生物技术制药期末

第四章抗体制药

1．Ig分子是由二硫键连接起来的4条（两对）条多肽链构成的。

2．单克隆抗体制备时对动物的免疫方法分为体内免疫和体外免疫。

3．一般来说PEG的相对分子质量和浓度越大，细胞的融合率越高。

1.Ig分子的抗原结合部位是由（V L和V H的CDR区）共同构成。

2.制备单克隆抗体时一般采用与（骨髓瘤细胞）供体同一品系的动物进行免疫。

3.生物药物检验要求（理化指标和生物活性指标缺一不可）。

4.下列不属于基因产品液态保存的方法是（低浓度保存）

5.前预防乙型肝炎使用的生物制品属于（疫苗）。

单克隆抗体：由单一的B淋巴细胞克隆产生的，这种抗体是针对一种抗原决定簇的抗体，称为单克隆抗体。

双功能抗体：就是双特异性单链抗体，将抗A抗原抗体的轻链可变区基因与抗B抗原抗体的重链可变区通过短肽链接子连接构建成双链抗体的表达质粒，表达后形成双特异性抗体。多克隆抗体：病原微生物含有多种抗原决定簇的抗原物质，因此这些抗体制剂也是多种抗体的混合物，故称多克隆抗体。

抗体：是指能与相应抗原特异性结合具有免疫功能的球蛋白。

克隆化：指单个细胞通过无性繁殖而获得细胞集团的整个培养过程。

免疫球蛋白：将具有抗体活性及化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白。

类型基本结构

人-鼠嵌和抗体人IgC-小鼠IgV

改型抗体小鼠CDR替换人CDR

Fab 完整L链和Fd

Fv V H和V L

单链抗体（scFv） V H-或-V L

单域抗体 V H或 V L

最小识别单位（MRU）一个CDR

人-鼠嵌和抗体：由于抗体同抗原结合的功能决定于抗体分子的可变区（V），同种性免疫原决定于抗体分子的稳定区（C）,如果在基因水平上把鼠源性单克隆抗体的重链（H）和轻链（L）可变区分离出来，分别与人Ig的重链的稳定区（C）基因连接成人-鼠嵌合体的H

和L链基因，再共转染骨髓瘤细胞，就能表达出完整的人-鼠嵌合抗体。

Fab抗体：用胃蛋白可将IgG的重链在铰链区的C端处裂解，获得两个完全相同的抗原结合片段，在Fab片段之间仍保留有铰链区与二硫键，为Fab双体，具有完整的双价抗体活性，但相对分子质量减少了1/3，为10000，在人体内产生的抗鼠蛋白的排斥反应也相应降低30%，由于仍保持抗体分子的立体构型，因此在人体任然很稳定，成为小分子抗体的锥形。

单链抗体：是由一段弹性链接肽把抗体可变区重链（VH）与轻链（vl）相连而成，是具有亲代抗体全部抗原结合特异性的最小功能单位。

单域抗体：抗体的V H-或-V L是具有结合抗原特异性的小抗体片段。

改形抗体：Ig 分子中参与构成抗原结合部位的区域是H和L链V区中的互补决定区（CDR 区），而不是整个可变区。 H和L链各有三个CDR，其它部分称框架区。用鼠源单抗的CDR 序列替换人Ig 分子中CDR序列，则可使人的Ig 分子具有鼠源单抗的抗原结合特异性。可消除免疫源性。又称CDR移植抗体。

（单克隆抗体）免疫导向疗法障碍有：1，单克隆抗体均是鼠源性抗体，应用于人体内可产生人抗鼠抗体，加速了排斥反应，难以维持有效药物作用靶组织时间；2，完整的抗体分子，

即Ig的相对分子质量过大，难以透穿肿瘤组织。改造：1，降低单克隆抗体的免疫原性；2，降低单克隆抗体的相对分子质量。

免疫学的三大类抗体诊断药物：血清学鉴定用的抗体制剂、免疫标记技术用的抗体制剂和体内导向诊断药物。

第五章植物细胞工程制药

1．与动物细胞和微生物细胞相比，植物细胞具有细胞壁、液泡和质体。

2．植物细胞的悬浮培养分为静止和振荡。

3．植物组织和细胞培养物的生长主要取决于生长素和分裂素的比例。

4．大多数植物细胞的培养基中的氮都是以 NH4+和 NO3-形式提供的。

5．常用的对植物组织培养的表面灭菌剂是次氯酸钙、次氯酸钠和氯化汞。6．植物培养细胞重量的增加主要取决于对数期，而次级代谢产物的累积则主要在稳定期。次级代谢作用：由特异蛋白质调控产生的内源化合物的合成,代谢及分解作用的综合过程. 初级代谢物：核酸、核苷、核苷酸、氨基酸、蛋白质及糖类。次级：生物碱、黄酮体、萜类、有机酸、木质素等。

次级代谢产物：除了核酸、核苷、核苷酸、氨基酸、蛋白质及糖类以外，具有如下特征的成分成为次级代谢产物：有明显的分类学区域界限；其合成需在一定的条件下才能发生；缺乏明确的生理功能；是生命的多余成分。

植物细胞工程：以植物细胞为基本单位，应用于细胞生物学、分子生物学等理论和技术，在立体条件下进行培养、繁殖或人为的惊细操作，使细胞的某些生物学特性按人们的意思发生改变，从而改良品种、制造新品种、加速繁育植物个体或获得有用物质的一门科学或技术。植物细胞全能性：植物体中任何一个具有完整细胞核的细胞，在一定条件下都可以重新再分化成原来的个体。

分化：可以分为胚胎发生和器官发生两个阶段。前者是从精子与卵细胞结合开始，分化为幼胚，进而发育为成熟胚和种子。种子在适宜的条件下分化过程，形成根、茎、叶、花和果实。脱分化：已经分化的细胞、组织和器官在人工培养的条件下又变成未分化的细胞和组织的过程。再分化：通过脱分化诱导形成的愈伤组织在适宜的培养条件下可再分化成为胚状体或直接分化出器官。

细胞培养：指利用单个细胞进行液体或固体培养，诱导其增殖及分化的培养试验。目的：得到单细胞无性繁殖系。

外植体：指用于植物组织培养的器官或组织，植物的各部位如根、茎、叶、花、果、穗、胚珠、胚乳、花药和花粉等均可作为外植体进行组织培养。

继代培养：由最初的外植体上切下的新增殖的组织，培养一代称为“第一代培养”，连续多代的培养就称为继代培养。

植物激素：是植物代谢过程中形成的生长调节物质，在极低浓度（小于1微摩时即能调节植物的生育过程，并能从合成部位转运到作用部位而发挥作用。

固体培养：是在培养基中加入一定量的凝固剂，经加热溶解后，分别装入培养的容器，冷却后凝结成固体培养基。

生物反应器：人们通常将用于细胞大规模生产的装置称为发酵罐，而将主要用于生产次级代谢产物的装置称为生物反应器。

1．影响植物次级代谢产物产生和累积的主要因素有哪些？

影响次级代谢产物产生和累积的因素主要有：（1）、生物条件：外植体、季节、休眠、分化等；（2）、物理条件：温度、光（光照时间、光强、光质）、通气（氧气）、酸度和渗透压；（3）、化学条件：无机盐、碳源、物质生长调节剂、维生素、氨基酸、核酸、抗生素、天然