人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒说明书

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人β2-糖蛋白I elisa 说明书

人β2-糖蛋白I elisa 说明书

人β2-糖蛋白I (β2-GPI )酶联免疫酶联免疫分析分析分析试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围检测范围:: 96T30µg/L -800µg/L使用目的使用目的::本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中β2-糖蛋白I (β2-GPI )含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人β2-糖蛋白I (β2-GPI )水平。

用纯化的人β2-糖蛋白I (β2-GPI )抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入β2-糖蛋白I (β2-GPI ),再与HRP 标记的β2-糖蛋白I (β2-GPI )抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的β2-糖蛋白I (β2-GPI )呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人β2-糖蛋白I (β2-GPI )浓度。

试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml ×1瓶 7 终止液 6ml ×1瓶 2 酶标试剂 6ml ×1瓶 8 标准品(1600µg/L ) 0.5ml ×1瓶3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml ×1瓶4 样品稀释液 6ml ×1瓶 10 说明书 1份5 显色剂A 液 6ml ×1瓶 11 封板膜 2张 6显色剂B 液6ml ×1/瓶12密封袋1个标本标本要求要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP )活性。

操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

内毒素去除试剂盒说明书

内毒素去除试剂盒说明书

内毒素去除试剂盒说明书I. DESCRIPTION细菌内毒素(脂多糖,LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分。

人们在研究革兰氏阴性菌血症和内毒素血症的过程中,发现细菌内毒素在其中起着关键的作用,内毒素使机体免疫功能严重受损,进一步的发展可能引发脓毒性休克,弥散性血管内凝血,急性呼吸窘迫综合症,全身炎症反应综合症或致命性多器官功能衰竭。

因此,内毒素的去除对于人类疾病治疗的注射型药品、生物制品等都是必须的,尤其对于基因药物、蛋白药物、单抗克隆药物、治疗性疫苗、小分子化学药物等生物制品的下游纯化处理来说就显得非常重要。

本试剂盒使用的是一类高效内毒素去除树脂,它以修饰过的多粘菌素B(PMB)为配体,进行特异性的内毒素去除。

经此亲和树脂纯化,样品最终的内毒素水平可低于0.1 EU/ml。

亲和树脂的主要特性如下表:规格 1.5 ml预装柱结合能力高达2,000,000 EU/ml 树脂配基修饰的多粘菌素B (PMB)pH 范围pH 5-10基质4% 交联的琼脂糖凝胶颗粒大小90 µm保存温度2°C-8°C使用寿命18个月平衡缓冲液磷酸盐缓冲液,pH 8.0适合纯化对象蛋白,多肽,抗体,多糖等离子条件0.1-0.5 M NaCl可耐受试剂20% DMSO, 20% 乙醇, 20% 甘油;1 M 尿素, 300 mM 咪唑; 0.05% 吐温-20, 10 mM DTT 等II. KEY FEATURES·高稳定性,高去除效率·高结合力:> 2, 000, 000 EU / ml (CV)·无需恒流泵即可调节流速·重复使用5次不会改变柱子效果·使用方便,试剂盒中提供无热源缓冲液,无热源收集管,无热源枪头等III. CONTENTS试剂盒内容 3 – 5个测试亲和树脂 1.5 ml 预装柱再生缓冲液125 ml平衡缓冲液125 ml流速控制器1个无热源接收管 1 包(3个/包)无热源枪头(1 ml) 2包(6个/包) 说明书1份IV. MATERIALS AND EQUIPMENT NEEDED BUT NOT PROVIDED1. 铁架台2. 0.1 M的氢氧化钠和0.1M盐酸, 用于调节样品pH值V. ENDOTOXIN REMOVAL PROTOCOL样品处理:样品的pH值和离子强度在内毒素去除的过程中起着重要作用。

脂多糖(LPS)提取试剂盒-Qwbio

脂多糖(LPS)提取试剂盒-Qwbio

脂多糖(LPS)提取试剂盒Lipopolysaccharide(LPS)Extraction Kit产品描述:最常用的LPS提取方法仍然是Westphal,O. (1965)使用的热酚-水法(hot phenol-water method),主要优势在于高产量,但是提取步骤繁琐,费时,以及常受蛋白质和核酸的污染,纯度低等缺点也常困扰科研工作者。

启维益成代理iNtRON的LPS提取试剂盒是市场上第一个商品化的产品,排除传统热酚-水法的缺陷,使得科研工作者能够快速方便的从细菌中提取LPS。

技术参数:从不同的细菌中提取脂多糖的量利用脂多糖提取试剂盒从不同的OD600nm的革兰氏阴性菌中提取LPS,并采用Purpal Assay 定量分析LPS提取量,提取效率列于上表中。

同时利用SMART TM Micro BAS 分析试剂盒分析蛋白的含量,结果显示蛋白质的含量低于0.2微克。

试剂盒使用中常见问题问答Q:我打算提取脂多糖,但是我们的离心机针对15ml的离心管最大的转速是10,000rpm。

但按照说明书中描述,需要13,000rpm离心10分钟。

想请问我采用10,000rpm下离心30分钟能达到同样的效果吗?A:可以的,您可以在10,000rpm下离心20-30分钟,但是我们建议为了达到最好的效果最好采用13,000rpm离心10分钟。

Q:我想要提取脂多糖,我能先使用试用装吗?A:脂多糖提取试剂盒是基于酚-水提取法研发的,因此是使用效果好且操作简单,我们没有提供试用装。

Q:我想在植物中通过分离多糖来核对其免疫活性,我想知道多糖中是否含有脂多糖。

A:在植物中没有脂多糖。

脂多糖存在于细菌中二各种糖类是存在于植物中。

如果您想确认提取的LPS,可使用银染法。

换句话说,在您使用LPS提取试剂盒提取LPS后,您可以利用银染法简单地分析LPS的带形。

Q:我一直在使用LPS提取试剂盒,但是产物中还存在少量蛋白。

A:存在较多的蛋白质意味着上样量太大了,为了得到更好的效果使用建议的样品用量,如果提取的LPS中存在蛋白,建议使用蛋白酶k 来去除。

人脂多糖LPS酶联免疫分析ELISA

人脂多糖LPS酶联免疫分析ELISA

人脂多糖(LPS)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中脂多糖(LPS)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人脂多糖(LPS)水平。

用纯化的人脂多糖(LPS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂多糖(LPS),再与HRP标记的脂多糖(LPS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的脂多糖(LPS)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人脂多糖(LPS)浓度。

试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。

大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒说明书

大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒说明书

大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中脂多糖结合蛋白(LBP)含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)水平。

用纯化的大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂多糖结合蛋白(LBP),再与HRP标记的脂多糖结合蛋白(LBP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的脂多糖结合蛋白(LBP)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)浓度。

样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5.组织标本:切割标本后,称取重量。

加入一定量的PBS,PH7.4。

人P21蛋白(P21)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书

人P21蛋白(P21)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。

人P21蛋白(P21)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【试剂盒名称】人P21蛋白(P21)定量检测试剂盒(ELISA)【试剂盒用途】定量检测人血清、血浆及相关液体样本中P21蛋白(P21)的含量。

【检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。

将标准品、待测样本加入到预先包被人P21蛋白(P21)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。

依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人P21蛋白(P21)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人P21蛋白(P21)含量。

【试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7显色剂A液6mL2标准品0.3mL×6管8显色剂B液6mL320倍浓缩洗涤液25mL9终止液6mL4样本稀释液6mL10说明书1份5特殊稀释液6mL11封板膜2张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品(1号→6号)浓度依次为:48、24、12、6、3、1.5ng/L【需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。

2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。

4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。

碧云天生物技术 Human Angiogenin ELISA Kit PA023说明书

碧云天生物技术 Human Angiogenin ELISA Kit PA023说明书

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线:400-168-3301或800-8283301订货e-mail:******************技术咨询:*****************碧云天网站微信公众号网址:Human Angiogenin ELISA Kit产品编号产品名称包装PA023 Human Angiogenin ELISA Kit 96次产品简介:碧云天的Human Angiogenin ELISA Kit (Human Angiogenin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人血管生成素酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的Angiogenin的ELISA试剂盒。

本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。

多次重复检测结果表明,最小检出量为4.75pg/ml,与EGF、GM-CSF、MIP-1α、MIP-1β、TGF-α、TGF-β1,小鼠 EGF、GM-CSF、MIP-1α等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。

人血管生成素(Angiogenin, ANG)是一种分子量为14kDa的单链非糖基化蛋白,属于核糖核酸酶中RISBASE家族。

该家族成员不仅具有核糖核酸酶活性,还具有一些特殊的生物学功能。

ANG氨基酸长度为123,包括3个链内二硫键。

人ANG与小鼠ANG具有75%的氨基酸同源性,且具有一定的种间交叉反应。

能够表达ANG的细胞主要有血管内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞、结肠柱状上皮细胞、淋巴细胞和部分肿瘤细胞。

ANG主要参与血管的形成过程。

基底膜的降解是血管新生过程中内皮细胞发生迁移的先决条件。

ANG首先与肌动蛋白结合,随后肌动蛋白-ANG复合物发生裂解,激活组织血纤维蛋白溶酶原。

这一过程产生的血纤维蛋白溶酶会降解基底膜中的层粘连蛋白和纤连蛋白。

CEB526Ge-脂多糖(LPS)检测试剂盒

CEB526Ge-脂多糖(LPS)检测试剂盒

CEB526Ge96T脂多糖(LPS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)适用生物:泛物种使用说明书仅供体外研究使用,不用于临床诊断!第12版(2016年05月修订)[预期应用]本试剂盒运用竞争抑制ELISA法定量测定血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关生物液体中脂多糖含量。

[试剂盒内容]试剂名称数量试剂名称数量96孔板(预包被)196孔板覆膜4标准品2标准品稀释液1×20mL检测溶液A1×120μL检测稀释液A1×12mL检测溶液B1×120μL检测稀释液B1×12mLTMB底物1×9mL终止液1×6mL浓洗涤液(30×)1×20mL使用说明书1[需自备的设备及试剂]1、450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)2、单道或多道微量移液器及吸头3、稀释样品的EP管4、蒸馏水或去离子水5、吸水纸6、盛放洗液的容器7、0.01mol/L(或1×)磷酸缓冲盐(PBS),pH=7.0-7.2[试剂盒的储存及有效期]1、未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。

请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20o C,其余试剂请置于4o C保存备用。

2、使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,此外,请将未使用酶标条用包含干燥剂的铝箔袋装好,并拉紧密封铝箔袋,置于-20o C保存。

注意:试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。

产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。

[标本的采集与保存]1、血清:将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置2小时或4o C过夜,然后1,000×g离心20分钟,取上清即可,将上清置于-20o C或-80o C保存,避免反复冻融。

天净沙系列脂多糖PAGE胶银染试剂盒使用手册说明书

天净沙系列脂多糖PAGE胶银染试剂盒使用手册说明书

天净沙系列CAT#:220509-10常温运输和保存脂多糖PAGE 胶银染试剂盒LPS PAGE Silver Staining Kit使用手册V1.0江苏天净沙基因诊断技术有限公司网址:;电话:400-6605850;电邮:*****************产品及特点脂多糖银染的原理是银离子(Ag+)可与脂多糖形成稳定的复合物,然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银颗粒,可把脂多糖电泳带染成黑褐色。

本产品就是根据此原理开发,它具有下列特点:1.即开即用,用户不需要单独准备各个成分,优化操作条件。

2.可用于聚丙烯酰胺凝胶电泳得到的脂多糖。

3.灵敏度高,能检测到几十ng的脂多糖条带。

4.比常规的银染方法快捷,只有染色和显影两步,只需要20分钟。

5.本产品足够配制1000mL的工作液,足够10次银染。

6.本产品只能用于科研。

规格及成分本产品采用小扁盒(无垫)包装成份编号规格包装材料溶液A成分一(干粉)220509a12克10mL棕色塑料瓶溶液A成分二,10×220509a2100mL125mL本色瓶溶液A成分三,10×220509a3100mL125mL本色瓶溶液B成分一,10×220509b1100mL125mL本色瓶溶液B成分二220509b25mL5mL本色瓶使用手册220509sc1份无运输及保存常温运输和保存,保存期限为一年。

自备试剂去离子水。

使用方法一、配制溶液A(即染色液)100mL注意:溶液A需要新鲜配制,不能存放。

所需溶液A(染色液)的体积跟PAGE胶的面积大小相关,一般的10cm×10cm的mini-PAGE胶需要20-30mL。

下面的用量是针对配制100mL溶液A。

如果配制的溶液A的体积不是100mL,则需按比例改变各成分用量。

1.在一干净烧杯中加入下列成分,充分搅拌混匀即可。

成分用量自备去离子水80mL溶液A成分一0.2g溶液A成分二10mL溶液A组分三10mL二:配制溶液B100mL需要配制的溶液B(显色液)的体积完全跟PAGE胶的大小相关,一般的10cm×10cm的mini-PAGE胶需要20-30mL溶液B。

革兰阴性菌脂多糖检测试剂盒(光度法)产品技术要求jinshanchuan

革兰阴性菌脂多糖检测试剂盒(光度法)产品技术要求jinshanchuan

革兰阴性菌脂多糖检测试剂盒(光度法)适用范围:与本公司生产的微生物快速动态检测系统配套使用,用于体外定量测定人血清中革兰阴性菌脂多糖的含量。

1.1 产品规格EKT-1M:20人份/盒;EKT-5M:50人份/盒;EKT-10M:50人份/盒;EKT-20M:60人份/盒。

1.2 主要组成成分EKT-1MEKT-5MEKT-10MEKT-20M2.1 外观反应主剂为白色冻干粉末,样品处理液为无色透明液体,反应主剂溶解液为无色透明液体。

2.2装量样品处理液为0.9ml/支;EKT-5M反应主剂溶解液0.6ml/支;EKT-10M反应主剂溶解液为1.2ml/支;EKT-20M反应主剂溶解液为2.4ml/支,其中装量不小于标称值。

2.3准确性试剂盒对革兰阴性菌脂多糖的回收率为75%~125%。

2.4重复性试剂盒重复检测结果的CV(%)值应不大于10%。

2.5线性在浓度0.8 pg/ml~500 pg/ml范围内,其线性相关系数的绝对值r≥0.980,在0.8 pg/ml~75 pg/ml范围内,绝对偏差为±11.25pg/ml,在75 pg/ml~500 pg/ml范围内,相对偏差≤15%。

2.6空白检测限革兰阴性菌脂多糖的空白检测限为1pg/ml。

2.7反应特征曲线反应主剂的反应特征曲线应为反S形。

2.8原始吸光度酶反应主剂在(270±5)nm波长处应有单一吸收峰。

2.9批间差不同批号的试剂盒检测结果的相对偏差应不大于10%。

2.10稳定性试剂盒2-8℃储存有效期36个月,贮存期末的分析性能应符合2.1~2.8的要求。

脂多糖结合蛋白在脓毒症患者诊断和预后预测中的作用

脂多糖结合蛋白在脓毒症患者诊断和预后预测中的作用

脂多糖结合蛋白在脓毒症患者诊断和预后预测中的作用焦京;蒋宇;高敏;王念;杨明施;肖献忠【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2015(000)007【摘要】目的:探讨脂多糖结合蛋白( LBP)在脓毒症患者诊断和预后预测中的作用。

方法:挑选ICU的患者共80名,患者分为全身炎症反应综合征( SIRS)组(阴性对照组)、脓毒症存活组和脓毒症死亡组;所有患者均于进入ICU后24 h内采集血清样本并进行APACHEⅡ评分分析;另挑选10名健康志愿者血清作为正常对照组;ELISA检测各组样本血清LBP、C反应蛋白( CRP)和降钙素原( PCT)浓度;并以APACHEⅡ评分、血清LBP、CRP和PCT浓度对脓毒症诊断和预后预测做ROC曲线,评价LBP在脓毒症患者诊断和预后预测中的作用。

结果:与SIRS组相比,脓毒症组的APACHEⅡ评分、血清LBP、CRP、PCT浓度均升高( P<0.05);与脓毒症存活组相比,死亡组的APACHEⅡ评分和血清LBP浓度升高( P<0.05),而血清CRP和PCT浓度在脓毒症存活组与死亡组之间的差异无统计学意义;LBP血清浓度高于26.84 mg/L时诊断脓毒症的敏感性和特异性分别为97.1%和95.9%;LBP血清浓度高于54.16 mg/L时预测脓毒症预后的敏感性和特异性分别为85.2%和80.0%。

结论:与传统的脓毒症生物标志物CRP、PCT相比,LBP在脓毒症的诊断和预测方面都具有更好的效果。

【总页数】6页(P1294-1299)【作者】焦京;蒋宇;高敏;王念;杨明施;肖献忠【作者单位】湖南师范大学医学院生物化学与分子生物学教研室,湖南长沙410006;中南大学湘雅医学院病理生理学教研室,湖南长沙410013;中南大学湘雅三医院急危重症医学中心,湖南长沙410013;中南大学湘雅医学院病理生理学教研室,湖南长沙410013;中南大学湘雅三医院急危重症医学中心,湖南长沙410013;中南大学湘雅医学院病理生理学教研室,湖南长沙410013【正文语种】中文【中图分类】R446.1;R631+.1【相关文献】1.PCT和D-二聚体在急诊脓毒症患者病情及预后预测中的应用评价 [J], 王锋;胡小平;刘自刚2.多因素超声评分法在胎儿肾积水产前诊断及预后预测中的诊断价值 [J], 吴竹君;刘峰;金晓倩;陈霞3.上皮-间质转化诱导转录因子在肺癌诊断和预后预测中的作用 [J], 申雪芳; 花晴; 王敬; 许平波4.18F-PSMA PET/CT在前列腺癌诊断与预后预测中的价值初探 [J], 王卓楠;吴开杰;郑安琪;高俊刚;袁网;李磊;贺大林;段小艺5.血清刺激性甲状腺球蛋白水平在分化型甲状腺癌诊断及预后预测中的价值 [J], 吴捷;王欢;梁昌平;王敏;何涛因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

牛脂多糖结合蛋白(LBP)说明书

牛脂多糖结合蛋白(LBP)说明书

牛脂多糖结合蛋白(LBP)酶联免疫酶联免疫分析分析分析试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围检测范围:: 96T0.4ng/ml -15ng/ml使用目的使用目的::本试剂盒用于测定牛血清、血浆及相关液体样本中脂多糖结合蛋白(LBP)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛脂多糖结合蛋白(LBP)水平。

用纯化的牛脂多糖结合蛋白(LBP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂多糖结合蛋白(LBP),再与HRP 标记的脂多糖结合蛋白(LBP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的脂多糖结合蛋白(LBP)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中牛脂多糖结合蛋白(LBP)浓度。

试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml ×1瓶 7 终止液6ml ×1瓶 2 酶标试剂 6ml ×1瓶 8 标准品(24ng/ml ) 0.5ml ×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml ×1瓶 4 样品稀释液 6ml ×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A 液 6ml ×1瓶 11 封板膜 2张 6显色剂B 液6ml ×1/瓶12密封袋1个标本标本要求要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP )活性。

操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

12 ng/ml 5号标准品 150µl 的原倍标准品加入150µl 标准品稀释液 6ng/ml 4号标准品 150µl 的5号标准品加入150µl 标准品稀释液 3ng/ml 3号标准品 150µl 的4号标准品加入150µl 标准品稀释液 1.5ng/ml 2号标准品 150µl 的3号标准品加入150µl 标准品稀释液 0.75ng/ml1号标准品150µl 的2号标准品加入150µl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

细菌脂多糖提取试剂盒说明书

细菌脂多糖提取试剂盒说明书

细菌脂多糖提取试剂盒说明书细菌脂多糖提取试剂盒说明书一、产品介绍细菌脂多糖提取试剂盒是一种用于提取细菌脂多糖的试剂盒。

该试剂盒采用了先进的生物技术,能够快速高效地从细菌中提取出脂多糖,适用于各种类型的细菌。

二、试剂组成本试剂盒包含以下组分:1. 细胞壁水解液:含有酸性和碱性水解酶,能够有效地降解细胞壁和膜结构,使得脂多糖易于提取。

2. 氯仿:用于沉淀杂质和去除蛋白质等杂质。

3. 乙酸:用于调节pH值,使得样品处于适宜的环境中。

4. 硫酸铵:用于沉淀DNA和RNA等核酸杂质。

5. 乙醇:用于洗涤和沉淀样品。

6. 水:纯净水,用于稀释试剂和洗涤样品。

三、使用方法1. 样品制备将需要提取的细菌样品收集到离心管中,离心5分钟,去除上清液,保留菌体沉淀。

2. 细胞壁水解向菌体沉淀中加入适量的细胞壁水解液,混匀后放置于37℃水浴中反应4小时。

3. 氯仿处理将细胞壁水解液与氯仿按1:1的比例混合,摇匀后放置于室温下静置10-15分钟。

待两相分离后,取上层的水相液体转移至新的离心管中。

4. 氨基酸处理向新的离心管中加入等体积的氨基酸(如丝氨酸),混匀后放置于室温下静置30分钟。

此步骤可以去除蛋白质等杂质。

5. 硫酸铵沉淀向样品中加入等体积的硫酸铵,并在冰箱中冷藏1小时。

待样品沉淀后,用乙醇洗涤和沉淀样品。

6. 溶解和检测将样品用纯净水溶解并稀释至适宜浓度,即可进行下一步实验操作或检测。

四、注意事项1. 本试剂盒仅供科研使用,不得用于临床诊断。

2. 所有操作需在洁净的实验室环境下进行,避免污染样品。

3. 操作过程中需佩戴手套和口罩,避免吸入或接触试剂。

4. 所有试剂均需储存于4℃以下,避免阳光直射和高温环境。

5. 本试剂盒内的试剂不可直接食用或注射。

6. 使用前请仔细阅读说明书,并按照操作步骤进行操作。

七、联系方式如有任何问题或需要帮助,请联系我们:电话:XXX-XXXXXXX邮箱:XXXXX@XXXX.。

n-末端脂多糖结合蛋白

n-末端脂多糖结合蛋白

什么是n-末端脂多糖结合蛋白(n-terminal lipopolysaccharide-binding protein,简称LBP)。

n-末端脂多糖结合蛋白(LBP):
1. 结构与功能:LBP是一种在肝脏中合成的急性相蛋白。

它的主要功能是与细菌的脂多糖(LPS)结合,从而增强免疫系统对LPS的反应。

2. 生物学意义:LBP在炎症反应中起到关键作用,因为它可以帮助将LPS呈递给其他免疫细胞,如巨噬细胞和树突状细胞,从而激活它们。

3. 临床意义:LBP的水平在某些疾病中可能会升高,如感染、炎症和某些癌症。

因此,它可以作为这些疾病的生物标志物。

4. 检测方法:LBP的水平可以通过血液检测来测量。

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  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断
人(Human)脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA检测试剂盒使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

往预
先包被脂多糖结合蛋白(LBP)抗体的包被微孔中,依次加入标本、
标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显
色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成
最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的脂多糖结合蛋白(LBP)呈正相
关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞
刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地
分离。

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000 转离心30 分钟取上清。

3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000 转离心10 分钟
取上清。

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于
-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20 分钟。

从冰箱取出的
浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解
后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3. 浓度为0 的S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5 倍,最终结果乘以5 才是样本实际浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成
名称96孔配置48孔配置备注
微孔酶标板12 孔×8 条12 孔×4 条无
标准品0.3mL*6 管0.3mL*6 管无
样本稀释液6mL 3mL 无
检测抗体-HRP 10mL 5mL 无
20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL 3mL 无
底物B 6mL 3mL 无
终止液6mL 3mL 无
封板膜2 张2 张无
说明书1 份1 份无
自封袋1 个1 个无
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、15、30、60、120、240μmol/L
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20 稀释,即1 份的20×洗涤缓
冲液加19 份的蒸馏水。

洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min 后甩尽
孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5 次。

2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5 次。

操作步骤
1. 从室温平衡20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封
袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不
加。

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶
(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴
锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去
洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5 次(也可用洗板机洗板)。

6. 每孔加入底物A、B 各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL,15min 内,在450nm 波长处测定各孔的
OD 值。

结果判断
绘制标准曲线:在Excel 工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应
OD 值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样
本浓度值。

试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R 值,大于等于
0.9900。

2. 灵敏度:最低检测浓度小于1.0μmol/L。

3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

6. 有效期:6 个月
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

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