水质微生物的检测
实验室中水质微生物的检测与管理
实验室中水质微生物的检测与管理摘要：水是人类赖以生存的，所以确保水质安全是异常重要的。
我国对对水质微生物样品检测要求也不断加深，本文作者结合工作经验，详细阐述了对微生物实验室样品检测与管理的流程及相关环节。
关键词：水质;微生物;检测;样品采集;1、样品的采集一般情况下,为保证水样采集,采集的水质监测样品必须有代表性,同一水源、统一时间采集几类检测指标的水样时,应先采集供微生物学指标检测的水样。
采样时应直接采集,不得用水样涮洗已灭菌的采样瓶,并避免手指和其他物品对瓶口的沾污。
首先水质监测微生物实验室先备齐采集微生物样品的无菌采样玻璃瓶,通常情况下采样瓶需经过180℃高温干热灭菌两小时的灭菌消毒处理。
采样时不可搅动水底的沉积物。
水源水采样点通常应选择汲水处。
表层水采集应该在河流、湖泊可以直接汲水的场合。
采样时注意不能混入漂浮于水面上的物质。
若采集湖泊、水库等具有一定深度的水样时,可用直立式采样器。
出厂水的采集点应设在出厂进入输送管道以前处。
管网水的采集应注意采样时间。
夜间可能析出可沉渍于管道的附着物,取样时应打开水龙头放水数分钟,排出沉积物。
采集用于微生物学指标检验的样品前应对水龙头进行消毒。
不同的生物检测项目,需要不同的采样方法。
二次供水的采集应包括水箱(或蓄水池)进水、出水以及末梢水。
采集出厂水、管网水水样时, 250 ml采样瓶内应提前加0·5 gNa2S2O3灭菌。
自来水采样应采用无菌操作的取样,方法为用火焰在龙头表面烧灼片刻(3~5 s)或用75%酒精对其表面进行擦拭消毒,然后放水5~10 min,无菌操作采集自来水(手不要接触到无菌瓶口和瓶塞)。
井水采样也需要无菌操作来取样,方法为将取水桶洗干净放入井中数分钟(3-5 min),尽量不取表面水,提水后将水灌入无菌瓶中(手不要接触到无菌瓶口和瓶塞,新井要3个月后采样送检)。
采样完成后应填好现场采样记录表,注明水样编号、采样者、日期、时间及地点等相关信息。
水质微生物检测
第二节饮用水种类及卫生微生物指标
一、饮用水分类 1、生活饮用水：供人生活的饮水和生活用水 2、包装饮用水： • 饮用天然矿泉水 • 饮用天然泉水 • 其他天然饮用水 • 饮用纯净水 • 饮用矿物质水 • 其他包装饮用水
二、饮用水介绍
（一）、生活饮用水 • 新发布的产品标准 GB5749-2006 • 标准检验方法为 GB/T5750-2006 • 水质检验项目由原35项增加至106项，旧标准微生
0 MPN/100mL
0 CFU//250mL 0 CFU//250mL 0 CFU//50mL
各类水质的微生物指标要求(续)
瓶 装 饮 用 纯 净 GB17324 － 水卫生标准 1998
菌落总数 ≤ 大肠菌群 ≤
霉菌和酵母 ≤
致病菌（沙门氏菌、
志贺氏菌、金黄色葡萄
球菌）
瓶（桶）装饮用 GB19298 － 水卫生标准 2003
• PH：水中微生物适宜范围是pH6.5～8.5，这与一般自然水 的pH值范围相适应。 海水的pH7.5～8.5，海水中多数微生 物生长的最适pH7.2～7.6；
• 化学物质：有机物，无机物：氨、硝酸盐、磷酸盐、硫酸 盐、碳酸盐，金属离子：汞、铜；
• 营养物质：异养微生物，营养贫乏时，微生物倾向吸附颗 粒。
第三节生活饮用水微生物检测
一、水样中微生物项目检测方法 GB/T 5750.12
1 菌落总数
1 平皿计数法
2 总大肠菌群大肠菌群
1 多管发酵法
2 滤膜法
4大肠埃希氏菌
二、水微生物的种类
• 水微生物的种类很多，有细菌、真菌、病毒、藻 类和原生动物；
• 水中大多数微生物属于异养微生物，它能利用水 中有机物质生长，另一类为自养微生物，它只需 无机物质就能合成新的细胞。
饮用水水质微生物检测方法有哪些
饮用水水质微生物检测方法有哪些处于可持续发展战略时代背景下，社会各界人士都对自然环境水资源问题提出了极高重视，饮用水安全关系到群众生活质量与生命安全，这就凸显出饮用水水质微生物检测工作重要性以及紧迫性。
饮用水作为广大群众生活中不可缺少的部分，伴随着我国工业化进程的飞速发展，在提升居民物质生活水平的同时，一定程度上也对饮用水水源质量造成的了极大影响，鉴于演变为Ⅴ类的水质，更不能当作饮用水继续使用。
分析饮用水水质污染问题，主要就是水质中存在大量微生物造成的。
科学技术带动下行业内持续推出现代化饮用水水质微生物检测方法，对提高水源质量做出了重要贡献。
一、饮用水水质中主要存在的微生物类型分析为合理利用饮用水水质微生物检测方法，前提需要明确具体微生物类型，不同类型的病原微生物所应用的检测方法存在较大差异，接下来将对饮用水水质微生物类型加以分析。
1.细菌针对饮用水水质中常见病原微生物，其中主要以细菌最为严重。
通过行业人士多年以来的研究观察，军团菌是细菌病原微生物中出现频率最高的部分，鉴于自然条件下的军团菌，不仅表现出了自由选择环境的特点，而且也能够存活较长周期，像区域内有着丰富水资源的环境，都是军团菌优先考虑的生存地，在对群众健康构成巨大影响的基础上，着重集中在肺部位置。
居民大量饮用含有军团菌的饮用水，长此以往，会加剧肺炎病症出现几率与严重性；另外还有大肠杆菌。
体现出病原特性的大肠杆菌水中致病菌，会造成饮用者不同程度腹泻现象，更会造成少量群众死亡。
目前来看，行业人士在开展饮用水水质微生物检测时，主要以容易检测的大肠杆菌为主，也是评价水质是否安全的重点指标之一；在饮用水水质中还存在着鸟分枝杆菌，依托于复合群存在的细菌会严重影响个体肺部健康，如果不能及时处理还会造成其他身体部位遭受感染。
与此同时，还会出现在管道壁上的鸟分枝杆菌群落，构成一层生物膜的基础上，会对饮用水管道构成反复污染的现象。
2.病毒涵盖肠道病毒、肠炎病毒等在内的病毒微生物，其中分析常见的肠道病素，通常以自然水源作为居住场所，虽然当前社会上推出了一系列现代化水处理设备，但是不可避免的还会出现很多肠道细菌；面对干净卫生的饮用水水源，当受到生物粪便污染后就会形成肠炎病毒，特别是处于妊娠期的女性群体，极易受到其威胁；作为有着较大分布范围的轮状病毒，针对身体抵抗能力较差的婴幼儿群体会严重影响其身体健康，甚至也是构成死亡危险的根本原因。
平板菌落计数法水中微生物的检测
2、由于细菌易吸附玻璃器皿表面，菌液加入后应 尽快倒培养基，立即摇匀；
3、倾注平板时的培养基温度冷却至45℃左右。 4、计数时，30―300个菌落的稀释度计算每毫升
的菌数最为合适 5、同一稀释度的三个重复的菌数不能相差很悬殊
菌落计数方法及原则：
1）若只有一个稀释度的平均菌落数在30-300范围 时，则将该菌落数乘以稀释倍数报告之。
2）若有两个稀释度，其生长的菌落数均在 30~300之间，则视二者之比值来决定，若 其比值小于2应报告两者的平均数。若大于 或等于2则报告其中较小的菌落总数。
3）若所有稀释度的平均菌落数均大于300， 则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释 倍数报告之
水中细菌总数的测定
——平板菌落计数法
一、细菌总数测定的意义
水中细菌总数往往同水中有机物污染的程度呈 正相关，它是评价水质污染程度重要指标之一
细菌总数：指水样在一定条件下培养后，1mL水样 所含菌落的总数。
我国生活饮用水标准（GB5749-85）规定，细 菌总数不得超过100个/ml
含细菌10-100个/ml的水体为极清洁
代表性：多采几个部位，液体样品需经过震摇，以 获得均匀稀释液。
2 水样的10倍稀释
第一步 稀释 水样 第二步： 接种平板
注意：稀释 度的选择
平板混合分离法： 将菌液分离样品摇匀，用无菌移液管取1 ml的
菌液移至无菌培养皿中，然后将融化，凉至45℃ 左右的培养基，在每个培养皿内各倒入约15 ml， 摇匀，凝固，制成平板。
4）若所有稀释度的平均菌落数均小于30， 则应以按稀释度最低的平均菌落数乘以稀 释倍数报告之
水中微生物的测定-国标法(水质检测)
水中微生物的测定-国标法(水质检测)
摘要
本文介绍了水中微生物的测定方法，以国家标准法为基础。
水中微生物的测定是水质检测的重要环节，可以评估水的卫生状况，以及相关的环境健康风险。
引言
水是人类生活中必不可少的资源，保证水质安全对于人类健康至关重要。
水中微生物作为一种主要的水质指标，可以反映水中存在的微生物污染程度。
因此，精确测定水中微生物的数量是进行水质检测的基本要求之一。
国标法测定方法
样品收集与处理
1. 确定采样点及采样时间，避免样品受到外界干扰。
2. 使用干燥及密闭的收集水样，并尽量防止样品受到氧气、光照和高温的影响。
3. 避免采样与外界环境接触，以防止二次污染的发生。
样品制备与预处理
1. 根据国家标准法的要求，将收集的水样进行适当的稀释，使其微生物数量在可测量的范围内。
2. 使用适当的培养基进行预处理，以促进微生物的生长。
微生物测定方法
1. 平板计数法：将经稀释处理的水样均匀地分布在培养基上，通过培养基固化后，计数形成的菌落数量，并据此推算出水样中微生物的浓度。
2. 膜过滤法：通过将水样通过细孔滤膜，然后将膜过滤板放置在含培养基的平板上，根据过滤后膜上菌落的数量计算水样中微生物的浓度。
结论
本文介绍了水中微生物的测定方法，基于国家标准法。
这些测定方法可以用于水质检测，评估水的卫生状况，以及相关的环境健康风险。
采样、制备和处理样品的正确操作，以及准确的测定方法选择，对于保证测定结果的可靠性至关重要。
饮用水微生物学指标
饮用水微生物学指标
饮用水微生物学指标是衡量饮用水质量的重要参数之一。
这些指标包括总大肠菌群、大肠杆菌和菌落总数等方面，它们可以反映饮用水中是否存在病原微生物的污染，以及水体的清洁程度和污染程度。
一、总大肠菌群
总大肠菌群是饮用水中最常见的微生物指标之一。
它是一类常见的肠道细菌，包括大肠杆菌和其他相关菌群。
总大肠菌群的检测可以间接反映饮用水中是否存在病原微生物的污染。
这些细菌通常来自动物的粪便，如果饮用水中出现总大肠菌群超标，往往意味着水源受到了污染。
二、大肠杆菌
大肠杆菌是一类常见的肠道细菌，其存在通常意味着饮用水中存在粪便污染。
大肠杆菌的检测是评估水源是否受到病原微生物的污染的重要手段。
在饮用水中出现大肠杆菌超标时，通常意味着水体中存在其他更危险的病原微生物，如霍乱弧菌、沙门氏菌等。
因此，大肠杆菌的检测也是保障饮用水安全的重要措施之一。
三、菌落总数
水中菌落总数可以作为评价水质清洁程度和考核净化效果的指标。
水中细菌总数与水体受有机物污染的程度成正相关，常作为评价水体污染程度的一个重要指标。
菌落总数反映了水体中细菌的总数量，可以用来判断水体中是否存在污染源，以及污染的程度和类型。
如果菌落总数超标，往往意味着水体中存在大量的有机物污染，需要采取相应的净化措施来保障饮用水安全。
总之，饮用水微生物学指标是保障饮用水安全的重要措施之一。
通过对这些指标的监测和分析，可以及时发现和解决饮用水安全隐患，保障人民群众的健康和生命安全。
水质微生物的检测
精心整理设为首页加入收藏联系站长首页食品资讯政策法规生产技术质量管理检验技术仪器设备食品标准资料中心食品图库食品人才食品安全食品课堂专业英语食品专题食品网刊食品网址食品百科个人空间食品论坛定，生活饮用水中大肠菌群每升不得超过3个。
在某些情况下，水体中的细菌总数也可指示水体受粪便等污染物污染的情况。
这里的细菌总数其实是指营养琼脂培养后形成的菌落总数。
目前世界各国对于控制饮用水的卫生质量，除采用大肠菌群等指标外，一般还采用细菌总数这个指标。
我国GB5749-85《中华人民共和国国家标准生活饮用水卫生标准》中规定生活饮用水细菌总数每毫升不得超过100个。
二、水质微生物检验方法GB5750-85《中华人民共和国国家标准生活饮用水标准检验法》提供了水质中细菌总数和总大肠菌群的检测方法。
（一）细菌总数的检测：国家标准中，细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中，于37℃经24h培养后，所生长的细菌菌落的总数。
对生活饮用水，直接吸取1ml水样于平皿中，加入营养琼脂后混匀，37℃培养24h，进行计数。
对水源水，根据情况对样品进行10倍梯度稀释，选择适宜稀释液1ml，加注平皿，营养琼脂混匀，37℃培养24h，进行计数。
37℃生长时能度，120.1ml接种10三、说明：1100个，因此可以直接吸取1毫升到平板进行培养。
2．培养时间。
与食品中菌落计数不同，测定水中细菌总数，培养时间采用24h。
3．总大肠菌群的测定方法，由于饮用水和水源水可能的污染程度不同，因此采用不同的接种量，检数表也不相同。
4．当接种量超过1毫升时，一般采用多倍浓度培养液。
如配制3倍浓缩乳糖蛋白胨培养液50mL，加入100mL 水样后，总体积为150mL，培养液恢复到正常浓度。
5．滤膜法检测总大肠菌群，一般在检测较大量低浊度水样时采用，大量水样滤过滤膜后，水中所含有的所有细菌均截留在滤膜上。
水质菌落总数检测方法
水质菌落总数检测方法一、引言水质菌落总数是评估水体卫生质量的重要指标之一，它能够反映水体中细菌的数量，进而判断水质是否合格。
因此，准确测定水质菌落总数对于保障水源安全、防止水传播疾病具有重要意义。
1. 培养法培养法是目前最常用的水质菌落总数检测方法之一。
其基本原理是将水样涂布在含有营养物质的琼脂平板上，然后在适宜的温度下培养一定时间，观察并计数菌落的数量。
这种方法简单易行，可以检测各种类型的细菌，但需要较长的时间，通常需要24-48小时才能得到结果。
2. 膜过滤法膜过滤法是一种快速测定水质菌落总数的方法。
其原理是将水样通过一块细孔膜滤膜，过滤掉水中的微生物，然后将滤膜放置在含有营养物质的琼脂平板上进行培养。
菌落在滤膜上生长并形成可见的斑点，通过计数斑点的数量来测定水质菌落总数。
相比于培养法，膜过滤法缩短了检测时间，通常只需要6-12小时即可得到结果。
3. 流式细胞仪法流式细胞仪法是一种高效准确的水质菌落总数检测方法。
它利用光散射和荧光染色技术，将水样中的微生物分为不同的群体并进行计数。
流式细胞仪能够快速检测大量样品，并提供详细的菌落分布数据，具有高灵敏度和准确性。
但是，流式细胞仪法的设备较为昂贵，需要专业操作人员进行操作。
4. PCR法PCR法是一种基于DNA扩增的水质菌落总数检测方法。
它利用特定的引物和酶，在聚合酶链反应的条件下，扩增水样中细菌的DNA片段。
通过测定扩增产物的数量，可以间接测定水质菌落总数。
PCR 法具有高灵敏度和高特异性，并且可以快速得到结果，但需要专业的实验室设备和技术支持。
三、不同方法的优缺点比较1. 培养法的优点是操作简单，可以检测不同种类的细菌。
缺点是需要较长时间，无法实时监测水质。
2. 膜过滤法的优点是快速，可以在较短时间内得到结果。
缺点是只能检测活菌，对于耐热菌等特殊菌种的检测效果较差。
3. 流式细胞仪法的优点是高效准确，可以实时监测水质。
缺点是设备昂贵，需要专业操作人员。
水质微生物检测
不同稀释度的平均菌落数
10-2 164 295 271 30 1650 11 305 0 10-3 20 46 60 8 513 5 12 0
两个稀释度 菌落数之比
—— 1.6 2.2 2 —— —— —— ——
菌落总数/ （CFU/mL）
16400 37750 27100 1500 513000 270 30500 < l×l0
第十二章 水质微生物检测
第一节 水中微生物
一、水生境的特征 影响水中微生物分布类群的主要因素： 温度 静水压 光照 溶解氧 氢离子强度 化学物质 营养物质
• 光照：日光中紫外线射入水中强度明显减弱，具有光合作 用的微生物和藻类主要分布在水的表层； • 溶解氧：水中的需氧微生物利用溶解氧，水体表层主要是 需氧和兼性需氧微生物，深层和水底以厌氧微生物为主； • PH：水中微生物适宜范围是pH6.5～8.5，这与一般自然 水的pH值范围相适应。 海水的pH7.5～8.5，海水中多数 微生物生长的最适pH7.2～7.6； • 化学物质：有机物，无机物：氨、硝酸盐、磷酸盐、硫酸 盐、碳酸盐，金属离子：汞、铜； • 营养物质：异养微生物，营养贫乏时，微生物倾向吸附颗 粒。
50 cfu/mL 3 MPN/100mL 10 cfu/mL 10 cfu/mL 不得检出
10000 个/L 2000 个/L
第三节生活饮用水微生物检测
一、水样中微生物项目检测方法 GB/T 5750.12
1 菌落总数 2 总大肠菌群
1 平皿计数法 1 多管发酵法 2 滤膜法
3 酶底物法
3 耐热大肠菌群 4大肠埃希氏菌
四、各类水质的微生物指标要求
标准名称 生活饮用水 卫生标准 标准号 GB5749-2006 细菌学项目 菌落总数 总大肠菌群 耐热大肠菌群 大肠埃希氏菌 贾第鞭毛虫 隐孢子虫 细菌总数 总大肠菌群 粪大肠菌群 大肠菌群 粪链球菌 铜绿假单胞菌 产气荚膜梭菌 限量 100cfu/ml 不得检出， MPN/100mL； cfu/100mL 不得检出， MPN/100mL； cfu/100mL 不得检出， MPN/100mL； cfu/100mL <1 （个/10L） <1 （个/10L） 100（cfu/ml） 每 100ml 水样中不得检出 每 100ml 水样中不得检出 0 MPN/100mL 0 CFU//250mL 0 CFU//250mL 0 CFU//50mL
水质大肠杆菌检测方法
水质大肠杆菌检测方法水质大肠杆菌是一种常见的水污染指标微生物，其存在表明水体可能受到了粪便或污水的污染。
因此，对于饮用水、游泳水、工业用水等不同用途的水体，检测水质中大肠杆菌的含量具有重要意义。
本文将介绍几种常用的水质大肠杆菌检测方法，以供参考。
一、培养基法。
培养基法是一种常见的大肠杆菌检测方法，其基本原理是将水样在含有大肠杆菌生长所需营养物质的培养基上培养，然后观察培养基上是否有大肠杆菌的生长。
这种方法操作简单，成本较低，但需要一定的培养时间，通常需要24-48小时才能得到结果。
此外，培养基法对于大肠杆菌的特异性较差，可能会同时检测出其他肠道菌群。
二、膜过滤法。
膜过滤法是一种常用的水质微生物检测方法，其原理是将水样通过微孔膜过滤，然后将膜放置在含有营养物质的培养基上进行培养。
通过计数膜上的大肠杆菌落，可以得到水样中大肠杆菌的数量。
这种方法操作简便，结果准确，而且可以检测到低浓度的大肠杆菌。
但是，膜过滤法需要一定的实验室设备和技术支持。
三、分子生物学方法。
随着分子生物学技术的发展，PCR（聚合酶链式反应）和实时荧光定量PCR等分子生物学方法也被应用于水质大肠杆菌检测中。
这些方法具有高度的特异性和灵敏度，可以快速准确地检测出水样中的大肠杆菌。
此外，分子生物学方法还可以对大肠杆菌进行分子鉴定和基因分析，为进一步研究提供了有力的支持。
然而，分子生物学方法需要相对复杂的实验操作和昂贵的设备，对操作人员的技术要求也较高。
综上所述，针对水质大肠杆菌的检测，可以根据实际情况选择合适的方法。
培养基法操作简单，成本低，适合于一般的水质监测；膜过滤法准确性高，可以检测低浓度的大肠杆菌；而分子生物学方法则具有高度的特异性和灵敏度，适合于对水质中微生物的深入研究。
在实际应用中，可以根据需求和条件选择合适的检测方法，以保障水质安全和生态环境的健康。
水质微生物检测
免疫学方法
利用特异性抗体进行检测，具 有较高的特异性和灵敏度，是 未来发展的重要方向。
生物传感器技术
生物传感器技术可实现快速、 连续的检测，具有广阔的应用 前景。
自动化与智能化
通过自动化和智能化技术，可 提高检测效率，减少人为误差
。
未来研究方向与趋势
新型检测方法的研发
针对不同水质和微生物种类，研发新型的检 测方法。
水质微生物检测
目录
• 水质微生物检测概述 • 水质微生物检测技术 • 水质微生物检测标准与法规 • 水质微生物检测实践与应用 • 水质微生物检测的挑战与展望
01
水质微生物检测概述
定义与目的
定义
水质微生物检测是对水体中微生 物的数量、种类和活性进行检测 的过程。
目的
评估水质的安全性和卫生状况， 预防和控制水传播疾病，保障公 众健康。
检测方法
培养法、荧光原位杂交技 术、PCR-DGGE等。
工业废水微生物检测
检测目的
监控工业废水处理效果，确保达标排放。
检测项目
总需氧量、总有机碳、氨氮等。
检测方法
化学分析法、生物分析法、在线监测技术等。
05
水质微生物检测的挑战 与展望
当前面临的主要挑战
微生物多样性
水质中的微生物种类繁 多，包括细菌、病毒、 原生动物等，检测难度
质量控制与保证
加强水质微生物检测的质量控制与保证，确 保检测结果的准确性和可靠性。
标准化与规范化
建立水质微生物检测的标准化和规范化体系， 提高检测结果的可靠性。
多指标综合评价
结合多种指标进行综合评价，以更全面地反 映水质状况和微生物污染情况。
谢谢观看
不同水质微生物的水质检测技术分析
不同水质微生物的水质检测技术分析1、传统水质微生物检测技术对于人们来说，饮用水的质量至关紧要，假如饮用水的水质不达标，将很可能会对人们的生命健康安全造成重点影响。
因此，对于水质中微生物的检测就显得更加紧要，近年来，随着科学技术的进展，微生物水质检测技术也越来越多样，而且正在朝着多样化、精准明确化、快速化的方向进展。
现在，我们将认真探讨关于传统水质微生物检测的相关技术。
1.1平板计数法对于传统水质中的菌落数量，我们通常会使用平板计数的方法，而且这种方法从大约百年前就开始使用，这种方法重要是通过异养菌平板计数的方法来进行技术，对于分裂速度可观而且可以在琼脂培育基上快速生长并形成可见菌落的微生物，用这种方法的效果比较明显，由于这种方法重要是通过肉眼或显微镜来直接对平板上的微生物菌落进行技术，所以可见菌落的产生至关紧要。
然而，水中的微生物大多无法在固体琼脂培育基上生长，所以假如使用这种方法将很可能会产生不必要的误差，并且对水质中微生物生长情况的了解造成肯定的困扰和拦阻。
此外，这种较为传统的平板计数法耗费时间特别长，至少要12天才可能会得到结果，因此这种检测方法无法快速了解目前水质的情况，具有肯定的滞后性。
假如所检测水质中的微生物含量过多，还需要对其进行梯度稀释，因此这种方法的操作比较麻烦，还需要预试验来大致检测水质中的微生物含量所处数量级，能够应用的检测范围也并不广泛。
1.2大肠杆菌数量检测法在对饮用水的质量进行评价的时候，人们常常会以大肠菌群和耐热大肠杆菌作为指示生物，通过对他们的数量观测来确定水质。
通常来讲，比较常见的测量方法包括发酵法、滤膜法等，然而，这些方法具有一个共同的缺点，就是所需时间较长，而且并没有较强的特异性，因此对于那些生长较慢的细菌很难检测出来。
之后，有些讨论人员发觉可以用基于特异性酶活性的方法来检测传统水质中大肠杆菌的数量，比如可以用βD半乳糖甘酶和βD葡萄糖醛酸酶对水质中的大肠杆菌数量进行检测，这样产生的灵敏度会比多管发酵法（MTF）以及膜过滤技术（MF）好很多，不过这样的方法依旧有缺陷，那就是时间成本很高。
水质检测微生物指标
2011年 农村饮用水水质微生物
表1 稀释度选择及菌落总数报告方式
实例
1 2 3 4 5 6 7
不同稀释度的平均菌落数
10-1
10-2
10-3
1365
164
20
2760
295
46
2890
271
60
150
30
8
多不可计
1650
513
27
11
5
多不可计
305
12
两个稀释度 菌落总数/ 菌落数之比 （CFU/mL）
报告方式 /(CFU/mL)
❖ 3.主要培养基：营养琼脂 ❖ 4.主要仪器：培养箱36 ℃+1 ℃等
5.检验步骤
❖ 生活饮用水
1mL水样+15mL45℃左右琼脂
摇匀，
做平行样和空白对照。冷却后，翻转平板， 36 ℃+1 ℃培养48h后计数。
❖ 水源水
先制成1：10，1：100等稀释液，再按生 活饮用水的检验步骤进行检验。
注意事项
❖ 3.主要培养基：EC培养基和伊红美兰琼脂 ❖ 4.主要仪器：恒温水浴培养箱
5.检验步骤
自总大肠菌群乳糖发酵试验中的阳性管（产 酸产气）中取1滴转钟于EC培养基中，置 44.5 ℃水浴箱或隔水式恒温培养箱内（水浴 箱的水面应高于试管中培养液面），培养24 h+2h后，如所有管均不产气，则可报告为阴 性，如有产气者，则转钟于伊红美兰琼脂平 板上，置44.5 ℃培养18h～24h，凡平板上有 典型菌落者，则证实为耐热大肠菌群阳性。
水质微生物检测的影响因素及质量控制措施
水质微生物检测的影响因素及质量控制措施摘要：水质微生物检测，是专业人员借助相关仪器设备，对水中微生物种类和数量进行确认的过程。
在水质环境的监测中，微生物检测是一项重要内容。
与化学检验不同，水质微生物检验是一个不断变化的生物体。
在微生物检验中由于检测结果的准确性受多方面因素的影响，因此,只有加强对微生物检验质量的控制，才能确保检测结果准确无误。
关键词：水质微生物；检测；影响因素；质量控制1现阶段影响水质微生物检测结果的主要因素1.1环境设施水质微生物检测很大程度上会受环境影响，因此需要做到如下几点。
第一，保持实验室内良好的通风和无尘状态——为减少灰尘、大气流、温度变化等因素产生的影响，安装空调是解决这些影响因素的最佳方式之一。
第二，每次接种前，需将无菌室用紫外灯消毒30分钟，消毒完毕后关闭紫外灯，等待30分钟后人员方可进入无菌室；人员进入无菌室后需打开超净工作台后方可工作；工作完毕后需再次将紫外灯打开杀菌。
第三，微生物检验室应尽量避免外来人员出入，以减少空气流动。
第四，在样品移至无菌室前，须先将采样瓶体外壁用酒精棉擦拭，然后换上无菌工作服和拖鞋，戴好手套、口罩等，再将其移至无菌室内，从而避免与实验室内部环境发生交叉污染。
第五，无菌室应定期进行沉降菌的测试和环境的验证，环境合格后才能开展检测工作。
沉降菌的测试方法为，采用大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）配制的培养皿采样后，置于30~35℃培养箱中培养，时间不少于2d。
1.2样品的采集和保存1.2.1样品的采集因素水样应使用121℃经15min高压灭菌处理的玻璃瓶采集。
同一水源且同一时间采集几类检测指标的水样时，应先采集供检测微生物指标的水样，且采样时应直接采集，不得用水样涮洗已灭菌的采样瓶，以避免手指和其他物品沾污瓶口。
1.2.2样品保存因素采集的水样应立即送检，时间不得超过2小时。
如无法及时送检，应将样品置于冰箱中，但不得超过24小时，否则会影响检测结果。
水体微生物的检测
水体微生物的检测指标菌落总数(aerobic bacterial count)是指1ml水样在营养琼脂培养基中，于37℃经24h培养后，所生长的细菌菌落的总数。
检测意义：作为一般性污染的指标，即评价被检样品的微生物污染程度和安全性。
水样菌落总数越多，说明水被微生物污染程度越严重，病原微生物存在的可能性越大，但不能说明污染的来源总大肠菌群(coliform bacteria)是指一群需氧及兼性厌氧的，37℃生长时能使乳糖发酵，在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
检测意义：作为粪便污染的指标。
水样总大肠菌群数的含量，表明水被粪便污染的程度，而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能。
水样采集菌落总数的测定；总大肠菌群的测定。
采样原则所采集的样品具有代表性。
采样容器：选择硼硅玻璃瓶和聚乙烯塑料瓶。
不能是新的污染源；不吸收或吸附某些待测组分；不与待测组分发生反应。
保证从采样到分析期间，样品各组分的浓度不发生改变。
必须按一般无菌操作的基本要求采集，并保证在运送、贮存过程中不受污染。
▪自来水水样：先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌，再开放水龙头使水流5 min（经常用水的水龙头放水1～3min）后，采集水样于无菌锥形瓶，约占瓶容量80%，以便摇匀水样。
▪水源水水样：选有代表性的地点及可疑地方，一般距水面下10～15cm采样。
采样后，将瓶塞盖好，再从水中取出。
▪注意事项▪严格无菌操作。
▪做好标记：采得水样后应立即记录水样名称、地点、时间等项目。
▪从速送检。
水样从采集到检验不应超过2h，在0～4℃下保存不应超过24h。
—平板菌落计数法（一）生活饮用水➢[器材与试剂]无菌1ml吸管1支/组，无菌平皿3个/组，营养琼脂。
➢[方法]水样摇匀20~25次，使细菌分散。
倾注培养：无菌吸取1ml水样分别置于2个空平皿，另一个作空白对照。
再倾注15ml琼脂（约45℃）于平皿中旋转，混匀待琼脂凝固后倒置37℃24h。
菌落计数：用肉眼或放大镜检查，计数平皿内菌落数目。
水体微生物检测方法
水体微生物检测方法1 水体微生物检测方法水是生命存在的必要条件，水体中的微生物是水质健康状况的重要指示物，所以检测水体微生物是监测污染质量、污染程度以及保证水生态环境健康、生物多样性等的重要技术手段之一。
检测水体中的微生物，常用的方法有活性测定法、培养分离法、PCR以及荧光探针法等。
1.1 活性测定法活性测定是水体微生物检测中应用最为广泛的方法之一。
在活性测定法中，样品会添加选定的培养基，配合观察和测定时间、温度、湿度以及添加凝结剂等来选择培养条件，通过特殊的检测仪器可以观测到微生物的活动，得出结论。
优点是流程简单、方法全面、检测灵敏，适应性强；但方法不适用于菌类多样性检测。
1.2 培养分离法培养分离法是最常用的一种微生物检测方法，在样品中添加特殊培养基，用于培养水体中的微生物。
采集不同条件下培养出的细菌株进行形态学分析、生理与生化特性分析和分子生物学分析等操作，从而获取对应的菌类信息。
优点是检测单元多、可检测菌类多样性；缺点是方法较复杂，时间较长。
1.3 PCR聚合酶链反应法（PCR）是水质检测的一种快速、灵敏的检测方法，它能够实现对特定微生物核酸序列片段的快速，灵敏的检测。
PCR采用不同条件，以几个温度周期反复扩增，以此形成检测抗原特异性的DNA 片段，最终得出该片段的扩增结果，通过特殊的检测仪器，得出检测结论。
优点是抗原检测的特异性更高、检测灵敏度高，时间短；缺点是不能检测到活体细菌，技术成本较高。
1.4 荧光探针法荧光探针法是运用荧光或发射荧光的探针分子，通过其与特定抗原发生特异性结合，以检测活态微生物的一种分子方法。
从而检测水体中活态微生物类型及数量，快速精准地检测水样中的微生物活性。
与传统活性测定法相比，优点是检测时间短、灵敏度高、减少误报率，方法进行简单；缺点是设备成本较高。
以上就是四种常用的水体微生物检测方法，每种方法都有优缺点，检测人员根据实际情况来选择恰当的检测方法。
除此之外，正确使用相关设备、操作标准的熟悉度对水体微生物的检测也是非常重要的。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
设为首页
加入收藏
联系站长首页食品资讯政策法规生产技术质量管理检验技术仪器设备食品标准资料中心食品图库食品人才食品安全食品课堂专业英语食品专题食品网刊食品网址食品百科个人空间食品论坛
水质微生物
一、水质微生物及指示菌
在各种水体，特别是污染水体中存在有大量的有机物质，适于各种微生物的生长，因此水体是仅次于土壤的第二种微生物天然培养基。
水体中的微生物主要来源于土壤，以及人类的动物的排泄物及污染。
水体中微生物的数量和种类受各种环境条件的制约。
一般认为，水中微生物以革兰氏阴性杆菌占有较大优势。
与其他水体相比，河水及溪水中革兰氏阳性菌相对较多，这是因为陆地微生物冲洗污染的缘故。
水体中的致病性微生物一般并不是水中原有微生物，大部分是从外界环境污染而来，特别是人和其它温血动物的粪便污染。
水中常见的致病性细菌主要包括：志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌、小肠结炎耶尔森氏菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌等。
在实际控制中，对水质卫生质量的评价和控制，是无法对各种可能存在的致病微生物一一进行检测，而一般利用对指示菌的检测和控制，来了解水体是否受到过人畜粪便的污染，是否有肠道病原微生物存在的可能，从而评价水的质量，以保证水质的卫生安全。
目前，世界各国一般认为大肠菌群是指示水质受粪便污染较好的指示菌。
我国水质控制也采用大肠菌群作为指示菌，GB5749-85《中华人民共和国国家标准生活饮用水卫生标准》规定，生活饮用水中大肠菌群每升不得超过3个。
在某些情况下，水体中的细菌总数也可指示水体受粪便等污染物污染的情况。
这里的细菌总数其实是指营养琼脂培养后形成的菌落总数。
目前世界各国对于控制饮用水的卫生质量，除采用大肠菌群等指标外，一般还采用细菌总数这个指标。
我国GB5749-85《中华人民共和国国家标准生活饮用水卫生标准》中规定生活饮用水细菌总数每毫升不得超过100个。
二、水质微生物检验方法
GB5750-85《中华人民共和国国家标准生活饮用水标准检验法》提供了水质中细菌总数和总大肠菌群的检测方法。
（一）细菌总数的检测：
国家标准中，细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中，于37℃经24h培养后，所生长的细菌菌落的总数。
对生活饮用水，直接吸取1ml水样于平皿中，加入营养琼脂后混匀，37℃培养24h，进行计数。
对水源水，根据情况对样品进行10倍梯度稀释，选择适宜稀释液1ml，加注平皿，营养琼脂混匀，37℃培养24h，进行计数。
按照规定格式报告每毫升水中细菌总数。
（二）总大肠菌群的检测：
国家标准中，利用总大肠菌群作为粪便污染的指标。
总大肠菌群是指一群需氧及兼性厌氧的，37℃生长时能使乳糖发酵，在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
水样中总大肠菌群数的含量，表明水被粪便污染的程度，而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能。
国家标准提供了多管发酵法及滤膜法检测总大肠菌群的方法。
多管发酵法检测总大肠菌群，分为三步：初发酵试验，平板分离，复发酵证实试验。
初发酵试验，采用乳糖蛋白胨培养液37℃培养24h，观察产酸产气情况。
对阳性管培养物，接种于品红亚硫酸钠培养基或伊红美蓝培养基，观察菌落特征，并进行革兰氏染色和镜检。
对典型和可疑菌落，接种于乳糖蛋白胨培养液，进行复发酵证实试验，并根据标准所附检数表报告结果。
其中，对生活饮用水，初发酵试验接种水样总量300ml，即100ml接种2管，10ml接种10管，采用两个稀释度，12支发酵管。
对水源水，初发酵试验接种水样总量55.5ml，即10ml接种5管，1ml接种5管，0.1ml接种10管，共采用三个稀释度，15支发酵管。
两种接种方法，所用的检数表是不同的。
滤膜法检测总大肠菌群，就是利用微孔滤膜，过滤一定量水样，将水样中含有的细菌截留在滤膜上，然后将滤膜帖放在选择性培养基上（如品红亚硫酸钠培养基），经培养和证实试验后，直接计数滤膜上生长的典型大肠菌群菌落，并计算出每升水样中含有的总大肠菌群数。
三、说明：
1．菌落总数测定中，应选择合适的稀释度进行。
生活饮用水，国家标准规定每毫升不得超过100个，因此可以直接吸取1毫升到平板进行培养。
2．培养时间。
与食品中菌落计数不同，测定水中细菌总数，培养时间采用24h。
3．总大肠菌群的测定方法，由于饮用水和水源水可能的污染程度不同，因此采用不同的接种量，检数表也不相同。
4．当接种量超过1毫升时，一般采用多倍浓度培养液。
如配制3倍浓缩乳糖蛋白胨培养液50mL，加入100mL 水样后，总体积为150mL，培养液恢复到正常浓度。
5．滤膜法检测总大肠菌群，一般在检测较大量低浊度水样时采用，大量水样滤过滤膜后，水中所含有的所有细菌均截留在滤膜上。