浙江师范大学遗传学实验报告巴氏小体的观察

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吴月婷学号13990115

巴氏小体的观察

1 目的

学习掌握观察与鉴别人体X染色体的方法,识别其形态特征和所在的部位;进一步理解雌性哺乳动物X染色体失活的假说和剂量补偿效应。

2 原理

巴氏小体是由雌性哺乳动物体细胞中失活的X染色体在间期细胞中存在的异固缩状态,形成直径约为1 μm的染色小体,贴着核膜或靠近核膜边缘。XX型的女性细胞中含有1个巴氏小体,XY型的男性细胞中没有巴氏小体,巴氏小体的数目为细胞中X染色体的数目-1。正常女性口腔粘膜细胞中巴氏小体出现的概率是30~50%。

3 步骤

(1)取女生口腔上皮细胞,涂在载玻片上,男生口腔上皮细胞为对照。(2)醋酸洋红染色约20min。(3)制片显微镜观察。

4 结果

在40倍视野下(图1),观察到女性细胞中有1个巴氏小体,而男性细胞中没有巴氏小体。巴氏小体贴着核膜表面,团状,染色较深。统计了50个女性细胞,含有巴氏小体的细胞数为19个,比例为38%.

50 μm50 μm

图1 女性细胞(A)和男性细胞(B)的巴氏小体观察

5 讨论

我们观察到女性细胞有巴氏小体而男性细胞没有。巴氏小体是失活的X染色体,女性有两条X染色体,而男性只有1条X染色体,因此女性在胚胎时细胞会有1条X染色体失活成为巴氏小体,从而使得X染色体剂量均等。通常X染色体上的基因活性是常染色体活性的两倍。女性的卵子细胞会使已经形成的巴尔氏体再次展开,转变回原始的状态。

我们观察到并非所有的女性细胞中都有巴氏小体,而是部分细胞存在。控制X染色体失活的基因主要是X染色体上的Xist。Xist基因表达的时候会使X染色体凝缩,当基因没有被转录或翻译的时候没有巴氏小体,凝缩后的巴氏小体缺少相应的结合蛋白也会重新展开,例如卵子中的Xist基因就会关闭,巴氏小体就重新展开形成X染色体。在不同的组织中巴氏小体出现的频率也有所差异。

在哺乳动物中,形成巴氏小体能使X染色体的剂量均等。其他动物有不同的方法,例如线虫不会进行X染色体去活化,而是把雌性两条X染色体的活性都减半;果蝇则是雌蝇的两条X染色体都有正常作用,但雄蝇的单一X染色体会发挥两倍的活性。

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