山豆根的化学成分研究_潘其明
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西、 贵州、 云南、 广东、 江西等地， 具有清热解毒、 消肿 ［1 ］ 利咽等功效 。 现代科学研究证明山豆根主要含
Email： liangdonggxnu@ 163. com 梁东， 研究方向为天然药物化学，
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潘其明等： 山豆根的化学成分研究
有生物碱、 黄酮、 木脂素等化学成分， 具有抗肿瘤、 抗 ［2 ］ 病毒等多方面药理活性 。 本课题组对山豆根进 行了系统的化学成分研究， 前期报道了 17 个苦参碱 ［3 ］ 并进行了抗病毒活性筛选 。 本实验继 型生物碱， 续对其 95% 乙醇提取物开展化学成分研究， 从中分 （ 6， 7dihydro离得到 13 个 化 合 物， 分 别 鉴 定 为 1pyrrolo［ 1， 2a］ imidazol3yl） ethanone （ 1 ） ， 5 H环（ 脯 氨酸脯氨酸） （ 2 ） ， 烟酸 （ 3 ） ， 对羟基苯甲酸 （ 4 ） ， 对 42， 61甲氧基苯甲酸 （ 5 ） ， 羟甲基二甲氧基苯酚ODβ吡喃葡 萄 糖 苷 （ 6 ） ， 松柏苷（ 7） ， 紫丁香苷 （ 8） ， （ －） 4OD开环异落叶松脂素β吡喃葡萄糖 （ －）4OD苷（ 9） ， 丁 香 脂 素β吡喃葡萄糖苷 （ 10 ） ， （ －） 4， 4'OD丁香脂素二β吡喃葡萄糖苷 （ 11 ） ， （ －）4， 4'OD松 脂 素二β吡喃葡萄糖苷 （ 12 ） ， （ 6 S， 9Ｒ） roseoside （ 13 ） 。 化合物 1 为新天然 5， 6， 9， 10 ， 12 ， 13 为首次从该属植物 产物， 化合物 2 ， 中分离得到。细胞毒活性测试结果显示新天然产物 1 对 A549 肿 瘤 细 胞 具 有 一 定 的 抑 制 作 用 IC50 = （ 23. 05 ± 0. 46 ） μmol·L － 1 。 1 材料 PerkinElmer 341 旋光仪 （ 美国， 珀金埃尔默 ） ； PerkinElmer Spectrum Two FTIＲ 光 谱 仪 （ KBr 压 珀金埃尔默 ） ； 瑞士 Bruker AVANCE 500 片） （ 美国， MHz 超导核磁共振仪； ThermoScientific Exactive 高 布鲁 分辨质谱仪； Bruker HCT 离子阱质谱仪 （ 德国， ） ； ， YMC C18 克 创新通恒高效液相色谱仪 （ 20 mm × 250 mm， 5 μm） 色 谱 柱； 簿 层 色 谱 硅 胶 GF254 及柱色谱硅胶 （ 200 ～ 300 目 ） 为青岛海洋化工 18 （ 50 μm ） 为 YMC 公 厂生产； 反相柱色谱硅胶 ＲP20 为 Pharmacia 司生产； 葡聚糖凝胶 Sephadex LH公司生产； MCI 树脂 CHP20 （ 75 ～ 150 μm ） 为 Mitsubishi 化学 公 司 生 产； 所 用 试 剂 均 为 分 析 纯 或 色 谱纯。 山豆根于 2012 年 12 月采于广西南宁， 由中国 科学院广 西 植 物 研 究 所 林 春 蕊 研 究 员 鉴 定， 标本 （ No. ST2012018 ） 保存于广西师范大学化学与药学 “药用资源化学与药物分子工程 ” 学院 国家重点实 验室培养基地。 2 提取与分离 山豆根干燥根茎 8. 3 kg， 切成小段， 用 95% 乙 醇加热回流提取 3 次， 每次 3 h， 合并提取液， 减压浓 缩得 到 浸 膏。 将 浸 膏 溶 于 3% 酒 石 酸 溶 液 （ pH
doi： 10． 4268 / cjcmm20160119 山 豆 根 为 豆 科 槐 属 植 物 越 南 槐 Sophora tonkinensis Gagnep. 的干燥根及根茎， 主要分布于广
［收稿日期］ 20150914 ［基金项目］ 广西科学研究与技术开发计划项目（ 13550043 ） ； 广西医药产业人才小高地项目（ 1408 ） ； 广西药用资源化学与药物分子工程教 A18 ， CMEMＲ2013C04 ） ； 广西植物功能物质研究与利用重点实验室开放项目（ FPＲU20131） 育部重点实验室项目（ CMEMＲ2012［通信作者］
Studies on chemical constituents of rhizomes of Sophora tonkinensis
PAN Qiming，HUANG Ｒizhen，PAN Yingming，WANG Hengshan，LIANG Dong * （ State Key Laboratory Cultivation Base for the Chemistry and Molecular Engineering of Medicinal Ｒesources， School of Chemistry and Pharmaceutical Sciences，Guangxi Normal University，Guilin 541004 ，China） ［ Abstract］ Thirteen compounds were isolated from the 95% aqueous EtOH extract of the rhizomes of Sophora tonkinensis by a com20 ，MCI，ODS，and bination of various chromatographic techniques including column chromatography over silica gel，Sphadex LHsemipreparative HPLC. Their structures were elucidated as 1（ 6， 7dihydro5 Hpyrrolo［ 1， 2a］imidazol3yl ） ethanone （ 1 ） ，cyclo （ ProPro） （ 2 ） ，nicotinic acid（ 3 ） ，phydroxybenzonic acid（ 4 ） ，pmethoxybenzonic acid（ 5 ） ，4hydroxymethyl2， 6dimethoxyphenol1ODglucopyranoside（ 6 ） ，coniferin （ 7 ） ，syringin （ 8 ） ， （ －）secoisolariciresinol4ODglucopyranoside （ 9 ） ， （ －）syringaresββODglucopyranoside（ 10 ） ， （ －） syringaresinol4， 4'diODglucopyranoside （ 11 ） ， （ －） pinoresinol4， 4'diODglucoinol4βββpyranoside（ 12 ） ，and（ 6 S， 9 Ｒ） roseoside（ 13 ） by their physicochemical properties and spectroscopic data. Compound 1 was a new naturalproduct，and compounds 2 ， 5， 6， 9， 10 ， 12 and 13 were obtained from the Sophora genus for the first time. Compound 1 possessed moderate cytotoxic activity against A549 human tumor cell ［ IC50 （ 23. 05 ± 0. 46 ） μmol·L － 1］ . ［ Key words］ Sophora tonkinensis； imidazoline alkaloid； cytotoxic activity
Leabharlann Baidu2016 年 1 月
第 41 卷第 1 期
Vol. 41 ，No． 1
January， 2016
山豆根的化学成分研究
潘其明，黄日镇，潘英明，王恒山，梁东
*
（ 广西师范大学 化学与药学学院 药用资源化学与药物分子工程国家重点 实验室培养基地，广西 桂林 541004 ）
［ Sephadex LH20 ， MCI， ODS， 摘要］ 研究山豆根 Sophora tonkinensis 的化学成分。 采用硅胶， 半制备 HPLC 等色谱技术， 从山 （ 6， 7dihydro5 Hpyrrolo［ 1， 2a］ imidazol3yl） ethanone（ 1 ） ， 分别鉴定为 1环（ 脯 豆根 95% 乙醇提取物中分离得到 13 个化合物， 42， 61OD氨酸脯氨酸） （ 2 ） ， 烟酸（ 3 ） ， 对羟基苯甲酸 （ 4 ） ， 对甲氧基苯甲酸 （ 5 ） ， 羟甲基二甲氧基苯酚β吡喃葡萄糖苷 （ 6） ， （ －） 4OD（ －） 4OD松柏苷（ 7 ） ， 紫丁香苷（ 8 ） ， 开环异落叶松脂素β吡喃葡萄糖苷（ 9 ） ， 丁香脂素β吡喃葡萄糖苷 （ 10 ） ， （ －） 4， 4'OD（ －） 4， 4'OD（ 6 S， 9Ｒ） roseoside 丁香脂素二β吡喃葡萄糖苷（ 11 ） ， 松脂素二β吡喃葡萄糖苷（ 12 ） ， （ 13 ） 。化合物 1 为新天然产物， 5， 6， 9， 10 ， 12 ， 13 为首次从该属植物中分离得到 。 细胞毒活性测试结果显示新天然 化合物 2 ， IC50 （ 23. 05 ± 0. 46 ） μmol·L － 1 ］ 。 产物 1 对 A549 肿瘤细胞具有一定的抑制作用［ ［ 关键词］ 山豆根； 咪唑生物碱； 细胞毒活性
2 ～ 3， 10 L） ， 滤去不溶物后， 滤液用乙酸乙酯萃取 3 次， 萃取后的酸水液用饱和的碳酸钠溶液调 pH 9 ～ 10 ， 依次用二氯甲烷、 正丁醇萃取 3 次， 每次 6 L。 二氯甲烷部分 （ 42. 0 g ） 经硅胶柱色谱分离， 依 次用石油醚丙酮二乙胺 （ 20 ∶ 1 ∶ 0. 1 ～ 1 ∶ 1 ∶ 0. 1 ） 和 二氯甲烷甲醇二乙胺（ 4∶ 1∶ 0. 1 ～ 1∶ 1∶ 0. 1 ） 梯度洗 得到 Frs. A ～ H。Fr. C （ 3. 4 g） 经硅胶柱色谱 （ 石 脱， 4 ∶ 1 ∶ 0. 1 ～ 1 ∶ 1 ∶ 0. 1 ） 得到 油醚乙酸乙酯二乙胺， Frs. C1 ～ C5 。Fr. C4 （ 808. 1 mg） 经反相 ODS 柱色谱 （ 甲醇10∶ 90 ～ 100∶ 0 ） 得到化合物 1 （ 4. 3 mg ） 和 水， 2 （ 3. 5 mg ） 。 Fr. E （ 1. 0 g ） 经反相 ODS 柱色谱 （ 甲 5∶ 95 ～ 100∶ 0 ） 得到化合物 3 （ 2. 5 mg ） 。 Fr. G 醇水， （ 4. 0 g） 经反相 ODS 柱色谱 （ 甲醇20∶ 80 ～ 100∶ 水， 0 ） 得到 Frs. G1 ～ G5 。 Fr. G1 （ 400 mg ） 经半制备型 HPLC ， 以甲醇水 （ 45 ∶ 55 ， 含 0. 01% TFA ） 等度洗脱 －1 （ 6 mL· min ） ， t Ｒ = 38. 1 得 到 化 合 物 4 （ 2. 9 mg， min） 和 5 （ 38. 1 mg， t Ｒ = 40. 7 min ） 。 Fr. G2 （ 68. 9 mg） 经半制备型 HPLC ， 以乙腈水（ 23∶ 77 ， 含 0. 01% TFA） 等度洗脱（ 8 mL·min － 1 ） ， 得到化合物 10 （ 2. 9 t Ｒ = 25. 6 min） 。 mg， 正丁醇部分（ 79. 2 g ） 经 MCI 柱色谱 （ 甲醇水， 0∶ 100 ～ 100∶ 0 ） 得到 Frs. N1N5 。 Fr. N3 （ 20. 2 g ） 经 50 ： 1 ∶ 0. 1 ～ 甲醇二乙胺， 硅胶柱色谱 （ 二氯甲烷1∶ 1∶ 0. 1 ） 得到 Frs. N3a ～ N3e。 Fr N3c （ 2. 2 g ） 经反 5 ∶ 95 ～ 25 ∶ 75 ） 得 到 相 ODS 柱 色 谱 （ 甲 醇水， Frs. N3c1 ～ N3c7 。 Fr. N3c2 （ 10. 0 mg ） 经 半 制 备 型 HPLC ， 8 mL · min － 1 ） 洗脱得到化 以乙腈水（ 7∶ 93 ， t Ｒ = 32. 8 min ） ； Fr. N3c5 （ 21. 6 mg ） 合物 6 （ 3. 0 mg， 8 mL · min － 1 ） 经半制备型 HPLC ， 以乙腈水 （ 9∶ 91 ， t Ｒ = 41. 7 min ） ； Fr. N3c6 洗脱得到化合物 8 （ 8. 7 mg， （ 37. 6 mg ） 经半制备型 HPLC ， 8 以乙腈水 （ 10 ∶ 90 ， －1 mL·min ） 洗脱得到化合物 13 （ 29. 8 mg， t Ｒ = 58. 6 min） 。Fr. N3d（ 2. 45 g ） 经反相 ODS 柱色谱 （ 甲醇5 ∶ 95 ～ 35 ∶ 65 ） 和 半 制 备 型 HPLC （ 乙 腈水， 水， 7∶ 93 ， 8 mL · min － 1 ） ， tＲ = 得 到 化 合 物 7 （ 4. 5 mg， 55. 1 min） 。Fr. N4 （ 3. 0 g） 经 Sphadex LH20 柱色谱 （ 50% MeOHH2 O ） 得 到 Frs. N4aN4g。 Fr. N4b （ 617. 3 mg） 经半制备型 HPLC ， 6 以甲醇水 （ 30∶ 70 ， mL·min － 1 ） 洗脱得到化合物 11 （ 25. 0 mg， t Ｒ = 47. 7 min） ； Fr. N4c （ 305. 0 mg ） 经半制备型 HPLC ， 以乙 水（ 14 ∶ 86 ， 含 0. 01% TFA ） 等 度 洗 脱 （ 8 mL · 腈－1 min ） ， t Ｒ = 34. 0 min ） ； 得到化合物 12 （ 10. 4 mg， · 97·
西、 贵州、 云南、 广东、 江西等地， 具有清热解毒、 消肿 ［1 ］ 利咽等功效 。 现代科学研究证明山豆根主要含
Email： liangdonggxnu@ 163. com 梁东， 研究方向为天然药物化学，
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潘其明等： 山豆根的化学成分研究
有生物碱、 黄酮、 木脂素等化学成分， 具有抗肿瘤、 抗 ［2 ］ 病毒等多方面药理活性 。 本课题组对山豆根进 行了系统的化学成分研究， 前期报道了 17 个苦参碱 ［3 ］ 并进行了抗病毒活性筛选 。 本实验继 型生物碱， 续对其 95% 乙醇提取物开展化学成分研究， 从中分 （ 6， 7dihydro离得到 13 个 化 合 物， 分 别 鉴 定 为 1pyrrolo［ 1， 2a］ imidazol3yl） ethanone （ 1 ） ， 5 H环（ 脯 氨酸脯氨酸） （ 2 ） ， 烟酸 （ 3 ） ， 对羟基苯甲酸 （ 4 ） ， 对 42， 61甲氧基苯甲酸 （ 5 ） ， 羟甲基二甲氧基苯酚ODβ吡喃葡 萄 糖 苷 （ 6 ） ， 松柏苷（ 7） ， 紫丁香苷 （ 8） ， （ －） 4OD开环异落叶松脂素β吡喃葡萄糖 （ －）4OD苷（ 9） ， 丁 香 脂 素β吡喃葡萄糖苷 （ 10 ） ， （ －） 4， 4'OD丁香脂素二β吡喃葡萄糖苷 （ 11 ） ， （ －）4， 4'OD松 脂 素二β吡喃葡萄糖苷 （ 12 ） ， （ 6 S， 9Ｒ） roseoside （ 13 ） 。 化合物 1 为新天然 5， 6， 9， 10 ， 12 ， 13 为首次从该属植物 产物， 化合物 2 ， 中分离得到。细胞毒活性测试结果显示新天然产物 1 对 A549 肿 瘤 细 胞 具 有 一 定 的 抑 制 作 用 IC50 = （ 23. 05 ± 0. 46 ） μmol·L － 1 。 1 材料 PerkinElmer 341 旋光仪 （ 美国， 珀金埃尔默 ） ； PerkinElmer Spectrum Two FTIＲ 光 谱 仪 （ KBr 压 珀金埃尔默 ） ； 瑞士 Bruker AVANCE 500 片） （ 美国， MHz 超导核磁共振仪； ThermoScientific Exactive 高 布鲁 分辨质谱仪； Bruker HCT 离子阱质谱仪 （ 德国， ） ； ， YMC C18 克 创新通恒高效液相色谱仪 （ 20 mm × 250 mm， 5 μm） 色 谱 柱； 簿 层 色 谱 硅 胶 GF254 及柱色谱硅胶 （ 200 ～ 300 目 ） 为青岛海洋化工 18 （ 50 μm ） 为 YMC 公 厂生产； 反相柱色谱硅胶 ＲP20 为 Pharmacia 司生产； 葡聚糖凝胶 Sephadex LH公司生产； MCI 树脂 CHP20 （ 75 ～ 150 μm ） 为 Mitsubishi 化学 公 司 生 产； 所 用 试 剂 均 为 分 析 纯 或 色 谱纯。 山豆根于 2012 年 12 月采于广西南宁， 由中国 科学院广 西 植 物 研 究 所 林 春 蕊 研 究 员 鉴 定， 标本 （ No. ST2012018 ） 保存于广西师范大学化学与药学 “药用资源化学与药物分子工程 ” 学院 国家重点实 验室培养基地。 2 提取与分离 山豆根干燥根茎 8. 3 kg， 切成小段， 用 95% 乙 醇加热回流提取 3 次， 每次 3 h， 合并提取液， 减压浓 缩得 到 浸 膏。 将 浸 膏 溶 于 3% 酒 石 酸 溶 液 （ pH
doi： 10． 4268 / cjcmm20160119 山 豆 根 为 豆 科 槐 属 植 物 越 南 槐 Sophora tonkinensis Gagnep. 的干燥根及根茎， 主要分布于广
［收稿日期］ 20150914 ［基金项目］ 广西科学研究与技术开发计划项目（ 13550043 ） ； 广西医药产业人才小高地项目（ 1408 ） ； 广西药用资源化学与药物分子工程教 A18 ， CMEMＲ2013C04 ） ； 广西植物功能物质研究与利用重点实验室开放项目（ FPＲU20131） 育部重点实验室项目（ CMEMＲ2012［通信作者］
Studies on chemical constituents of rhizomes of Sophora tonkinensis
PAN Qiming，HUANG Ｒizhen，PAN Yingming，WANG Hengshan，LIANG Dong * （ State Key Laboratory Cultivation Base for the Chemistry and Molecular Engineering of Medicinal Ｒesources， School of Chemistry and Pharmaceutical Sciences，Guangxi Normal University，Guilin 541004 ，China） ［ Abstract］ Thirteen compounds were isolated from the 95% aqueous EtOH extract of the rhizomes of Sophora tonkinensis by a com20 ，MCI，ODS，and bination of various chromatographic techniques including column chromatography over silica gel，Sphadex LHsemipreparative HPLC. Their structures were elucidated as 1（ 6， 7dihydro5 Hpyrrolo［ 1， 2a］imidazol3yl ） ethanone （ 1 ） ，cyclo （ ProPro） （ 2 ） ，nicotinic acid（ 3 ） ，phydroxybenzonic acid（ 4 ） ，pmethoxybenzonic acid（ 5 ） ，4hydroxymethyl2， 6dimethoxyphenol1ODglucopyranoside（ 6 ） ，coniferin （ 7 ） ，syringin （ 8 ） ， （ －）secoisolariciresinol4ODglucopyranoside （ 9 ） ， （ －）syringaresββODglucopyranoside（ 10 ） ， （ －） syringaresinol4， 4'diODglucopyranoside （ 11 ） ， （ －） pinoresinol4， 4'diODglucoinol4βββpyranoside（ 12 ） ，and（ 6 S， 9 Ｒ） roseoside（ 13 ） by their physicochemical properties and spectroscopic data. Compound 1 was a new naturalproduct，and compounds 2 ， 5， 6， 9， 10 ， 12 and 13 were obtained from the Sophora genus for the first time. Compound 1 possessed moderate cytotoxic activity against A549 human tumor cell ［ IC50 （ 23. 05 ± 0. 46 ） μmol·L － 1］ . ［ Key words］ Sophora tonkinensis； imidazoline alkaloid； cytotoxic activity
Leabharlann Baidu2016 年 1 月
第 41 卷第 1 期
Vol. 41 ，No． 1
January， 2016
山豆根的化学成分研究
潘其明，黄日镇，潘英明，王恒山，梁东
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（ 广西师范大学 化学与药学学院 药用资源化学与药物分子工程国家重点 实验室培养基地，广西 桂林 541004 ）
［ Sephadex LH20 ， MCI， ODS， 摘要］ 研究山豆根 Sophora tonkinensis 的化学成分。 采用硅胶， 半制备 HPLC 等色谱技术， 从山 （ 6， 7dihydro5 Hpyrrolo［ 1， 2a］ imidazol3yl） ethanone（ 1 ） ， 分别鉴定为 1环（ 脯 豆根 95% 乙醇提取物中分离得到 13 个化合物， 42， 61OD氨酸脯氨酸） （ 2 ） ， 烟酸（ 3 ） ， 对羟基苯甲酸 （ 4 ） ， 对甲氧基苯甲酸 （ 5 ） ， 羟甲基二甲氧基苯酚β吡喃葡萄糖苷 （ 6） ， （ －） 4OD（ －） 4OD松柏苷（ 7 ） ， 紫丁香苷（ 8 ） ， 开环异落叶松脂素β吡喃葡萄糖苷（ 9 ） ， 丁香脂素β吡喃葡萄糖苷 （ 10 ） ， （ －） 4， 4'OD（ －） 4， 4'OD（ 6 S， 9Ｒ） roseoside 丁香脂素二β吡喃葡萄糖苷（ 11 ） ， 松脂素二β吡喃葡萄糖苷（ 12 ） ， （ 13 ） 。化合物 1 为新天然产物， 5， 6， 9， 10 ， 12 ， 13 为首次从该属植物中分离得到 。 细胞毒活性测试结果显示新天然 化合物 2 ， IC50 （ 23. 05 ± 0. 46 ） μmol·L － 1 ］ 。 产物 1 对 A549 肿瘤细胞具有一定的抑制作用［ ［ 关键词］ 山豆根； 咪唑生物碱； 细胞毒活性
2 ～ 3， 10 L） ， 滤去不溶物后， 滤液用乙酸乙酯萃取 3 次， 萃取后的酸水液用饱和的碳酸钠溶液调 pH 9 ～ 10 ， 依次用二氯甲烷、 正丁醇萃取 3 次， 每次 6 L。 二氯甲烷部分 （ 42. 0 g ） 经硅胶柱色谱分离， 依 次用石油醚丙酮二乙胺 （ 20 ∶ 1 ∶ 0. 1 ～ 1 ∶ 1 ∶ 0. 1 ） 和 二氯甲烷甲醇二乙胺（ 4∶ 1∶ 0. 1 ～ 1∶ 1∶ 0. 1 ） 梯度洗 得到 Frs. A ～ H。Fr. C （ 3. 4 g） 经硅胶柱色谱 （ 石 脱， 4 ∶ 1 ∶ 0. 1 ～ 1 ∶ 1 ∶ 0. 1 ） 得到 油醚乙酸乙酯二乙胺， Frs. C1 ～ C5 。Fr. C4 （ 808. 1 mg） 经反相 ODS 柱色谱 （ 甲醇10∶ 90 ～ 100∶ 0 ） 得到化合物 1 （ 4. 3 mg ） 和 水， 2 （ 3. 5 mg ） 。 Fr. E （ 1. 0 g ） 经反相 ODS 柱色谱 （ 甲 5∶ 95 ～ 100∶ 0 ） 得到化合物 3 （ 2. 5 mg ） 。 Fr. G 醇水， （ 4. 0 g） 经反相 ODS 柱色谱 （ 甲醇20∶ 80 ～ 100∶ 水， 0 ） 得到 Frs. G1 ～ G5 。 Fr. G1 （ 400 mg ） 经半制备型 HPLC ， 以甲醇水 （ 45 ∶ 55 ， 含 0. 01% TFA ） 等度洗脱 －1 （ 6 mL· min ） ， t Ｒ = 38. 1 得 到 化 合 物 4 （ 2. 9 mg， min） 和 5 （ 38. 1 mg， t Ｒ = 40. 7 min ） 。 Fr. G2 （ 68. 9 mg） 经半制备型 HPLC ， 以乙腈水（ 23∶ 77 ， 含 0. 01% TFA） 等度洗脱（ 8 mL·min － 1 ） ， 得到化合物 10 （ 2. 9 t Ｒ = 25. 6 min） 。 mg， 正丁醇部分（ 79. 2 g ） 经 MCI 柱色谱 （ 甲醇水， 0∶ 100 ～ 100∶ 0 ） 得到 Frs. N1N5 。 Fr. N3 （ 20. 2 g ） 经 50 ： 1 ∶ 0. 1 ～ 甲醇二乙胺， 硅胶柱色谱 （ 二氯甲烷1∶ 1∶ 0. 1 ） 得到 Frs. N3a ～ N3e。 Fr N3c （ 2. 2 g ） 经反 5 ∶ 95 ～ 25 ∶ 75 ） 得 到 相 ODS 柱 色 谱 （ 甲 醇水， Frs. N3c1 ～ N3c7 。 Fr. N3c2 （ 10. 0 mg ） 经 半 制 备 型 HPLC ， 8 mL · min － 1 ） 洗脱得到化 以乙腈水（ 7∶ 93 ， t Ｒ = 32. 8 min ） ； Fr. N3c5 （ 21. 6 mg ） 合物 6 （ 3. 0 mg， 8 mL · min － 1 ） 经半制备型 HPLC ， 以乙腈水 （ 9∶ 91 ， t Ｒ = 41. 7 min ） ； Fr. N3c6 洗脱得到化合物 8 （ 8. 7 mg， （ 37. 6 mg ） 经半制备型 HPLC ， 8 以乙腈水 （ 10 ∶ 90 ， －1 mL·min ） 洗脱得到化合物 13 （ 29. 8 mg， t Ｒ = 58. 6 min） 。Fr. N3d（ 2. 45 g ） 经反相 ODS 柱色谱 （ 甲醇5 ∶ 95 ～ 35 ∶ 65 ） 和 半 制 备 型 HPLC （ 乙 腈水， 水， 7∶ 93 ， 8 mL · min － 1 ） ， tＲ = 得 到 化 合 物 7 （ 4. 5 mg， 55. 1 min） 。Fr. N4 （ 3. 0 g） 经 Sphadex LH20 柱色谱 （ 50% MeOHH2 O ） 得 到 Frs. N4aN4g。 Fr. N4b （ 617. 3 mg） 经半制备型 HPLC ， 6 以甲醇水 （ 30∶ 70 ， mL·min － 1 ） 洗脱得到化合物 11 （ 25. 0 mg， t Ｒ = 47. 7 min） ； Fr. N4c （ 305. 0 mg ） 经半制备型 HPLC ， 以乙 水（ 14 ∶ 86 ， 含 0. 01% TFA ） 等 度 洗 脱 （ 8 mL · 腈－1 min ） ， t Ｒ = 34. 0 min ） ； 得到化合物 12 （ 10. 4 mg， · 97·