高中生物选修3教案

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第一章基因工程

一.基本工具

(一)限制性核酸内切酶

1.分布:原核生物

2.作用:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且在特定部位

进行切割,使两个核苷酸间的磷酸二酯键断开。

3.作用结果:产生黏性末端或平末端

(二)DNA连接酶

1.分类(1)E.coliDNA连接酶来源:大肠杆菌

功能:只能连接黏性末端

(2)T4DNA连接酶来源:T4噬菌体

功能:连接黏性末端和平末端

2.作用:将DNA连接起来

(三)基因进入受体细胞的载体

1.条件(1)具有多个限制酶切割位点,供外源基因插入

(2)可自我复制或整合到染色体DNA中进行同步复制。

(3)具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择

2.种类:λ噬菌体的衍生物、动植物病毒、质粒

质粒:双链环状DNA分子,最常用,要人工改造

二。基本操作程序

(一)目的基因的获取

1.目的基因:编码蛋白质的基因或具有调控作用的因子

2.获取方法(1)从基因文库中获取

**基因组文库,部分基因文库

(2)利用PCR技术扩增目的基因

(3)化学方法直接人工合成:基因小,核苷酸序列已知(二)基因表达载体的构建(核心步骤)

1.目的(1)稳定存在,遗传给下一代

(2)表达和发挥作用

2.结构:启动子、目的基因、终止子、标记基因、复制原点

**启动子:RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录

**终止子:使转录在所需要的地方停止;

**标记基因:鉴别受体细胞中是否含目的基因。

(三)将目的基因导入受体细胞

1.转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内

维持稳定和表达

2.将目的基因导入植物细胞(1)农杆菌转化法(2)基因枪法

(3)花粉管通道法

3.将目的基因导入动物细胞:显微注射法

4.将目的基因导入微生物细胞:Ca+处理使细胞处于感受态

**原核细胞特点:繁殖快,单细胞,遗传物质相对较少(四)目的基因的检测与鉴定

1.分子水平的检测

(1)检测受体细胞中是否插入了目的基因:DNA分子杂交技术(2)检测目的基因是否转录出了 mRNA:DNA分子杂交技术(3)检测目的基因是否翻译成蛋白质:抗原—抗体杂交法

**检测成功会出现杂交带

2.个体生物学水平的鉴定:接种实验

三.基因工程的应用

1.动物、植物基因工程的成果

(1)植物:提高抗逆性、改良品质、生产药物;

(2)动物:品种改良、建立生物反应器、器官移植;

2.基因工程药物:细胞因子、抗体、疫苗、激素;

3.基因治疗(1)概念:

(2)方法体外基因治疗体内基因治疗

四.蛋白质工程的崛起

1.理论推测,人工合成

2.基因工程,蛋白合成(自然界没有的蛋白质)

第二章细胞工程

一.细胞工程

1.原理和方法:细胞生物学和分子生物学

2.操作水平:细胞水平或细胞器水平

3.目的:按照人们的意愿改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品

4.分类:植物细胞工程和动物细胞工程

二.植物细胞工程的基本技术

(一)植物组织培养技术

1.原理:植物细胞具有全能性

2.条件(1)材料:离体

(2)培养基:营养激素

(3)外界条件:无菌等

3.过程:离体组织器官脱分化愈伤组织再分化胚状体植株

(二)植物体细胞杂交技术

1.概念:不同种杂种细胞植物体

2.原理:植物细胞具有全能性

3.过程(1)制备原生质体方法①酶解法

②酶:纤维素酶和果胶酶

③结果:获得原生质体

(2)诱导原生质体融合①方法:a物理法离心、振动、电激

b化学法:聚乙二醇(PEG)

②标志:杂种细胞再生出细胞壁

③结果:形成杂种细胞

(3)杂种细胞的筛选:AA BB AB AB

(4)植物组织培养:杂种细胞杂种植株

4.意义:克服远缘杂交不亲和的障碍

**生殖方式:无性生殖变异类型:染色体数目变异

(三)实际应用

1.植物繁殖的新途径

(1)微型繁殖:植物组织培养

(2)作物脱毒:茎尖组织培养

(3)人工种子:胚状体、芽+ 人工薄膜

**可加入固氮菌、抗生素、除草剂等有利于生长和提高产量2.作物新品种的培育

(1)单倍体育种

(2)突变体的利用

3.细胞产物的工产化生产

(1)细胞产物种类蛋白质、糖类、药物、香料、生物碱(2)一般为愈伤组织时期

第二课时

三.动物细胞工程

(一)动物细胞培养的过程细胞株

取材处理单个细胞培养细胞悬浮10代细胞

原代培养

1.取材:胚胎细胞或幼龄动物的组织器官

2.处理:剪碎、胰蛋白酶或胶原蛋白酶

3.培养:(1)培养基:液体培养基、合成培养基

(2)条件①无菌无毒环境(灭菌抗生素更换)

②营养:、、维生素、动物的血清、血浆

③温度PH:36.5+/-0.5 7.2~7.4

④气体环境:O2代谢所必需;CO2维持培养液PH

4.原代培养:细胞贴壁、接触抑制、冷冻保存(1~10代)

5.传代培养:①酶处理、分装;

②细胞株:10~50代,正常

③细胞系:50代以后,有癌变特点

6.应用:皮肤移植、生产蛋白质制品、有毒物质的检测、研究

四.动物细胞核移植和克隆动物

1.概念:核移植重组胚胎个体

2.原理:动物细胞核具有全能性

3.分类:胚胎细胞核移植和体细胞核移植

4.过程:见课本

5.应用与存在的问题

(1)畜牧业、保护濒危物种、医药卫生、治疗疾病、器官移植

(2)问题:成功率低健康问题食品安全问题

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