已颁行标《下呼吸道感染细菌培养操作指南》 _解读胡继红20170303
如何提高下呼吸道标本质量及操作规范
分析前： 明确下呼吸道标本适合诊断的病原和检验项目 规范下呼吸道标本的采集、运送，标本初筛、合格判断
分析中： 痰/气管吸出物定性和气管镜采集标本定量细菌 培养程序，病原菌筛查和判断 质量控制
分析后： 染色、培养结果报告格式及临床意义
人类口咽部位定植着大量需氧 菌、兼性厌氧菌和厌氧菌，总 数可达1010CFU/mL~1012CFU/mL
可发现培养不能 生长的细菌
注：除引起社区非典型肺炎的病原不能常规培养外，其他常见肺部感染的病原菌均可用常规培养方法 分离，但培养方法的敏感性低，且无法判断分离菌的来源。
纤维支气管镜标本定量培养的临床意义
半定量
♣ 经纤维支气管镜获取的支气管肺泡灌洗液和保护毛刷 标本适合做细菌定量培养
♣ 当可能致病菌的菌落数大于阈值时，其诊断下呼吸道 感染的特异性可达82%~91%，诊断价值远高于痰标本
于10个即达到阈值103 CFU/mL 稀释平板计数：菌落数等于相同形态菌落数乘以稀释倍数103 CFU/mL
定量培养标本的处理
标本
自然咳痰 诱导痰
气管内吸取物 支气管肺泡灌洗液
保护性毛刷 支气管灌洗液
有意义的浓度（CFU/ml）
107 不确定
106 104 103 不做培养
气管镜标本处理
♣ 接种其他培养基并培养 BAL标本或PSB标本接种麦康凯或中国蓝培养基做分区划线。 肺组织标本研磨后接种血平板和巧克力平板延长培养至4d
106
感染可能大，建议重复培养（重复培 养2~3+感染菌）
>10
<5
<5
107
多为感染病原菌
注：任何数量均应报告 注：患儿标本任何数量均
最新下呼吸道感染细菌学检验操作规范
下呼吸道感染细菌学检验操作规范—、相关临床知识临床通常将正常人喉以上部位称之为上呼吸道，上呼吸道定植有大量的正常菌群，而气管以下包括气管、支气管和肺泡称下呼吸道，通常无菌。
下呼吸道感染包括急性气管-支气管炎、慢性支气管炎急性发作、支气管扩张继发感染及肺实质感染（肺炎、肺脓肿）等。
病原体有细菌、病毒、衣原体、支原体、真菌、立克次体和原虫等。
下呼吸道感染患者可有发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性，可伴有胸痛、气急，肺部闻及湿罗音、白细胞总数及嗜中性粒细胞比例明显增高，x线检查提示肺部有炎症性浸润或胸腔积液等体症，严重时可导致感染性休克和呼吸衰竭，因此临床诊断一般不难；细菌学检验能明确感染病原，并提供有关抗菌药物对分离菌的抗菌活性等信息，有助于疾病治疗、流行病学调查研究和医院感染的监测。
临床呼吸道标本中常见分离细菌见表1表1呼吸道标本中的常见分离细菌二、标本米集本室必须注意生物安全防护。
（一）采集方法1 •自然咳痰法以晨痰为佳，采集标本前应用清水、冷开水漱口或牙刷清洁口腔和牙齿，有假牙者应取下假牙。
尽可能在用抗菌药物之前采集标本。
用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中，标本量应》lml。
标本应尽快送检，不能及时送检的标本，室温保存w 2h o2•支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集，但必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。
3 •小儿取痰法用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。
幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。
（二）标本验收遇有不合格标本，应及时与临床联系，报告不合格标本拒收的具体理由。
下呼吸道标本验收与拒收见表2o三、实验室检查（一）肉眼观察 观察痰液的颜色、粘度、有无血丝和是否呈脓性，如见有颗粒存在，则应注意可能 与放线菌属及奴卡菌属感染有关。
下呼吸道感染细菌培养操作规范
Standard for Bacterial Culture Procedures 标本European Manual Microbiology.1罗斯菌属（Rothia spp.) `脑膜炎奈瑟菌草绿色链球菌草绿色链球菌、奈瑟菌属嗜血杆菌属、莫拉菌属常见引起细菌性社区感染典型肺炎病原菌：•肺炎链球菌•流感嗜血杆菌上呼吸道正常菌群•金黄色葡萄球•卡他莫拉菌细胞内病原引起非典型肺炎：•肺炎支原体•肺炎/鹦鹉热衣原体•嗜肺军团菌•柯克斯体（Q 热）痰的来源？是否被上呼吸道污染？hospitalization.Clin.Infec.Dis.31:869-874.9Gleckman,R.,J.DeVita,D.Hibert,C.Pelletier,and R.Martin.1988.Sputum gram stain assessment in community-acquired bacteremic pneumonia.J.Clin.Microbiol.26:846-849.内容特异性82%～91%，诊断价值远高于痰标本；附录B:“适合诊断的病原及检验项目”5.下呼吸道感染细菌培养的局限性培养结果假阴性、假阳性的原因球菌、流感嗜血杆菌（具侵袭性）定植数量会增加；`基础条件变化：使用免疫抑制剂、慢性肺病、广谱抗菌药物治疗或住院患者等人群中，革兰阴性杆菌的优势明显增加。
1）肺部感染的最常见机制：肺泡内吸入了口咽部定植菌；¾吸入性肺炎患者咽部菌群种类：多侵袭性细菌或耐药细菌，如肺炎链球菌或革兰阴性杆菌。
¾清除机制：健康宿主吸入口腔定植菌后常无临床症状，细菌通常被粘液柱状纤维清除。
¾吸入能否引起肺部感染取决于：吸入菌的致病性及数量；患者免疫系统；呼吸道功能等诸方面的因素。
2）吸入气溶胶肺部感染占第二位：主因：使用了不清洁的呼吸机。
3）血液播散性肺炎占第三位：感染通常造成双肺下叶肺炎。
下呼吸道感染细菌培养操作规范_3
2014/5/933.2 标本运送注1：若送检标本超过2h ，将导致有临床意义的致病菌数量减少，非苛养的口咽部定植 菌过度生长。
为防止口咽部正常菌群的过度生长，可将标本放置2℃～8℃环境，但 培养分离到肺炎链球菌等苛养菌的机会和数量会减少。
注2：若标本延迟送检超过2h 后未冷藏（超过2h ～24h ，2℃～8℃），应在报告中说明因 延误送检标本，可能对培养结果造成的影响。
3.3 筛选并拒收下呼吸道细菌培养标本❝拒收24h 内重复采集的痰细菌培养标本 ❝唾液❝鼻冲洗液和分泌物、鼻孔拭子 ❝咽部标本❝未经保护套管收集的支气管刷培养标本 ❝痰的厌氧菌培养标本注：除支气管穿刺吸出物、PSB 、活检标本、胸水或其他未经污染以外的标本做厌氧菌培养均不合格。
❝诱导痰注：诱导痰标本只适用于检测卡氏肺孢子菌和结核分枝杆菌，对其他病原菌检出效果差。
4.1 痰及气管吸出物标本处理 4.1.1标本处理要求❝接种标本及涂片操作必须在Ⅱ级生物安全柜中进行；❝应尽快处理所有标本，特别是来自急诊、新入院患者和有创方法采集的标本（如：BAL 和肺活检标本），以保证致病菌的活性，避免造成重复采集标本；❝使用全自动接种前处理系统的实验室按厂家说明书处理标本，洗痰、液化后自动接种和涂片革兰染色。
4.1.2 接种标本 4.1.3 培养4.1.4 标本涂片及革兰染色注1：革兰染色脱色时间因选用不同的脱色剂而异。
1）95%乙醇脱色时间为30s ；2）丙酮- 乙醇（体积比为3:7,棕色瓶室温保存，有效期1年）脱色时间1s ～5s ，脱色效果一致性 好；3）丙酮（试剂纯）脱色时间最短，当标本中含大量宿主细胞时脱色效果好。
注2：使用革兰染色仪染色的实验室按照厂家操作说明书进行，注意条件优化，使涂片染色结果达到满意效果。
4.1.5显微镜观察革兰染色结果注：低倍镜下细胞计数、油镜下细菌计数半定量指标；❝4.2 气管镜标本处理4.2.1 支气管肺泡灌洗液定量培养 4.2.2 保护毛刷定量培养4.2.3 接种其他培养基并培养 4.2.4 革兰染色标本处理4.2.5 剩余BAL 标本可用于其他病原检测（标本珍贵）对剩余BAL 标本离心后，可根据需要进行病毒、分枝杆菌、军团菌和真菌培养；或做病毒、卡氏肺孢子菌、抗酸染色和真菌涂片染色（见参考文献4的第六篇相关章节）（修改解释）。
胡继红-微生物检验的标准化是准确报告的重要保证
出现的 正常菌群
NO
临床意义 阈值
NO
2类 其他标本
3类 含大量定植菌 标本
尿、呼吸道 皮肤、表皮、粘膜、 粪便、咽部
Yes
Yes
Yes
NO
European Manual Microbiology.1st edition. EMCM, 2012.
Organism 菌株 E.coli 大肠埃希菌 Entero/Prot 肠杆菌属/变形 杆菌属 Pseudo 假单胞菌属 Enterococci 肠球菌 Staph saprophyt 腐生葡萄 球菌 Yeast 酵母菌
药敏 试验
是
+
+
≤2
+
+
≤103
不 适用 不
+
-
≥105
≤2
a)免疫正常患者：重复尿细菌学及细 胞学检查（可能尿道感染初期） b)免疫抑制患者（化疗、移植）
是 不 不 不 适用
不 确定
பைடு நூலகம்不 确定 不 确定
103 - 104 ≥105 ≤103
≥1 ≥2
标本采集不好可能污染 定植 无尿路感染或定植
-
类型
苛养菌
肺炎链球菌、草绿色链球菌、牛链球菌 化脓链球菌、无乳链球菌 嗜血杆菌属、卡他莫拉菌、奈瑟菌属 JK棒状杆菌、产单核李斯特菌
G+c G-b
金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌 粪肠球菌、屎肠球菌 肠杆菌科、假单胞菌属、嗜麦芽窄食单胞菌 洋葱伯克霍德菌、不动杆菌、黄杆菌属
厌氧菌 其他
拟杆菌属、梭杆菌属、普雷沃菌属、卟啉单胞 菌属、消化链球菌属 分枝杆菌属，念珠菌属，丝状真菌
下呼吸道感染细菌培养操作规范_1
由于国内微生物检验专业缺乏系统的、按流程编写的操作规范；
2009年卫生部临床检验中心举办了全国临床微生物检验标准化培训班， 邀请美国斯坦福大学国际权威的临床微生物学家Prof. Ellen做了临床微 生物检验操作流程的标准化培训，得到参会学员的一致好评。
由此，2010-2011年中华医学会临床检验分会临床微生物学组任健康组 长和马筱玲副组长提议，由卫生部临床检验中心微生物室胡继红执笔， 合作草拟了《下呼吸道感染细菌培养操作规范》。
卫生部临床检验中心 陕西省人民医院 安徽省立医院
胡继红 任健康 马筱玲
卫生部北京Leabharlann 院胡云建 北京大学人民医院
王辉
中国医学科学院北京协和医院 徐英春
首都医科大学附属北京友谊医院 苏建荣
解放军总医院
罗燕萍
浙江省温州医科大学附属第二医院李向阳
1 美国微生物学会:《下呼吸道感染》临床微生物学检验技术技术及操作系列丛书.2004
2014/5/9
Standard for Bacterial Culture Procedures of Lower Respiratory Tract Infections
主要起草人：卫生部临床检验中心 胡继红
大多数微生物室每日近一半标本量：痰培养+药敏； 培养结果前后两天经常不一致； 培养生长的不同种类、数量细菌如何报告标准不统一； 定植菌、致病菌如何判断—标本是否合格如何判断？ 培养结果与临床诊断不符合；
2012年完成讨论稿，开过两次专家审稿会，也广泛征求了全国微生物专 家的意见，并在全国室间质评大会上征求了微生物室操作人员的意见， 大家普遍认为下呼吸道感染细菌培养操作急需规范性文件，此将对实验 室有重要指导作用。
下呼吸道细菌学检验操作规范(讨论稿)
出芽酵母样孢子和假菌丝
通常提示鹅口疮或上呼吸道酵母菌感 染，不是肺炎，仅当其为主要所见菌 时报告
请高级医师进行确认，可能需要补充 实验如改良的抗酸染色
其他异常结构，如真菌，分枝的革 兰阳性丝状杆菌或奇特形状的细菌 （可能抗生素治疗的结果）
培养结果检查
观察24h后平板
继续培养平板24－48h，为检出霉菌、慢生长菌、 苛养的革兰阴性杆菌如博德特菌属
8
支气管 肺泡灌 洗液 BAL
保护毛 刷标本 PSB
库什曼 螺旋纤 维
术语及 定义
夏科雷 登结晶
弹性纤 维 纤毛柱 状上皮 细胞
9
肺泡巨 噬细胞
保护毛 刷(PSB) 支气管 肺泡灌 洗液标 本(BAL)
咳痰
分析前
标本采集
气管镜 标本
气管吸 出物
诱导痰 （通常 不用于 细菌培 养）
血培养
11
分析前下呼吸道标本检验
不要报告小菌落的beta-溶血链球菌或F群链球菌，
因为这些菌是上呼吸道正常菌群
链球菌 Alpha-溶血链球菌 Optochin敏感实验 胆汁溶菌实验 （联合上述两个实验进行鉴定） 药敏实验，贴OP纸片确认纯度以检查药敏结果是否
有污染
苛养革兰阴性杆菌 流感嗜血杆菌，卫星现象，ALA实验确认鉴定并 作beta-内酰胺酶试验。 百日咳博德特菌 触酶和尿素酶阳性，培养48h出 现肉眼可见菌落 巴斯德菌 吲哚和氧化酶阳性，动物口腔正常菌群
THANK YOU
报告“肠道革兰阴性杆菌”
报告“非发酵革兰阴性杆菌”
报告“分离到上呼吸道细菌”， 注如果只存在肠球菌和凝固酶阴 性葡萄球菌（有或没有酵母菌）， 报告“混合有革兰阳性微生物细 菌，或如果90%是培养物，则做 少量鉴定列出”
最新下呼吸道感染细菌学检验操作规范
下呼吸道感染细菌学检验操作规范一、相关临床知识临床通常将正常人喉以上部位称之为上呼吸道，上呼吸道定植有大量的正常菌群，而气管以下包括气管、支气管和肺泡称下呼吸道，通常无菌。
下呼吸道感染包括急性气管-支气管炎、慢性支气管炎急性发作、支气管扩张继发感染及肺实质感染(肺炎、肺脓肿)等。
病原体有细菌、病毒、衣原体、支原体、真菌、立克次体和原虫等。
下呼吸道感染患者可有发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性，可伴有胸痛、气急，肺部闻及湿罗音、白细胞总数及嗜中性粒细胞比例明显增高，x线检查提示肺部有炎症性浸润或胸腔积液等体症，严重时可导致感染性休克和呼吸衰竭，因此临床诊断一般不难；细菌学检验能明确感染病原，并提供有关抗菌药物对分离菌的抗菌活性等信息，有助于疾病治疗、流行病学调查研究和医院感染的监测。
临床呼吸道标本中常见分离细菌见表1二、标本采集本室必须注意生物安全防护。
(一)采集方法1．自然咳痰法以晨痰为佳，采集标本前应用清水、冷开水漱口或牙刷清洁口腔和牙齿，有假牙者应取下假牙。
尽可能在用抗菌药物之前采集标本。
用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中，标本量应≥lml。
标本应尽快送检，不能及时送检的标本，室温保存≤2h。
2．支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集，但必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。
3．小儿取痰法用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。
幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。
(二)标本验收遇有不合格标本，应及时与临床联系，报告不合格标本拒收的具体理由。
下呼吸道标本验收与拒收见表2。
三、实验室检查(一)肉眼观察观察痰液的颜色、粘度、有无血丝和是否呈脓性，如见有颗粒存在，则应注意可能与放线菌属及奴卡菌属感染有关。
已颁行标《下呼吸道感染细菌培养操作指南》_解读胡继红20170303
医院获得性肺炎
最常见病原菌
少见病原菌
肺炎链球菌，流感嗜血杆菌， 金黄色葡萄球菌，卡他莫
肺炎克雷伯菌
拉菌，脑膜炎奈瑟菌
肺炎支原体，呼吸道病毒， 流感病毒，肺炎衣原体， 军团菌属
厌氧菌，金黄色葡萄球菌， 需氧G-b
沙眼衣原体，结核分枝杆 菌，真菌等
G-b (肠杆菌属/克雷伯菌属/不 军团菌，肺炎链球菌 动杆菌属/假单胞菌属)， 金黄色葡萄球菌，厌氧菌， 社区获得性肺炎的典型菌
胡继红 任健康 马筱玲 胡云建 王辉 徐英春 苏建荣 罗燕萍 李向阳
2013年立项
20092010 酝酿
2012 初稿
2013 立项
20142015 完稿、 征求意 见、并 通过标
委会投 票
2015 年底完 成花脸 稿最后 修改
3
2017/3/3 Friday
1 美国微生物学会:《临床微生物学操作手册》（第3版）.2007. （Clinical Microbiology Procedures Handbook）
6 Nagendra, S., P.Bourbeau, S.Brecher, M.Dunne, Rocco, and G.Doern.2001.Sampling variability in the microbiological evaluation of expectorated sputa and endotracheal aspirates. J. Clin. Microbiol.39:2344-2347.
血液播散性肺炎 金黄色葡萄球菌，链球菌
需氧革兰阴性杆菌
注1：肺炎链球菌和流感嗜血杆菌是引起儿童和老年人肺炎的最常见致病菌；卡他莫拉菌、脑 膜炎球菌多发于: 基础病患者或病毒感染后的继发感染；金黄色葡萄球菌肺炎可引发肺脓肿；
下呼吸道感染宏基因组二代测序报告临床解读路径专家共识
下呼吸道感染宏基因组二代测序报告临床解读路径专家共识摘要近年来，宏基因组二代测序（mNGS）技术在下呼吸道感染（LRTI）病原诊断领域得到了广泛应用，国内临床医师在mNGS的临床应用方面已积累了一定的经验和证据。
但mNGS在LRTI病原诊断中的适用场景仍缺乏规范，mNGS报告的临床意义解读也缺乏专业的指导意见。
本共识基于mNGS在我国LRTI病原诊断方面的应用实践，梳理mNGS在LRTI应用领域的瓶颈问题，汇总本领域专家意见，明确了mNGS在LRTI病原诊断中的适用场景，为mNGS报告临床意义提供了一条合理可行的解读路径，以期规范mNGS在LRTI中科学合理应用。
宏基因组二代测序是近年来兴起的基于核酸检测的微生物鉴定技术，由于其非预设性、高通量等优点而得到广泛应用。
下呼吸道感染主要包括社区获得性肺炎、医院获得性肺炎、免疫抑制宿主肺炎、慢性阻塞性肺疾病急性加重、支气管扩张症合并感染等类型，临床表现多样，感染微生物种类复杂，感染和定植鉴别困难，加之mNGS技术本身存在的局限性，mNGS诊断效力的发挥有赖于选择恰当患者、采用适宜标本以及进行合理的解读。
尽管国内就mNGS的技术要点和临床应用已有数部专家共识，但尚缺乏针对LRTI临床实践中具体问题的指导意见。
为此，中华医学会呼吸病学分会发起并组织呼吸与危重症、临床微生物检验、感染等多学科的专家撰写本共识，以期规范mNGS在LRTI中的临床应用，为更好地规范解读mNGS报告提供指引。
LRTI诊断要点、主要病原谱及特定致病微生物的危险因素本共识不再赘述，可参考相关指南或共识。
本共识采用问答的形式，首先提出需要阐明的问题，经共识写作组讨论后确定入选问题，在梳理临床证据的基础上给出每个问题的推荐意见及理由，并附上典型应用案例及其解析，方便读者掌握共识要点。
本共识适用于青少年和成人LRTI。
一、LRTI病原学诊断方法学问题1：mNGS 和传统微生物检测方法相比的优势与不足是什么？传统微生物检测方法技术成熟，可靠性较高，临床应用实践多；mNGS技术理论上能非预设性、一次性检测未知病原，检测范围更广，但存在技术复杂、报告解读困难等不足。
下呼吸道感染测序技术临床应用共识解读PPT课件
技术局限性挑战
样本质量影响
01
样本质量、数量和采集方法对测序结果的影响，如不同来源的
样本中微生物组成差异、采集过程中的污染等。
数据库完善程度
02
现有微生物数据库的不完善，可能导致部分微生物序列无法准
确注释和分类。
技术敏感性与特异性
03
测序技术对于低丰度微生物的检测能力以及对于近似种、亚种
等微生物的区分能力有待提高。
第二代测序技术
高通量、低成本，以Illumina和Life Technologies为代表，广泛应用于
基因组、转录组等领域。
第三代测序技术
单分子实时测序，无需PCR扩增，具 有超长读长和实时数据分析等特点。
下呼吸道感染测序技术应用
01
病原菌鉴定
通过测序技术对下呼吸道样本中 的病原菌进行鉴定，提高诊断准
注明不确定因素
对于测序结果中可能存在的不确定因素，如样本质量、测 序深度等，应在报告中注明，并提醒临床医生注意。
06 临床应用场景及优势分析
诊断准确性提升
病原菌鉴定
通过测序技术，准确鉴定感染病原菌类型，包 括细菌、病毒、真菌等。
药物敏感性检测
预测病原菌对抗生素等药物的敏感性，为合理 用药提供依据。
推动技术发展
通过推广和应用本共识，有助于推动测序技术在临 床感染性疾病诊断领域的应用和发展。
提高医疗质量
本共识的实施将有助于提高下呼吸道感染的 诊断准确性和治疗效果，从而提高医疗质量 和患者满意度。
02 下呼吸道感染测序技术概 述
测序技术简介
第一代测序技术
Sanger测序法，准确性高但通量低 ，适用于小片段DNA测序。
采集时间
应在患者发病早期或接受治疗前采集样本，以提高阳 性检出率。
下呼吸道感染细菌培养及药敏分析
下呼吸道感染细菌培养及药敏分析（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【摘要】目的分析下呼吸道感染病原菌的分布及耐药情况，以及对常用抗菌药的敏感情况。
方法选取我院呼吸内科患者580份痰液标本，对感染细菌进行鉴定、分类，同时进行药敏实验。
结果580例痰培养革兰阴性杆菌为主占56.03%，呈阳性结果的占43.97%。
其中位居革兰阴性杆菌前三位的是大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌，铜绿假单胞菌。
革兰阴性菌对第三代头孢类药物敏感率高。
讨论下呼吸道感染以革兰阴性菌为主，对常用抗生素有较高的耐药率，临床用药时要选用敏感抗菌药物治疗，避免滥用抗生素。
【关键词】下呼吸道细菌培养革兰阴性菌药敏分析下呼吸道感染是最常见的感染性疾患，随着抗生素的广泛使用，各种病原菌对抗生素均产生了不同程度的耐药性，治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素，是降低下呼吸道感染发病率和病死率的关键[1]。
本文选取我院580例下呼吸道感染患者的痰培养并对其药物敏感性情况进行了分析。
1资料与方法1.1一般资料选取在我院诊治的2009年10月至2010年10月的下呼吸道感染患者580例，男性287例（49.48%），女性293例（50.52%），年龄在35～71岁,平均年龄为48.8岁。
支气管炎（308例）、哮喘伴感染（192例）、支气管肺炎（80例）。
1.2操作方法采用法国ATB半自动细菌生化鉴定仪，在患者未使用任何抗生素前，晨起用无菌生理盐水漱口3次后，咳痰于无菌器皿内立即送检。
采用KB纸片扩散法对临床标本分离的铜绿假单胞菌，进行抗生素敏感性测定，阿米卡星等17种抗生素纸片均购自北京天坛药品生物技术开发公司，部分药敏纸片来自英国OXOID。
2结果2.1感染细菌的种类和分布580例痰培养呈革兰阴性杆菌结果者共325例占56.03%，呈阳性结果者共255例，阳性率为43.97%。
其中位居革兰阴性杆菌前三位的是大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌，铜绿假单胞菌。
下呼吸道感染细菌学检验操作规范
培养基选择问题
总结词
培养基是细菌生长的媒介，不同的培养基适合不同的细菌，因此选择适合的培养 基是关键。
详细描述
针对下呼吸道感染的常见病原菌，如肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌等 ，应选择含有适量的血液、血清、抗生素和碳源的培养基。同时，培养基的pH 值和渗透压也要适宜，以确保细菌的正常生长。
药敏试验误差
增菌
在适当的培养基中对样本 进行增菌，以促进细菌的 生长。
分离纯化
将增菌后的样本进行分离 纯化，得到单一菌落。
细菌培养
选择培养基
根据不同的细菌选择适宜的培养基，以保证细菌 的生长和分离。
培养条件
设定适宜的温度和湿度等培养条件，保证细菌的 正常生长。
观察记录
对培养的细菌进行观察和记录，包括菌落形态、 染色特性等。
PART 02
下呼吸道感染细菌学检验 操作流程
样本采集
01
02
03
采集时间
在抗生素使用前采集下呼 吸道感染的样本，以避免 抗生素对细菌的影响。
采集方法
根据感染部位选择合适的 采集方法，如痰液、支气 管肺泡灌洗液等。
注意事项
采集过程中要严格遵守无 菌操作原则，避免交叉感 染。
样本处理
预处理
去除样本中的杂质，如痰 液中的唾液、食物残渣等 。
药敏试验的方法包括纸片法、稀 释法和自动化仪器法等，应根据
具体情况选择合适的方法。
药敏试验结果应准确、可靠，为 临床医生提供准确的抗生素选择
依据。
结果报告要求
结果报告应及时、准确，以便临床医 生及时了解患者病情和治疗情况。
结果报告应包括细菌种类、药敏试验 结果等信息，以便临床医生选择合适 的抗生素进行治疗。
【推荐下载】关于下呼吸道感染细菌培养及药敏分析
关于下呼吸道感染细菌培养及药敏分析 2012-12-12 【编者按】：医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。
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关于下呼吸道感染细菌培养及药敏分析 【摘要】目的分析下呼吸道感染病原菌的分布及耐药情况，以及对常用抗菌药的敏感情况。
方法选取我院呼吸内科患者580份痰液标本，对感染细菌进行鉴定、分类，同时进行药敏实验。
结果580例痰培养革兰阴性杆菌为主占56.03%，呈阳性结果的占43.97%。
其中位居革兰阴性杆菌前三位的是大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌，铜绿假单胞菌。
革兰阴性菌对第三代头孢类药物敏感率高。
讨论下呼吸道感染以革兰阴性菌为主，对常用抗生素有较高的耐药率，临床用药时要选用敏感抗菌药物治疗，避免滥用抗生素。
【关键词】下呼吸道细菌培养革兰阴性菌药敏分析 下呼吸道感染是最常见的感染性疾患，随着抗生素的广泛使用，各种病原菌对抗生素均产生了不同程度的耐药性，治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素，是降低下呼吸道感染发病率和病死率的关键[1]。
本文选取我院580例下呼吸道感染患者的痰培养并对其药物敏感性情况进行了分析。
1 资料与方法 1.1一般资料 选取在我院诊治的2009年10月至2010年10月的下呼吸道感染患者580例，男性287例(49.48%)，女性293例(50.52%)，年龄在35～71岁,平均年龄为48.8岁。
支气管炎(308例)、哮喘伴感染(192例)、支气管肺炎(80例)。
1.2操作方法 采用法国ATB半自动细菌生化鉴定仪，在患者未使用任何抗生素前，晨起用无菌生理盐水漱口3次后，咳痰于无菌器皿内立即送检。
采用KB纸片扩散法对临床标本分离的铜绿假单胞菌，进行抗生素敏感性测定，阿米卡星等17种抗生素纸片均购自北京天坛药品生物技术开发公司，部分药敏纸片来自英国OXOID。
下呼吸道感染的病原菌谱及耐药性研究
下呼吸道感染的病原菌谱及耐药性研究作者：常海荣来源：《现代养生·下半月版》 2014年第3期常海荣克东县润津乡卫生院黑龙江省克东县164800【摘要】目的：针对呼吸内科下呼吸道感染患者病原菌谱及耐药性进行研究，配合临床治疗选择合适的抗菌药物。
方法：收集2005-2010 年呼吸内科下呼吸道感染患者分离痰标本中的病原菌及耐药性。
结果：革兰阴性杆菌约为47.5%-55.8%，其中铜绿假单胞菌及大肠埃希菌分别占14.6% 及8.7%，对亚胺培南、哌拉西林/ 他唑巴坦及阿米卡星耐药率为2.3%-36.7%；革兰阳性球菌约为22.8%-35.6%，金黄色葡萄球菌及凝固酶阴性葡萄球菌分别占16.8% 和7.4%，只是对万古霉素耐药率为0；真菌占14.9%-23.8%。
结论：呼吸内科下呼吸道感染主要是革兰阴性杆菌，革兰阳性球菌呈现增高趋势，真菌具有一定比例，耐药率增高，对于耐药性监测的加强，抗菌药物的合理使用都具有重要意义。
【关键词】病原菌谱；下呼吸道感染；呼吸内科1 前言随着近些年先进医疗技术的发展，广谱抗菌激素、药物及免疫抑制剂的应用日益广泛，病原菌耐药性逐渐严重，为在临床中对用药的合理性进行指导，收集2007-2010 年之间的下呼吸道感染患者送检痰标本中培养分离826 株病原菌，并鉴定病原菌、分析耐药性，现将具体情况总结如下。
2 材料与方法2.1 标本来源采用无菌方法收集2007-2010 年之间的下呼吸道感染患者送检痰标本中培养分离826株病原菌，进行细菌培养及药敏试验。
2.2 鉴定菌株与药敏试验血平板及麦康凯平板接种于标本，选取优势菌实施分纯及生化鉴定工作。
分离株采用K-B法进行药敏试验，根据NCCL 推荐的标准分析结果。
2.3 质量控制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌都是质控菌。
2.4 数据处理采用软件对数据进行统计。
3 结果3.1 病原菌分布病原菌种类分布构成为，杆菌约占50.4%，球菌约占28.7%，真菌约占20.9%。
下呼吸道感染细菌培养操作规范
下呼吸道感染细菌培养操作规范ICS点击此处添加中国标准文献分类号WS中华人民共和国卫生行业标准XX/TXXXXX—XXXX下呼吸道感染细菌培养操作规范StandardforBacterialCultureProceduresofLowerRespiratoryTractInfections点击此处添加与国际标准一致性程度的标识（报批稿）（本稿完成日期：）XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施中华人民共和国国家卫生计生委员会发布XX/TXXXXX—XXXX1目次前言 (4)引言 (5)1范围 (7)2术语及定义 (7)2.1支气管肺泡灌洗液 (7)2.2保护毛刷标本 (7)2.3库什曼螺旋纤维 (7)2.4夏科雷登结晶 (7)2.5弹性纤维 (7)2.6纤毛柱状上皮细胞 (8)2.7肺泡巨噬细胞 (8)3分析前 (8)3.1标本采集 (8)3.1.1咳痰 (8)3.1.4诱导痰（通常不用于细菌培养） (8)3.1.5气管镜标本 (8)3.2标本运送 (9)3.3筛选并拒收下呼吸道细菌培养标本 (9)4分析中 (9)4.1痰及气管吸出物标本处理 (9)4.1.1标本处理要求 (9)4.1.2接种标本 (9)4.1.3培养 (9)4.1.4标本涂片及革兰染色 (10)4.1.5显微镜观察革兰染色结果 (10)4.2气管镜标本处理 (10)4.2.1支气管肺泡灌洗液定量培养 (10)4.2.2保护毛刷定量培养 (11)4.2.3接种其他培养基及培养 (11)4.2.4革兰染色标本处理 (11)4.2.5剩余BAL标本检测其他病原 (11)4.3连续培养并观察慢生长菌 (11)4.4分离并鉴定下呼吸道重要致病菌（参见附录C） (11)XX/TXXXXX—XXXX24.4.1链球菌属 (11)4.4.2苛养革兰阴性杆菌（在麦康凯平板上难生长） (12)4.4.3革兰阴性双球菌 (12)4.4.4革兰阴性杆菌（在麦康凯平板上生长良好） (12)4.4.5葡萄球菌属 (13)4.4.6肠球菌属 (13)4.4.7革兰阳性杆菌 (13)4.4.8鉴定丝状真菌 (13)4.4.9涂片时可见但培养不生长的细菌 (13)4.5质量控制 (13)4.5.1革兰染色 (13)4.5.4试剂 (14)5分析后报告结果 (14)5.1革兰染色报告 (14)5.1.1痰标本报告原则（见表1） (14)5.1.2BAL细胞离心涂片报告 (15)5.2报告有临床意义的微生物 (16)5.2.1报告的病原菌 (16)5.2.2培养和涂片相符合时报告的病原菌 (16)5.2.3有临床意义的数量 (16)5.2.4报告有临床意义数量的非优势菌 (16)5.2.5报告有临床意义数量的优势菌 (16)5.3对非致病菌的报告 (17)5.3.1报告“肠杆菌科革兰阴性菌” (17)5.3.2报告“非发酵革兰阴性杆菌” (17)5.3.3只生长肠球菌和凝固酶阴性葡萄球菌 (17)5.3.4报告“分离到口咽部正常菌群” (17)5.4平板上无细菌生长 (17)5.5结果解释 (17)附录A（规范性附录）下呼吸道感染主要类型及常见病原体 (18)附录B（规范性附录）支气管镜采集的标本适合诊断的病原体和检验项目 (19)附录C（规范性附录）常见可疑菌落形态及经典快速鉴定方法 (20)参考文献 (22)XX/TXXXXX—XXXX3前言本标准按照GB/T1.1给出的规则起草。
呼吸内科下呼吸道感染革兰阴性菌分布及耐药性的分析
呼吸内科下呼吸道感染革兰阴性菌分布及耐药性的分析金晶;李红斌;侯小玲【摘要】目的了解呼吸内科下呼吸道感染病原菌的分布情况以及耐药特点,为临床用药提供参考.方法对本院近3年呼吸内科送检的下呼吸道标本进行常规细菌培养,对培养出的病原菌进行鉴定和药敏试验,采用WHONET 5.4软件进行统计分析.结果共分离出1548株病原菌,检出率为29.54％,其中革兰阴性杆菌1239株,占80.04％,以肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌和阴沟肠杆菌为主,主要革兰阴性杆菌对碳青霉烯类、氨基糖苷类和哌拉西林/他唑巴坦耐药率较低.结论本院呼吸内科下呼吸道感染病原菌以革兰阴性杆菌为主,主要病原菌的耐药性较高,临床治疗应根据药敏结果合理选用抗菌药物以减少耐药菌株的产生.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2016(014)022【总页数】2页(P99-100)【关键词】呼吸内科;下呼吸道;病原菌;耐药率【作者】金晶;李红斌;侯小玲【作者单位】石门县人民医院检验科,湖南常德415300;石门县人民医院检验科,湖南常德415300;石门县人民医院检验科,湖南常德415300【正文语种】中文【中图分类】R446.5呼吸内科下呼吸道感染是医院感染最常见感染性疾病，该病发生率较高，多见于机体免疫功能低下、重症患者以及接受侵入性诊疗者，治疗难度较大。
其病原菌分布特点和细菌耐药性在不同的国家和地区存在一定的差异。
了解本院呼吸内科下呼吸道感染病原菌的耐药现状对指导临床合理用药起着重要的作用。
现对本院呼吸内科2012年1月至2014年12月本院住院患者下呼吸道感染病原菌的分布和耐药情况进行报道。
1.1 菌株来源：2012年1月至2014年12月本院住院患者临床送检标本（重复株不计算在内）。
1.2 方法：平皿购自郑州安图生物工程有限公司，按《全国临床检验操作规程》进行常规培养分离。
细菌的鉴定与药敏试验均采用梅里埃公司的VITEK3D-120微生物分析仪及其配套的鉴定和药敏卡进行分析，补充实验采用K-B法。
下呼吸道感染病原学的诊断进展
下呼吸道感染病原学的诊断进展
樊慧珍;方怡;黄文杰
【期刊名称】《广东医学》
【年(卷),期】2003(024)001
【摘要】@@ 下呼吸道感染是威胁人类健康的主要疾病之一,在20世纪90年代,感染性疾病致死者占全球死亡人数的三分之一,其中呼吸道感染居各类感染之首[1].其死亡率居高不下的主要原因是没有获得及时正确的诊断和治疗.虽然通过一些临床指征如发热、脓痰、血白细胞升高、胸部影像学改变有助于下呼吸道感染的判定,但并不能明确病原体.明确下呼吸道感染的病原体对于指导抗生素使用,减少病原体产生耐药性和药物的副作用,缩短病程,降低费用具有重要意义.近年来,人们在不断探索新的、简便易行的病原学诊断方法,同时对一些传统的诊断方法也有了新的认识,本文对此作一概述.
【总页数】2页(P98-99)
【作者】樊慧珍;方怡;黄文杰
【作者单位】广州军区广州总医院呼吸科,广州,510010;广州军区广州总医院呼吸科,广州,510010;广州军区广州总医院呼吸科,广州,510010
【正文语种】中文
【中图分类】R56
【相关文献】
1.乙型肝炎的病原学诊断进展 [J], 刘晓松
2.血流感染的病原学及诊断进展 [J], 金涛;田卓民
3.小儿肠道病毒心肌炎的病原学诊断进展 [J], 王雪梅
4.真菌感染性皮肤肉芽肿病变病原学诊断进展 [J], 张瑞峰;冉玉平
5.流行性脑脊髓膜炎病原学诊断进展 [J], 朱昆蓉
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免疫抑制宿主条件 社区获得性肺炎典型菌，奴 致病菌感染性肺炎 卡菌属，念珠菌属，条件致
病真菌，曲霉菌
环 境 暴 露 3 引 起 的 结核分枝杆菌、军团菌属、 鼻疽假单胞菌，假鼻疽 双相真菌、曲霉属、肺炎支 假单胞菌，鼠疫耶尔森 肺炎
原体、肺炎衣原体
菌，贝纳柯克斯体、图 拉热弗朗西斯菌
急性气管炎
病毒，百日咳博德特菌，肺 炎支原体和肺炎衣原体
判断难 报告难 不符合
卫生部临床检验中心 陕西省人民医院 安徽省立医院 卫生部北京医院 北京大学人民医院 中国医学科学院北京协和医院 首都医科大学附属北京友谊医院 解放军总医院 浙江省温州医科大学附属第二医院
胡继红 任健康 马筱玲 胡云建 王辉 徐英春 苏建荣 罗燕萍 李向阳
举例：长期接触携带定植菌人群菌群会变化，如日托儿童的父母的肺炎链球
细胞内病原引起非典型肺炎： •肺炎支原体 •肺炎/鹦鹉热衣原体 •嗜肺军团菌 •柯克斯体（Q热）
常见引起细菌性社区感染典型肺炎病原菌： • 肺炎链球菌 • 流感嗜血杆菌 上呼吸道正常菌群 • 金黄色葡萄球 • 卡他莫拉菌
基础条件变化：使用免疫抑制剂、慢性肺病、广谱抗菌药物治疗或住院患 者等人群中，革兰阴性杆菌的优势明显增加。
血液播散性肺炎
注1：肺炎链球菌和流感嗜血杆菌是引起儿童和老年人肺炎的最常见致病菌；卡他莫拉菌、脑
膜炎球菌多发于: 基础病患者或病毒感染后的继发感染；金黄色葡萄球菌肺炎可引发肺脓肿； 肺炎克雷伯菌大叶性肺炎，常合并脓肿或肺粘连，死亡率较高。
注2：通常可用分子生物学方法快速诊断，也可在感染后期用血清学方法检测肺炎支原体、肺炎衣 原体和军团菌属抗体确诊。由生物恐怖病原菌，如和鼠疫耶尔森菌引起的感染，血清学检测 可作为辅助诊断方法。结核分枝杆菌可用罗氏培养基或快速结核杆菌液体培养仪培养，或分 子诊断方法检测。 注3：暴露在特殊气溶胶环境：与飞沫有关的结核分枝杆菌、与尘暴和鸟排泄物有关的双相真菌 等。
除引起社区非典型肺炎的病原不能常规培养外，其他常见肺部感 染的病原菌均可常规培养方法分离；
但培养方法敏感性低，无法判断分离菌的来源。
弹性纤维 肺组织有破坏性病变如肺脓肿、肺 癌等时，痰中可出现弹性纤维，证明痰液标本来
自下呼吸道。
涂片革兰染色方法：
宿主细胞、蛋白质和肺部炎症反应的分泌物等来自下呼吸道痰 的组分，可反映感染的状况； 痰经咳嗽从肺深部进入气道，未受损的粘膜纤毛运动将痰送人 口腔，痰标本会被上呼吸道和口腔定植菌污染； 评价痰标本是否合格； 涂片还可发现培养不能生长的细菌。 涂片方法提高了培养方法的特异性及敏感性。
自然咳痰
气管内吸取物
107 106
不确定
诱导痰
定量 培养 支气管肺泡灌洗液 保护性毛刷 支气管灌洗液
104 103
不做培养
阈值
标本最多
• 多数微生物室：40-60%标本量/日 • 标本是否合格？ • 定植菌？致病菌？ • 生长不同种类细菌如何报告？ • 生长不同数量细菌取舍？ • 前后两天培养结果 • 培养结果与临床诊断
7 Roson,B.,J.Carratala,R.verdaguer,J.Dorca,F.Manresa,and F.Gudiol.2000.Prospective study of sputum Gram stain in the initial approach to community-acquired pneumonia requiring hospitalization.Clin.Infec.Dis.31:869-874. 8 Gleckman,R.,J.DeVita,D.Hibert,C.Pelletier,and R.Martin.1988.Sputum gram stain assessment in community-acquired bacteremic pneumonia.J.Clin.Microbiol.26:846-849.
特别是ICU及住院的社区获得性肺炎（CAP）
慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD) 肺脓肿（咳痰非最适标本）等适应症 可疑细菌性病原引起的肺部感染患者（见 附录A）
3.痰涂片对下呼吸道感染病原菌诊断的重要作用
痰培养：敏感性低 / 培养+ 涂片：提高特异性和敏感性
4.支气管纤维镜标本定量培养的临床意义
2013年立项
20092010 酝酿 2012 初稿
2015 20142015 2013 立项 完稿、 征求意 见、并 通过标 委会投 票 年底完 成花脸 稿最后 修改
3
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1 美国微生物学会:《临床微生物学操作手册》（第 3版）.2007. （ Clinical Microbiology Procedures Handbook ） 2 美国微生物学会:《下呼吸道感染》临床微生物学检验技术及操作系列丛书 .2004 3 美国微生物学会:《临床微生物学手册》(第10版).2011 4 美国微生物学会:《临床微生物学手册》(第9版).2006 5 欧洲临床微生物学手册（Eropean Manual Microbiology）.1st edition. EMCM, 2012. 6 Nagendra, S., P.Bourbeau, S.Brecher, M.Dunne, Rocco, and G.Doern.2001.Sampling
1）肺部感染的最常见机制：
肺泡内吸入了口咽部定植菌；
常见因素：
病毒感染 抗菌药物
住院患者（48h后）：
——继发细菌感染 ——ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ死、抑制正常菌群，使G-b、耐药 菌过度繁殖，如大肠埃希菌、铜绿假单胞 菌、不动杆菌、阴沟肠杆菌等； 定植菌：肠道菌，MRSA，多重耐药菌 ——机械通气（ICU） 嗜麦芽窄食单胞菌 鲍曼不动杆菌
人类口咽部定植：需氧菌、兼性厌氧菌和厌氧菌等微生物； 菌群总数：1010 ～1012CFU/mL; 健康人咽部定植菌特点： 菌量～最少； 需氧的正常菌群组成：革兰阳性菌为主； 影响因素：人体基础条件变化影响定植菌群的种类和数量；（微生态） 菌、流感嗜血杆菌（具侵袭性）定植数量会增加；
1. 2. 3.
Yes
Yes
NO
Yes
Roson,B.,etc.2000.Prospective study of the usefulnessof the sputum Gram stain in the initial approach to community-acquired pneumonia requiring hospitalization. Clin.Infect.Dis.31:869-874
结果报告---临床意义？： 新生儿吸痰经常有草绿色链球菌或凝固酶阴性葡萄球菌的纯培养，如何理解其 临床意义？
痰培养有肠球菌的纯培养怎么处理？ 痰标本血平板纯培养如果是凝固酶阴性葡萄球菌有意义吗？需要做药敏吗？
痰的来源？ 是否被上呼吸道污染？
草绿色链球菌、奈瑟菌属 嗜血杆菌属、莫拉菌属
标本初筛、合格判断
病原菌筛查和鉴定、质量控制
染色、培养结果报告（致病菌、非致病菌）、结果解释
内容
1.口咽部定植菌群变化对肺部感染的重要影响
肺部感染的影响因素 (定植菌变化：健康人G+ 免疫、基础病/住院、用抗菌药物 G-b )
针对肺部感染患者：
附录A 汇总表
2.肺部感染的常见机制
主要机制：吸入定植菌；吸入气溶胶；血播性； 附录A: “下呼吸道感染的主要类型及主要病原菌”
European Manual Microbiology.1st edition. EMCM, 2012.
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下呼吸道标本有意义的细菌浓度值（CFU/ml） 标本 定性 培养
有意义的浓度 CFU/ml
支气管纤维镜标本定量培养的临床意义
报告菌落数大于阈值的细菌，诊断的特异性82%～91%，诊断价值远高于痰标本
特异性82%～91%，诊断价值远高于痰标本； 附录B :“适合诊断的病原及检验项目” 附录B 汇总表
5.下呼吸道感染细菌培养的局限性
培养结果假阴性、假阳性的原因
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4.1.1咳痰 咳痰前，患者用无菌生理盐水漱口； 指导患者咳出深部痰，勿留取唾液和鼻咽腔分泌物。
损害 侵入性仪器
引起医院获得性感染
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类型/免疫状态
最常见病原菌
少见病原菌
类型/免疫状态
最常见病原菌
少见病原菌
社区获得性 典型肺炎1 社区获得性 非典型肺炎2 吸入性肺炎 医院获得性肺炎
肺炎链球菌，流感嗜血杆菌， 金黄色葡萄球菌，卡他莫 肺炎克雷伯菌 拉菌，脑膜炎奈瑟菌 肺炎支原体，呼吸道病毒， 流感病毒，肺炎衣原体， 军团菌属 厌氧菌，金黄色葡萄球菌， 需氧G-b G-b ( 肠杆菌属 /克雷伯菌属 / 不 军团菌，肺炎链球菌 动杆菌属/假单胞菌属)， 金黄色葡萄球菌，厌氧菌， 社区获得性肺炎的典型菌 金黄色葡萄球菌，链球菌 需氧革兰阴性杆菌 沙眼衣原体，结核分枝杆 菌，真菌等
（1）明确：下呼吸道标本适合诊断的病原和检验项目； （2）规定：细菌培养项目需同时做革兰染色涂片—— （培养+药敏+涂片）； （3）规范：痰培养/气管吸出物的定性培养程序、气管镜 采集标本的定量培养程序； （4）明确：报告的临床意义和格式内容。
分析前 分析中 分析后
标本的采集、运送
定性、定量培养、涂片流程
敏感性
特异性
当有大量炎症细胞，且：
G+双球菌,诊断肺炎链球菌： G-小杆菌,诊断流感嗜血杆菌：