食品微生物快速检测常用方法-纸片法测大肠菌群(精)
菌落总数的速测技术—纸片法
菌落总数的速测技术—纸片法菌落总数主要是作为判定食品被细菌污染程度的标记，具有重要卫生学意义，被国内外广泛应用于食品卫生工作中。
菌落总数作为卫生检验指标菌的常检项目之一，国标法检测程序比较烦琐，倾注平板时受温度影响较大，影响检测结果。
因此，进展迅速、简便、经济的检测办法势在必行，最主要的是缩短检测时光，提高检出率，便利生产在线检测和现场检测等。
1．速测原理将养分培养基、凝胶和(TTC)显色剂等加载到试纸片，经加样、培养后，细菌菌落在测试片上显现出红色菌斑，通过计数报告结果。
2．速测范围纸片法用于各类食品及原料中菌落总数的测定，也可用于与食品接触的容器、操作台和其他设备表面的卫生检测。
3．速测步骤 (1)样品处理。
无菌称取样品25g(或25mL)放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内，经充分振摇(均质)做成1:10的稀释液。
用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL 灭菌生理盐水的试管内，用1mL灭菌吸管反复吸吹制成1:100的稀释液。
以此类推，做出1:1000等稀释度的稀释液，每个稀释度更换一支灭菌吸管。
(2)接种。
普通食品选2～3个稀释度举行检测，含菌量少的液体样品(如食用纯水和矿泉水等)可挺直用原液检测。
将测试片放在水平台面上，揭开上面的透亮薄膜，用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL，匀称加到中心的纸片上，轻轻将上盖膜放下，静置5min使培养基凝固，最后用手轻轻地压一下。
每个稀释度接种两片。
(3)培养。
将测试片叠在一起放回原自封袋中，透亮面朝上，水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。
培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。
4．结果判定 (1)细菌在纸片上生长后会显示红色斑点，挑选菌落数适中(101～100个)的纸片举行计数，乘以稀释倍数后即为每克(或毫升)样品中所含的细菌菌落总数。
菌落数在100以内时，按实有数报告。
菌落数＞100时，用2位有效数字，2位有效数字后面的数字，以四舍五入办法计算，并以10的指数来表示。
食品微生物大肠菌群检测方法
食品微生物大肠菌群检测方法食品安全一直备受人们关注，而微生物大肠菌群是食品中常见的一种微生物污染物。
因此，建立一套有效的检测方法对于保障食品安全至关重要。
本文将介绍几种常用的食品微生物大肠菌群检测方法，希望能对相关领域的研究工作者提供一些参考。
首先，传统的培养法是一种常见的检测方法。
该方法通过将样品在特定的培养基上培养，利用大肠杆菌的生长特性进行检测。
然而，这种方法存在着检测周期长、操作繁琐、灵敏度低等缺点，无法满足现代食品安全监测的需求。
其次，分子生物学方法的应用逐渐成为食品微生物大肠菌群检测的主流。
PCR法是其中的一种常用技术，它利用特定的引物和酶对DNA进行扩增，通过检测扩增产物来判断样品中是否存在大肠菌群。
这种方法具有操作简便、灵敏度高、检测周期短等优点，已经成为食品微生物检测的重要手段之一。
另外，免疫学方法也是一种常用的检测技术。
ELISA法是其中的代表，它利用抗原与抗体的特异性结合来检测样品中的大肠菌群。
这种方法具有高度的特异性和灵敏度，适用于大批量样品的快速检测，被广泛应用于食品安全监测领域。
除了上述方法外，近年来基于生物传感技术的检测方法也逐渐受到关注。
生物传感器利用生物分子与传感器进行特异性识别，通过信号转导来实现对微生物的检测。
这种方法具有灵敏度高、检测速度快、操作简便等优点，对于食品微生物大肠菌群的检测具有重要的应用前景。
总的来说，食品微生物大肠菌群的检测方法多种多样，每种方法都有其独特的优势和局限性。
在实际应用中，需要根据具体的检测要求和条件选择合适的方法。
希望本文介绍的方法能够为食品安全领域的研究工作者提供一些参考，促进食品微生物大肠菌群检测技术的进一步发展和完善。
纸片法和发酵法检测餐具大肠菌群结果比较
纸片法和发酵法检测餐具大肠菌群结果比较关键词：大肠菌群；纸片法；发酵法中图分类号：r12 文献标识码：b 文章编号：1004-7484(2012)06-0279-02《中华人民共和国食品安全法》对餐具消毒明确规定：餐(饮)具和盛放直接入口食品的容器使用前应当洗净、消毒,用后应当洗净,保持清洁[1]。
所以加强餐具监测及评价、公布餐具卫生状况、正确引导科学消费已成为监督监测工作的重要任务[1]。
在餐具大肠菌群检测工作中大肠菌群快速检测纸片法(以下简称纸片法)具有用材简单，操作方便，且出结果快(18h)等优点，所以自1994年被正式列入国标检测方法[2] 以来，在餐具大肠菌群检测工作中得到广泛使用。
但我们在长期检测实践中也发现该方法存在个别结果不易判别的不足。
为保证餐具大肠菌群检测结果准确性，我们在2011年对我县大，中，小餐馆随机抽取的消毒后餐具检测时，用纸片法和发酵法同时对360份送检的餐具样本进行检测，结果如下。
1 材料与方法1.1材料1.1.1试剂大肠菌群食(饮)具快速检测纸片(南京三爱实业有限公司研制，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所监制)。
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(lst)北京陆桥公司。
绿乳糖胆盐肉汤(bglb)北京陆桥公司。
灭菌滤纸片(5cm*10cm)本实验室制备。
所有试剂均在有效期内使用。
1.1.2 样本从我县大，中，小餐馆随机抽取的消毒后餐具 360份。
1.2 方法按gb14934-1994[1]中纸片法和发酵法同时进行检测。
1.2.1 纸片法每份餐具样品贴纸片两张，每张纸片面积25cm2(5cm×5cm)，用无菌生理盐水润湿大肠菌群检测用纸片后，立即贴于待检餐具内侧表面，30s后无菌操作取下，置于无菌塑料袋内;将采好样的纸片置37℃条件下培养18h，若纸片保持紫蓝色不变为大肠菌群阴性，纸片变黄并在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。
1.2.2 发酵法将制备好的灭菌滤纸片(5cm*10cm)2张用无菌生理盐水润湿后紧帖于待检餐具，1分钟后取滤纸片置入50ml无菌生理盐水试管中，充分振荡后制成原液。
食品微生物大肠菌群检测方法
食品微生物大肠菌群检测方法食品安全一直是人们关注的焦点之一，而微生物污染是导致食品安全问题的重要原因之一。
其中，大肠菌群是一类重要的微生物指标，其检测方法对于评估食品的卫生质量具有重要意义。
本文将介绍食品微生物大肠菌群检测的方法，以期为食品安全提供有力的保障。
首先，食品微生物大肠菌群检测的方法主要包括样品的准备和处理、细菌培养、细菌计数和鉴定等步骤。
在样品的准备和处理过程中，需要注意避免交叉污染，保持操作台面和仪器的清洁，并严格按照操作规程进行。
接下来是细菌培养的步骤，通常采用的是在含有营养物质的琼脂培养基上进行培养，利用恒温培养箱进行培养。
培养时间一般为24小时，待菌落形成后进行细菌计数和鉴定。
在细菌计数过程中，可以利用涂布法或滤膜法进行计数，最后通过形态学特征、生理生化特性和分子生物学方法进行鉴定。
其次，食品微生物大肠菌群检测方法的选择应根据具体的检测目的和食品样品的特点来确定。
一般来说，常用的检测方法包括传统培养法、膜过滤法、PCR法等。
传统培养法操作简单，成本低，但需要较长的培养周期；膜过滤法适用于水样等液态样品，可以获得更精确的细菌计数；PCR法则可以快速、准确地进行细菌鉴定，对于特定的微生物种类有很高的特异性。
因此，在实际应用中，可以根据具体情况选择合适的方法进行检测。
此外，食品微生物大肠菌群检测方法的质量控制也是非常重要的。
在检测过程中，应当严格遵守操作规程，避免交叉污染和误操作。
同时，还应建立健全的质量管理体系，对实验室环境、仪器设备、培养基和试剂等进行严格的质量控制。
此外，还应定期开展内部质量控制和外部质量评价，确保检测结果的准确性和可靠性。
综上所述，食品微生物大肠菌群检测方法是保障食品安全的重要手段之一。
在日常生活和生产中，应当重视食品微生物大肠菌群检测工作，采取科学有效的方法，确保食品的卫生质量，保障消费者的健康。
希望本文所介绍的方法能够为相关领域的工作者提供一定的参考和帮助，共同为食品安全贡献力量。
食品微生物快速检验和无菌操作技术
食品微生物快速检验和无菌操作技术食品微生物快速检验和无菌操作技术是食品安全的重要保障，它们可以帮助食品生产企业及时发现和控制食品中的微生物污染，确保食品的质量和安全。
本文将介绍食品微生物快速检验和无菌操作技术的原理、方法以及在食品生产中的应用。
一、食品微生物快速检验技术食品微生物快速检验技术是指利用先进的仪器设备和方法，快速、准确地检测食品中的微生物，包括细菌、霉菌、酵母菌等。
常见的食品微生物快速检验技术包括PCR法、毒素检测法、酶活性检测法等。
1. PCR法PCR法是一种分子生物学技术，可以在较短的时间内快速检测食品中的微生物，如大肠杆菌、沙门氏菌等。
其原理是利用DNA扩增技术，将微生物DNA扩增成可检测的数量，然后通过荧光探针或染料检测扩增产物，确定食品中是否存在特定微生物。
2. 毒素检测法毒素检测法是指通过检测食品中的毒素水平来判断其是否受到微生物污染。
常用的方法包括酶联免疫吸附测定法（ELISA）、质谱分析法等。
通过这些方法可以快速测定食品中的毒素水平，判断食品是否安全。
3. 酶活性检测法酶活性检测法是通过检测食品中的微生物产生的酶活性来判断其是否受到微生物污染。
霉菌会产生一些特定的酶，可以通过检测这些酶的活性来判断食品是否受到霉菌污染。
二、无菌操作技术无菌操作技术是指在食品生产过程中采取一系列措施，确保生产环境和设备的无菌，避免微生物污染。
无菌操作技术包括清洁消毒、空气过滤、人员培训等方面。
1. 清洁消毒清洁消毒是无菌操作的基本步骤，包括对生产设备、生产环境、工作台面等进行定期清洁和消毒。
选择合适的清洁消毒剂，并按照规定的浓度和时间进行清洁消毒操作，可以有效杀灭细菌、霉菌、酵母菌等微生物。
2. 空气过滤空气过滤是指通过高效过滤器对生产场所的空气进行过滤，去除空气中的微生物和颗粒物。
特别是在一些对空气质量要求较高的生产环节，如酿酒、发酵等领域，空气过滤技术尤为重要。
3. 人员培训人员是食品生产过程中最容易造成微生物污染的因素之一，因此对生产人员进行严格的无菌操作培训是必不可少的。
餐具大肠菌群快速检验纸片安全操作规定
餐具大肠菌群快速检验纸片安全操作规定
一、背景
大肠菌群检验是餐具卫生检验的常规项目之一，因其快速、简便、可靠而被广泛应用于各类餐饮场所。
为确保检验结果的准确性及员工操作时的安全性，特制订此规定。
二、适用范围
本规定适用于各类餐饮场所的餐具大肠菌群快速检验操作。
三、检验流程
1.取下滤网，清洗干净并擦干；
2.取下滤网复位卡，清洗干净并擦干；
3.拆下采样棒尖端罩，取出一支采样棒；
4.将采样棒放入样品中，旋转10秒钟左右，使采样棒表面充
分接触样品；
5.取下采样棒，将其放入管中，挤压采样棒上的液体，使其
流入管中；
6.取下检测纸片，插入管中并旋紧盖子；
7.摇匀，放置15-20分钟。
检测时间过久或时间不足将会影
响检测结果；
8.观察检测纸片上是否有两条蓝线，如有则表示样品中存在
大肠菌群。
快速检验纸片在食品微生物检测中的应用
快速检验纸片在食品微生物检测中的应用摘要：伴随着社会经济的持续发展，食品安全问题在社会中备受高度重视，随着近些年对于各类微生物所呈现出的食品污染备受各界关注，如何开展食品微生物检测工作显得格外重要。
对此，本文基于快速检验纸片在食品微生物检测中的应用进行研究分析，希望可以为相关工作者提供帮助。
关键词：食品微生物；快速检验纸片；检测应用对于食品而言，在生产、加工、储存、运输以及销售等不同环节中，均有可能会导致细菌等微生物的污染问题，在生产期间需要基于适当的方式提供食品安全检验检测工作，这也是肾小管部门的重要职责。
从市场现状来看，传统的食品安全检测技术方式有着比较多的实验方法，但是整体操作复杂并且时间比较长，所以需要大量的人员参与，虽然有许多的检测技术方式能够促使相关检测的精度更高，但是大多数食品微生物检测工作对于检测速度的要求更高，这也间接提高了快速检验纸片技术的重要性。
对此，探讨快速检验纸片在食品微生物检测中的应用具备显著实践性价值。
1.快速检验纸片在食品微生物检测中的应用方法和结果1.1菌落总数测试片法首先是基于菌落总数的测试片法。
针对基于滤纸为载体的菌落总数测试技术方式而言，这一种检测技术方式可以被称为DIY的检测技术方式，具体而言实验期间实验人员可以通过滤纸裁剪称为适当的尺寸，针对裁剪之后的滤纸浸入到氯化三苯四氮唑的无菌培养基当中，通过这样的方式可以基本完成在菌落总数测试中快速检验纸片的制作[1]。
在菌落总数的侧二十操作过程中，可以将1ml待测液均匀涂抹在干燥的快速检验纸片当中，基于压平纸片之后放置在37℃的培养箱当中进行16小时的培养，这样的方式能够快速检验植片当中出现的计数红点，同时计数红点便是待测液的细菌总量。
为了更好的验证DIY快速检验纸片满足检测的基本要求，可以将同样的待测液基于国标的技术方式进行检测，这一种检查检验的结果与国标检测和DIY的快速检验纸片检验结果无明显的差异。
与此同时，在DIY快速检验纸片干燥之后，可以将其分装在聚丙烯塑料口袋当中，从而在更长时间维持菌落总数的测定性能。
餐具大肠菌群快速检验纸片安全操作及保养规程
餐具大肠菌群快速检验纸片安全操作及保养规程在餐饮行业中，餐具的卫生安全问题备受关注。
为了确保消费者的身体健康，餐具大肠菌群的快速检测成为了餐饮企业不可或缺的一项任务。
本文将介绍餐具大肠菌群快速检验纸片的安全操作及保养规程，保障餐具卫生安全问题。
餐具大肠菌群快速检验纸片的原理餐具大肠菌群快速检验纸片是通过检测餐具表面所沉积的大肠菌群来判定餐具是否安全可用。
纸片表面上存在着特殊的培养基，通常采用液体培养基。
当纸片接触到含有大肠菌的样品时，菌落会在纸片上生长，这时就需要通过颜色检测观察餐具是否存在大肠菌群。
餐具大肠菌群快速检验纸片的使用方法1.取出检验纸片，观察包装是否有瑕疵、破损等问题，确保检验纸片完好无损。
2.将检验纸片放于餐具表面，轻轻按压几秒钟后取下。
如果需要检测双面，可以分别检测每个面。
3.将检验纸片放入培养皿中，并且倒入液体培养基至培养皿内，将培养皿密封（一定要密封），并且按照说明书中所示的指导我们进行培养。
4.培养期一般为24-48小时，视情况而定。
5.观察纸片的颜色变化。
琼脂液变颜色就会说明是否没有被污染（通常而言，紫色或透明是代表底色，像是变黄或绿色，就说明餐具存在问题）。
餐具大肠菌群快速检验纸片的保养规程为了确保检验结果的准确性及纸片的卫生安全，需要注意以下几点：1.存放：检验纸片应存放在阴凉干燥的地方，远离阳光直射及高温高湿环境，以免影响纸片质量。
2.使用：使用前应检查纸片的包装是否完好，如发现破损，变色等情况，应及时更换。
3.清洁：纸片使用完毕后，在取下前应该先用酒精进行消毒清洁，防止污染其他表面。
4.丢弃：使用后的纸片应当直接丢弃，避免二次污染和误用的发生。
同时，在丢弃纸片时应当注意安全，避免造成餐饮环境的污染。
结论餐具大肠菌群的快速检测纸片已成为餐饮行业中必不可少的一项技术。
通过快速、便捷的检测方式，可以有效地保障消费者的身体健康。
餐具大肠菌群快速检验纸片的安全操作及保养规程是餐饮企业保障餐具卫生安全的重要一步。
大肠菌群快速纸片检测试剂盒 使用说明
【结果判断】
1、 纸片上出现紫红色菌落，其周围有黄圈者为阳性。
2、 纸片为一种颜色，无菌落生长者为阴性。
3、 纸片呈紫色，有紫红色菌落，其周围无黄圈者为阴性。
4、 酸性食品接种后，纸片变黄，经培养后无紫红色菌落为阴性。
4、 确认试验的方法：进行确认试验，用灭菌摄子无菌操作将可疑纸片移种到乳糖发酵管里，置37℃24小时培养后，对其产酸产气者判为大肠菌群阳性，否则判为阴性。
大肠菌群量的多少与结果的显示密切相关，可出现3种不同现象：⑴菌量较晕)；⑵菌量适中(102～103 cfu/ml)，整个纸片也变黄，但有小而密集的红色斑点；⑶菌量较少(≤102cfu/ml)，纸片可呈紫蓝色，并有散在或较密集的红色斑点，其周围变黄。因此菌量较大时，可能出现可疑现象。此时应通过加大样品稀释度或进一步做复发酵进行证实。其它可疑现象也可通过发酵实验进行确认。
【标本处理】
1、样品处理：液体样品按国标方法进行；固体样品，取25g样品，研碎加入25ml灭菌盐水混匀。
2、接种：液体样品吸取三个1mL分别涂布于三疑于三张纸片，再吸取1︰10、1︰100稀释液各三个1ml，分别涂布于三张纸片。固体样品，吸取1︰1混悬液三个1mL(1g)分别涂布于三张纸片，再吸取1︰10、1︰100稀释液各三个1ml，分别涂布于三张纸片，而后用手轻轻压平，置36±1℃温箱，培养15小时观察结果。
【检验原理】应用灭菌的滤纸吸收选择性培养基，细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定并生长繁殖，大肠菌群在发育时伴随产生琥珀酸脱氢酶将纸片上的TTC(红四碳唑)还原成不可逆的Formazane产生红色色素，即大肠菌在纸片培养上呈红菌落，菌落周围产生黄圈是大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。
微生物快速检验方法
微生物快速检验方法嘿，咱来聊聊微生物快速检验方法。
我有次去一个食品加工厂参观，那可真是让我大开眼界。
他们对微生物检验可重视啦，因为要是微生物超标，那生产出来的食品可就有大问题。
有一种快速检验方法是利用快速检测纸片。
这就像是给微生物设了个小陷阱。
这些纸片经过特殊处理，里面有能和微生物发生反应的物质。
检测人员把要检测的样品，比如食品的一小部分，放在纸片上，然后等一会儿。
如果有微生物，它们就会在纸片上“现形”。
我看到检测员拿着镊子夹起纸片，那动作可小心了，就像夹着宝贝一样。
要是纸片变色或者出现了一些特殊的斑点，那就说明有微生物，而且根据颜色和斑点的情况，还能大概知道是哪种类型的微生物呢。
还有一种是酶联免疫吸附测定法，这名字听起来挺复杂，其实原理也不难懂。
就像是给微生物和它对应的抗体安排了一场特殊的“相亲”。
他们把样品和一些特定的抗体放在一起，如果样品里有那种微生物，它们就会和抗体紧紧结合，然后通过一些显色反应就能看出来。
我在旁边看着他们操作，那些小小的试剂瓶，就像一个个神秘的魔法瓶，检测员把各种液体加进去，然后等待结果，那过程就像在等待奇迹出现一样。
另外，还有一种聚合酶链式反应（PCR）检测方法。
这就像是给微生物的基因做一个超级放大镜。
把样品里微生物的基因提取出来，然后通过特殊的反应，让基因不断复制。
如果最后能检测到特定的基因片段，那就说明有这种微生物。
这个方法可灵敏啦，哪怕只有一点点微生物，都有可能被检测出来。
我看到他们在实验室里用那些精密的仪器进行 PCR 检测，仪器上的小灯一闪一闪的，感觉就像在探索微生物的神秘世界。
这些微生物快速检验方法可都是保障我们食品安全、医疗安全等的好帮手。
就像在食品加工厂里，如果没有这些快速检测方法，那些有问题的食品可能就流向市场了，那可就麻烦啦。
从那次参观后，我就对这些神奇的检测方法充满了好奇和敬意呢。
快速检验纸片在食品微生物检测中的应用
Ｓ １ｇ Ｌ ２ ，ｐ ． ～７Ｏ ０ ／ ｍＬ Ｈ６ ８ ． ，灭菌 条件 ｌ５ 、１ｍｉ ，浸泡条件 ｌ℃ ５ ｎ
６ ￣ １Ｏ ｎ 烘 干 温度 ５ ￣ 将待测 液加到 纸片上 后 ， ７ ０ Ｃ、 ．ｍｉ ， ５ Ｃ。 ３￣ Ｃ培养箱 培养 １ ～１ ｈ，即可 出结 果ｌ。 ６ ８ ３ 】 结 果 判断 ：纸 片上 出 现红 色斑 点 ，外周 黄 晕或 纸 片产 生黄 色
中图分类 号 ：Ｒ ５ ． １５５
文献标 识码 ：Ａ
文章编 号 ：１７ － １４ （０ ８ － ０ ８ ０ ６ １ ８ ９ ２ ０ ）１ ０ ４ － ２ ９
生 长 ，又能 灵敏 显示 细 菌数 目为 宜 。使用 时 把 ｉ ｍＬ待测 液加 于纸
随着人们 生活水 平的 不断提 高 ，食 品安全 问题 越来越 受到 人们
载体 ， 将特定 的培养 基和显 色物质 附着 在上面 ， 通过微 生物 在上面 的 生长 、显色来 测定食 品微 生物 的方 法ｌ ９５ ， 国学者 Ｆ ．ｏｇ ３ ９年 德 】 。１ ＪＦ ｒ 发 明了一种 简单快 速的大 肠菌群快 速检 测法 一纸片法 ，使 原来的检 测周 期 由 ７ ｈ缩短 到 １ｈ，材料 成本 降低 了 ３ ４ ２ ５ ／ ，同时 大大 简化 了 操作 程序 ｌ。从此 ，这种 集化 学 、高分 子学 和微 生物学 于一 体 的检 ４ ｌ 测方 法开始 发展起 来 。 年来 以滤纸 和美 国３ 公司 的Ｐ ｔ ｆｍ为 载 近 Ｍ ｅｒ ｉ ｉｌ
体 的测试 片 已开 始被 广 泛应用 】 。 １材 料
１ １ 样 品 ．
制作 的优 良工艺 ， 和九管 法检 测结果 的总符合 率为 ９ ．％， 其 ４ ５ 统计学
处理 Ｊ Ｄ＞０ ０ ． ５，说 明两 法 的检 测结 果无 显著 性差 异 。浸 液配 方为 （ＯｍＬ １Ｏ ］乳糖 ２ ５ 、蛋 白胨 １５ 、胆盐 ０ １ｇ ＴＣ ０ ／ ｍＬ ．ｇ ．ｇ ．５ 、Ｔ ４ ｇ Ｌ ２ 、 琼脂 ０ １ 、Ｎａ １０ ３ 、Ｋ， Ｏ ．ｇ Ｃ ．ｇ ＨＰ ０ ４ 、溴 甲酚 紫 ２ ｇ ．ｇ ａ ｒ 、乳 化剂
纸片法快速检测生活饮用水中总大肠菌群的探讨
纸片法快速检测生活饮用水中总大肠菌群的探讨许晶摘要：目的 探讨使用纸片法快速检测生活饮用水中大肠菌群的可行性。
方法 使用纸片法与多管发酵法同时检测本地区收集的水样106份，对两种方法对大肠菌群的检出率进行比较。
结果 在106份生活饮用水水样中，多管发酵法和纸片法均检出总大肠菌群阳性2份，组间差异无统计学意义（P >0.05）。
结论 纸片法可以达到快速、准确、简便地检测总大肠菌群的目的，可以用于快速、便捷的检测生活饮用水。
关键词： 纸片法；快速检测；生活饮用水；大肠菌群Study on rapid detection of total coliform bacteria in drinking waterby paper strip methodJing XUDisease Prevention and Control Center of Caidian District, Wuhan 430100, ChinaABSTRACT ：Objective To investigate the feasibility of rapid detection of coliform bacteria in drinkingwater using paper strip method. Methods Simultaneous detection of 106 samples of water collected in the re-gion by using paper strip and multiple-tube fermentation. The detection rate of coliform bacteria by two methods were compared. Results In 106 drinking water samples, 2 samples with total coliform bacteria positive detected by the multiple-tube fermentation and the paper strip method, and there was no statistically significant differ -ence between the two groups. Conclusion The paper strip method can quickly, accurately and conveniently de-tect the total coliform bacteria, and can be used to detect drinking water quickly and conveniently.KEY WORDS ：Paper strip method; Rapid detection; Drinking water; Fecal coliform作者单位：430100 武汉，武汉市蔡甸区疾病预防控制中心临床研究生活饮用水与居民的身体健康密切相关，大肠菌群是我国生活饮用水中最为常见的细菌[1]。
食品微生物检验之纸片法
物 的设计 ，具有 良好 的吸水性 ，可快速 吸收 测试液，使微生物 自动均匀分布于无纺布上 ， 为 测 试 液 和 营 养 底 物 创 造 了 一 个 固定 的 混 合 区域 。这 种纸片法排 除了滤纸测试 片不易计 数 、营养 物质分布不 均、显色指 示剂单一和 保 水 性 差 的 缺 点 ，待 测 样 品不 需 灭 菌 、 本 身 带有培 养基 ，样 品可直接加入 。其特点可 归 纳 为 ：可 应 用 于 现 行 Ｇ Ｂ／ Ｔ ４ ７ ８ ９ — ２ ０ ０ ８和 Ｓ Ｎ 标准 中；使用方 便，即用型 产品 ，省去配 制 步骤 ，减 少工作量 ；大量 缩短检测 时间，提 高 检 测 效 率 ； 降 低 对 操 作 人 员 的技 术 要 求 ； 准 确 ：灵 敏 度 高 、特 异 性 强 ；可 用 于 食 品 微 生物检测 和环境卫 生检测 ，可分 别检测菌落 总数 、大肠菌群计数 、霉菌和酵 母计数 、金 黄色葡 萄球菌计数 。如用大肠 菌群快检纸片 检测餐 具的表面 ，操作简便 、快 速、省料 ， 特 异性和敏感性 与发酵法符 合率高 ，使用 时 应 正确掌握操 作技术和判 断标准 ，从而达 到 理想 的检测效果【 ４ 】 。 从 实 用性 来 说 ，Ｅ Ｔ纸 片 省 却 了大 量 的 玻 璃 器 皿 的麻 烦 ，操 作 简 便 ， 携 带 方 便 ， 污 染 小 ；可在 野外迅速检 测所采集样 本，避免常 规 方法 因 运输 时 间长 而 造成 的 菌落 环 境变 化 ，更能反映采集 样本真 实菌 落情况 ；培养 后 所 长 的为 有 色 菌 落 ，便 于 计 数 。 纸 片法也有其 弊端 ，测试 片较小 ，菌量 数较 大时计数 困难 ；只研制 出 了少数几 种类 型 的测 试 片 ，只 能 局 限于 几 个 指 标 的检 测 上 。 目前 ，对 纸片法分改进 主要是扩 大被检 测 目标菌种 种类 ；研制 具有检测较大 菌量的 纸 片 ，并 且 提 高检 测 准 确 性 。神 保 胜彦 】 （ １ ９ ９ １ ）对 纸片法作 了进一步研 究和改进 ， 改 进 后 的 纸 片 法 不 仅 能 够 确 定 抗 生 素 的 种 类 ，而且提 高了检 出率和准确 性，氯霉素 最 低 检 出量 ０ ． ０ １ ｍｇ ／ ｋ ｇ ，土 霉 素 ０ ． ０ ５ ｍｇ ／ ｋ ｇ ， 链 霉素 ｌ ｍｇ ／ ｋ ｇ， 红 霉 素 Ｏ ． ０ ５ ｍｇ ／ ｋ ｇ， 青 霉 素
食品安全快速检测方法
食品安全快速检测摘要食品安全隐患和食品安全问题日益严重，有效的解决食品安全问题刻不容缓，因此食品安全检测变得尤为重要。
其中食品安全快速检测技术，为食品安全检测提供了重要的技术支撑，本文就食品安全快速检测技术的现状进行了简述,对免疫学技术、生物芯片、PCR 技术、生物传感器技术、快速检验纸片法,色谱分析法等快速检测技术进行了介绍，对食品中非法添加剂、农、兽药残留、有毒有害元素、微生物、等易引起食品安全物质的快速检测应用情况进行了介绍,同时分析了我国快速检测技术的发展的现状和方向.关键词食品快速检测技术发展方向随着食品安全问题的相继曝光，我国食品安全问题已成为老百姓日常关心的热点和焦点，甚至引起全球消费者的关注。
为此，国家相关部门加大了食品的监管、监测力度。
在食品卫生监督工作中，原先靠简单的感官检查不仅满足不了食品安全监管的需要，也缺乏执法的公信力，迫切需要新的科技手段来支撑，于是一些快速、方便、准确的快检技术得以在卫生监督工作中广泛应用。
随着需求的不断增加，新的快检设备亟待破解高灵敏度、高精密度、高稳定性、高智能化，以及便携带、成本低、前处理简单、检测时间短等诸多难题。
从食品快速检测技术发展方向上看，最终将向小型化、集成化、模块化、精确化、自动化、信息化方向发展.一、目前常用的食品安全检测技术生物技术的快速发展，种类繁多，其中绝大部分都能应用于食品安全检测。
目前比较常用的快速检测方法主要有免疫学技术、生物芯片、PCR技术、生物传感器技术、快速检验纸片法，色谱分析法等等。
1。
1免疫学技术免疫学技术是基于抗原与抗体的特异性结合反应建立的,抗原抗体结合具有高度的特异性，即一种抗原分子只能与由它刺激所产生的抗体发生特异性结合。
具有快速、灵敏、特异、操作简便、无须昂贵的仪器设备和可以在采样现场分析等优点.免疫学方法包括免疫沉淀法、发光免疫分析法、电化学免疫分析法、免疫絮凝法、放射免疫分析方法和酶联免疫分析方法等各种免疫学方法。
食品微生物快速检测常用方法-纸片法测大肠菌群.
谢 谢
食品微生物快速检测常用方法纸片法测大肠菌群
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设备和培养基
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操作步骤
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结果报告
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Hale Waihona Puke 过渡页一设备和培养基
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培养箱、天平、均质器或乳钵、试管、1.0mL和 10.0mL吸管、广口瓶或三角瓶、玻璃珠、试管架、溴 甲酚紫TTC培养基。
纸片(纸片制备：定性滤纸，切成10cm×12cm， 叠成5cm×6cm大小的双层纸片，经烘干或高压灭菌后 备用)、塑料袋(为耐高温的聚丙烯塑料薄膜袋，可按实 验要求压合成一定规格，115℃灭菌15min后备用)。
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操作步骤
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1.样品处理 2.接种 3.结果判定
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大 肠
红晕，其周围变黄整个纸片变黄均为阳性。若
菌
所检样品为未经消毒的食(饮)具，纸片结果是全
群
黄且无红色斑点或红晕，可直接列为阳性；如
）
若是已消毒的，应按发酵法做证实试验或加pH
7.4的无菌PBS溶液证实，以免误判。
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结果报告
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根据纸片的阳性片数，查大 肠菌群MPN检索表，报告。
样品处理
（纸
液体样品按国标乳糖发酵法进行；固体样
片
品取25g，研碎加入225mL灭菌生理盐水混匀。
法
测
大
肠
菌
群
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接种
（纸
液体样品吸取3个1mL分别涂布于3张纸片，再
纸片法快速检测生活饮用水大肠菌群分析
纸片法快速检测生活饮用水大肠菌群分析摘要】目的：探讨纸片法对于生活饮用水快速检测大肠菌群的有效性。
方法：对98份水样分别用纸片法与多管发酵法进行总大肠菌群检测。
结果：两种方法检测大肠菌群阳性率结果无显著性差异，两种检测方法大肠菌群MPN值符合率为96.93%。
结论：两种方法的测定结果基本一致。
但相对于多管发酵法，纸片法更加省时、省力，简便易行，适用于大批量样品快速检测。
【关键词】大肠菌群检测；纸片法；多管发酵法；结果【中图分类号】R123.1 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2017）17-0295-01水是生产生活中不可或缺的重要资源，水质的好坏直接影响着人们的生活质量和身体健康。
近年来，环境及水资源污染问题日益严重，水的安全问题也引起了人们的广泛重视[1]。
大肠菌群测定是检测生活饮用水情况的重要指标，具有广泛的卫生学意义。
目前，我国环保部门检测水中大肠菌群常用传统的多管发酵法，但该方法准备工作量大，操作复杂，周期长，无法满足大批量样品快速检测的需求。
1956年，Forg等提出的快速纸片在餐具消毒等的定性检测中得到了广泛应用，并被列入我国卫生部《生活饮用水检验规范(2001)》及国家环保总局《水和废水监测分析方法(第4版)》中的C类方法。
本次研究中，通过对比分析快速纸片法与多管发酵法在生活饮用水中的大肠菌群的试验结果，探讨两种方法在生活饮用水大肠菌群检测中的应用，现报道如下。
1.资料与方法1.1 一般资料选择来自本地区农村生活饮用水，其中农户自备井水43份，农村学校自备水20份，农村饮水安全工程35份，本组水样共计98份。
1.2 方法1.2.1材料大肠菌群快速检测纸片(南京三爱宝业生产，国家卫生部食品卫生监督检验所监制)；纸片规格：大纸片为10cm×10cm，小纸片为5cm×5cm。
乳糖蛋白胨、乳糖复发酵液、伊红美蓝培养基(EMB)和革兰氏染液均由杭州天和微生物试剂有限公司生产。
大肠菌群快检纸片
大肠菌群快检纸片法的结果判定
其结果可有如下5种情况： ①纸片保持青紫色，无论有无红色斑点或红晕均为阴性。 ②纸片上出现红点或红晕且其周围变黄，为典型阳性。 ③整个纸片全变黄色，却无红色斑点或红晕出现，为不典 型阳性，造成此结果的因素很多，见“影响因素” 。 ④纸片中某部分变黄色，或有或无红斑（红晕），为不典 型阳性。 ⑤纸片加样后立即或较短时间内出现黄色或褪色，此情况 应对样品进行中和处理。
组成和性状：每份2张5×5cm纸片，干燥纸片 为灰白色或淡绿色，加中性水湿润后为青紫色。 ±1 使用方法： 将纸片用适量无菌蒸馏水浸湿（无 多余水分），贴于食饮具内侧表面或其他待测 物体表面规定位置，压实，使纸片与物体面充 分接触，30秒后取下，放于无菌袋内，37℃培 养16-18h观察结果。
大肠菌群快检纸片的种类及其使用方法
大肠菌群快检纸片法的检测原理
众所周知，酶是一种蛋白质，其活性随 温度和pH等变化而改变，在高温和极端 酸性或碱性情况下，可完全丧失活性而 失去脱氢的能力。受氢体的作用也可能 受pH的影响，因此影响酶活性和导致pH 异常的任何因素均可影响检测结果。
大肠菌群快检纸片的种类及其使用方法
1 餐饮具和待测物体表面用纸片：
大肠菌群和粪大肠菌群的定义
总大肠菌群中的细菌除生活在肠道中外，在自 然环境中的水与土壤中也经常存在，但此等在 自然环境中生活的大肠菌群培养的最合适温度 为25℃左右，如在37℃培养则仍可生长，但如 将培养温度再升高至44．5℃，则不再生长， 而直接来自粪便的大肠菌群细菌，习惯于37℃ 左右生长，如将培养温度升高至44．5℃仍可 继续生长。
1.0 毫 升 水 样 0.1 毫 升 水 样
食品微生物快速检测常用方法-纸片法测大肠菌群(精)
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液体样品吸取3个1mL分别涂布于3张纸片，再 吸取l:10和l:100稀释液各3个1mL，分别涂布于3张 纸片； 固体样品，吸取l:1混悬液3个1mL(mg)，分别 涂布于3张纸片，再吸取l:10、1:100稀释液各3个 mL(mg)，分别涂布于3张纸片，而后用手轻轻压平， 置36℃±1℃恒温箱培养15h，观察结果。
食品营养与检测专业教学资源库目录页结果报告食品营养与检测专业教学资源库过渡页设备和培养基食品营养与检测专业教学资源库培养箱天平均质器或乳钵试管10ml和100ml吸管广口瓶或三角瓶玻璃珠试管架溴甲酚紫ttc培养基
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液体样品按国标乳糖发酵法进行；固体样 品取25g，研碎加入225mL灭菌生理盐水混匀。
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培养箱、天平、均质器或乳钵、试管、1.0mL和 10.0mL吸管、广口瓶或三角瓶、玻璃珠、试管架、溴 甲酚紫TTC培养基。 纸片(纸片制备：定性滤纸，切成10cm×12cm， 叠成5cm×6cm大小的双层纸片，经烘干或高压灭菌后 备用)、塑料袋(为耐高温的聚丙烯塑料薄膜袋，可按实 验要求压合成一定规格，115℃灭菌15min后备用)。
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根据纸片的阳性片数，查大 肠菌群MPN检索表，报告。
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培养箱、天平、均质器或乳钵、试管、1.0mL和 10.0mL吸管、广口瓶或三角瓶、玻璃珠、试管架、溴 甲酚紫TTC培养基。 纸片(纸片制备：定性滤纸，切成10cm×12cm， 叠成5cm×6cm大小的双层纸片，经烘干或高压灭菌后 备用)、塑料袋(为耐高温的聚丙烯塑料薄膜袋，可按实 验要求压合成一定规格，115℃灭菌15min后备用)。
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液体样品按国标乳糖发酵法进行；固体样 品取25g，研碎加入225mL灭菌生理盐水混匀。︶ຫໍສະໝຸດ 食品营养与检测专业教学资源库
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纸 片 法 测 大 肠 菌 群
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纸 片 法 测 大 肠 菌 群
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阴性结果：纸片保持紫蓝色不变，无论有否色 斑点或红晕均为阴性； 阳性结果及可疑现象：纸片上呈现红色斑点或 红晕，其周围变黄整个纸片变黄均为阳性。若 所检样品为未经消毒的食(饮)具，纸片结果是全 黄且无红色斑点或红晕，可直接列为阳性；如 若是已消毒的，应按发酵法做证实试验或加pH 7.4的无菌PBS溶液证实，以免误判。