电镜样品处理

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样品处理步骤:

样品包埋

1、将组织切成

的小快儿,立即投入3%的戊二醛固定液

中,抽气直到组织块完全进入固定液,4摄氏度固定过夜。2、经PBS充分洗涤(离心管中洗10次,每次15分钟),用0.1%

的锇酸后固定,25摄氏度,2小时

3、换离心管用0.1M PBS充分洗涤(洗10次,每次15min),乙醇

系列脱水,每次10min;纯丙酮过度,3次,每次10min。

4、浸透,0、5ml Spurr树脂+5滴丙酮

5、包埋:70摄氏度聚合

6、制超薄切片

7、切片捞在100目0.3%Formvar膜覆盖的镍网上。

染色

用2%的醋酸铀25摄氏度染色10min,用重蒸水洗3次,每次20min 再用柠檬酸铅25摄氏度染色5min,用重蒸水洗三次,每次20min。电镜观察

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