动物的克隆-1
动物克隆的原理
动物克隆的原理嘿，朋友们！今天咱来聊聊动物克隆的原理，这可有意思啦！你看啊，动物克隆就像是一场神奇的魔术表演。
我们都知道，每个动物都是由一个小小的受精卵发育来的，就像一颗种子会长成参天大树一样。
那克隆呢，就是让这颗“种子”再复制一份。
比如说，有一只特别厉害的羊，它长得漂亮，身体又好，我们就想：哎呀，要是能再有一只一模一样的该多好啊！这时候克隆技术就派上用场啦。
科学家们会先从这只羊身上取一个细胞，这个细胞就包含了这只羊的所有遗传信息，就好像是这只羊的“密码本”。
然后呢，把这个细胞放到一个没有细胞核的卵细胞里，就像是给这个卵细胞换了一个“大脑”。
接着，通过一些特殊的手段，让这个新的细胞开始发育。
你想想，这是不是很神奇？就好像是给一个空房子重新装修，然后让它变成和原来那间一模一样的房子。
那有人可能会问啦，这样克隆出来的动物和原来的真的完全一样吗？嗯，大部分是一样的，但也不是完全一样哦。
就像双胞胎，虽然长得很像，但还是有自己的个性呀。
克隆技术可不是随便就能玩得转的哟！这需要很高超的技术和非常精细的操作呢。
要是不小心弄错了一步，那可就前功尽弃啦。
而且啊，克隆也不是想克隆多少就克隆多少的。
这就好比做蛋糕，材料就那么多，你总不能无限量地做吧。
动物克隆技术可是给我们带来了很多好处呢。
比如说，可以用来保护濒危动物呀，让那些快要灭绝的动物能够继续在地球上生存下去，这多有意义啊！还可以用来做医学研究，帮助我们更好地了解疾病和治疗方法。
不过呢，克隆技术也有一些让人担心的地方。
比如说，会不会有人用它来做坏事呀？会不会对自然环境造成什么影响呀？这些都是我们需要认真思考的问题呢。
总之呢，动物克隆的原理就像是一个神秘的宝藏，等着我们去探索和发现。
它既有让人惊叹的神奇之处，也有需要我们谨慎对待的地方。
我们要好好利用这项技术，让它为我们的生活带来更多的好处，而不是带来麻烦。
大家说是不是呀？。
牦牛低氧诱导因子-1α基因克隆及蛋白质结构分析
牦牛低氧诱导因子-1α基因克隆及蛋白质结构分析段荟芹;王利;李键;熊显荣【摘要】试验采用RT-PCR方法,以麦洼牦牛脾脏cDNA为模板扩增牦牛低氧诱导因子-1α (hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因,并运用生物信息学软件对其序列进行分析.结果发现,扩增得到的麦洼牦牛HIF-1α基因编码区长为2 472 bp,编码823个氨基酸;蛋白质预测结果显示,该蛋白质分子质量为92.13 ku,等电点5.09,为亲水性蛋白,二级结构以随机卷曲和α-螺旋为主,有69个磷酸化位点和4个N-糖基化位点;系统进化树显示,麦洼牦牛与牦牛、野牦牛、普通牛亲缘关系最近.本试验成功克隆麦洼牦牛HIF-1α基因并对其序列进行了分析,为进一步研究HIF-1α基因的功能提供参考.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2016(043)006【总页数】7页(P1430-1436)【关键词】麦洼牦牛;低氧诱导因子-1α;克隆;蛋白质分析【作者】段荟芹;王利;李键;熊显荣【作者单位】西南民族大学青藏高原研究院,成都 610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都 610041;西南民族大学青藏高原研究院,成都 610041;西南民族大学生命科学与技术学院,成都 610041【正文语种】中文【中图分类】Q785低氧诱导因子(hypoxia inducible factor，HIF)最早是由Maroni等[1]在研究促红细胞生成素基因时发现，它是真核细胞调节氧稳态重要的转录调节因子，可靶向调控诸多低氧基因的表达。
HIF包括HIF-1、HIF-2和HIF-3，是由1个不稳定的α亚基和1个稳定的β亚基构成。
活性亚基HIF-1α是对氧气敏感的亚基，在细胞低氧信号转导过程中起枢纽作用，属于bHLH-PAS(basic helix-loop-helix-containing Per-ARNT/AhR-Sim domain protein family)蛋白家族[2-3]。
梅花鹿Galectin-1基因克隆及生物信息学分析
2021.3基金项目:山东省自然科学基金项目“β-半乳糖凝集素在禽网状内皮组织增生症病毒感中作用机制研究”(ZR2019MC036);菏泽学院培育基金项目“ATP1B1对禽网状内皮组织增生症病毒复制影响研究”(XY18PY01)。
作者简介:张淑萍(1995.11-),女,山东省高密市人,研究方向:动物疫病。
*通信作者。
梅花鹿Galectin-1基因克隆及生物信息学分析张淑萍1张厚锋2孔娜2温海燕2周宛蓉2姜莉莉2樊兆斌2*(1,山东省菏泽市食品药品检验检测研究院274000;2,菏泽学院药学院274715)摘要:本试验拟克隆梅花鹿半乳糖凝集素-1(Galectin-1)基因,并对其编码产物进行生物信息学预测分析。
根据ncbi 数据库中已发表的梅花鹿Galectin-1mRNA 序列,设计合成梅花鹿Galectin-1基因扩增引物。
提取梅花鹿肝脏组织RNA ,反转录为cDNA 为模板,利用RT-PCR 技术扩增梅花Galectin-1基因序列,并对其核苷酸和推导氨基酸序列进行遗传演化分析,结果显示,梅花鹿Galectin 1基因编码区为408bp ,编码135个氨基酸。
Galectin-1编码蛋白理论分子量为14.69kD ,理论等电点为5.1,不稳定系数为14.87,推测该蛋白为稳定蛋白。
脂肪系数为81.04,总平均亲水指数为-0.145。
Galectin-1编码蛋白不含信号肽,无跨膜区;存在1个潜在的磷酸化位点不含O-和N-糖基化修饰位点;含有7个抗原决定簇区域,抗原倾向指数高。
本试验成功克隆了梅花鹿Galectin-1基因,并对其进行了生物信息学分析预测,为深入研究Galectin-1编码蛋白的功能提供依据,进一步阐明了其生物功能。
关键词:梅花鹿;Galectin-1基因;基因克隆;序列分析半乳糖凝集素(Galectin)属于S 型凝集素,是一类不依赖钙离子的可溶性凝集素,在脊椎动物、无脊椎动物、原生动物和真菌等各种生物体内广泛存在。
动物克隆的基本过程
动物克隆的基本过程
嘿，朋友们！今天咱来聊聊动物克隆这神奇的事儿。
你说这克隆就像是变魔术一样，能复制出一个一模一样的动物来。
咱先说说这细胞吧，就好像是动物身体的小零件。
要克隆呀，就得先找到合适的细胞。
这就好比你要盖房子，得先找到好的砖头不是？然后呢，把这个细胞放到一个特殊的环境里，就像给小零件找了个特别的家。
接下来，就有个关键的步骤啦！得把这个细胞和一个卵细胞结合起来。
这就像是把两个不同的拼图块拼在一起，组成一个新的整体。
这可不是随随便便就能成功的哦，得非常精细地操作才行。
然后呢，这个新的组合就开始发育啦！就像一颗种子开始发芽、长大。
慢慢地，它就会长成一个和原来的动物几乎一样的新生命。
你说神奇不神奇？
想想看啊，如果我们能把那些珍稀的动物都克隆出来，那不是能保护它们不灭绝了吗？这多好呀！但是，这也不是没有问题的哟。
比如说，克隆出来的动物真的能和原来的完全一样吗？它们的性格、行为会不会有差别呢？这都是值得我们思考的问题呀。
而且啊，克隆也不是随便就能做的。
这需要很高的技术和很严格的条件。
可不是我们在家里就能随便试试的，那可不行！要是弄错了，那可就麻烦啦。
不过呢，虽然有这些问题，动物克隆还是给我们带来了很多希望和可能性。
说不定以后我们能通过克隆技术做出很多对我们人类有益的事情呢。
总之，动物克隆是个既神奇又复杂的事情。
我们既要看到它的好处，也要注意它可能带来的问题。
我们要好好地研究它，让它为我们的生活带来更多的好处，而不是坏处。
你们说是不是这个理儿呀？。
动物克隆的基本原理及过程
动物克隆的基本原理及过程《动物克隆的基本原理及过程》动物克隆是指通过人工手段复制原始个体的生殖过程。
这项技术的发展引起了广泛的关注和讨论，同时也引发了一系列伦理和道德问题。
本文将介绍动物克隆的基本原理及过程，以帮助读者更好地理解这一领域的发展和挑战。
动物克隆的基本原理是利用体细胞核移植技术，将一个成熟核移植到一个去核的卵细胞中，然后通过合适的刺激使其发育成一个完整的新个体。
在这个过程中，克隆个体将完全或部分地拥有捐赠体细胞的遗传信息。
动物克隆的过程可以分为以下几个关键步骤：1. 获取捐赠体细胞：捐赠体细胞可以来自成年个体的体细胞，比如皮肤细胞或肌肉细胞。
这些细胞将成为克隆个体的遗传来源。
2. 准备去核卵细胞：通过一系列的实验操作，去除卵细胞中的细胞核，以确保克隆个体将只携带捐赠体细胞的遗传信息。
3. 核移植：将捐赠体细胞的细胞核注射到去核卵细胞中。
4. 诱导发育：经过核移植后，为了启动克隆个体的发育，科学家通常需要提供一些刺激，比如电脉冲或化学物质。
这些刺激可以激活细胞的发育能力，使其开始分裂和发育。
5. 移植和孵化：克隆胚胎可以被移植到一只母兽体内，或在试管中孵化出来。
无论哪种方法，都需要为克隆个体提供适当的环境和条件，使其正常生长和发育。
需要注意的是，动物克隆是一项复杂和技术密集型的过程，目前仍然面临许多挑战和限制。
成功率仍然相对较低，伦理和道德问题也一直备受关注。
然而，动物克隆也有着广阔的应用前景。
它可以用于保护濒临灭绝的物种、提高家畜和农作物品质、以及研究人类和动物发育等基础科学问题。
随着技术的不断发展和完善，我们相信动物克隆将在未来发挥更大的作用。
总之，动物克隆是一项具有巨大潜力和困难的技术。
通过核移植和发育诱导等关键步骤，科学家可以实现原始个体的复制和繁殖。
尽管仍面临许多挑战，但动物克隆在生物学和应用领域的潜力仍然令人兴奋。
动物的克隆
2.培育过程
去核卵细胞
体细胞核
3、原理 动物体细胞核具有全能性
细胞核移植 重组细胞
电脉冲刺激 早期胚胎(或重组胚胎）
胚胎移植
母体子宫
妊娠、出生 个体
绵羊“多莉”克隆过程：
Ａ母绵羊
Ｂ母绵羊
多
卵细胞
莉
乳腺细胞
羊 的
细胞质
细胞核
培 育
细胞核移植
融合后的卵细胞
卵裂
早期胚胎
胚胎移植
过
程
C母绵羊子宫
妊娠 分娩
原代培养 传代培养
细胞系、细胞株
原代培养物
…………
细胞系
原代培养物在首次 传代时就成为细胞系
可连 续培 养的
不能 连续 培养 的
连续 有限 细胞系 细胞系
细胞系、细胞株
细胞株： 通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞 系中获得的具有特殊性质的细胞，称为细胞株。
细胞株一般具有恒定的染色体组型、同功酶类型、 病毒敏感性和生化特性等。
单克隆 抗体
抗体：机体受抗原刺激后产生的，并且能 与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能 的球蛋白。
什么是抗体？
由何种细胞产生？ 效应B细胞
主要分布在哪里？ 血清 起何作用？ 特异性免疫作用
什么是单 用单个B淋巴细胞进行无性增殖（扩 克隆抗体？ 增），也就是通过克隆，形成细胞群，
这样的细胞群就有可能产生出化学性质 单一、特异性强的抗体。
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂 就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。 13、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？ 将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后继续增殖。
这样的过程叫做传代培养
动物克隆的技术和原理
动物克隆的技术和原理
动物克隆是指通过人工手段复制一个动物的基因组，使其与原生态个体相同或相似的过程。
目前，动物克隆技术主要包括体细胞克隆和胚胎克隆两种方法。
体细胞克隆是利用已成熟的体细胞（如皮肤细胞）经过处理，使其转化为“全能细胞”，再将其注入到空心的卵细胞中，使其发育成胚胎，最终通过移植到代孕母体中获得一个新生个体。
这种方法最早应用于羊的克隆，被称为“多莉”，成功率较低，但是可以利用一个体细胞克隆出多个个体。
胚胎克隆是利用早期胚胎的细胞，通过细胞分裂产生多个完全相同的胚胎，再将其移植到代孕母体中发育成新生个体。
这种方法的成功率相对较高，但需要采集和操作早期胚胎，对于某些动物来说难度较大。
动物克隆技术的原理是基于细胞分裂和基因组重组的原理。
每个动物细胞都包含着完整的基因组，通过不同的基因表达和调控，才能发挥出不同的细胞类型和个体特征。
通过对细胞进行特殊处理，可以使其恢复到某种发育状态，从而重新分裂产生新的胚胎或个体。
动物克隆技术在基础研究、药物研发、种质保护等领域有广泛应用，但也存在伦理和安全等问题，需要进一步探究和规范。
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克隆动物的原理
克隆动物的原理
克隆动物的原理是通过细胞核移植技术来实现的。
该技术的基本步骤如下：
首先，从欲克隆的动物身体中取出成熟细胞，通常选择来自皮肤或肌肉的细胞。
然后，从另一只动物的卵细胞中去除其细胞核，形成一个空的卵细胞。
这个过程称为去核化。
接下来，将已取出的成熟细胞注射到去核化的卵细胞中，使其取代原来的细胞核。
随后，将充满新细胞核的卵细胞进行体外培养，直至它发育成一个早期胚胎。
最后，将早期胚胎植入一只代孕母动物的子宫中，进行妊娠和胎儿发育，最终诞生出一个克隆动物。
通过这种方式，科学家可以复制一只动物的基因组，使其与原动物基本一致。
然而，由于细胞核移植技术的复杂性和不稳定性，成功克隆出健康动物的几率相对较低。
同时，克隆动物也可能会出现一些不正常的生理和行为特征，因为基因组的复制并不完全等同于原动物的全部遗传特征被复制。
克隆动物的研究对于科学研究、遗传学研究以及生物医学领域具有重要意义。
它可以帮助科学家更好地理解动物发育和遗传
机制，促进生物医学研究，推动科学技术的进步。
此外，克隆动物的出现也引发了一系列伦理和道德问题的讨论，如个体权利、动物福利、基因改造等问题，需要进一步深入研究和探讨。
《动物克隆》课件
促使克隆个体在实验室中发育成熟，形成一个与原始动物完全相同的个体。
动物克隆的历史
动物克隆起源于20世纪50年代，诺贝尔奖获得者艾斯纳克和威尔莫特首次成功克隆了动物。
1
1952
首次成功克隆了一只无性繁殖动物。
2
1996
多利羊于此年诞生，标志着克隆技术迈入新纪元。
3
2013
再一次突破，人类成功克隆猴子，为人类克隆进程提供了新的方向。
动物克隆的应用领域
动物克隆技术在医学、农业和生物研究等领域具有广泛的应用潜力。
医学研究
通过克隆动物，可以进行药物测试和疾病模拟， 加速新药的研发过程。
农业改良
动物克隆可以用于繁育优质畜禽，提高农业生，我们可以拯救濒危物种并维持 生态平衡。
器官移植
未来或许可以通过克隆动物，获得更充足的器 官资源。
伦理思考
我们需要平衡技术的发展和个体 权益的尊重。
未来探索
伦理建设
科学家们将继续不断探索和创新， 推动动物克隆技术的进一步发展。
我们需要建立健全的伦理框架， 引导动物克隆技术的发展和应用。
动物克隆的方法
目前，动物克隆可以通过以下几种方法实现：离体胚胎细胞核移植、胚胎纳米注射和人工核移植。
离体胚胎细胞核移植
胚胎纳米注射
通过将个体细胞的细胞核注入受 体胚胎的去核细胞内，实现克隆。
使用纳米尺度的注射器将克隆个 体的DNA注入受体胚胎中。
人工核移植
通过手术将个体的细胞核移植到 受体动物体内，实现克隆。
生物多样性
通过克隆技术，我们可以更好地 保护和维持动物的种群多样性。
克隆的定义和原理
克隆是指复制一个完全相同的个体，原理是通过提取和操纵细胞的DNA，再将其注入到另一个细 胞中。
动物体细胞克隆
胚胎移植技术
胚胎收集
从重构胚中收集发育至一定阶段 的胚胎，通常在体外培养至囊胚
阶段。
胚胎移植前处理
对收集到的胚胎进行评估和选择， 去除发育异常或质量不佳的胚胎。
胚胎移植
将选定的胚胎移植到受体动物的子 宫内，使其继续发育并诞生克隆动 物。
03 动物体细胞克隆实验步骤
供体细胞的准备
选择供体细胞
选择具有正常生理功能和遗传物质的动物体细胞作为供体细胞， 如皮肤成纤维细胞、乳腺细胞等。
医学领域的应用
人类疾病模型
通过克隆技术，可以创 建具有人类疾病的动物 模型，用于研究疾病的 发生机制和治疗方法。
器官移植
利用克隆技术，可以培 育出与患者基因型相同 的器官供体，解决器官 移植中的免疫排斥问题。
药物研发
克隆技术可用于生产具 有特定功能的细胞或组 织，用于药物筛选和研 发。
生物制药领域的应用
伦理问题
生命的起源和尊严
克隆技术可能引发关于生命起源和尊严的争议，因为它涉及到创造与原有生物体基因相同 的新生命。
动物福利
在克隆过程中，动物可能会遭受痛苦和不适，这引发了关于动物福利和伦理责任的讨论。
人类对自然的干预
克隆技术可能被视为人类对自然的过度干预，从而引发关于人类在自然界中角色的争议。
法规问题
发、疾病治疗等方面的研究。
生物工程领域
克隆技术可以用于生产具有特定 功能的生物制品，例如生产药物、 疫苗等。此外，还可以利用克隆 技术进行基因编辑和基因治疗等
方面的研究。
02 动物体细胞克隆技术原理
细胞核移植技术
细胞核提取
01
从供体动物体细胞中分离出细胞核，通常采用显微操作技术。
动物的克隆
（3）意义： ①、有利于遗传疾病的治疗
②、 有利于物种的优化、优良品种的培育 ③、降低畜牧业的成本，缩短育种年限，提高生产效率 ④、有利于濒危动物的保护和转基因动物的扩群有重要意义
细胞在贴壁生长过程中，
随着细胞分裂，数量不
断增加，最后形成一个
单层，此时细胞间相互
接触，细胞分裂和生长
停止，数量不再增加。
2、动物组织培养
动物组织在体外以及人工条件下维持生活状态或 生长特性。
3、器官培养
器官的原基、器官的一部分或整个器官在体外和人工 控制的条件下得以保存、生长，在此过程中保持器官 的结构、功能及分化能力。
动物细胞培养技术和动物组织培养技术是动物克隆 技术的基础
4、克隆培养法
（1）克隆培养法概念：
把一个细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍 成一个新的细胞群体的技术。又称细胞克隆 （2）特征： 遗传性状均一、表现性状相似，便于研究。 （3）基本要求： 必须保证分离出来的细胞是一个而不是多个。 （4）较容易克隆的细胞： 无限细胞系、转化细胞系和肿瘤细胞等。 （5）提高克隆形成率的措施： 选择适宜的培养基、添加血清、以滋养细胞支持生 长、激素刺激、 使用CO2培养箱调节PH值等 （6）用途： 如从普通细胞系中分离出缺乏特殊基因的突变细胞系。
这种叫接触抑制。
动物细胞培养条件：
1、无菌、无毒的环境
（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
2、营养
(水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖、动物血清等）
3、温度和pH
36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4
4、气体环境：
CO2培养箱
★
小结 动物细胞培养
（原、传代培养，细胞系、株）
克隆动物的原理是
克隆动物的原理是
克隆动物的原理主要分为两种方式：自然克隆和人工克隆。
自然克隆是指一种自然现象，即在某些动物中，可以通过无性生殖形成完全一样的个体。
例如，某些植物可以通过分裂生长、萌芽或者无性繁殖来实现克隆。
在动物中，像一些昆虫、无脊椎动物和鱼类也具有自然克隆的能力。
自然克隆的产生是由于这些动物个体中存在能够发育成全新个体的组织或细胞，常见的有根茎和分蘖。
人工克隆是指通过人为干预和操作，实现动物的克隆。
最常见的人工克隆方式是体细胞核转移法。
具体来说，首先从一个成年动物的体细胞（如皮肤细胞）中提取细胞核，然后将这个细胞核注入到另一个已经取出细胞核的未受精卵细胞中。
经过某些处理和刺激后，形成的这个卵细胞就会发育成一个与原始动物基因完全相同的胚胎，并最终发育成一个克隆动物。
无论是自然克隆还是人工克隆，其本质都是利用细胞的分裂和发育能力，通过复制原始动物的基因信息，最终获得与原始动物相同基因组的个体。
虽然克隆动物与原始动物拥有相同的基因，但在生长及发育过程中由于外界环境的差异，克隆动物可能会展现出不同的个体特征和表现。
第三节动物的克隆
思考题
动物细胞培养过程
悬浮培养
思考题
动物细胞生长特性： （1）贴壁生长：培养瓶中的悬浮液细胞， 紧贴培养瓶内壁才能生长 （2）接触抑制：当培养瓶中内壁生长细 胞彼此紧密接触时，细胞不再分裂 （3）细胞只分裂不分化
如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？ 原代培养 机体中取 下经过处 理后的单 细胞 细胞株：
动物的组织培养
培养物： 离体的动物组织 培养环境： 人工控制的培养条件 培养过程： 细胞的运动、变化，使得培养物的
组织成分也发生结构和功能变异
培养产物：
单一类型的细胞
组织培养长期培养后最终成为了简单的细胞培 养,因此两者可以统称为组织培养. 器官培养： 器官的原基、器官的一部分或整个器 官，使之在体外和人工控制的条件下得以生存、生 长和保持器官的结构、功能及分化能力。
4、动物胚胎分割移植
解决某些妊 娠时间长、每胎 产子数量少的优 良种畜的繁殖速 度问题。
练习：
二、动物的细胞融合技术及其应用
1、细胞融合与细胞杂交：
物理法：离心、振荡、电融合技术
诱导方式
化学法：聚乙二醇
生物法：灭活的仙台病毒
灭活的病毒颗粒 黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒 穿通，细胞膜连接
细胞融合，形 成杂种细胞
（糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。）
3、温度和PH 保证细胞顺利的 36.5 ± 0.5℃，7.2-7.4 生长增殖 4、气体环境： 有O2和CO2（95%空气和5%CO2 ）
[讨论]动物细胞离体培养时，是否会表 现和体内细胞一样的生命活动？
①细胞能生存并保持生长、分裂乃至接触抑制和 有规律的衰老、死亡等。 ②细胞之间相互依存，在某种程度上呈现一定的 组织特性。
动物体细胞克隆技术
动物体细胞克隆技术嘿，朋友们！今天咱来聊聊动物体细胞克隆技术。
这玩意儿可神奇啦，就好像是生命的魔法师一样！你想想啊，通过这个技术，我们可以复制出一个和原来动物几乎一模一样的个体。
这多厉害呀！就好比说，你有一只特别可爱特别乖的小狗，你超级超级喜欢它，但是呢，狗狗的生命是有限的呀。
那要是有了克隆技术，哇塞，就又能有一只一模一样的小狗啦，是不是很神奇？克隆技术可不是随随便便就能做到的哦。
它需要科学家们像侦探一样，仔细地研究细胞的每一个细节，找到关键的地方，然后施展他们的魔法。
这可不是闹着玩的，这需要超级高的技术和耐心呢。
比如说，要从动物身上取出一个体细胞，这就像是从一个大宝藏里找出一颗特别珍贵的宝石。
然后呢，再把这个体细胞放到一个合适的环境里，让它像种子一样发芽、生长。
这过程可不简单呐，就跟培育一朵特别娇嫩的花似的，得小心翼翼地照顾着。
那克隆出来的动物和原来的动物真的完全一样吗？嗯，大部分是很像的啦，但也不是完全一模一样哦。
就像双胞胎，虽然长得很像，但还是有自己的个性和特点呀。
克隆技术也有很多好处呢。
比如说可以用来保护那些濒临灭绝的动物呀。
想象一下，如果那些可爱的珍稀动物快要消失了，我们用克隆技术让它们又多起来，这不是很棒吗？这就像是给它们打了一针神奇的复活药！而且，克隆技术还能帮助我们更好地研究动物的疾病呢。
我们可以克隆出有病的动物，然后仔细研究它们的身体，找到治疗的办法。
这多有意义呀！不过呢，克隆技术也不是完美无缺的呀。
它也会带来一些问题呢。
比如说，如果克隆技术被滥用了，那会不会出现很多一模一样的动物，这世界不就变得有点奇怪啦？还有啊，如果有人用克隆技术来做坏事，那可咋办呢？所以啊，我们要用好克隆技术，让它为我们服务，而不是给我们添麻烦。
我们要像对待一个珍贵的礼物一样，小心地使用它，让它给我们的生活带来更多的美好和惊喜。
总之呢，动物体细胞克隆技术是一个非常有趣又非常有挑战性的领域。
它就像一个充满神秘和奇迹的宝藏，等待着我们去探索和发现。
国外关于克隆的经典案例
国外关于克隆的经典案例克隆是在科学界引起广泛争议的一个话题。
自从英国爱丁堡罗斯林研究所的伊恩·威尔穆特成功克隆了羊多莉以来，克隆技术就备受关注。
以下是一些国外经典的克隆案例，它们在科学、医学和道德层面上都产生了深远的影响。
1.羊多莉（Dolly the Sheep）：这是迄今为止最具影响力和最广为人知的克隆案例之一。
1996年，伊恩·威尔穆特和他的团队成功克隆出了一只名为羊多莉的多莉绵羊。
这被认为是第一次在哺乳动物中实现了克隆。
羊多莉的克隆引发了众多争议，许多人担心克隆技术会导致道德和伦理问题的出现。
2. CC猫（CC the Cat）：CC猫是世界上第一只被成功克隆的宠物猫。
在2001年，研究人员从一只名为Rainbow的雌性美国短毛猫身上提取了细胞，然后克隆了CC猫。
这个案例引发了对宠物克隆道德和伦理问题的关注，人们开始讨论是否应该把动物作为克隆试验的对象。
3.斯尼普（Snuppy）：斯尼普是2005年克隆的世界上第一只狗。
韩国科学家黄禹锡及其团队成功将一个雄性阿富汗猎狗克隆成斯尼普。
这个里程碑事件在科学界引起了很大的轰动，引发了人们对狗克隆和基因操作的道德和伦理问题的讨论。
4.莫利斯（Molly & Polly）：这对由澳大利亚绵羊制成的双胞胎克隆，被克隆出来用于研究抵抗疾病的药物生产。
这对克隆绵羊在2009年诞生，是克隆技术在药物研发领域中的一个重要突破。
它们的克隆突破了过去困扰克隆科学家多年的技术难题。
5.喜洋洋和懒洋洋（Yang Yang & Long Long）：这对名叫喜洋洋和懒洋洋的猴子，是2018年中国科学家首次成功克隆的猴子。
这个突破标志着中国在克隆技术领域的进展，也引发了全球科学界对人类克隆的道德和伦理问题的热议。
这些案例展示了克隆技术在动物领域的应用和进展，但也揭示出了许多道德和伦理问题。
有些人对将克隆技术用于动物和人类身上表示担忧，担心可能出现的滥用和伦理问题。
克隆动物的原理与应用
克隆动物的原理与应用近年来，克隆技术在动物领域引起了广泛的关注和研究。
克隆动物是指通过人工手段，利用体细胞核移植等技术，复制出与原始个体基因几乎完全一致的动物。
本文将探讨克隆动物的原理和应用。
一、克隆动物的原理克隆动物的原理主要通过体细胞核移植技术实现。
体细胞核移植是指将捐赠者个体的体细胞核转移到受体个体的卵子细胞内，经过诱导和培养，使其发育为一个基因几乎与捐赠者完全一致的新生个体。
具体步骤如下：1. 卵子准备：从受体动物的卵母细胞中取出细胞质，形成空卵细胞。
2. 核移植：将捐赠者动物的体细胞核提取，并注射到空卵细胞中。
3. 刺激发育：通过一系列的电刺激、体外培养等措施，促使卵子细胞进入发育阶段。
4. 种植胚胎：将发育正常的胚胎种植到代孕母体中，进行孕育。
这一原理的实现，使得科学家们能够复制出具有相同基因组的动物，并在研究、医学等领域有着重要的应用前景。
二、克隆动物的应用1. 科学研究：通过克隆动物，研究人员可以消除基因差异的干扰，更好地研究基因功能、疾病发生机制等。
例如，利用克隆动物进行药物测试，可以减少动物实验的数量，提高研究的效率和准确性。
2. 动物保育：在濒危动物保育方面，克隆技术有望发挥重要作用。
对于数量稀少的珍稀物种，通过克隆技术可以复制多个个体，增加物种的数量，为物种的繁衍提供了新途径。
3. 细胞治疗：克隆技术还可用于人类医学领域的研究。
例如，通过克隆技术可以获得与患者基因几乎完全相同的胚胎干细胞，为器官移植和治疗疾病提供更多的选择和可能性。
4. 农业生产：克隆技术在农业上也有一定的应用潜力。
通过克隆动物，可以复制出优质肉牛、高产奶牛等，提高农业生产的效率和品质。
然而，克隆技术仍然存在一些争议和挑战。
首先，克隆动物的成功率相对较低，技术难度较大；其次，克隆动物可能存在基因突变和健康问题；此外，伦理和道德问题也需要认真考虑。
总结起来，克隆动物技术的发展为科学研究、动物保育、医学治疗等领域带来了新的希望和机遇。
高中生物PPT课件《动物的克隆》第三课时 (1)
一、动物细胞全能性的表现程度
细胞全能性 指单个细胞具有发育成完整个 体的潜能。
受精卵具有全能性
一、动物细胞全能性的表现程度
• 2、“受精卵、多能干细胞、胚胎干细胞、 单能干细胞、高度分化细胞”请按细胞表 现全能性程度由高到低排序：
• 3、“低等动物细胞、高等动物细胞、植物 细胞”请按细胞表现全能性程度由高到低 排序：
一、动物细胞全能性的表现程度
2、 受精卵> 胚胎干细胞 > 多能干细胞 > 如多能造血干细胞： 单能干细胞 > 高度分化细胞 可分化为红细胞、 白细胞、血小板等 3、
植物细胞 > 低等动物细胞 > 高度动物细胞
培育过程
去核卵细胞 体细胞核
细胞核移植
动物难以克隆的 根本原因？
重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎(或重组胚胎） 胚胎移植 母体子宫 妊娠、出生 个体
二、动物难以克隆的根本原因
在动物的个体发育过程中，分化的结果使 得细胞在形态和功能上高度特化，这是由于细 胞在伴随着它们发育过程中在时间、空间的变 化，基因表达的调控使得细胞中合成了专一的 蛋白质,使得基因组中基因的活动很不完全。
培育过程
去核卵细胞 体细胞核
细胞核移植
体细胞克隆动物成 功可以证明？
重组细胞 电脉冲刺激 早期胚胎(或重组胚胎） 胚胎移植 母体子宫 妊娠、出生 个体
体细胞克隆动物成功可以证明：
1、证明了高度分化的细胞也可以回复到类 似受精卵时期的功能。 2、证明了细胞质具有调控细胞核发育的作 用。
三、体细胞克隆猴成功的分子细胞生 物学机理
重组卵细胞最初分裂时虽复制了DNA,但基 因的转录并未开始； 重组移核细胞丢失了源于供体细胞的调节蛋 白； ，供体细胞的调节蛋白便全部被卵细胞质中 的蛋白因子替换了，因此核DNA表达程序被重 新编排，细胞开始表达自己的基因。
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无限增殖、 产生大量的单克隆抗体
(3) 单克隆抗体的制备： 阳性孔
如何得到一个细胞的克隆？
3、单克隆抗体的应用
• 诊断和防治各种疾病。
• 研究抗原物质在细胞中的定位及其功能。
• 在单抗上连接抗癌药物，制成“生物导弹”， 治疗癌症。
位素的单抗
-----生物导弹
植物组织培养与动物细胞培养的比较
抗原 反复注射
从血清中分离
动物
抗体
得到
特点：
产量低、 纯度低、 特异性差。
一个B淋巴细胞只产生一种特异性抗体
在体外，如果
克隆
单个B淋巴细胞
细胞群
产 生
化学性质单一、 特异性强的抗体 （单克隆抗体）
(3) 单克隆抗体的制备：
科勒 德国
米尔斯坦 英国
一个B淋巴细胞
一个骨髓瘤细胞 细胞杂交
1975年，两位科学家创 造性的工作解决了这一难 题。二人于1984年获得了 诺贝尔生理或医学奖
20世纪80年代出现了电融合技术。
(2)动物细胞融合的过程
细胞融合 细胞杂交 （P31）
2、杂交瘤技术和单克隆抗体的制备过程
(1)什么是抗体？ 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生
特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
一个病原体有多个抗原，可以与多个 抗体特异结合
(2)传统的抗体制备技术：
第二章 克隆技术
第三节 动物的克隆
动物克隆的技术基础是动物的细胞培养。
动物细胞和组织培养技术的发展
1885年Roux 用生理盐水培养鸡的神经板，发现它可在盐水中生 活一段时间。
1903年Jlly分别将皮肤及白1907年Harry为探讨神经纤维的真正来源，从蛙胚中分离出一部 分神经管，培养在一滴蛙的淋巴液中，成功地看到了神经纤维的 末端的生长，其中一根神经纤维在25分钟之内长到20微米，另一 根在50分钟内长到25微米，最长的达到了200微米。
比较 项目
原理
结果
用途
植物组 织培养
动物细 胞培养
细胞的全 能性
细胞的增 殖
培育成 植株
培育成 细胞群
快速繁殖等
获得细胞的 产物或细胞
等
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目
植物体细胞杂交 动物细胞融合
细胞融合原理 细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性
融合前的处理
去除细胞壁
诱导融合的方法物理（离心、振动、 物理、化学方法
电刺激）
（同左）
化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
用途
获得杂种植株 制备单克隆抗体
资料：
（1）淋巴细胞合成DNA有D和S两条途径， 其中D途径能够被氨基喋呤阻断。但是一般 不分裂增殖。 （2）骨髓瘤细胞是特殊选择的代谢缺陷型 细胞，其DNA合成过程只具有D途径，能被 氨基喋呤阻断。 （3）杂交瘤细胞则既可无限增殖，又具备 两条DNA合成途径。
1912年Carrel发现鸡胚浸出液对多种细胞生长有高度促进作用， 他将7天鸡胚心脏的组织块培养在血浆和鸡胚提取液的混合物中， 当细胞生长出晕后再把它分成两份进行培养，鸡胚细胞的培养连 续维持了34年之久。 Carrel使用的培养液，采用的无菌技术， 以及后来设计的培养瓶(卡氏瓶)等都是对组织培养的重要贡献。
1950年Morgan等人经过大量研究设计的“199”培养液至今仍广泛 用于人及哺乳动物细胞的培养。
一、动物细胞培养
从动物机体中取出相关的组织，将它分散 成单个细胞，然后，放在适宜的培养液中，让 这些细胞生长和增殖。
一、动物细胞培养
1、动物细胞培养的条件
① 无菌、无毒环境 ② 营养：糖、氨基酸、促生长
受精作用
细胞融合是正常的生命活动
(1)细胞融合技术的发展
Luginbuhl于1873年观察到天花病人的血液中有多核的血细 胞存在。
1958年日本学者冈田（Okada）发现仙台病毒具有触发动物 细胞融合的效应。
1974年华裔加拿大学者高国楠创立了聚乙二醇（PEG）化学 融合法。
1975年Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B-淋巴细胞和骨 髓瘤细胞而产生能分泌预定单克隆抗体的杂交瘤细胞。
资料：用HAT培养基筛选得到杂交瘤细胞
单克隆抗体技术中人工诱导小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞融合后，细胞将以多种形式 出现，如脾细胞-瘤细胞、脾细胞-脾细胞、瘤细胞-瘤细胞、细胞多聚体、未融合的脾 细胞和瘤细胞等，其中只有脾细胞-瘤细胞的融合体是有用的。正常的脾细胞在培养 基中存活仅5-7天，无需特别筛选，细胞多聚体也容易死去，关键问题是要去除未融 合的瘤细胞。选择培养基具有3种关键成分：次黄嘌呤（hypoxanthine）、氨甲蝶呤 （aminopterin）和胸腺嘧啶核苷（thymidine），故名HAT培养基。这个培养基通 过抑制瘤细胞的核苷酸合成，达到去除未融合瘤细胞的目的。细胞有两条基本途径合 成嘌呤核苷酸，一条是从磷酸核糖、氨基酸、CO2和NH3等化合物开始，叶酸是重要 的辅酶，而氨甲蝶呤是叶酸的拮抗剂，可阻断瘤细胞通过这一途径合成核苷酸。另一 条途径是利用已存在的碱基，经特异的磷酸核糖转移酶催化合成核苷酸，如次黄嘌呤 经过次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）转变为嘌呤核苷酸。融合所用的瘤细胞是 选择出来的HGPRT缺陷细胞株，因此不能在HAT培养基中生长，而且不合成或不分 泌免疫球蛋白。只有融合细胞具有亲代双方的遗传性能，可在HAT培养基中长期存活 与繁殖并分泌抗体。用于筛选具有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)或胸苷激酶(TK)活 性缺陷细胞的培养基。是含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)、胸苷(T)和甘氨酸的完全 培养基。在氨基蝶呤(二氢叶酸类似物)存在下，这种酶缺陷的细胞不能通过核苷酸合 成旁路合成次黄嘌呤和胸苷。HPRT和TK缺陷细胞可以在此培养基中生存。是常用的骨 髓杂交瘤细胞选择性培养基。
因子、无机盐、微量元素、 动物血清等。 ③ 温度：一般与动物体温接近， 哺乳动物多以36.5±0.5为宜。 ④ 适宜的pH：多数细胞的最适 pH为7.2-7.4，CO2可以维持培 养液pH。一般为95%+5%的混 合气体。
2、动物细胞培养的过程
原代培养：从机体取 出后立即进行的细 胞培养。（P28）
传代培养：将细胞从 一个培养瓶分装到 多个培养瓶中继续 培养。 （P28）
细胞系 细胞株
一、动物细胞培养
3、动物细胞培养技术的应用
① 生产有价值的生物制品。 ② 检测有毒物质的毒性。 ③ 培养细胞用于生理、药理、病理研究为治疗和
预防疾病提供理论依据。
二、动物细胞融合与单克隆抗体 1、细胞融合与细胞杂交