微生物检测技术--金黄色葡萄球菌检测【内容丰富】
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分解甘露醇，产酸。
参考内容
11
2、致病性
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，为条件 致病菌。可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、心包炎等， 甚至败血症、脓毒症等全身感染。
参考内容
12
葡萄球菌皮肤感染
参考内容
13
菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶：
a.溶血素：外毒素，分α、β、γ多种，能损伤血小板，破坏溶酶体，
食品的微生物学检验 致病菌
参考内容
1
主要内容
金黄色葡萄球菌（GB4789.10-2010） 大肠杆菌（GB 4789.38-2012） 沙门氏菌（GB 4789.4—2010） 副溶血性弧菌（GB 4789.7—2013 ）
参考内容
2
金黄色葡萄球菌检验 p153
1、生物学特性 （重点） 2、致病性 3、流行病学 4、国标检验方法 （重点） 5、快速检测方法
参考内容
17
金黄色葡萄球菌的流行病学
近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球 菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。
++++金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题， 在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个 细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占45%，我国 每年发生的此类中毒事件也非常多。
引起肌体局部缺血和坏死；
b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞；
c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆
中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄 球菌形成的感染易局部化与此酶有关；
d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐
受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌；
参考内容
18
4、GB 4789.10—2010食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验
1 范围
本标准规定了食品中金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的检验方法。
本标准第一法适用于食品中金黄色葡萄球菌 的定性检验；
第二法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品中金黄色葡萄 球菌的计数；
7
血平板：可形成完全透明溶血环（溶血）
溶血：红细胞破裂，血红蛋白逸出称红细胞溶解，
简称溶血。
溶血素是细菌分泌的一种参考毒内容性因子
8
细菌的溶血现象
根据细菌对红细胞的溶解能力可分为以下三种溶血类型及现 象：
α溶血:产生溶血素，不完全性溶血，在血琼脂平皿上菌落 周围有1～2mm，较窄半透明的草绿色溶血环。
e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性
肠毒素，分为A、B、C、D、E五种。
参考内容
14
2、致病性
++++当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品， 如牛奶和奶制品、肉、蛋等，在温度条件适宜时，经8-10 小时即可相当数量的肠毒素。肠毒素可耐受100度煮沸 30min而不被破坏。人摄食该污染产品后2-3h便可出现中 毒症状。其引起的食物中毒典型症状为呕吐和腹泻。
参考内容
15
3、流行病学
在自然界中广泛存在，空气、水、灰尘及人和动 物的排泄物中都可找到。
作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和 动物的鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的 皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。因而，食品受 其污染的机会很多。
参考内容
16
金黄色葡萄球菌的流行病学
一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品 食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染 食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了 肠毒素，引起食物中毒； 熟食制品包装不严，运输过程受到污染； 奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污 染。
蒸馏水
1 000 mL
参考内容
22
检测步骤 ---分离
血平板：金黄色葡萄球菌可以产生溶血素，因此在 血平板上产生明显的溶血环。
血平板上其典型菌落呈金黄色，有时也为白色，大 而突起，圆形，不透明，表面光滑，有溶血圈。
参考内容
23
血平板
参考内容
24
检测步骤 ---分离
Baird－Parker琼脂平板(BP平板)
能在pH4.2-9.3之间生长（最适pH为6-7）； 耐盐性强，在含7～15%的氯化钠培养基中仍能生长，可
用于筛选菌种。
参考内容
6
在普通营养琼脂平板上培养18～24ｈ，可形成圆形、表面 光滑、不透明的菌落。可产生金黄色色素，色素为脂溶性， 不溶于水，故色素只局限于菌落内，不渗至培养中。
参考内容
第三法适用于金黄色葡萄球菌含量较低而杂菌含量较高的食 品中金黄色葡萄球菌的计数。
参考内容
19
检验前准备工作 采集与送检 预处理
百度文库
菌落总数
大肠菌群
致病菌
前增菌 分离培养
纯化 多项鉴定及检测实验
分析、报告
参考内容食品微生物检验的一般程20 序
检测步骤---增菌
利用金黄色葡萄球菌耐盐的特性（可耐受 15%的氯化钠），用含7.5%氯化钠肉汤
参考内容
3
1、生物学特性
1.1形态与染色
金黄色葡萄球菌无芽孢，无鞭毛， 大多数无荚膜
革兰氏染色阳性；
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直 径0.8μm左右，显微镜下排列成葡 萄串状。
参考内容
4
参考内容
5
1.2 培养特征
易培养，对营养要求不高，在普通培养基中生长良好。 需氧或兼性厌氧，在好氧条件下生长最好； 大多数菌株能生长在6.5-46℃之间（最适温度30-37℃）
β溶血: 呈完全性溶血，在血平皿上菌落周围有2～4mm宽、 界限分明、无色透明的溶血环。
γ溶血:不产生溶血素，在血琼脂平皿上的菌落周围无溶血 环。
参考内容
9
可产生卵磷脂酶，在卵黄高盐培养基上形 成周围有白色沉淀环的菌落。
参考内容
10
1.3 生化反应
大多数菌株分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗 糖，产酸不产气。
蛋白胨 牛肉膏 氯化钠 蒸馏水
10.0 g 5.0 g 75 g 1 000 mL
参考内容
21
检测步骤---增菌
或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤（污染严重时）
胰酪胨（或胰蛋白胨）
17.0 g
植物蛋白胨（或大豆蛋白胨） 3.0 g
氯化钠
100.0 g
磷酸氢二钾
2.5 g
丙酮酸钠
10.0 g
葡萄糖
2.5 g
胰蛋白胨
参考内容
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2、致病性
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，为条件 致病菌。可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、心包炎等， 甚至败血症、脓毒症等全身感染。
参考内容
12
葡萄球菌皮肤感染
参考内容
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菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶：
a.溶血素：外毒素，分α、β、γ多种，能损伤血小板，破坏溶酶体，
食品的微生物学检验 致病菌
参考内容
1
主要内容
金黄色葡萄球菌（GB4789.10-2010） 大肠杆菌（GB 4789.38-2012） 沙门氏菌（GB 4789.4—2010） 副溶血性弧菌（GB 4789.7—2013 ）
参考内容
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金黄色葡萄球菌检验 p153
1、生物学特性 （重点） 2、致病性 3、流行病学 4、国标检验方法 （重点） 5、快速检测方法
参考内容
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金黄色葡萄球菌的流行病学
近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球 菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。
++++金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题， 在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个 细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占45%，我国 每年发生的此类中毒事件也非常多。
引起肌体局部缺血和坏死；
b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞；
c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆
中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄 球菌形成的感染易局部化与此酶有关；
d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐
受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌；
参考内容
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4、GB 4789.10—2010食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验
1 范围
本标准规定了食品中金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的检验方法。
本标准第一法适用于食品中金黄色葡萄球菌 的定性检验；
第二法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品中金黄色葡萄 球菌的计数；
7
血平板：可形成完全透明溶血环（溶血）
溶血：红细胞破裂，血红蛋白逸出称红细胞溶解，
简称溶血。
溶血素是细菌分泌的一种参考毒内容性因子
8
细菌的溶血现象
根据细菌对红细胞的溶解能力可分为以下三种溶血类型及现 象：
α溶血:产生溶血素，不完全性溶血，在血琼脂平皿上菌落 周围有1～2mm，较窄半透明的草绿色溶血环。
e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性
肠毒素，分为A、B、C、D、E五种。
参考内容
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2、致病性
++++当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品， 如牛奶和奶制品、肉、蛋等，在温度条件适宜时，经8-10 小时即可相当数量的肠毒素。肠毒素可耐受100度煮沸 30min而不被破坏。人摄食该污染产品后2-3h便可出现中 毒症状。其引起的食物中毒典型症状为呕吐和腹泻。
参考内容
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3、流行病学
在自然界中广泛存在，空气、水、灰尘及人和动 物的排泄物中都可找到。
作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和 动物的鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的 皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。因而，食品受 其污染的机会很多。
参考内容
16
金黄色葡萄球菌的流行病学
一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品 食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染 食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了 肠毒素，引起食物中毒； 熟食制品包装不严，运输过程受到污染； 奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污 染。
蒸馏水
1 000 mL
参考内容
22
检测步骤 ---分离
血平板：金黄色葡萄球菌可以产生溶血素，因此在 血平板上产生明显的溶血环。
血平板上其典型菌落呈金黄色，有时也为白色，大 而突起，圆形，不透明，表面光滑，有溶血圈。
参考内容
23
血平板
参考内容
24
检测步骤 ---分离
Baird－Parker琼脂平板(BP平板)
能在pH4.2-9.3之间生长（最适pH为6-7）； 耐盐性强，在含7～15%的氯化钠培养基中仍能生长，可
用于筛选菌种。
参考内容
6
在普通营养琼脂平板上培养18～24ｈ，可形成圆形、表面 光滑、不透明的菌落。可产生金黄色色素，色素为脂溶性， 不溶于水，故色素只局限于菌落内，不渗至培养中。
参考内容
第三法适用于金黄色葡萄球菌含量较低而杂菌含量较高的食 品中金黄色葡萄球菌的计数。
参考内容
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检验前准备工作 采集与送检 预处理
百度文库
菌落总数
大肠菌群
致病菌
前增菌 分离培养
纯化 多项鉴定及检测实验
分析、报告
参考内容食品微生物检验的一般程20 序
检测步骤---增菌
利用金黄色葡萄球菌耐盐的特性（可耐受 15%的氯化钠），用含7.5%氯化钠肉汤
参考内容
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1、生物学特性
1.1形态与染色
金黄色葡萄球菌无芽孢，无鞭毛， 大多数无荚膜
革兰氏染色阳性；
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直 径0.8μm左右，显微镜下排列成葡 萄串状。
参考内容
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参考内容
5
1.2 培养特征
易培养，对营养要求不高，在普通培养基中生长良好。 需氧或兼性厌氧，在好氧条件下生长最好； 大多数菌株能生长在6.5-46℃之间（最适温度30-37℃）
β溶血: 呈完全性溶血，在血平皿上菌落周围有2～4mm宽、 界限分明、无色透明的溶血环。
γ溶血:不产生溶血素，在血琼脂平皿上的菌落周围无溶血 环。
参考内容
9
可产生卵磷脂酶，在卵黄高盐培养基上形 成周围有白色沉淀环的菌落。
参考内容
10
1.3 生化反应
大多数菌株分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗 糖，产酸不产气。
蛋白胨 牛肉膏 氯化钠 蒸馏水
10.0 g 5.0 g 75 g 1 000 mL
参考内容
21
检测步骤---增菌
或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤（污染严重时）
胰酪胨（或胰蛋白胨）
17.0 g
植物蛋白胨（或大豆蛋白胨） 3.0 g
氯化钠
100.0 g
磷酸氢二钾
2.5 g
丙酮酸钠
10.0 g
葡萄糖
2.5 g
胰蛋白胨