一氧化氮检测.ppt
一氧化氮和二氧化氮课件
04
一氧化氮和二氧化氮的检测与 防治
一氧化氮和二氧化氮的检测方法
化学分析法
通过化学反应将一氧化氮和二氧 化氮转化为有色化合物或离子， 再利用比色法或电导法进行检测
。
电子鼻和质谱法
利用电子鼻技术识别气体成分，结 合质谱法对气体进行定性和定量分 析。
激光光谱法
利用激光诱导荧光或共振增强吸收 等光谱技术，对一氧化氮和二氧化 氮进行高灵敏度检测。
一氧化氮与二氧化氮对水体的影响
一氧化氮和二氧化氮可以溶于水，形成硝酸盐，导致水体酸化，影响水生生物的生存。 此外，这些污染物还可以通过地表水和地下水进入饮用水源，对人类健康构成威胁。
一氧化氮和二氧化氮在医学领域的研究进展
一氧化氮与二氧化氮在心血管系统中的作用
一氧化氮和二氧化氮在心血管系统中具有重要作用。研究表明，一氧化氮可以扩张血管，降低血压， 而二氧化氮则可以舒张血管平滑肌，参与血压调节。这些发现为心血管疾病的预防和治疗提供了新的 思路。
随着工业的发展，一氧化氮和二氧化 氮在生产和生活中的应用逐渐增多。
19世纪中叶
一氧化氮和二氧化氮的制备方法逐渐 被掌握。
一氧化氮和二氧化氮的性质
一氧化氮
无色、无味、有毒的气体，难溶 于水，易与氧气反应生成二氧化 氮。
二氧化氮
红棕色、有刺激性气味的气体， 有毒，易与水反应生成硝酸和一 氧化氮。
一氧化氮和二氧化氮的用途
一氧化氮和二氧化氮课件
目 录
• 一氧化氮和二氧化氮的简介 • 一氧化氮和二氧化氮的化学反应 • 一氧化氮和二氧化氮的环境影响 • 一氧化氮和二氧化氮的检测与防治 • 一氧化氮和二氧化氮的前沿研究
01
一氧化氮和二氧化氮的简介
一氧化氮和二氧化氮的发现
一氧化氮检测.ppt
数（不能直接反映气 道炎症）弱相关 哮喘常检的标配与首选
Allergy 2009: 64: 431–438
相比于肺功能方法
1. 降低误诊率 42% 2. 降低医药费 43% 3. 降低复发率 83% 4. 降低误学误工等
eNO测定常规服务项目
咳嗽持续超过2周或间歇性反复咳嗽
eNO>切点？
否
是
反酸嗳气：GERC 胃食道反流 制酸药治疗
炎症切点=25 ppb (>12岁，基于50ml/s呼气流速或大气道为主的炎症测定)
（eNO及切点因抽烟而降低，对于吸烟者切点值考虑降低30%-60%) (该切点的临床有效性80%，近于气道高反应激发试验，其余20%还需临床判断）
eNO 测定值(50ml/s), ppb
< 切点（低值）*
≥ 切点（高值）
内源性NO可通过呼出气测定
口呼气NO(eNO)主要包括大 小气道产生的NO，鼻呼气NO （nNO)则来自于鼻腔与鼻窦
eNO是气道炎症标志物，可 检测哮喘等呼吸道疾病与疗效
eNO测定需遵循美国胸科学 会(ATS)与欧洲呼吸学会(ERS) 2005年共同制定的技术标准
eNO=aNO+bNO/V
呼气NO=小气道NO+大气道NO/呼气流速 小气道NO=小气道产生+ 循环系统气体交换
慢阻肺患者eNO测定
呼出气一氧化氮检测及其在气道疾病诊治中应用的中国专家共识ppt课件
支气管哮喘的诊断和监测
哮喘诊断
呼出气一氧化氮检测可作为支气管哮 喘的辅助诊断手段，通过测量呼出气 中一氧化氮的浓度，评估气道炎症水 平，有助于哮喘的诊断和鉴别诊断。
哮喘控制评估
呼出气一氧化氮检测可用于评估哮喘 控制水平，监测哮喘治疗效果，指导 哮喘治疗方案的调整。
慢性阻塞性肺疾病的诊断和监测
慢阻肺诊断
发展便携式呼出气一氧化氮检测设备，实现 床旁检测和即时诊断，满足临床需求。
呼出气一氧化氮检测在临床应用中的挑战和解决方案
标准化操作
制定呼出气一氧化氮检测的标准化操作流程和质量控制标准，确保 不同医疗机构和检测人员之间的结果可比性。
数据解读与结合临床
呼出气一氧化氮检测数据需结合患者的临床信息进行综合解读，避 免单一指标的误诊和漏诊。
呼出气一氧化氮检测及其在气道疾 病诊治中应用的中国专家共识
汇报人：xxx 2023-1-24
目 录
• 呼出气一氧化氮检测概述 • 呼出气一氧化氮检测在气道疾病诊治中的应用 • 中国专家对呼出气一氧化氮检测的共识和建议 • 呼出气一氧化氮检测的前景和挑战
01 呼出气一氧化氮检测概述
呼出气一氧化氮的产生和性质
整和个体化治疗方案制定。
呼出气一氧化氮检测的标准化操作流程
前期准备
确保检测设备的准确性和稳定性，并对检测 人员进行技术培训。
患者准备
向患者解释检测过程，确保其在检测前不进 行剧烈运动，并遵循特定的呼吸要求。
样本采集
使用专用的呼出气一氧化氮收集器或呼吸口 罩进行样本采集。
数据分析
采用专业的分析软件对呼出气一氧化氮数据 进行处理和分析，生成检测报告。
应用于哮喘诊断
呼出气一氧化氮检测可作为哮喘 的诊断指标之一，结合临床症状 和其他检查结果进行综合判断。
一氧化氮检测
注 意
饮食：测试前3小时不得饮食（尤其是中国特色食品，可使测试值升高） 环境：测试时避免吸入NO>10ppb的空气（可通过NO过滤器吸气后测试）
在线：≥ 6岁 需一气呵成
方 式
离线：在线测试 困难者 可多次呼气
潮气：在线离线 测试困难者 自由呼气
气道与血管皮质细胞在NO合 酶（NOS）作用下，精氨酸氧 化脱氨基产生内源性NO
eNO =气道NO = 口呼气NO – (饮食+环境+其它）NO
测 试 仪 器
饮食：测试前3小时不得饮食（尤其是中国特色食品，可使测试值升高） 环境：测试时避免吸入NO>10ppb的空气（可通过NO过滤器吸气后测试） 其它：测试前1小时不得烟酒、运动与肺功能或其它测试（可使测试值降低） 测试时避免漏气、换气、憋气及喷口水（降低为主） • 监控呼气压力、时间与流速（流速显著影响测定值） • 检测限<5ppb, 分析(临床)准确性/重复性≤5(10)ppb 或 10%(20%) • 必须定期及时标定（检验校准），保证仪器的准确性与稳定性
炎症介质/抗炎药物促进/抑 制NOS，致使NO升高/降低
NO是炎症分子生物标志物， 可检测炎症相关的疾病与疗效
炎症介质
内源性NO可通过呼出气测定 口呼气NO(eNO)主要包括大 小气道产生的NO，鼻呼气NO （nNO)则来自于鼻腔与鼻窦 eNO是气道炎症标志物，可 检测哮喘等呼吸道疾病与疗效 eNO测定需遵循美国胸科学 会(ATS)与欧洲呼吸学会(ERS) 2005年共同制定的技术标准
炎症介质/抗炎药物促进/抑制NOS，致使NO升高/降低 NO是炎症分子生物标志物，可检测炎症相关的疾病与 疗效
炎症介质
ATS/ERS2005年技术标准
呼气一氧化氮检测技术ppt课件
小气量（30毫升）
口呼、鼻呼、潮气、 口呼、鼻呼、在线 口呼、鼻呼、潮气、
分段、在线、离线
分段、在线、离线
大气量 外标定
响应时间
稳定响应值
I = k[eNO] + I0
k 灵敏度，I0 零点 两参数与使用环境 及呼气组成有关， 必须通过至少2个已 知浓度的气样确定 （外标定）
小气量 自标定
积分值
Q = ∫Idt
嗜中性粒 细胞增多 抗生素治疗
嗜酸性粒 细胞增多 激素治疗
反复发作 慢性炎症
下呼吸道
呼气流速：50ml/s 偏态分布 2-200 ppb
均值16 ppb
慢阻肺 稳定期
非嗜酸性炎症 非激素治疗 (嗜中性炎症 抗生素治疗）
上呼吸道
呼气流速：5ml/s 准正态分布
200-3000 ppb 均值 700 ppb
eNO, ppb MINO
SUNVOU
范围 5-116 5-112
均值 29 28
成功率 75 % 98 %
55位儿童（4-9岁）
eNO, ppb MINO NIOX
范围 1-48 4-47
均值 7.8 9.9
成功率 73 % 93 %
Measurement of exhaled nitric oxide: Comparison of different analyzers , Respirology 2010 15, 1203–1208
85人（正常、哮喘、慢阻肺）
eNO, ppb Medisoft NIOX MINO
EcoMedics
范围 6-243 0-197 5-208 4-103
均值 24.8 14.5 16.3 13.1
(医学PPT课件)呼出气一氧化氮测
11
1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007
FeNO在呼吸系统疾病的应用
支气管哮喘 COPD 慢性咳嗽 支气管扩张 非囊性纤维化（CF） 原发性纤毛功能障碍（PCD） 鼻炎 间质性肺疾病：系统性硬化症、
9
一氧化氮化氮测定(FENO)已经标准化
《欧洲呼吸学会》(ERS)先后于1997年和2001年、《美国胸科学会》(ATS)于1999首次 制订了FENO测定的程序标准及指南，ATS于2005年又联合ERS对程序和指南进行了修订
10
FENO基础研究和临床应用报道
250 200 150 100
50 0
-《临床技术操作规范》- 呼吸病学分册, p62-67, 中华医学会编著, 人民军医 出版社, 2008年。
5
气道炎症的监测方法
无创技术：
2、诱导痰检测(SI)* – 慢性咳嗽诊断常规测定项目# a. 影响因素较多； b. 个体差异大； c. 会出现一定副作用； d. 约40%患者诱导不出痰。
14
慢性咳嗽与FENO
大量基础研究和临床观察证实：一氧化氮呼气测定试验(FENO) 可以替代诱导痰检查。
慢性咳嗽最常见的四大病因
FENO测定
嗜酸粒细胞性支气管炎
↑
鼻后滴流综合征
正常
咳嗽变异型哮喘
↑
胃食管反流性咳嗽
正常
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FENO在测试中注意事项
合适的测定环境 1、环境温度：16～30℃ 2、环境湿度：20 ～60%RH（非冷凝状态） 3、请远离手机或其它无线信号等干扰源 4、请保持环境的清洁，远离尘埃和花粉处 5、建议在安装传感器2小时后，再开始测试
呼气一氧化氮含量测定
呼气一氧化氮含量测定
呼气一氧化氮含量测定是一种用于评估人体肺部疾病的方法，通过检测呼气中的一氧化氮浓度来了解气道炎症的情况。
一氧化氮是一种气体信号分子，人体通过呼吸将其排出体外，一氧化氮的浓度可以间接反映气道炎症的程度。
在进行呼气一氧化氮含量测定时，通常采用的是呼气一氧化氮仪。
被检测者会被要求深呼吸几次，然后吹气进入仪器，仪器会测量呼气中的一氧化氮浓度。
通过这个测定过程，医生或研究人员可以了解被测者气道炎症的情况，进而制定相应的治疗方案或评估疾病的病情。
呼气一氧化氮含量测定在临床上有着广泛的应用，特别是在哮喘、慢性阻塞性肺病等气道疾病的诊断和治疗中。
研究表明，气道炎症会导致气道内一氧化氮的浓度升高，因此测定呼气一氧化氮含量可以帮助医生及时了解气道炎症的情况，及时干预治疗。
另外，呼气一氧化氮含量测定还可以用于评估气道炎症的严重程度和炎症的类型。
不同病症引起的气道炎症会导致一氧化氮的浓度有所不同，通过测定含氮气体的浓度，可以帮助医生做出更为精准的诊断和治疗方案。
总的来说，呼气一氧化氮含量测定是一种简便、非侵入性的检测方法，可以帮助医生更好地了解气道疾病的炎症情况，为病人的治疗提供更为科学的依据。
在今后的临床实践中，呼气一氧化氮含量测定将会有更广泛的应用，为疾病的诊断和治疗提供更多的帮助。
(完整版)细胞一氧化氮检测
NO Assay(BioAssay Systems--QuantiChrom TM Nitric Oxide Assay Kit )原理: NO能被氧化成亚硝酸盐和硝酸盐，从而通过测定亚硝酸根离子NO2-/硝酸根离子NO3-的总量来确定NO水平。
样品制备：1.用1mL枪头吸弃每孔上层细胞培养基1mL，先横刮3次再竖刮3次，刮起剩下1mL细胞培养液，然后用1mL枪头冲吹细胞3次，显微镜下计数细胞数，收集1×106细胞于1.5mL离心管中，置于冰上。
2.于40C，5000rpm离心3min，吸弃上清液，收集细胞沉淀。
3.向细胞沉淀中加入1mL冰上预冷的1×PBS液，用200uL枪头混匀后于40C，5000rpm离心3min。
吸弃上清液，收集细胞沉淀，置于冰上。
4.向细胞沉淀中加入150uL细胞裂解液，用200uL枪头混匀后于冰上裂解30min。
5.于40C，12000rpm离心10min。
6.向150uL细胞裂解液中加入8uL ZnSO4，vortex上混匀，然后加入8uLNaOH，vortex上混匀，于40C，14000rpm离心10min。
取上清液，按50uL/管分装，作为NO检测样品。
标准曲线制作：稀释标准品：取25uL 1.0mM 标准品，加入225uL ddH2O，用200uL枪头混匀，将标准品稀释成100uM Premix。
1.WR工作液配制：将25uL Reagent A，25uL Reagent B和50uL Reagent C于1.5mL 离心管中充分混匀。
2.样品及标准品反应：将50uL样品和标准品与100uL WR工作液于1.5mL离心管中混匀，于600C孵育10min。
3.测定：将反应好的样品与标准品加到96孔板中，于500-570nm(峰值540nm)测定OD值。
4.NO浓度计算：（按如下公式计算）【NO】=(OD sample-OD blank)/slope (uM)，注：OD blank为空白对照吸光值，slope为标准曲线斜率。
一氧化氮测定
一氧化氮测定一氧化氮，简称NO，是一种无色气体，它与氧和二氧化碳一起构成了大气中的重要组成部分。
一氧化氮具有比较强的腐蚀性，在大气中存在具有重要环境意义的污染物，它也是生物体新陈代谢等活动中的主要参与者。
因此，获取NO的浓度信息对于研究区域环境污染有着至关重要的意义。
一氧化氮的测定方法有多种，其中常见的比较有：一、光度法：光度法是利用一种特定的检测器，检测在某一特定波长处，一氧化氮吸收光后所产生的特定信号，从而对环境中一氧化氮的浓度进行测定。
二、比色法：比色法通过用特殊的试剂将环境中的一氧化氮反应，反应后形成一种比色物，通过肉眼观察比色物的色度，从而估算出一氧化氮的浓度。
三、气相分析法：气相分析法是将一氧化氮从空气样品中提纯出来，并进行分析测定，从而得出一氧化氮的浓度。
四、浊度法：浊度法是利用一种特定的仪器，经过特殊处理后将空气样品中的气态一氧化氮吸收到反应室中，当放入一定浓度的NaOH 溶液时，一氧化氮就会被氢氧化钠催化水解成碳酸钠和氨水，然后再被一氧化钠反应产生一个恰当浓度的氯化钠溶液，最后只需通过浊度仪对溶液进行测量，即可知道一氧化氮的含量。
上述是一氧化氮测定常用的几种方法，它们都有各自的优势，使得一氧化氮测定更加高效和准确。
除此之外，在实际测定中，一氧化氮测定也应结合其它测定方法，以及采用先进的仪器设备，提高测定的准确性。
一氧化氮测定在环境监测、医药分析等方面都有着重要的应用，比如用于检测大气中一氧化氮的浓度;检测生物体体液中NO浓度;用于肺功能诊断;研究新药等。
它在环境和医药等领域都有极其重要的作用。
综上所述，一氧化氮测定对于获取一氧化氮的浓度含量具有重要的意义，它的应用领域也十分广泛，在环境保护、药物研发以及临床诊断等方面均占据重要的地位。
只有在选用合适的测定方法的同时，采用先进的仪器来采集和处理测定数据，才能取得准确的结果，为环境保护和药物研发提供有效信息。
检测一氧化氮的荧光探针 ppt课件
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检测一氧化氮的荧光探针
检测一氧化氮的荧光探针
本实验合成了连接有1，4，8，11一四氮杂环十 四烷环胺化合物的荧光素一环胺一Cu(II)离子新型配 合物，用作一氧化氮分子荧光探针。合成简便，配合 物本身无荧光，当与NO反应后，在激发光下产生荧光， 荧光强度随着NO浓度的增加而增大，并且在过氧化氢 和硝酸根存在情况下，荧光探针表现出很好的选择性。 本探针可以实现对NO的直接检测，但其缺点是与NO反 应时间长且灵敏度不高。 有待于开发性能更好的荧光探针。
检测一氧化氮的荧光探针
一氧化氮理 NO浓度，PH对荧光强度的影响
探针对NO的选择性
精品资料
检测一氧化氮的意义
一氧化氮是迄今发现的生物体内最小、最轻、最简单 的信息传递分子，在生命过程中发挥着重要的作用。 由于一氧化氮的浓度变化与机体的生理机能紧密联系， 而且其半衰期非常短，给它的快速检测带来了一定的 困难，因此建立高灵敏度、高选择性组织和细胞内一 氧化氮浓度和时空分布的分析方法具有重要意义。
检测一氧化氮的荧光探针
大多数分子在室温时均处在电子基 态的最低振动能级，当物质分子吸 收了与它所具有的特征频率相一致 的光子时，由原来的能级跃迁至第 一电子激发态或第二电子激发态中 各个不同振动能级。其后，大多数 分子常迅速降落至第一电子激发态 的最低振动能级，在这一过程中它 们和周围的同类分子或其他分子撞 击而消耗了能量，因而不发射光。 分子在第一电子激发态的最低振动 能级停留约10-9秒之后,直接下降 至电子基态的各个不同振动能级， 此时以光的形式释放出多余的能量， 所发生的光即是荧光 。
荧光探针是指用来进行生物标本特定区域内定位 或对细胞内特定刺激反应的荧光团，具有高灵敏度 和选择性的检测复杂生物分子及活细胞中的特定成 分或化合物。最早人们在研究细胞中钙离子的移动 而引入了荧光标识物，即荧光探针。
一氧化氮检测ppt课件
ATS/ERS2005年技术标准
Am J Respir Crit Care Med, 2005, 171: 912-930
eNO =气道NO = 口呼气NO – (饮食+环境+其它）NO
注
饮食：测试前3小时不得饮食（尤其是中国特色食品，可使测试值升高）
意
环境：测试时避免吸入NO>10ppb的空气（可通过NO过滤器吸气后测试）
eNO测定需遵循美国胸科学 会(ATS)与欧洲呼吸学会(ERS) 2005年共同制定的技术标准
eNO=aNO+bNO/V
呼气NO=小气道NO+大气道NO/呼气流速 小气道NO=小气道产生+ 循环系统气体交换
正常呼气(50ml/s) 大气道NO(炎症)为主
高速呼气(>200ml/s) 小气道NO(炎症)为主
器
• 必须定期及时标定（检验校准），保证仪器的准确性与稳定性
在线：≥ 6岁 需一气呵成
方 式
离线：在线测试 困难者 可多次呼气
潮气：在线离线 测试困难者 自由呼气
eNO测定准确性 = 测试 + 仪器 + 方式 eNO临床有效性 = eNO测定准确性 + eNO临床意义 eNO临床意义遵循专家共识声明与ATS/ERS临床指南
测
环境：测试时避免吸入NO>10ppb的空气（可通过NO过滤器吸气后测试）
试
其它：测试前1小时不得烟酒、运动与肺功能或其它测试（可使测试值降低）
测试时避免漏气、换气、憋气及喷口水（降低为主）
• 监控呼气压力、时间与流速（流速显著影响测定值）
仪
• 检测限<5ppb, 分析(临床)准确性/重复性≤5(10)ppb 或 10%(20%)
呼出一氧化氮测定
呼出一氧化氮测定
呼出一氧化氮测定是一种用于检测肺部炎症程度的诊断方法。
该方法通过测量呼出气体中的一氧化氮浓度来确定肺部炎症的程度。
一氧化氮是由肺部炎症区域产生的一种气体，因此，测量呼出气体中的一氧化氮浓度可以提供有关肺部炎症的信息。
呼出一氧化氮测定非常简单和无痛，只需要在呼出口吸气后，呼出气体被收集，并在设备中进行一氧化氮浓度的测量。
这种测定方法可以帮助医生确定肺部炎症的程度，并制定合适的治疗方案。
- 1 -。
FeNO测定及应用(共36张PPT)
1
NO— 内源性调节分子
合成由一系列酶调节 — NO 合成酶
呼出气中的NO主要由支气管壁上皮细 胞生成
（过敏性）炎症性气道疾病往往伴随
呼出气NO的增高，通常和嗜酸性 炎症相关
NO
Healthy
Soluble mediator
iNOS
Corticosteroidresistant mechanism
FeNO
炎症
FeNO：直接量化 嗜酸性细胞气道炎症
9
FeNO 的临床意义
在气道炎症患者诊断中的作用
鉴别诊断、处方参考
在哮喘管理中的作用
炎症评估（潜在炎症对气道的损伤） 判断患者 对ICS的反应性、有效性 判断患者使用ICS的 依从性 预测哮喘的复发和恶化 减少急性发作，更好的经济效价比
10
FeNO在气道炎症患者评估诊断中的作用
结论 • 在难治性哮喘病人中可以用FeNO指标来判断患者的ICS的依从性, • 即便病人在紧遵医嘱的情况下,也可以使用FeNO值的变化而明确该病
人对进一步增加药物干预的敏感性是否良好, • 辨别出患者对药物的依从性有助于我们对病人进行个体化的治疗
Am J Respir Crit Care Med Vol 186, Iss. 11, pp 1102–1108, Dec 1, 2012
FeNO group
50
15
900
Control group (n=109)
FeNO group (n=111)
800
700
600
更少的激素吸入
0
0
5
10
15
20
25
Time, weeks
细胞一氧化氮检测
NO Assay(BioAssay Systems--QuantiChrom TM Nitric Oxide Assay Kit )原理: NO能被氧化成亚硝酸盐和硝酸盐，从而通过测定亚硝酸根离子NO2-/硝酸根离子NO3-的总量来确定NO水平。
样品制备：1.用1mL枪头吸弃每孔上层细胞培养基1mL，先横刮3次再竖刮3次，刮起剩下1mL细胞培养液，然后用1mL枪头冲吹细胞3次，显微镜下计数细胞数，收集1×106细胞于1.5mL离心管中，置于冰上。
2.于40C，5000rpm离心3min，吸弃上清液，收集细胞沉淀。
3.向细胞沉淀中加入1mL冰上预冷的1×PBS液，用200uL枪头混匀后于40C，5000rpm离心3min。
吸弃上清液，收集细胞沉淀，置于冰上。
4.向细胞沉淀中加入150uL细胞裂解液，用200uL枪头混匀后于冰上裂解30min。
5.于40C，12000rpm离心10min。
6.向150uL细胞裂解液中加入8uL ZnSO4，vortex上混匀，然后加入8uLNaOH，vortex上混匀，于40C，14000rpm离心10min。
取上清液，按50uL/管分装，作为NO检测样品。
标准曲线制作：稀释标准品：取25uL 1.0mM 标准品，加入225uL ddH2O，用200uL枪头混匀，将标准品稀释成100uM Premix。
按下表制作标准曲线：No. Premix+ddH2O Nitrite(uM)1 0uL+100uL 02 20uL+80uL 203 40uL+60uL 404 60uL+40uL 605 80uL+20uL 80样品NO水平测定：1.WR工作液配制：将25uL Reagent A，25uL Reagent B和50uL Reagent C于1.5mL 离心管中充分混匀。
2.样品及标准品反应：将50uL样品和标准品与100uL WR工作液于1.5mL离心管中混匀，于600C孵育10min。
呼气末一氧化氮测定
呼气末一氧化氮测定呼气末一氧化氮（FeNO）测定是一种用于评估气道炎症的非侵入性检测方法。
此项检测方法广泛应用于哮喘和过敏性鼻炎的诊断和管理，在医学界具有很高的价值和重要性。
一、检测前准备在进行FeNO测定之前，需要考虑以下几个方面：1. 患者需要遵循以下准备工作来保证准确的测量结果：① 测量前至少不要吸入药物2小时；② 测量前至少不要吸烟3小时；③ 测量前不要进行激烈的运动，以免影响呼吸（至少30分钟）；④ 禁食、禁饮茶、咖啡等刺激食品30分钟。
二、检测过程执行以下步骤进行检测：1. 让患者坐在舒适的椅子上，松开衣领，依据个人情况，可以选择不戴口罩或佩戴口罩；2. 患者用深呼吸呼气至肺黏膜清空，然后将嘴唇用力紧闭于呼吸机端口上，使用耳塞皮下给予预定深度的呼气（平均呼气流速为50~70L/min）；3. 随着呼气的过程中，仪器会自动记录呼气流速的变化以计算出FeNO 值；4. 需要测量3次，最终取平均值作为测量结果。
三、分析结果分析FeNO测量结果的方法有以下几种：1. 参考值法：通过参照已知的年龄和性别相关的FeNO值范围，对FeNO测定结果进行评估；2. 绝对值法：测定FeNO值并根据剂量应答和疗效来评估患者；3. 组内变异法：该方法仅适用于哮喘研究，可以根据不同的疗效评估治疗方案；四、意义和价值FeNO测定在临床中已被广泛应用，并具有以下几个方面的意义和价值：1. 评估过敏性鼻炎和哮喘患者的气道炎症；2. 患者建立个性化治疗方案，通过FeNO监测患者哮喘的控制水平，指导哮喘患者管理；3. 提高哮喘患者治疗的有效性和安全性；4. 帮助临床医生作出诊断和治疗建议。
综上所述，FeNO测定是一种非侵入性检测方法，已广泛应用于哮喘和过敏性鼻炎的诊断和管理。
通过准确的测量和分析结果，临床医生可以更好地评估气道炎症和为患者提供更好的治疗建议。
气道一氧化氮测定
气道一氧化氮测定一、测定方法气道一氧化氮测定是一种非创伤性检查，用于评估气道炎症。
测定方法通常采用气道呼出气一氧化氮（Fractional exhaled Nitric Oxide，FeNO）检测。
这种方法的原理是通过测定呼出气体中一氧化氮的浓度来评估气道炎症反应的程度。
具体操作方法为，受试者通过口含器缓慢、均匀地呼出一口气，仪器立即分析并打印结果。
二、测定前的准备1. 测定前应告知受试者相关注意事项，并签署知情同意书。
2. 受试者应停用可能会影响一氧化氮测定的药物，如吸入性糖皮质激素等。
3. 受试者应避免剧烈运动，以免影响测定结果。
4. 测定时应保持安静，避免咳嗽、深呼吸等动作。
5. 受试者应按照指示正确使用口含器，保证呼出的气体能够被仪器准确测量。
三、结果分析气道一氧化氮测定结果根据不同情况分为不同的范围：1. 健康成人FeNO 值一般<20 ppb。
2. 气道炎症患者FeNO 值可能升高，但不同病因及炎症类型的患者FeNO 值可能有重叠。
3. 过敏体质或哮喘患者FeNO 值可能较高。
四、临床意义气道一氧化氮测定是一种无创、无痛、无辐射的检查方法，对于气道炎症性疾病的诊断、评估及治疗监测具有重要意义。
其临床意义主要包括以下几个方面：1. 辅助诊断：气道一氧化氮测定可以作为哮喘、慢性阻塞性肺疾病（COPD）等气道炎症性疾病的辅助诊断手段。
通过测定FeNO 值，有助于了解气道炎症反应程度，为临床医生提供参考依据。
2. 监测病情：气道一氧化氮测定可以用于监测气道炎症性疾病的病情变化。
通过定期测定FeNO 值，可以了解患者病情的发展情况以及治疗的效果，有助于及时调整治疗方案。
3. 指导治疗：气道一氧化氮测定可以指导气道炎症性疾病的治疗。
对于FeNO 值较高的患者，可适当增加抗炎药物的剂量或调整治疗方案；而对于FeNO 值较低的患者，可适当减少抗炎药物的剂量或调整治疗方案。
4. 鉴别诊断：气道一氧化氮测定有助于鉴别诊断不同病因引起的气道炎症性疾病。
一氧化氮精品PPT课件
硝酸甘油为什么能治心脏病？
佛契哥特 慕拉德
伊格纳罗
硝酸甘油可以有效地缓解心绞痛,但它的作用机理困扰了医学 家、药理学家百余年。
直到1980年代，这一谜团被美国的伊格纳罗博士和其他两位 药理学家（慕拉德和佛契哥特）破译——硝酸甘油及其他硝 酸脂通过释放一氧化氮气体(NO)而舒张血管平滑肌，从而扩 张血管。
‧放松血管使其畅开、柔软、和有弹性。 ‧预防动脉粥样硬化症。 ‧防止血小板（凝结）和白血球黏着于血管壁上。 ‧减少造成氧化和加速老化的自由基数量。 ‧抑制一些血管细胞的异常生长。
世界华人中医养生协会 香港李嘉诚健康慈善总会 世界最权威的诺贝尔医学奖转 换成果中国大陆地区推广委
员会的委托
武汉地区诺贝尔医学奖学习班
诺贝尔医学奖 读书学习班
班主任:宋铁军
学习班学习内容
1. 人类健康的第一杀手---心脑血管疾病 2. 认识最伟大的科学家及世界级的诺贝尔医学
奖 3. 学习“一氧化氮让你 远离心脑血管病” 4. 读书“一氧化氮让你
发现这一点之后，伊格纳罗他们开始研究一氧化氮(NO)的其他效用。 发现一氧化氮（NO)可以由人体细胞自我产生，具有的健康益处远 远超出他最初的猜想：它能降低血压，预防中风、心脏病、肿瘤及 老年痴呆症。
震惊世界的应用诺贝尔技术
一氧化氮（NO）造就诺贝尔旋风
3位科学家的论文发表后，一氧化氮(NO)的旋
伊格纳罗介绍说： 人体内有很多信号系统，各种 信号选择性地使血管扩张或收缩，根据人体需要 调节血流，如胃肠道在饭后的血流增加，肌肉在 运动当中局部血流量也增加等。各种细胞和组织 不断地接受和发出各种信号，告诉肌细胞何时收 缩，指示脂肪细胞何时释放出所贮存的能量，等 等。
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夜间为主：CVA 咳嗽变异性哮喘 SABA/激素治疗 日夜咳嗽：EB 嗜酸性粒支气管炎 激素治疗
按哮喘“eNO测定监测预后”，监测疗效 与炎症发展，指导增药减药或停药等
鼻呼气nNO测定可帮助鉴别诊断UACS 慢性咳嗽炎症分型诊疗是国际学术研究热点
缺乏规范化的指南。以下路径是基于2011年指南及最近临床研究的总 结(Pulmonary biomarkers in COPD exacerbations: a systematic review, Koutsokera et al. Respiratory Research 2013, 14:111)，仅供参考使用。
方法比较
CVA、EB、GERC与UACS 是慢咳4大病因，目前主要 结合x片/肺功能试验、诱 导痰细胞分析，食道pH监 测与鼻窦片/鼻咽镜等逐一 检查诊断，繁琐复杂。由 于难以开展全套服务，慢 性咳嗽误诊误治率超过 70%，是药物尤其是抗生 素滥用的主要原因
eNO无创安全、便捷易行， 可结合病史症状快速筛查 慢性咳嗽主要病因。CVA 确诊率90%，与肺功能激 发试验相当，优于肺功能 舒张试验（仅53%）；EB 确诊率与诱导痰细胞分析 相当。通过排除CVA与EB， 也可以结合症状快速筛查 GERC与UACS。
炎症介质
ATS/ERS2005年技术标准
Am J Respir Crit Care Med, 2005, 171: 912-930
eNO =气道NO = 口呼气NO – (饮食+环境+其它）NO
注
饮食：测试前3小时不得饮食（尤其是中国特色食品，可使测试值升高）
意
环境：测试时避免吸入NO>10ppb的空气（可通过NO过滤器吸气后测试）
eNO测定常规服务项目
COPD大都以小气道嗜中性炎症与不可逆堵塞为特征，但是： 1. COPD稳定期也可能合并有嗜酸性炎症，需要加入口吸入激素治疗 2. COPD急性加重时eNO会急剧升高，反映的是反复或重度感染（污染）
导致的急性炎症，需要加入全身激素治疗干预。 3. eNO虽然已被确认为COPD炎症分型与急性加重的生物标志物，但仍
数（不能直接反映气 道炎症）弱相关 哮喘常检的标配与首选
Allergy 2009: 64: 431–438
相比于肺功能方法
1. 降低误诊率 42% 2. 降低医药费 43% 3. 降低复发率 83% 4. 降低误学误工等
eNO测定常规服务项目
咳嗽持续超过2周或间歇性反复咳嗽
eNO>切点？
否
是
反酸嗳气：GERC 胃食道反流 制酸药治疗
检查用药依从性 检查环境影响(例如雾霾) 考虑合并症(例如鼻炎) 考虑增药，10天内复查
无症状
减药或停药 停药后4周复查来自炎症还在，坚持用药 4周复查
eNO升高超过40%，提示急性加重或复发风险，及早干预
出于以下几个方面考虑时可进行eNO检测：
①协助确定呼吸系统疾病症状的病因； ②协助识别喘息/哮喘的分型、分级； ③ 慢性阻塞性肺疾病分级与急性加重的监测； ④ 慢性咳嗽病因鉴别诊断； ⑤ 确定抗炎药物如激素的有效性； ⑥为以后哮喘的监测确立基础值； ⑦在哮喘治疗升/降级及停药时，指导调整抗炎药物剂 量； ⑧协助评估患者使用抗炎药物的依从性； ⑨协助确定哮喘控制不佳是否由气道炎症所致，尤其是 在伴随鼻窦炎，焦虑，胃食管反流情况下。
*对eNO低值，如临床判断为过敏、气道高反应，可初诊为嗜酸性炎症并加入激素治疗
监测预后 阶梯治疗
（近2周使 用激素治疗 者）
如果eNO较之前降低>10ppb或20%，提示治疗有效，继续用药回访复查，直 到eNO趋于稳定没有显著变化，并按如下情况优化治疗方案
有症状
考虑小气道问题 考虑上气道问题 考虑胃食道反流 优化或调整治疗方案
在线：≥ 6岁 需一气呵成
方 式
离线：在线测试 困难者 可多次呼气
潮气：在线离线 测试困难者 自由呼气
气道与血管皮质细胞在NO合 酶（NOS）作用下，精氨酸氧 化脱氨基产生内源性NO
炎症介质/抗炎药物促进/抑 制NOS，致使NO升高/降低
NO是炎症分子生物标志物， 可检测炎症相关的疾病与疗效
炎症介质
内源性NO可通过呼出气测定
口呼气NO(eNO)主要包括大 小气道产生的NO，鼻呼气NO （nNO)则来自于鼻腔与鼻窦
eNO是气道炎症标志物，可 检测哮喘等呼吸道疾病与疗效
eNO测定需遵循美国胸科学 会(ATS)与欧洲呼吸学会(ERS) 2005年共同制定的技术标准
eNO=aNO+bNO/V
慢阻肺患者eNO测定
eNO > 炎症切点 (非吸烟者25ppb，吸烟
者考虑降低30-60%) 或较之前增加>10ppb
eNO>急性加重切点 (非吸烟者35ppb，吸烟
者考虑降低30-60%) 或较之前增加>40%
合并嗜酸性炎症 加入ICS治疗
急性加重AECOPD 加入全身激素治疗
呼气检测临 床常检
呼气NO=小气道NO+大气道NO/呼气流速 小气道NO=小气道产生+ 循环系统气体交换
正常呼气(50ml/s) 大气道NO(炎症)为主
高速呼气(>200ml/s) 小气道NO(炎症)为主
ATS/ERS2005年技术标准
Am J Respir Crit Care Med, 2005, 171: 912-930
eNO =气道NO = 口呼气NO – (饮食+环境+其它）NO
饮食：测试前3小时不得饮食（尤其是中国特色食品，可使测试值升高）
测
环境：测试时避免吸入NO>10ppb的空气（可通过NO过滤器吸气后测试）
试
其它：测试前1小时不得烟酒、运动与肺功能或其它测试（可使测试值降低）
测试时避免漏气、换气、憋气及喷口水（降低为主）
呼气感知健康
SVSCC02V1
2011年临床指南 2005年技术标准 1998年诺贝尔奖
持续加速发展
2012年国家收费项目 2011年重点科室项目
2008年临床指南项目
如果还没开展呼出 气一氧化氮测定项 目，那就太落后了 – 欧洲儿科主席布什
教授，2010
气道与血管皮质细胞在NO合酶（NOS）作用下，精氨 酸氧化脱氨基产生内源性NO 炎症介质/抗炎药物促进/抑制NOS，致使NO升高/降低 NO是炎症分子生物标志物，可检测炎症相关的疾病与 疗效
炎症切点=25 ppb (>12岁，基于50ml/s呼气流速或大气道为主的炎症测定)
（eNO及切点因抽烟而降低，对于吸烟者切点值考虑降低30%-60%) (该切点的临床有效性80%，近于气道高反应激发试验，其余20%还需临床判断）
eNO 测定值(50ml/s), ppb
< 切点（低值）*
≥ 切点（高值）
An official ATS / ERS statement: Asthma Control and Exacerbation, Am J Respir Crit Care Med 2009 180. pp 59-99 / Consensus statement on the use of fractional exhaled nitric oxide in the clinical management of asthma, National Jewish Health , Dec. 2009
规范化诊疗 服务
高水平临床 科研
• 监控呼气压力、时间与流速（流速显著影响测定值）
仪
• 检测限<5ppb, 分析(临床)准确性/重复性≤5(10)ppb 或 10%(20%)
器
• 必须定期及时标定（检验校准），保证仪器的准确性与稳定性
在线：≥ 6岁 需一气呵成
方 式
离线：在线测试 困难者 可多次呼气
潮气：在线离线 测试困难者 自由呼气
>切点 • 如症状消失，不 可停药，防止复发 • 如症状还在， - 检查药物依从性 - 检查环境过敏原 - 增药或高效激素 - 考虑抗 IgE 治疗
• 如eNO据高不下、考虑并发症联合诊疗 • 如eNO低有症状，考虑小气道炎症诊疗
儿童哮喘eNO测定值 1. 与诱导痰嗜酸性粒细
胞数正相关 2. 与总IgE正相关 3. 与气道高反应正相关 4. 与气道受阻正相关 5. 与血检嗜酸性粒细胞
鉴别诊断 炎症分型
（症状持续 2周且2周内 未使用激素 的就诊者）
炎症分型
非嗜酸性（嗜中性）炎症
嗜酸性炎症
疾病分类 (结合症状)
感染性哮喘 感染性支气管炎/肺炎 嗜中性慢阻肺
过敏性哮喘 嗜酸性支气管炎/肺炎 嗜中性合并嗜酸性慢阻肺
治疗方案
非激素（抗生物）为主
吸入激素为主
为建立依从性与优化治疗方案，建议患者10天内回访复查
空气污染
发病机制
检测方法
病毒细菌
过敏原
反复感染/急性加重
嗜中性炎症 eNO升高 抗生素治疗 eNO降低
嗜酸性炎症 eNO升高显著
激素治疗 eNO降低显著
慢性炎症 咳嗽、气喘、胸闷、呼吸困难等症状 / 支气管炎、肺炎、哮喘、慢阻肺等疾病
如何量化基于eNO测定的炎症诊疗技术？
临床指南
基于炎症切点的eNO规范化诊疗策略
指南推荐的规范化临床应用
喘息或哮喘特征 eNO测定鉴别病因
<切点 • 感染性哮喘 （嗜酸性哮喘） 抗生素(激素)治疗
>切点 • 过敏性哮喘
激素药治疗 ( ICS+SABA )
eN位O测于定切监测点预后
<切点 • 如症状消失，考 虑减药或停药 • 如症状还在， - 考虑小气道 - 考虑并发症 - 加入LTRA或 LABA治疗