细胞培养基种类及用途
dmem培养基的种类
dmem培养基的种类
摘要：
1.DMEM 培养基的定义和作用
2.DMEM 培养基的种类及区别
3.不同种类的DMEM 培养基的特点与应用
4.选择合适的DMEM 培养基的注意事项
正文：
DMEM 培养基是一种富含营养物质的细胞培养基，用于支持细胞生长和繁殖。
它主要包括以下几种类型：
1.DMEM 低糖培养基：含有较低的葡萄糖浓度，适用于生长较慢、附着较困难的肿瘤细胞等。
2.DMEM 高糖培养基：含有较高的葡萄糖浓度，有利于细胞停泊于一个位置生长，适用于生长较快、附着较困难的肿瘤细胞等。
3.DMEM 含血清培养基：添加了血清成分，提供了更多的生长因子和营养物质，适用于各种细胞类型。
4.DMEM 无血清培养基：不添加血清成分，适用于对血清敏感的细胞类型。
在选择合适的DMEM 培养基时，需要注意以下几点：
1.确认细胞类型：不同类型的细胞对营养物质和生长环境的需求不同，需要选择适合该细胞类型的DMEM 培养基。
2.考虑生长速率：根据细胞的生长速率选择合适的高糖或低糖DMEM 培
养基。
3.血清添加：如果细胞对血清敏感，需要选择含血清的DMEM 培养基；如果对血清不敏感，可以选择无血清的DMEM 培养基。
4.品质保证：选择信誉良好的供应商，确保培养基的品质和稳定性。
总之，DMEM 培养基的种类繁多，需要根据细胞类型、生长速率、血清添加等因素选择合适的培养基。
细胞培养各种培养基简介
DMEM、RIPA1640、F12、L15等细胞培养基的基本知识培养细胞的完全培养基由基础培养基（如MEM）和添加剂（如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子）组成，培养基的配方一直在改进，其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。
一、基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。
最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。
而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如核苷酸）。
MEM/F12 这两种培养基各取1/2，形成神经生物学最通用的培养基。
Dulbecco`s改良培养基——DMEM，现应用于快速生长的细胞，同MEM 含有相同的营养成分，但浓度高出2~4倍。
选择某种培养基，应仔细了解成分表，应知道大多数情形下培养基都有不足。
例如，有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸，而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域，但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言，则并非最佳选择，特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。
F12中含有硫酸亚铁，据报道也有神经毒效应。
在所有这些培养基中，谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度，这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源。
对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸（若培养基中这两种物质缺乏时）。
MEM与F12均要用5%的CO2来平衡，DMEM含更高浓度的NaCO3，要用10%的CO2来平衡，当然也可以在较低CO2浓度下使用。
这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的，但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果。
原则上，HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。
实际操作中并非如此简单。
显然，溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长是重要的。
细胞培养基种类与基本成分
(1)需要长期保存的血清必须储存于-20C-70C低温冰箱中。4C冰箱中保存 时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%，因此，血清在冻入 低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
(5)切勿将血清在37C放置太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中的有效成 分会破会而影响血清质量。
(6)血清中的沉淀物絮状物：主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维
蛋白造成，这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm,5分钟去
除，也可不用处理。
显微镜下 小黑点”经过热处理过的血清，沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀 物在显微镜下观察象 小黑点”常误认为血清受污染。一般情况下，此小黑点不 会影响细胞生长，但如果怀疑血清质量，则应立即停止使用，更换另一批号的血 清。
(2)一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则 可将血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤血清。
(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法：-20C至-70C低温冰箱中的血清放入4C冰箱中溶解1天。然后移入室温，待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不 断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切
2、MEM细胞培 养基
又称低限量Eagle培养基 (Minimal Essential Medium) ，1959年在Eagle's基础 培养基(BME)上修改而来，删去赖氨酸、生物素，氨基酸浓度增加，适合多 种细胞单层生长，有可高压灭菌品种，是一种最基本、试用范围最广的培养基， 但因其营养成分所限，针对生产之特定细胞培养与表达时， 并不一定是使用效果 最佳或者最经济的培 养基。
细胞培养基简介
依据实验目的选择培养基
增殖实验
选择能够支持细胞快速增殖的培养基，以便在短时间 内获得大量细胞。
诱导分化实验
选择能够诱导细胞分化的培养基，以便观察细胞分化 过程和分化后的表型特征。
基因转染实验
选择能够支持基因转染的培养基，以便将外源基因导 入细胞并观察其对细胞表型的影响。
优化培养基配方
调整营养成分
较高。
无血清培养基
总结词
无血清培养基是指在培养基中不添加任何动物来源的血清，完全由化学成分合成的培养基。
详细描述
无血清培养基不含动物来源的血清，而是通过添加多种化学成分来模拟血清的功能，如添加蛋白质、生长因子等 。无血清培养基适用于生产疫苗、单克隆抗体等生物制品，因为其成分明确、质量控制方便，且能够避免血清批 次差异对细胞培养的影响。
再生医学
细胞培养基在再生医学领域也有广泛应用，如组织工程、器官再生等 。
发展趋势
1 2 3
新型细胞培养基的开发
随着生物技术的不断发展，对新型细胞培养基的 需求越来越高，如无血清培养基、个性化培养基 等。
细胞培养基的个性化定制
根据不同细胞类型和实验需求，细胞培养基需要 进行个性化定制，以满足特定实验条件和生产需 求。
细胞培养基市场的主要参与者包括生 物技术公司、科研机构和制药企业等 。
细胞培养基市场主要集中在美国、欧 洲和亚太地区，其中亚太地区增长最 快。
应用领域
生物制药
细胞培养基是生物制药生产过程中必不可少的原料之一，用于大规 模培养细胞，生产重组蛋白、单克隆抗体等生物药物。
科学研究
细胞培养基广泛应用于生命科学、医学、药学和农业等领域的基础 研究和应用研究，如肿瘤研究、免疫学研究、干细胞研究等。
细胞培养基种类及用途
细胞培养基种类及用途1. DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）：DMEM 是最常用的无血清培养基之一，是以鹰的鸟胚为基础改进而来的，含有大量氨基酸、糖类、维生素和一些重要的生长因子。
适用于大多数哺乳动物细胞的培养，具有优良的细胞增殖和生长效果。
2.RPMI1640：RPMI1640是一种由罗斯韦尔公立医院制备的细胞培养基，主要用于淋巴细胞、淋巴瘤和骨髓细胞的培养。
它具有高浓度的氨基酸和维生素，适合长期的培养以及体外细胞繁殖实验。
3. MEM（Minimum Essential Medium）：MEM 是一种最简单的细胞培养基，含有大量的必需氨基酸、维生素和果糖。
它广泛用于原代细胞和肿瘤细胞的培养，具有适应性强、成本低的优势。
4. FBS（Fetal Bovine Serum）：FBS 不是一种细胞培养基，而是培养基中添加的血清。
FBS 富含细胞生长因子、激素和营养物质，可提供所需的细胞补体和血浆蛋白。
它被广泛用于细胞培养中，可以促进细胞的增殖和生长。
5. StemPro MSC SFM：StemPro MSC SFM 是一种专门设计用于人类间充质干细胞（MSC）培养的无血清培养基。
它富含生长因子和维生素，可以维持 MSC 的干性状态，有利于其增殖和多向分化。
6. Neurobasal medium：Neurobasal 是一种特殊的神经元细胞培养基，用于神经元细胞的培养。
它含有许多神经营养因子和激素，能够促进神经细胞的生长和分化。
7.DMEM/F12：DMEM/F12是一种混合型细胞培养基，是DMEM和HAMF12培养基的混合产物。
它具有增强细胞的生存能力和增殖速度的优势，适用于许多类型的肿瘤细胞和原代细胞的培养。
细胞培养基的选择要根据具体实验目的和细胞类型来确定。
不同种类的细胞培养基在细胞生长、增殖和分化方面有不同的影响，因此合理的选择细胞培养基可以提高实验效果和数据可靠性。
培养基的类型及应用
培养基的类型及应用培养基种类繁多,依据其成份、物理状态和用途可将培养基分成多种类型。
1．按成份不同划分(1) 天然培养基(complex medium)这类培养基主要以化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物组成,牛肉膏蛋白胨培养基和麦芽汁培养基就属于此类。
基因克隆技术中常用的LB(Luria-Bertani)培养基也是一种复合培养基,其组成见表4-10。
常用的天然有机营养物质包含牛肉浸膏、蛋白胨、酵母浸膏(表4-11)、豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、稻草浸汁、羽毛浸汁、胡罗卜汁、椰子汁等,嗜粪微生物(coprophilous microorganisms)可以利用粪水作为营养物质。
复合培养根本钱较低,除在实验室经常使用外,也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。
(2) 合成培养基(synthetic medium)合成培养基是由化学成份完全了解的物质配制而成的培养基，也称化学限定培养基(chemically defined medium),高氏1号培养基和查氏培养基就属于此种类型。
配制合成培养基时重复性强,但与天然培养基相比其本钱较高,微生物在其中生长速度较慢,一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。
2．依据物理状态划分依据培养基中凝固剂的有无及含量的多少,可将培养基划分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基三种类型。
(1) 固体培养基(solid medium)在液体培养基中参加肯定量凝固剂即为固体培养基。
理想的凝固剂应具备以下条件:1.不被所培养的微生物分解利用;2.在微生物生长的温度范围内保持固体状态。
在培养嗜热细菌时,由于高温简单引起培养基液化,通常在培养基中适当增加凝固剂来解决这一问题;3.凝固剂凝固点温度不能太低,否则将不利于微生物的生长;4.凝固剂对所培养的微生物无毒害作用;5.凝固剂在灭菌过程中不会被破坏;6.透明度好,粘着力强;7.配制方便且价格低廉。
各种细胞培养基的区别及应用
各种细胞培养基的区别及应用细胞培养基是用于体外培养细胞的一种重要介质，它可以为细胞提供生长所需的营养物质、生长因子、激素等。
根据不同的需求和应用领域，细胞培养基有很多种类和特点。
本文将对细胞培养基的区别及应用进行详细介绍，以帮助大家更好地了解和选择合适的细胞培养基。
一、细胞培养基的概述细胞培养基的发展历程可以追溯到上世纪50年代，随着生物科学研究的不断深入，细胞培养技术得到了广泛应用。
细胞培养基的研究和应用不仅为生物学基础研究提供了有力支持，还为医学、农业、工业等领域创造了巨大价值。
二、细胞培养基的区别1.基础培养基与专用培养基基础培养基：含有细胞生长所需的基本营养物质，如糖、氨基酸、维生素等，适用于大多数细胞的培养。
常见的基础培养基有DMEM、RPMI-1640、MEM等。
专用培养基：针对特定类型的细胞设计，具有较高的特定成分和较窄的营养成分范围，可以满足某些细胞对特定营养物质的需求。
如HEK293细胞培养基、MCF-7细胞培养基等。
2.天然培养基与合成培养基天然培养基：来源于动物血清、血浆等天然物质，含有丰富多样的生长因子、激素等，具有较高的生物活性。
常见的天然培养基有FBS（胎牛血清）、ABC（人血清）等。
合成培养基：通过化学合成或重组技术制备，成分明确、可定制。
可以根据细胞需求添加不同的生长因子、激素等，具有较高的可控性。
如MED64培养基、Synthemax培养基等。
3.液体培养基与固体培养基液体培养基：含水量较高，细胞在其中可以自由悬浮和生长。
常见的液体培养基有DMEM/F12、RPMI-1640等。
固体培养基：在液体培养基中添加固体成分，如琼脂、纤维素等，使细胞可以在固体表面附着生长。
常见的固体培养基有agarose、matrigel等。
4.不同种类的细胞对培养基的需求不同种类的细胞对培养基的需求不同，例如：- 淋巴细胞培养：需要较高浓度的氨基酸、维生素和血清；- 神经细胞培养：需要添加神经营养因子、生长因子等；- 肿瘤细胞培养：需要较高浓度的糖和血清。
细胞培养基
细胞培养基引言细胞培养基是一种为细胞提供营养和环境条件的培养介质。
它是细胞培养的重要组成部分，对于细胞的生长、增殖和维持细胞功能起着重要的作用。
细胞培养基的配方不同，适用于不同种类和类型的细胞。
本文将介绍细胞培养基的组成、分类以及常见的细胞培养基。
组成细胞培养基主要由以下几个组成部分构成：1.基础培养液：包括离子缓冲剂、氨基酸、维生素、糖类和氨基酸。
2.补充物：包括生长因子、激素、血清、抗生素等。
3.pH 调节剂：用于调节培养基的酸碱平衡。
4.胶质物：一些细胞需要胶质物来提供支持和结构。
分类根据不同的细胞类型和应用需求，细胞培养基可以分为多种类型。
以下是常见的细胞培养基分类：基本培养基基本培养基是最简单的培养基，适用于大部分常见的细胞类型。
它提供了基本的营养物质和环境条件，但不包含特定的生长因子。
选择性培养基选择性培养基是根据特定细胞类型的需求设计的。
它包含了特定的成分和生长因子，能够选择性地促进或阻断特定细胞的生长。
例如，神经细胞培养基用于培养神经细胞，血液细胞培养基用于培养血液细胞。
专用培养基专用培养基是针对特定的细胞类型或应用需求而设计的。
例如，《Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM)》是一种广泛应用于细胞培养的常用培养基，适用于多种细胞类型的培养。
定制培养基在某些情况下，研究人员可能需要根据自己的实验需求定制一种特殊的培养基。
这些定制培养基可能包含特定的成分和浓度，以满足特定细胞类型的需求。
常见的细胞培养基下面是一些常见的细胞培养基示例：1.DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium)：适用于许多不同类型的细胞，包含了所有必需的氨基酸、维生素和矿物质。
2.RPMI 1640：适用于淋巴细胞和肿瘤细胞的培养，含有谷氨酸、肝素和其它成分。
3.MEM (Minimum Essential Medium)：含有氨基酸、维生素和营养物质，适用于多种类型的培养。
培养基概述及细胞培养
培养基概述及细胞培养培养基是一种用于在实验室中培养和维持细胞生长的营养物质。
细胞培养是一种广泛应用于细胞生物学、生物医学研究和药物研发等领域的技术，它可以提供无限数量的细胞，用于研究细胞的生理功能、细胞生长和分裂等过程，以及疾病的发生机制和治疗方法。
细胞培养基通常由多种成分组成，包括碳源、氮源、维生素、无机盐、氨基酸和生长因子等。
碳源和氮源是细胞生长的关键因素，它们提供了细胞进行代谢和生长所需的能量和营养物质。
维生素、无机盐和氨基酸等成分可以为细胞提供必需的微量元素和营养物质，帮助维持细胞生长和功能。
生长因子是一种特殊的蛋白质，可以诱导和促进细胞的增殖和分化。
细胞培养基中还可以添加胎牛血清或人工合成的血清替代物，来提供细胞生长所需的生物因子和维持细胞的黏附。
细胞培养一般分为原代细胞培养和细胞系培养两种类型。
原代细胞培养是指从组织或器官中分离获得的刚建立的细胞，它们保持了其在体内的特性和功能。
原代细胞一般只能进行有限次数的传代，很难获得大量的细胞。
细胞系培养是指通过连续传代的方式，将细胞培养至无限增殖的状态。
细胞系培养通常使用的是肿瘤细胞或转化细胞。
细胞系培养可以获得大量的同一类型的细胞，用于大规模的实验和研究。
细胞培养的技术和方法不断发展和改进，如三维细胞培养、器官培养和干细胞培养等。
三维细胞培养是在三维载体上培养细胞，模拟体内的微环境，可以更好地模拟和研究组织和器官的生理和病理过程。
器官培养则是将整个器官或组织在体外培养，来研究其发育和功能。
干细胞培养是指通过特定的培养条件和因子，将多能干细胞定向分化为特定类型的细胞或组织，用于研究疾病的发生机制和药物开发。
总结来说，培养基是细胞培养的基础，提供了细胞生长所需的能量和营养物质。
细胞培养是一种广泛应用于细胞生物学和生物医学研究的重要技术，可以提供无限数量的细胞用于实验和研究。
随着细胞培养技术的不断发展和创新，细胞培养将在更广泛的领域和应用中发挥重要作用。
培养基的分类与用途
培养基的分类与用途培养基是微生物学研究中常用的一种实验工具，它是一种含有特定成分的液体或固体介质，提供给微生物生长和繁殖所需的营养物质。
根据其组分和用途的不同，培养基可以分为多种类型。
下面将介绍培养基的分类和常用的用途。
1. 培养基的分类培养基的分类可以按照多种不同的标准进行，比如成分、形态、用途等。
以下是按照成分和形态进行分类的几种常见的培养基：（1）按照成分分类根据培养基中是否包含肉汤、胨、蛋白胨等动物组织或其提取物，可以将培养基分为以下几类：a. 肉汤培养基：含有肉汤的培养基，通常用于检测细菌的生长和鉴定不同菌株。
b. 蛋白胨培养基：含有胨的培养基，适用于一般微生物的培养。
c. 血培养基：含有鲜血的培养基，适用于血液相关病原微生物的培养。
d. 偶氮染料培养基：含有偶氮染料的培养基，利用微生物对染料的反应进行鉴定。
（2）按照形态分类根据培养基的形态，可以将其分为以下几类：a. 液体培养基：呈液体状的培养基，适用于微生物的产生大量菌体和代谢产物。
b. 固体培养基：呈固体状的培养基，通常添加琼脂或琼脂糖等，用于微生物的分离和鉴定。
c. 半固体培养基：介于液体培养基和固体培养基之间的培养基，适用于微生物的细胞运动和分泌物的分析。
2. 培养基的用途培养基的用途非常广泛，不同类型的培养基可以满足不同的实验需求。
以下是一些常见的用途：（1）微生物生长和繁殖培养基最基本的用途就是提供微生物生长和繁殖所需的营养物质。
通过调节培养基成分的添加量和种类，可以促进特定微生物的生长，培养大量的菌体，以便进行后续实验。
（2）微生物鉴定和鉴定菌种不同微生物对培养基的成分和条件有不同的生长要求，利用这一特点，可以通过不同培养基来鉴定和鉴定微生物。
例如，利用含有某种特定营养物质的培养基，可以鉴定某些微生物对该物质的利用能力，从而判断其菌株特性。
（3）微生物菌落的形成和分离固体培养基可以使微生物生长为可见的菌落。
通过培养基的配方和形态，可以促进微生物在培养皿上形成单独的菌落，使其易于观察和分离。
实验常用培养基和基本特性
常用培养基及基本特性1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。
主要用于悬浮细胞培养。
其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。
2、Minimum Essential Medium（MEM）也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。
成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。
MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。
3、DMEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。
适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。
4、DMEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。
低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。
5、DMEM/F12DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。
F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DME/F12medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。
该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。
为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES 缓冲液。
6、McCoy’s 5AMcCoy’s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。
细胞培养中常用到哪些培养基
细胞培养中常用到哪些培养基1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特别造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培育，是目前应用非常广泛的培育基。
主要用于悬浮细胞培育。
其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。
2、Minimum Essential Medium（MEM）也称低必需培育基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。
成分简洁，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培育。
MEM-Alpha一般用于培育一些难培育细胞类型，而其它没有特别之处的细胞株则几乎均可采纳MEM来培育。
3、DMEM-高糖（标准型）是一种应用非常广泛的培育基，可用于很多哺乳动物细胞培育,更适合高密度悬浮细胞培育。
适用于附着性较差，但又不盼望它脱离原来生长点的克隆培育，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培育。
4、DMEM-低糖（标准型）是一种应用非常广泛的培育基，可用于很多哺乳动物细胞培育。
低糖适于依靠性贴壁细胞培育，特殊适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培育。
5、DMEM/F12DMEM/F12培育基适于克隆密度的培育。
F12培育基成分简单，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培育基（DME/F12medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的养分成分为优点。
该培育基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培育。
为了增加该培育基的缓冲力量，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES缓冲液。
6、McCoy’sMcCoy’s Medium 主要为肉瘤细胞的培育所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培育外，主要用于作组织活检培育、一些淋巴细胞培育以及一些难培育细胞的生长支持。
培养基的种类及其作用
培养基的种类及其作用
培养基根据其用途可分为四个类型:
⑴基础培养基:在一定条件下含有某种微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基,也称为基本培养基。
基本培养基可用于菌落的培养或得到所需代谢产物,也可用于制备其它特殊要求的培养基。
⑵加富培养基:为分离某类微生物专门设计的,在普通培养基中加入额外营养物的培养基。
如加入血、血清、动植物组织提取液。
目的微生物在这种培养基中较其他微生物生长速度快,并逐渐富集而占优势。
加富培养基主要用于菌种的保存或用于菌种的分离筛选。
⑶鉴别培养基:培养基中加有能与某种菌的代谢产物发生显色反应的指示剂,通过肉眼可观察出该菌菌落与相似的其他菌落相区分的培养基。
鉴别培养基主要用于菌种的鉴别和分离。
⑷选择培养基:根据某种类微生物的特殊营养需求或对某物理、化学因素的抗性而设计的培养基。
具有使混合菌群中的劣势菌成为优势菌的功能,可用来进行菌种筛选。
常用培养基的种类及用途
常用培养基的种类及用途
有许多种类的培养基可以帮助科学家、农业或医疗方面的科研工作或活动等。
这些培养基的种类繁多，种类也越来越多。
研究者们为了更好地研究细胞、微生物、细菌等，可以选择合适的培养基。
下面我们就来谈谈常见培养基的种类及用途：
首先，了解培养基的种类及用途，必须从通用培养基开始。
通用培养基非常适
合大多数细胞、微生物、细菌的培养，其中最常用的通用培养基之一是Tris-HCL。
Tris-HCL 可以有效支持真菌、细菌、病毒等的生长，是研究实验必不可少的物质。
其次，也是使用比较广泛的培养基是各类微生物培养基，这些微生物培养基也
被称作特异培养基，它们可以满足培养特定种类细菌或真菌之类特定微生物的需要，比如不同的抗生素培养基、放线菌培养基、细菌培养基等。
紧接着，我们要提到的培养基是适合培养细胞的类型，比如细胞培养基就是用
来支持不同细胞类型生长的培养基，它们之中可以包括重组培养基，以支持任何细胞的生长；或者免疫细胞培养基，可以支持免疫功能的细胞的发育和活跃。
再有，将培养基分类，一定不能忘记病原体培养基，这是一种特殊的培养基，
用于培养易于感染的有害病毒、细菌等危害人类健康与生命安全的微生物病原体，如流感，结核，猩红热和伤寒等。
最后，需要提到的是各种细胞膜膜培养基。
它们被广泛用于研究细胞膜结构和
物质流动，这些培养基可以模拟生物体细胞膜的环境，以便检验药物的毒性，进一步研究细胞的生理功能，或研究埃及螺旋菌和结核病毒。
从上面这些内容可以看出，许多种类的培养基有着各自特定的用途，不同培养
基可以用于不同的研究，可以很好地服务于科学研究，从而为社会健康发。
细胞培养专题——细胞培养基种类与基本成分
细胞培养专题——细胞培养基种类与基本成分细胞培养专题—细胞培养基种类与基本成分细胞培养专题—细胞培养基种类与基本成分细胞培养基种类与基本成分细胞培养基的种类很多，按其来源分为合成培养基和天然培养基（目前使用的培养基绝大部分是合成培养基），按其物质状态分为干粉培养基和液体培养基两类。
干粉培养基需由实验者自己配制并灭菌，液体培养基由专业商家提供，用户可直接使用，非常方便。
1、合成培养基的主要成分有：氨基酸、碳水化合物、无机盐、维生素及其它辅助物质：氨基酸氨基酸是组成蛋白质的基本单位。
不同种类的细胞对氨基酸的要求各异，但有几种氨基酸细胞自身不能合成，必须依靠培养液提供，这几种氨基酸称为必需氨基酸。
其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。
因此，各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。
但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培养液内。
已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2 周以上时，还应重新加入原来量的谷氨酰胺。
碳水化合物碳水化合物是细胞生长主要能量来源，其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。
主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。
无机盐培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。
此外，通过提供钠，钾和钙离子，帮助细胞调节细胞膜功能。
培养液的渗透压是一个非常重要的因素, 细胞通常可耐受260mOsm/kg ～320 mOsm/kg。
标准培养液的渗透压在此范围内波动。
特别注意：向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压，特别是溶于强酸或强碱中的物质。
向培养液中添加HEPES 时需按以下方法调节钠离子浓度。
缓冲系统大多数细胞所需pH 在 7.2 - 7.4。
但是，细胞培养最适pH 值随培养的细胞种类不同而不同。
成纤维细胞喜欢较高pH (7.4 - 7.7), 而传代转化细胞系则需要偏酸pH (7.0 - 7.4)。
由于多数培养液靠碳酸氢钠（NaHCO3）与CO2 体系进行缓冲，因此，气相中的CO2 浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。
细胞培养基种类及用途
细胞培养基种类及用途按照细胞培养基的发展历史，细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。
1.1 平衡盐溶液(balanced salt solution，BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。
其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。
D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。
因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份，参与细胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS 可避免细胞结团。
此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液，前者缓冲能力较弱，适合于密闭培养；后者缓冲能力较强，适合于5% CO2的培养条件。
1.2 天然细胞培养基天然培养基指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。
其优点是营养成分丰富，培养效果良好，但缺点是成分复杂，来源受限且制作过程复杂、批间差异大。
目前广泛使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。
水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解的产物，含丰富的多肽、氨基酸和碳水化合物。
一般配制成0.5 %溶液（采用平衡盐溶液溶解）与合成培养基（如MEM细胞培养基）以1:1的比例混合使用。
目前用于细胞培养的血清主要是牛血清，培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。
牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的，但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。
血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
此外，血清含一些对细胞产生毒性的物质，如多胺氧化酶，能与来自高度繁殖细胞的多胺反应（如精胺、亚精胺）形成有细胞毒性作用的聚精胺。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
基础细胞培养基通常指基础合成培养基，主要成分为氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐、辅助物质（核酸降解物、氧化还原剂等）。
据不同细胞和研究目的，选用合适培养基,•还可补加新成分。
•如杂交瘤中常用DMEM加丙酮酸钠、2-巯基乙醇（相当于胎牛血清可透析组分的作用）。
合成培养基使用时加5-30%血清。
1． 199细胞培养基及其改良品种
1950年Morgan等设计，除BSS外，含有53种成分，为全面培养基，广用于各类细胞培养，广泛用于病毒学、疫苗生产。
2． BME细胞培养基
基础Eagle培养基（Basal Medium Eagle），1955年Eagle设计，BSS＋12种氨基酸＋谷氨酰胺＋8种维生素。
简单、便于添加，适于各种传代细胞系和特殊研究用，在此基础上改良的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMEM等。
3． MEM细胞培养基
低限量Eagle培养基（Minimal Essential Medium），1959年修改，删去赖氨酸、生物素，氨基酸浓度增加，适合多种细胞单层生长，有可高压灭菌品种，是一种最基本、试用范围最广的培养基，但因其营养成分所限，针对生产之特定细胞培养与表达时，并不一定是使用效果最佳或者最经济的培养基。
4． DMEM细胞培养基及其改良品种
DMEM由Dulbecco改良的Eagle培养基，各成份量加倍，分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)。
生长快，附着稍差肿瘤细胞、克隆培养用高糖效果较好，常用杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞培养。
例如CHO细胞表达生产乙肝疫苗、CHO细胞表达EPO。
5． IMEM细胞培养基
IMEM由Iscove's改良的Eagle培养基，增加了几种氨基酸和胱氨酸量。
6． RPMI-1640细胞培养基
Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制，针对淋巴细胞培养设计，BSS＋21种氨基酸＋维生素11种等，广泛适于许多种正常细胞和肿瘤细胞，也用做悬浮细胞培养
7．Fischer’s细胞培养基
用于白血病微粒细胞培养。
8． HamF10、F12细胞培养基
1963年、1969年Ham设计，含微量元素，可在血清含量低时用，适用于克隆化培养。
F10适用于仓鼠、人二倍体细胞，特适于羊水细胞培养。
9． DMEM/F12细胞培养基
DMEM和F12细胞培养基按照1:1比例混合效果最佳，营养成分丰富，且可以使用较少血清，或作为无血清培养基的基础培养基。
10． McCoy5A培养基
1959年MeCoy为肉瘤细胞设计，
BSS＋40种成分，用于正常和肿瘤细胞，尤对原代和难于培养细胞较好。