疟原虫的形态鉴别厚薄
厚薄血膜中四种人体疟原虫鉴别
（吉氏染色剂染色）
（吉氏染色剂染色）
疟原虫在人体内的发育场所依次为肝细胞内及红细胞内，现以间日疟原虫为例，描述如下：1．早期滋养体（环状体）
胞质纤细呈环状，中间为一空泡，核位于一侧，形似戒指状，故称环状体。
红细胞为正常大小。
2．晚期滋养体（大滋养体）
虫体明显增大，胞质增多，并伸出不规则伪足。
虫体胞质中出现细小杆的疟色素。
被寄生的红细胞胀大，颜色变浅，开始出现被染成红色的小点-薛氏点。
3．裂殖体
（1）未成熟的裂殖体
虫体逐渐变圆，空泡消失，核开始分裂，细胞质未分裂，疟色素分散。
红细胞胀大色浅，有薛氏点。
（2）成熟裂殖体
核分裂到12～24个时，胞质也随之分裂，一团细胞质包绕一个核，形成12～24个椭圆形的裂殖子，疟色素集中成堆，虫体充满胀大的红细胞，胞浆出现红染的薛氏点。
4．配子体
配子体呈圆形或椭圆形，胞质无空泡，内有均匀散在的疟色素。
雌配子体：核小，较致密，深红色，常位于虫体的一侧，胞质深蓝色。
雄配子体：核大而疏松，淡红色，位于虫体中央，胞质浅蓝略带红色。
（吉氏染色剂染色）
（吉氏染色剂染色）
（吉氏染色剂染色）。
疟原虫检验技术
疟原虫检验技术概述血涂片检查疟原虫是诊断和鉴定疟原虫种别的主要方法，也是疟疾流行病学调查的重要部分，血涂片制作和染色的好坏足心影响检查的结果，必须把握好“三关”。
玻片清洁。
清洁的玻片无油脂，无划痕，无灰尘，玻片上有油迹，使厚血膜容易脱落，薄血膜涂布不均匀。
在用手指持玻片时，只能夹持玻片的两侧边缘，不要接触玻片的表面，以避免手指上的油污染玻片。
新的载玻片先用热肥皂水洗涤，再用清水冲洗，然后用软而洁净的毛巾擦干待用。
①5%的肥皂水煮沸法：将洗衣肥皂削成小片，加水配成约5%的肥皂水，煮沸后将玻片一张一张地平放进肥皂水内，微火煮约一刻钟，然后灭火待肥皂水稍冷后，将洁干毛巾擦净后待用。
②清洁液浸泡法：清洁液配制如下：重铬酸钾 80g 浓硫酸100ml 水清净水 1000ml 二、制片 1.薄血膜涂制 2.厚血膜涂制薄血膜厚血膜标记处 1.薄血膜涂制： 1.薄血膜涂制 1 先用75%酒精棉球将耳垂消毒，待酒精干后用采血针迅速刺入耳垂近下端边缘处。
2 用左手的拇指与食指以及右手的中指向相对的方向将耳垂轻轻挤压出血。
3 取一张洁净的载玻片，将它的左1/3的表面接触耳垂上的血滴（不要将玻片接触耳垂上的皮肤），使一小滴血在玻片上。
血量1-1.5mm3 .1/4火柴头大小。
薄血膜涂好后，再轻挤耳垂挤出约火柴头大一血滴，将这一滴血滴在玻片的中心1/3处然后用推片的一角由血滴中央向周围旋转涂成直径约一厘米的圆形血膜，旋转涂制时间不宜过短，以免形成纤维蛋白束，遮盖了疟原虫。
厚血薄涂好后，应平放待干，防苍蝇舔食血膜或灰尘落在上面。
受检者的编号可用铅笔或钢笔写在薄血膜的边缘上，也可用蜡笔写在厚血膜一端。
血片制作和染色质量规范质量控制血片制作和染色质量判定标准 1.血片制作质量判定标准：好：厚薄血膜均好，或薄血膜好，厚血膜中。
中：薄血膜中，厚血膜好或中。
差：薄血膜差，或厚薄血膜均差。
质量控制 2.血片制作和染色合格率要求：分别以血片制作、染色和清洁度的好、中、差合并计算合格率。
疟原虫形态特征
疟原虫与其它物体的鉴别
灰尘和染色液的色素沉着误认为疟色素：可依据颗粒性状、大小、色泽、有无核与胞浆的结构 来鉴别。也可转动微调，看是否在一个平面，不在一个平面一般不是疟原虫。
细菌：很相疟原虫的核，但球菌形体较大，边缘光滑，与红细胞不在一个平面。
疟原虫与其它物体的鉴别
水中原虫：可看到核、胞浆和空泡，似间日疟原虫大滋养体，但无疟色素，而空泡多如网眼即 可区别。
恶性疟配子体
恶性疟原虫大配子体为新月形，小配子体为腊肠形。核居中，疟色素围在核周，外为一圈胞浆。 此外，还可见配子体的胞浆部分或全部消失，只留下核和疟色素，或核和胞浆均消失，只留下 一些疟色素
疟色素
间日疟色素为黄褐色，细小，杆状或结成粗大颗粒，分布不均。 恶性疟的色素为金黄色，颗粒细小，结成块后呈黑褐色，配子体色素粗大，分别核周。 疟色素与原虫在一水平面上；有立体感；色泽特殊，只有单色；
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雌配子体
间日疟
恶性疟
大于正常红细胞，圆形；核小．致密，探红色， 新月形，两端较尖；核小，致密，深红色，位于
偏于一侧，胞浆深蓝色；疟色素散在
中央；胞浆深蓝色；疟色素块围于核周
雄配子体 间日疟
恶性疟
大于正常虹细胞，圆形；核大，疏松，浅红色， 腊肠形，两端钝圆，核大，疏松，淡红色，位于 多位于中央；胞浆浅蓝色或淡红色；疟色素散在 中央；胞浆浅蓝色或浅红色；疟色素围于核周
大滋养体: T
三日疟：P.m
裂殖体：S
蛋形疟：P.o
配子体：G
疟原虫与其它物体的鉴别
白细胞残核和幼稚红细胞残核：白细胞破裂散出的颗粒，易误诊为环状体的核，但看不到胞浆。 白细胞残核和幼稚红细胞残核为兰色，与疟原虫胞浆相似，与其它红的或血小板巧合在一起，
疟原虫的镜检技术--2012年
染液的染色原理
红细胞和疟原虫的蛋白质均由氨基酸组 成，每个氨基酸电离出一个带正电荷的-NH3+ 和一个带负电荷的-COO-。碱性染料美蓝的有 色基团带阳离子，可与细胞中带负电荷的COO- 部分结合，使之成为蓝色。疟原虫、淋 巴细胞和大单核细胞的胞浆、嗜碱性粒细胞 的颗粒等酸性蛋白质，被染成蓝色。 酸性染料伊红的有色基团带阴离子，可 与细胞中带正电荷的-NH3+ 部分结合，使之呈 红色；美蓝与伊红都不能使疟原虫和白细胞 的核着色，但美蓝氧化后产生的天青有媒染 作用，在媒染物与染料的共同作用下，疟原 虫和白细胞核被染成紫红色。
用水应选择pH6.8-7.2清洁水，通常使用新鲜的蒸馏水 或过滤的冷开水。
• （6）染色用水 染液的稀释用水和染色后冲洗
• （7）冲洗方法
应沿玻片或染色缸边缘加水使 染液表面一层溢出，并轻轻冲洗，以免染液色素颗粒 沾污血膜。
血片制作与染色注意事项
●使用前载玻片一定要清洁，否则会影 响血片制作和镜检结果。 ●厚血膜干燥时勿加热，加热会使原虫 变形，影响镜检结果。 ●配置母液时过滤可除去杂质颗粒，有 助于提高镜检质量。
1.载玻片：新玻片浸入有液态洗涤剂的清水中10-20分钟，
2. 采血针：一次性 3.玻片盒：防止污染和昆虫吸食血膜 4.75%酒精棉球：采血前后消毒 5.记号笔：玻片上书写号码
血膜的制作（取血时间）
• 采血时间 现症病人和流调普查时可不考虑取血时机，但在诊断 或需要某期疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。 • 疟疾典型的临床表现分前驱期、发冷（寒战）期、发热期、出汗 期和间歇期五期。 • 间日疟在前驱期相当于肝内期疟原虫发育，因原虫密度太低，镜 检多为阴性；发冷（寒战）期相当于红内期成熟裂殖体胀破红细 胞期，镜检多见裂殖体和环状体；发热期外周血中以环状体（小 滋养体）为主；出汗期因原虫密度太低，镜检多为阴性；发作后 数小时（h），间歇期外周血中以大滋养体为主，形态较易辩认， 为诊断的有利时机。发作36-48h，可检出裂殖体；发作1-2次后， 配子体出现较多。 • 恶性疟较理想的取血时间是在发作后20h内取血，初发患者退热 后常查不到原虫。
疟原虫镜下形态-2017想
薄血膜Pv大滋养体
感染的红细胞： 胀大，褪色，出 现形状大小相等、分布均匀、 数目较多、鲜红色的薛氏小点 虫体大小： 较大 胞浆： 不规则，浅蓝色，出现阿 米巴伪足，有空泡 核： 红色，一个 疟色素：有，细小杆状，黄褐色， 分布不均匀
疟原虫与其它物体的鉴别
水中原虫
水中原虫有时也可看到核、胞浆和空泡，与间日疟大滋养 相似。 鉴别：无疟色素，空泡多如网眼。
植物种子
鉴别：有很清晰的厚薄一致的边界，染色较深、无疟色素， 也看不到核，且有柄脱落时的痕迹。
鉴定疟原虫的五条原则
1、疟原虫要有核有浆（红核蓝浆）
2、疟原虫各期（除环状体外）均含有疟色素 3、疟原虫自然形态要像；疟原虫呈半透明状态，模糊一团不透 明者不是 4、体积最大的疟原虫也不能超过中性粒细胞大 5、数量极少，似是而非者判为可疑，应重新选择时机多次制片、 多次检查
薄血膜Pf成熟裂殖体
感染的红细胞：大小正常，颜 色较深，可见茂氏小点 虫体大小：较小 胞浆和核：裂殖子8-32个，通 常为8-18个， 排列不规则， 核红色，胞浆蓝色 疟色素：黑褐色，集中于中央 或一侧 注意：外周血一般不易见到！
薄血膜Pf雌（大）配子体
形状：新月形，两端稍尖 胞浆：深蓝色 核：一个，较小，致密，深红 色，位于中央，核周可见透 明不染色带 疟色素：黑褐色，密布于核的 周围 注意：一般在环状体出现后710天才出现，如果就诊的及 时，血片中一般见不到！
胞浆活泼
Pv早期大滋养体，薛氏点明显
厚血膜Pv 大滋养体
Pv R和T：红细胞胀大明显，2个环状体寄生 同一红细胞少见；中部2个大滋养体
疟原虫的镜下形态PPT课件
8
恶性疟原虫--环状体
环纤细,约为RBC直径的1/6，RBC不胀大 核1个，但2个常见，红细胞常含2个以上原虫
9
恶性疟环状体
• 被寄生的红细胞形态正常，
一个红细胞内有一个环状 体，另一个红细胞内有三 个环状体，其中一个环状 体贴于红细胞上缘。 （×800 ）
16
薄血膜恶性疟雌、雄配子体
• 雌配子体：半月形，两
端较尖；核小致密，位
于虫体上1/3部，色素围
于核周；胞浆深蓝色。
虫体外包有红细胞膜。
（×1250）
• 雄配子体：腊肠形，两
端钝圆；核大疏松，位
于虫体中部，色素围于
核周；胞浆淡红色。虫
体外包有红细胞膜。
（×800）
17
恶性疟厚薄血膜下环状体、配子 体
• 雄配子体：虫体已充满寄
生红细胞，核大疏松，几 乎占满左侧半个红细胞； 色素粗大，散在；红细胞 不胀大。 （×800 ）
33
三日疟厚血膜裂殖体，裂殖子6 个
34
卵形疟环状体、大滋养体
胞浆：浅蓝色。 核：一个，较大，疏松，
位于中央，浅红色， 周围有明显不着色带。 疟色素：黄褐色，散在 分布。
26
薄血膜 Pv T、S
1.被寄生的红细胞明显胀大，有薛氏点；滋养体胞浆有明显阿米巴样伪足。 （×1250） 2.核已分裂成7块，黄褐色色素渐趋集中；被寄生的红细胞明显胀大。 （×800） 3.核已分裂成18块，色素颗粒聚集成块状，位于虫体中部左下方，另一色素团块 呈斜条状，位于虫体左上部；被寄生的红细胞明显胀大，有薛氏点。其左上方为 一大滋养体。（×1250）
• 被寄生的红细胞不胀大，虫
疟原虫镜检技术
细胞计数(国际标准) 。
白细胞疟原虫计数法
●例如 计数200 WBC中有35个疟原虫，在不知患
者白细胞数的情况下，以每微升血8 000个白细 胞计数, 由此计算出每微升血液疟原虫密度为： 35（计数的疟原虫数）÷200（计数的白细胞）x 8000（每微升血白细胞数） =1400 / μl 答：该患者的疟原虫密度为1400 / μl。
2. 原虫细胞浆呈条带状或方形
3. 成熟裂殖体呈菊花状 4. 裂殖子数通常为6-12个 5. 齐氏点（西门氏点）较少见
卵形疟原虫形态特征
1. 被寄生红细胞正常大小或略涨大，边 缘呈彗星状也称齿轮状 2. 疟原虫通常呈椭圆形 3. 薛氏点与间日疟相似
4. 裂殖子数通常为6-12
● 四种人体疟原虫都有双核和多重感染现象
red cell
A typical Plasmodium malariae presentation
Female patient, arrived from Brazil two weeks previously. Flu like symptoms since arrival.
● 间日疟原虫分布于我国大部分地区, 中部 地区病例较多 ● 病程良性, 有复发
三日疟 P.malariae
●遍及热带和亚热带地区，特别是东、西非洲，呈片状、 块状分布 ●三日疟在我国非常少见，只在南方有散在报告
卵形疟 （蛋形疟） P.ovale
● 主要分布非洲。缅甸、东南亚有散在报告 ● 在我国卵形疟消灭
P. ovale
(P.m.)
(P.o.)
恶性疟 P.falciparum
● 分布热带、亚热带地区，是非洲的重要疾病 ● 我国流行区域为云南省和海南省 ● 四种疟原虫中致病力最强，无免疫力者 感染 后出现急性症状,不及时治疗可危及生命（脑 型疟）
疟原虫形态鉴别
1. 寄生的红细胞正常或缩小，有淡红色细小 的齐氏点（Ziemann’s）； 2.环状体中等大小，核较大，胞浆粗厚； 3.滋养体胞浆常呈带状，核呈条状，疟色素深 褐色，粗大常沿边缘分布； 4.裂殖体小于正常红细胞，核6～12个，常排 列成菊花状，疟色素常聚集于中央； 5.雌雄配子体小于正常红细胞，色素呈深褐色； 6.常可查见各阶段的疟原虫。
雌配子体
雄配子体
恶性疟原虫雌配子体
新月形，两端较尖 核致密，深红色， 常位于中央 疟色素黑褐色，分 布于核周围
恶性疟原虫雄配子体
腊肠形，两端钝圆 胞质色蓝而略带红 核疏松，淡红色，位于 中央 疟色素黑褐色，小杆状， 在核周围较多
厚血膜上四种疟原虫的形态
间日疟原虫 恶性疟原虫
厚血膜中四种人体疟原虫从主要鉴别要点
间日疟原虫 恶性疟原虫 三日疟原虫 卵形疟原虫
环状体
核较大，胞浆粗厚，常 有伪 虫体较大，胞浆呈阿米 巴运动，有薛氏点
核较小，常见2个核， 胞浆纤细 在末稍血不常见，虫体 呈不规整圆形，有黑色 疟色素团块
核粗大，胞浆常缩 成圆形，拥抱于核 周 虫体常呈带状，胞 浆蓝色深，疟色素 较多
⑵大滋养体(big trophozoite)
Pv大滋养体与成熟裂殖体
间日疟裂殖体
2.1
经40小时晚期滋养体发育成熟，虫 体变圆，空泡消失 核开始分裂又称裂殖体前期 未成熟裂殖体 （immature schizont） 色素聚集成团块
成熟裂殖体约有12－24个 细胞核 胞浆也随之分裂 受染RBC 胀大、颜色苍白、虫体几乎 充满红细胞
卵形疟原虫的主要形态特征
1. 寄生的红细胞正常或稍胀大，可呈卵圆形或边 缘呈锯齿（伞矢）状，薛氏点出现较早粗大，量多； 2. 环状体中等大小，核较大，胞浆粗厚； 3. 滋养体胞浆常呈圆形，空泡不明显，疟色素棕 黄色，粗大常沿边缘分布； 4. 裂殖体小于正常红细胞，核6～12个，常排列 不规则，疟色素常散在。 5. 雌雄配子体小于正常红细胞，色素呈深褐色； 6. 常可查见各阶段的疟原虫。
疟疾厚薄血膜的制做和染色方法
Wright染色法
总结词
Wright染色法是一种常用的疟疾血膜染色方法，能够较好地显示疟原虫的形态和 结构。
详细描述
Wright染色法使用Wright染料对血膜进行染色，能够清晰地显示出疟原虫的形 态和结构。该方法操作简便，染色效果较好，也是疟疾诊断中常用的染色方法之 一。
Field染色法
总结词
疟疾厚薄血膜的制做和染 色方法
• 引言 • 厚血膜的制作 • 薄血膜的制作 • 血膜的染色方法 • 厚薄血膜在疟疾诊断中的应用 • 结论
01
引言
疟疾的背景和重要性
疟疾是一种由疟原虫引起的传染病，主要通过蚊虫叮咬传播，严重威胁全球公共卫 生安全。
疟疾在热带和亚热带地区流行，特别是在非洲、东南亚和南美洲等地，对当地居民 的健康造成严重影响。
厚薄血膜技术适用于大规模的疟疾筛 查和流行病学调查，有助于及时发现 和遏制疟疾的传播。
02
厚血膜的制作
采集血液样本
01
02
03
采集时间
选择疟疾感染后2-5天， 此时疟原虫数量较多，便 于检测。
采集部位
通常从手指或耳垂采集， 也可从静脉采集。
采集量
一般需要采集50-100微升 血液。
制作厚血膜的过程
对未来研究和应用的建议
进一步优化厚薄血膜法的操作流程，提高其准确性和可 重复性。
加强培训和人员素质提升，提高检验人员的疟疾诊断能 力。
开展多中心临床研究，验证厚薄血膜法在疟疾诊断中的 价值，并与其他诊断方法进行比较。
推动厚薄血膜法的标准化和产业化，降低成本，使其更 适用于资源有限地区的疟疾防控工作。
取血
将采集的血液滴在洁净的 玻片上，形成一个小血滴。
疟原虫镜检技术培训手册
目录第一章疟原虫生活史一、概述二、人体内发育三、蚊体内的发育第二章疟原虫镜下形态一、薄血膜中疟原虫形态二、厚血膜中疟原虫形态第三章显微镜使用及维护一、显微镜的构造二、显微镜使用三、使用注意事项四、显微镜的维护保养第四章血片制作与染色一、血片制作二、血膜的染色第五章疟原虫镜检技术一、血液二、血液中各种正常细胞形态三、薄血膜镜检四、厚血膜镜检五、杂质与疟原虫的鉴别六、疟原虫计数附录：疟原虫图谱第一章疟原虫生活史一、概述疟原虫是疟疾的病原体。
疟原虫为单细胞真核生物，属原生动物亚界顶端复合物门、孢子纲、真球虫目、疟原虫科、疟原虫属。
人体疟原虫有4种：间日疟原虫（Plasmodium vivax）、恶性疟原虫(P.falciparum)、三日疟原虫(P.malariae)和卵形疟原虫(P.ovale)，依次引起间日疟、恶性疟、三日疟和卵形疟。
在我国间日疟较常见，恶性疟次之，但对人体危害较间日疟严重，三日疟偶尔发现，卵形疟已无病例报告。
4种人体疟原虫的生物学特征见表1-1。
疟原虫的发育和繁殖，必须通过脊椎动物与昆虫媒介两个宿主，人体疟原虫的宿主是人和按蚊。
疟原虫在人体分别寄生于肝实质细胞和血液中的红细胞内，在蚊体内则寄生于蚊胃，最后积聚于唾腺。
4种人体疟原虫的生活史基本相同，包括在人体内的红细胞外期和红细胞内期以及在蚊体内的配子生殖和孢子增殖两个阶段。
二、人体内发育疟原虫在人体内的发育分成肝细胞内的发育和红细胞内的发育两个阶段。
（一）红细胞外期按蚊吸人血时，按蚊唾腺中的子孢子随唾液进入人体的末梢血液中，在30分钟内，随血流进入肝脏，在肝实质细胞内发育，进行裂体增殖，此时期称红细胞外期（简称红外期）或肝细胞期（简称肝期），此时期的疟原虫称肝期裂殖体。
成熟肝期裂殖体直径为45～60 m，内含数以万计的肝期裂殖子。
肝期裂殖体成熟致使肝细胞破裂，肝期裂殖子释入血液。
不同种疟原虫的此期所需时间不同，从6～12天不等。
疟原虫的形态鉴别厚薄
人 体 疟原虫的基本结构
2. 核 即细胞核或染色质粒。在正常情况下核呈鲜红 色，呈圆形或不规则，结构致密，在个别发育阶 段较为疏松，例如间日疟原虫雄配子体的核。 3. 疟色素 颜色和颗粒的形状，因疟原虫种类而异。间日 疟原虫的色素颗粒呈短棒状，黄褐色；恶性疟原 虫的色素颗粒呈细砂状，黑褐色。
显微镜下疟原虫形态鉴别特征
广州市疾病预防控制中心 任文锋
薄血膜中常见的血液成分
中 性 白 细 胞
酸性球
血小板 红血球 淋巴球 大单核球
人 体 疟原虫的基本结构
疟原虫基本构造为细胞浆、核和疟色素。 1.细胞浆 被染成蔚蓝色或深蓝色，随着虫体发育长大，细 胞浆逐渐增多。间日疟原虫发育到大滋养体阶段， 胞浆呈阿米巴样活动，胞浆内有空泡。
间日疟原虫小滋养体 约为红细胞直径的1／3； 环较粗大；核1个；2个 核和一个红细胞寄生2个 环状体，不如恶性疟原 虫多见
恶性疟原虫小滋养体 约为红细胞的 1/6；环 纤细；核1~2个； 一个红细胞寄生2个环状 体的常见
薄血膜疟原虫形态
间日疟大滋养体(T) 红细胞：胀大褪色，出现形状大 小相等，分布均匀，数 目较多，鲜红色薛氏小 点。 大小：较大。 胞浆：不规则，浅兰色，出现阿 米巴伪足，有空泡。 核： 红色，一个。 色素：有，细小杆状，黄葛色， 分布不均匀。
间日疟原虫被寄生红 细胞 胀大色浅，薛氏点鲜 红色，细小，数多
恶性疟原虫被寄生红 细胞 大小正常，色稍紫； 茂氏点紫红色，粗大， 数少
薄血膜疟原虫形态
间日疟 环状体(R) 红血球：正常。 大小： 较大，约为红 细胞直径1/3。 胞浆： 环状，浅蓝色。 核： 红色，一个， 偶有二个。 色素： 没有。
疟原虫
3.再燃与复发
①再燃 recrudescence ：疟疾患者经过若干次发作后，由
于人体对疟原虫产生了免疫力或经不彻底的药物治疗，大部分 红内期疟原虫被消灭，不再出现临床发作症状，但在血中仍残 存极少量疟原虫。经过一段时间后，这部分残存疟原虫重新繁 殖，血中疟原虫数达到发热阈值并出现临床发作症状
（四种疟原虫均有）
2.疟疾发作：三连续阶段持续约6 ~ 10小时
寒战期：畏寒、口唇青紫、面色苍白 高热期：体温上升可达40-41℃，脉150次/分钟 出汗退热期：体温下降、大汗、嗜睡 、恢复正常
① 机理：
发热阈值：P.v （间日） 10-500/ µl
P.f （恶性） 500-1300/ µl
裂殖子
红内期裂殖子胀破红细胞
在媒介按蚊体内 子孢子 (sporozoite)
卵囊 (oocyst)
动合子 (ookinete)
休眠子
在人体内发育 (肝细胞)
(hypnozoite) 裂殖体
(schizont)
(红细胞外期) (exo-erythrocytic stage)
裂殖子 (merozoite)
环状体
(ringform)
2. 切断传播途径
3.保护健康人群
4.坚持疟疾监测复习思考题来自1、简述疟原虫的生活史和其红内期各期的主要 形态特征。 2、简述疟疾的发作机理？什么是再燃、复发？ 3、简述疟疾患者贫血的机理及其免疫特点。 4、疟原虫的实验诊断方法有哪些？ 5、输血能传播疟疾吗？为什么？
子孢子
（10-15um长、约1um宽，染 色后可以清楚地看到核。放 大1000倍。）
(1) 传染源： 疟疾患者和带虫者＋感染血
(2) 传播途径：雌按蚊叮咬
疟原虫血涂片及形态识别
二、疟原虫各期的形态特点：
间日疟原虫大滋养体
间日疟原虫大滋养体：
薛氏点 疟色素
模式图
返回
实物照片
间日疟原虫早期裂殖体
恶性疟原虫环状体
间日疟原虫成熟裂殖体
间日疟原虫雄配子体
间日疟原虫雌配子体：
模式图
返回
实物照片
间日疟原虫雌配子体
恶性疟原虫雌配子体
恶性疟原虫雄配子体
间日疟原虫环状体
.
一、疟原虫血涂片：
1、薄血膜血涂片：指血膜制备应薄些，其他制备要求 同一般血涂片。涂片在显微镜下红细胞应不重叠，这 有利于观察红细胞内疟原虫一大滴，滴于玻片上，以推片的 一角，将血滴自内向外做螺形摊开，使之成为直径约1cm 大小、厚薄均匀的厚血膜。待厚血膜完全干后，（如再用 火焰固定有助于细胞粘在玻片上），加2-3滴蒸馏水在厚血 膜上使红细胞溶解，待血膜呈灰白色时，去掉血膜上的水， 血膜干后进行瑞氏染色，并在油镜下观察。厚片法疟原虫 的检出率比薄片法高，但由于厚片中疟原虫结构不清楚而 易误认为杂质，环转体也不易观察到，所以对于经验不足 的检验人员来说厚片法也很容易漏诊。
显微镜下疟原虫形态鉴别特征
02 显微镜检查方法
薄血膜法
01
02
03
制备薄血膜
取患者耳垂或指尖血制成 薄血பைடு நூலகம்，待其自然干燥后， 用甲醇固定，再用水冲洗。
镜检
在显微镜下观察薄血膜， 可见到红细胞内不同发育 阶段的疟原虫，如环状体、 滋养体、裂殖体等。
优缺点
薄血膜法能清晰显示疟原 虫形态，但操作繁琐，且 易漏检。
厚血膜法
制备厚血膜
生物学特性及生活史
疟原虫的生活史包括红细胞外期和红细胞内期两个阶段，其中红细胞外期主要在肝 脏中进行，红细胞内期则在红细胞中进行。
疟原虫通过蚊虫叮咬传播，进入人体后首先进入肝脏进行繁殖，然后侵入红细胞进 行裂体增殖，最后导致红细胞破裂并释放出裂殖子和代谢产物。
疟原虫具有变形能力，可以在红细胞内形成不同形态的虫体，如环状体、滋养体、 裂殖体等。
将患者血液滴在载玻片上， 用推片制成厚薄均匀的血膜 ，待其自然干燥后，用溶血 剂溶解红细胞。
镜检
在显微镜下观察厚血膜， 可见到被溶解红细胞后释 放出的疟原虫。
优缺点
厚血膜法操作简便，检出 率高，但疟原虫形态不够 清晰。
荧光抗体染色技术
荧光抗体标记
将特异性荧光抗体与疟原虫表面 抗原结合，形成荧光标记的复合
05 显微镜下鉴别诊断技巧与 注意事项
鉴别诊断流程梳理
样本制备
确保样本薄而均匀，避 免过厚导致重叠影像，
影响观察。
显微镜选择
使用高倍显微镜，确保 足够放大倍数以观察疟
原虫细节。
观察步骤
先观察整体形态，再注 意细胞核、细胞质等关
键部位特征。
鉴别诊断
结合其他相似病原体特 征进行比较，排除干扰
【2018年整理】厚薄血膜法得查疟原虫
厚、薄血膜法查疟原虫大体原理：疟原虫寄生于红细胞，经制片、染色后，显微镜下能够辨别疟原虫的虫种和虫期。
试剂器材：75%酒精棉球、采血针、载玻片、甲醇、~ PBS缓冲液、姬氏染液（或瑞氏染液）、显微镜等。
操作方式：(1)采血：①采血时刻在普查时，一样无法考虑采血时刻。
在临床上，对现症病人一样可随时采血，但为了提高检出率，就应当考虑采血的适那时刻。
对典型发作的间日疟及三日疟患者，应选择发作后数小时至10余小时采血为宜。
现在疟原虫发育至环状体乃至大滋养体，虫体大，疟色素已形成，受染红细胞也显现转变，有利于疟原虫的检出。
恶性疟原虫大滋养体和裂殖体是在皮下、脂肪和内脏微血管中发育的，通常在外周血液中不易查到，配子体在环状体显现1周后方能见于外周血液，故在发作时采血。
②采血部位从患者耳垂或指尖（以左手无名指为宜）取血，婴儿通常从大姆趾第二趾骨腹面针刺采血。
③采血方式用75%乙醇棉球消毒取血部位皮肤，待干后用左手拇指和食指捏住采血部位，右手持针迅速刺入皮肤，待血液流出或轻轻挤出血滴，供制作涂片用，采血完毕用干棉球轻压伤口止血。
(2)制片：①薄血膜的制作取1滴血于1张干净的载玻片上，选1张边缘平整、滑腻的载玻片作推片，用左手拇指和中指夹持其两头，将推片的边缘中点与血滴接触，并与载玻片呈30o~45o夹角，待血滴沿推片边缘向双侧展开后，当即由右向左迅速推成薄血膜。
理想的薄血膜要求红细胞均匀地铺成一层，无裂痕，其结尾凸出呈舌尖形。
注意：推片时使劲和速度要均匀，不能半途停顿或重复推片，以避免造成血膜断裂或厚薄不匀。
如取血量多，夹角宜小；取血量小，那么夹角可大些。
②厚血膜的制作用推片的一角接触刺血点上的血滴，取血2滴，置载玻片上，并从里向外作旋转涂布，使成直径为大小的圆形血膜，厚薄要均匀，然后平置桌上，待自然干燥。
③厚薄血膜同片制作用目测法将载玻片从右到左等分成6格，厚血膜涂在第3格中央，薄血膜涂在第4格前缘至第6格中部，第1、2格可用于贴标签，制作厚、薄血膜方式同上。
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直径1/5~1/6。 胞浆： 兰色，环状纤细，
有时位于红细胞的 边缘。常见多个同 寄生一红细胞现象。 核： 红色一个,常有二个。 色素： 没有。
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薄血膜疟原虫形态
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人 体 疟原虫的基本结构
2. 核 即细胞核或染色质粒。在正常情况下核呈鲜红
色，呈圆形或不规则，结构致密，在个别发育阶 段较为疏松，例如间日疟原虫雄配子体的核。
3. 疟色素 颜色和颗粒的形状，因疟原虫种类而异。间日
疟原虫的色素颗粒呈短棒状，黄褐色；恶性疟原 虫的色素颗粒呈细砂状，黑褐色。
恶性疟环状体(R)
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薄血膜中小滋养体形态特征
间日疟原虫小滋养体
约为红细胞直径的1／3； 环较粗大；核1个；2个 核和一个红细胞寄生2个 环状体，不如恶性疟原 虫多见
恶性疟原虫小滋养体
约为红细胞的 1/6；环 纤细；核1~2个；
一个红细胞寄生2个环状 体的常见
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人 体 疟原虫的基本结构
3. 被寄生的红细胞 被间日疟原虫寄生的红细胞胀大、颜色变淡。
疟原虫发育至阿米巴样体，红细胞出现薛氏点 (Schuffner's dots)。 被恶性疟原虫寄生的红细 胞大小正常或稍微缩小，红细胞上有时见到茂氏 点(Maurer's dots)。
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显微镜下疟原虫形态鉴别特征
广州市疾病预防控制中心 任文锋
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1
薄血膜中常见的血液成分
中
酸性球
性
白
细
胞
血小板 大单核球
淋巴球
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红血球
2
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3
人 体 疟原虫的基本结构
疟原虫基本构造为细胞浆、核和疟色素。 1.细胞浆 被染成蔚蓝色或深蓝色，随着虫体发育长大，细
胞浆逐渐增多。间日疟原虫发育到大滋养体阶段， 胞浆呈阿米巴样活动，胞浆内有空泡。
色素： 黑褐色，疏松地分
布于核周围。
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薄血膜中大（雌）配子体 形态特征
间日疟原虫雌配子体
小于正常红细胞，圆 形；核小，致密，深 红色，偏于一侧，胞 浆深蓝色；疟色素散 在
恶性疟原虫雌配子体
新月型，两端较尖； 核小，致密，深红色， 位于中央；胞浆深蓝 色；疟色素块围于核 周
间 日 疟 未 成 熟 裂 殖 体
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薄血膜疟原虫形态
恶性疟未成熟裂殖体
红细胞：大小正常，颜色较深，可 有茂氏小点。
大小： 较小。 胞浆： 规则，圆形或卵圆形，兰
色。 核： 分裂为二个以上，红色。 色素： 黄褐色颗粒，常集成黑褐
色团块。
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薄血膜中裂殖体前期形态特征
间日疟原虫裂殖体(S) 恶性疟原虫裂殖体前
形状大小：新月形，两端稍尖。
胞浆： 深兰色。
核：
一个，较小，致密，
深红色位于中央，
核周可见透明不染
色带。
色素： 黑褐色，密布于核
的周围
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薄血膜疟原虫形态
恶性疟小（雄）配子体
形状大小：腊肠形，两端钝圆。
胞浆： 浅兰色或淡紫红色。
核：
一个，较大，疏松，
位于中央，浅红色，
核周可见不染色带。
大于正常红细胞；裂 殖子12~24个，通 常16个，排列不规 则；疟色素常集于一 侧，黄褐色
恶性疟原虫裂殖体
小于正常红细胞；裂 殖子较小，8~36个， 排列不规则；疟色素 成团快状，黑褐色
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薄血膜疟原虫形态
间日疟大（雌）配子体
形状大小：圆或椭圆，较大。
胞浆： 深兰色。
核：
一个，较小，深红色常
偏于一边，核周可见
明显不染色带。
色素： 黄褐色，均匀散在，数
目较多。
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间日疟原虫形态
间日疟小（雄）配子体
形状大小：圆形，虫体较小。
胞浆： 浅兰色。
核：
一个，较大，疏松，
位于中央，浅红色，
周围有明显不着色
带。
色素： 黄褐色，散在分布。
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薄血膜疟原虫形态
恶性疟大（雌）配子体
前期
期
圆形或不规则；核分 裂为2个以上，空泡 消失；疟色素分布不 匀
圆形，核分裂为2个 以上；疟色素集成团 快
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薄血膜疟原虫形态
间日疟成熟裂殖体 红细胞：胀大，褪色，可见薛氏
小点。 大小： 个体较大。 胞浆和核：裂殖子12~24个平均
16个，排列不规则， 核红色，胞浆浅兰色。 色素： 黄褐色常集于疟原虫的一 边。
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薄血膜疟原虫形态
恶性疟大滋养体 红细胞：大小正常，颜色较深，可出现较
粗、大小不一、分布不匀、数目较少 红色茂氏小点。 大小：较小。 胞浆：兰色，圆形，坚实，体积小。 核：一个，红色。 色素：较细的黑褐色颗粒，常集成块。
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薄血膜中大滋养体形态特征
间日疟原虫大滋养体
虫体不规则，较大； 阿米巴样空泡明显； 疟色素细小，黄褐色
薄血膜疟原虫形态
间日疟大滋养体(T) 红细胞：胀大褪色，出现形状大
小相等，分布均匀，数 目较多，鲜红色薛氏小 点。 大小：较大。 胞浆：不规则，浅兰色，出现阿 米巴伪足，有空泡。 核： 红色，一个。 色素：有，细小杆状，黄葛色， 分布不均匀。
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薄血膜疟原虫形态
间 日 疟 大 滋 养 体
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薄血膜疟原虫形态
恶性疟成熟裂殖体 红细胞： 大小正常，颜色较深，
可见茂氏小点。 大小： 虫体较小。 胞浆和核：裂殖子8~36个平
均18~24个，排列 不规则或呈二重排列， 核红色胞浆兰色。 色素： 黑褐色，集中于中央 或一侧。
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薄血膜中成熟裂殖体形态特征
间日疟原虫裂殖体
恶性疟原虫大滋养体
体小，圆形；空泡小； 早期疟色素细小，金 黄色，晚期结成块状， 黑褐色
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薄血膜疟原虫形态
间日疟未成熟裂殖体
红细胞：胀大，褪色，可有薛氏 小点。
胞浆：较不规则，空泡小或消失， 浅兰色。
核： 红色，分裂为二个以上。 色素：黄褐色，分布不均匀。
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薄血膜疟原虫形态
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薄血膜中被疟原虫寄生红血球 形态特征
间日疟原虫被寄生红 细胞
胀大色浅，薛氏点鲜 红色，细小，数多
恶性疟原虫被寄生红 细胞
大小正常，色稍紫； 茂氏点紫红色，粗大， 数少
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7
薄血膜疟原虫形态
间日疟 环状体(R) 红血球：正常。 大小： 较大，约为红
细胞直径1/3。 胞浆： 环状，浅蓝色。 核： 红色，一个，