与健康儿童进行比较，结果显示，AA患儿的CD3+CD4+，CD3+CD4+/CD3+CD8+，CD19+检测值均显著低于健康儿童，CD3+CD8+，CD(16+56)+检测值则显著高于健康儿童，但CD3+检测值与健康儿童无明显差异，该结果在一定程度上说明AA患儿体内的T细胞与NK细胞数量存在异常，同时T细胞亚群分布发生异常，与高泽莉等人的研究[4]结果一致。
另外，对AA患儿的外周淋巴细胞亚群与血常规相关性进行观察分析，发现其CD3+CD8+检测值与HB，WBC计数水平均呈正相关，CD3+CD4+/CD3+CD8+检测值与HB，WBC，N计数水平均呈负相关(见表2)，与陶林静等人的研究[5]结果一致。