高中生物选修3教案
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第一章基因工程
一.基本工具
(一)限制性核酸内切酶
1.分布:原核生物
2.作用:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且在特定部位
进行切割,使两个核苷酸间的磷酸二酯键断开。
3.作用结果:产生黏性末端或平末端
(二)DNA连接酶
1.分类(1)E.coliDNA连接酶来源:大肠杆菌
功能:只能连接黏性末端
(2)T4DNA连接酶来源:T4噬菌体
功能:连接黏性末端和平末端
2.作用:将DNA连接起来
(三)基因进入受体细胞的载体
1.条件(1)具有多个限制酶切割位点,供外源基因插入
(2)可自我复制或整合到染色体DNA中进行同步复制。
(3)具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择
2.种类:λ噬菌体的衍生物、动植物病毒、质粒
质粒:双链环状DNA分子,最常用,要人工改造
二。基本操作程序
(一)目的基因的获取
1.目的基因:编码蛋白质的基因或具有调控作用的因子
2.获取方法(1)从基因文库中获取
**基因组文库,部分基因文库
(2)利用PCR技术扩增目的基因
(3)化学方法直接人工合成:基因小,核苷酸序列已知(二)基因表达载体的构建(核心步骤)
1.目的(1)稳定存在,遗传给下一代
(2)表达和发挥作用
2.结构:启动子、目的基因、终止子、标记基因、复制原点
**启动子:RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录
**终止子:使转录在所需要的地方停止;
**标记基因:鉴别受体细胞中是否含目的基因。
(三)将目的基因导入受体细胞
1.转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内
维持稳定和表达
2.将目的基因导入植物细胞(1)农杆菌转化法(2)基因枪法
(3)花粉管通道法
3.将目的基因导入动物细胞:显微注射法
4.将目的基因导入微生物细胞:Ca+处理使细胞处于感受态
**原核细胞特点:繁殖快,单细胞,遗传物质相对较少(四)目的基因的检测与鉴定
1.分子水平的检测
(1)检测受体细胞中是否插入了目的基因:DNA分子杂交技术(2)检测目的基因是否转录出了 mRNA:DNA分子杂交技术(3)检测目的基因是否翻译成蛋白质:抗原—抗体杂交法
**检测成功会出现杂交带
2.个体生物学水平的鉴定:接种实验
三.基因工程的应用
1.动物、植物基因工程的成果
(1)植物:提高抗逆性、改良品质、生产药物;
(2)动物:品种改良、建立生物反应器、器官移植;
2.基因工程药物:细胞因子、抗体、疫苗、激素;
3.基因治疗(1)概念:
(2)方法体外基因治疗体内基因治疗
四.蛋白质工程的崛起
1.理论推测,人工合成
2.基因工程,蛋白合成(自然界没有的蛋白质)
第二章细胞工程
一.细胞工程
1.原理和方法:细胞生物学和分子生物学
2.操作水平:细胞水平或细胞器水平
3.目的:按照人们的意愿改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品
4.分类:植物细胞工程和动物细胞工程
二.植物细胞工程的基本技术
(一)植物组织培养技术
1.原理:植物细胞具有全能性
2.条件(1)材料:离体
(2)培养基:营养激素
(3)外界条件:无菌等
3.过程:离体组织器官脱分化愈伤组织再分化胚状体植株
(二)植物体细胞杂交技术
1.概念:不同种杂种细胞植物体
2.原理:植物细胞具有全能性
3.过程(1)制备原生质体方法①酶解法
②酶:纤维素酶和果胶酶
③结果:获得原生质体
(2)诱导原生质体融合①方法:a物理法离心、振动、电激
b化学法:聚乙二醇(PEG)
②标志:杂种细胞再生出细胞壁
③结果:形成杂种细胞
(3)杂种细胞的筛选:AA BB AB AB
(4)植物组织培养:杂种细胞杂种植株
4.意义:克服远缘杂交不亲和的障碍
**生殖方式:无性生殖变异类型:染色体数目变异
(三)实际应用
1.植物繁殖的新途径
(1)微型繁殖:植物组织培养
(2)作物脱毒:茎尖组织培养
(3)人工种子:胚状体、芽+ 人工薄膜
**可加入固氮菌、抗生素、除草剂等有利于生长和提高产量2.作物新品种的培育
(1)单倍体育种
(2)突变体的利用
3.细胞产物的工产化生产
(1)细胞产物种类蛋白质、糖类、药物、香料、生物碱(2)一般为愈伤组织时期
第二课时
三.动物细胞工程
(一)动物细胞培养的过程细胞株
取材处理单个细胞培养细胞悬浮10代细胞
原代培养
1.取材:胚胎细胞或幼龄动物的组织器官
2.处理:剪碎、胰蛋白酶或胶原蛋白酶
3.培养:(1)培养基:液体培养基、合成培养基
(2)条件①无菌无毒环境(灭菌抗生素更换)
②营养:、、维生素、动物的血清、血浆
③温度PH:36.5+/-0.5 7.2~7.4
④气体环境:O2代谢所必需;CO2维持培养液PH
4.原代培养:细胞贴壁、接触抑制、冷冻保存(1~10代)
5.传代培养:①酶处理、分装;
②细胞株:10~50代,正常
③细胞系:50代以后,有癌变特点
6.应用:皮肤移植、生产蛋白质制品、有毒物质的检测、研究
四.动物细胞核移植和克隆动物
1.概念:核移植重组胚胎个体
2.原理:动物细胞核具有全能性
3.分类:胚胎细胞核移植和体细胞核移植
4.过程:见课本
5.应用与存在的问题
(1)畜牧业、保护濒危物种、医药卫生、治疗疾病、器官移植
(2)问题:成功率低健康问题食品安全问题