生化实验常用溶液配制

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(完整版)试验室常用溶液及试剂配制试验室常用溶液试剂的配制表一普通酸

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(完整版)试验室常⽤溶液及试剂配制试验室常⽤溶液试剂的配制表⼀普通酸实验室常⽤溶液及试剂配制实验室常⽤溶液、试剂的配制表⼀普通酸碱溶液的配制表⼆常⽤酸碱指⽰剂表三混合酸碱指⽰剂表四容量分析基准物质的⼲燥表五缓冲溶液的配制1、氯化钾-盐酸缓冲溶液2、邻苯⼆甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液3、邻苯⼆甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液4、⼄酸-⼄酸钠缓冲溶液5、磷酸⼆氢钾-氢氧化钠缓冲溶液6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液7、氨⽔-氯化铵缓冲溶液8、常⽤缓冲溶液的配制实验室常⽤试验⽅法2九、柠檬酸(C6H8O7·H2O)称取试样1.5g(精确到0.0002g)于三⾓瓶内,加⼊⽔50ml溶解,加酚酞指⽰剂3滴,⽤1mol/L 氢氧化钠标准溶液滴定⾄粉红⾊为终点,同时做空⽩试验。

计算:X%(⼀⽔)= (V1-V0)×C×0.06404 m×(1-0.08566)×100X%(⽆⽔)= (V1-V0)×C×0.06404 m×100V1-----消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml;V0-----空⽩所消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml;C------氢氧化钠标准溶液浓度,mol/L;m---样品质量。

⼗、钙含量测定(磷酸氢钙CaHPO4、磷酸⼆氢钙Ca(H2PO4)2·H2O、钙粉等)称取2g(精确到0.0002g)样品,⽤10ml盐酸(1+1)溶解,转移⾄100ml容量瓶中定溶,⽤移液管吸取10ml于250ml锥形瓶中,加50ml⽔,5ml蔗糖溶液(25g/L),2ml三⼄酸胺(1+1),1ml⼄⼆胺(1+1),1滴孔雀绿指⽰液(1g/L),滴加氢氧化钾溶液(200g/L)⾄⽆⾊,再过量10ml,加0.1g盐酸羟胺(每加⼀种试剂都要摇匀),加钙黄绿素少许,在⿊⾊背景下⽤0.05mol/L的EDTA标准溶液滴定⾄绿⾊荧光消失呈现紫红⾊为滴定终点。

理化实验配制方案

理化实验配制方案

理化实验配制方案在进行理化实验时,不同的实验要求使用不同的试剂和药品,并且需要按照一定的比例和配制方法进行混合。

在进行实验前,正确的配制方案对于实验结果的准确性和可重现性非常重要。

本文将针对常见的理化实验,介绍一些常用的试剂配制方案。

pH缓冲溶液Phosphate Buffered Saline (PBS) 缓冲液PBS缓冲液是一种理化实验中常用的缓冲液,可以用于细胞培养、免疫组化等实验。

其配制方法如下:•向1L去离子水中加入8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4。

调节pH值至7.4。

•用0.22μm的无菌滤膜过滤,分装到无菌的50mL离心管中。

•灭菌,储存在4℃。

Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液广泛用于生化实验和分子生物学实验中,其配制方法如下:•向800mL去离子水中加入Tris 11.1g, 调节pH值至所需值。

•加入到1L容量瓶中,用去离子水调至1L。

酶解液RIPA缓冲液RIPA缓冲液是广泛用于蛋白提取和酶解实验的缓冲液,其配制方法如下:•向1L去离子水中加入150mM NaCl、1% NP-40、0.5% sodium deoxycholate、0.1% SDS、50mM Tris-Cl pH 8.0、1mM EDTA。

•加入到1L容量瓶中,用去离子水调至1L。

Tris-HCl酶解液Tris-HCl酶解液是生化实验和分子生物学实验中常用的酶解液,其配制方法如下:•向1L去离子水中加入10mM Tris-HCl(pH8.2)、1mM EDTA、1% Triton X-100、0.1% SDS、50μg/ml Proteinase K。

•加入到1L容量瓶中,用去离子水调至1L。

其他试剂甲醛PBS固定液甲醛PBS固定液是常用的细胞固定液,可用于细胞培养、免疫组化等实验。

其配制方法如下:•向10ml PBS中加入1 ml 37%甲醛。

ph缓冲溶液的配制方法

ph缓冲溶液的配制方法

ph缓冲溶液的配制方法PH缓冲溶液是指在一定范围内,具有缓冲pH值的溶液,适用于化学、生物、医药等各个领域的实验和应用。

在实验中,通常需要制备一定浓度和pH值的缓冲溶液,以保证实验结果的准确性和可重复性。

本文将介绍几种常见的缓冲溶液配制方法。

一、磷酸缓冲液(PBS)磷酸缓冲液是一种常用的生物化学实验缓冲液,可以用于细胞培养、酶活性测定、免疫学实验等等。

其配制方法如下:1. 准备250ml坐标瓶,称取1.37g Na2HPO4·12H2O和0.26g KH2PO4。

3. 将两个溶液混合,加入NaCl使溶液最终重量达到250g,调节pH值至7.4-7.6,如果pH值过低,可加入1M NaOH调节,反之加入1M HCl。

二、三氯醋酸缓冲液(TCA)三氯醋酸缓冲液是一种酸性缓冲液,适用于蛋白质的沉淀和提取等实验。

其配制方法如下:1. 准备250ml坐标瓶,在其中加入11.9g三氯乙酸,加入去离子水至250ml。

2. 调节溶液pH值至2.0-2.5,可使用无水HCl或NaOH来调节pH值。

3. 再加入去离子水,使溶液最终体积达到500ml,并根据需要添加NaCl和KCl等。

五、TRIS缓冲液TRIS缓冲液是一种常用的生化和细胞学实验用缓冲液,其缓冲范围在7.0~9.2之间。

其配制方法如下:1. 准备500ml坐标瓶,称取12.11g Tris-Base。

3. 在室温下缓慢加入0.1M HCl溶液,同时使用pH计监测溶液pH值,当pH值达到所需值时停止加入。

4. 将溶液体积补至500ml,并调节pH值。

可根据实验需要调节缓冲液中的NaCl或其他化学物质的浓度。

以上就是几种常见缓冲溶液的配制方法,需要注意的是在配制过程中,一定要严格按照实验要求和操作规程进行,以获得准确的实验结果。

同时,制备的缓冲液要遵循使用前检测pH值、滤过消毒等规定操作,以保证实验的可重复性和安全性。

常见缓冲液配制大全

常见缓冲液配制大全

常见缓冲液配制大全缓冲液乙醇-醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7,用水稀释至1000ml,即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1,加水稀释至100ml,即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g,再加水溶解使成1000ml,调节pH值至9.0,即得。

乌洛托品缓冲液 取乌洛托品75g,加水溶解后,加浓氨溶液4.2ml,再用水稀释至250ml,即得。

巴比妥缓冲液(pH7.4) 取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml,用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4,滤过,即得。

巴比妥缓冲液(pH8.6) 取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml,即得。

巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8) 取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0.2mol/L 盐酸溶液调节pH值至7.8,再用水稀释至500ml,即得。

甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml,加酚酞指示液1滴,用2mol/L 氢氧化钠溶液中和,再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25~3.30,即得。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g,加水900ml,搅拌使溶解,用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml,混匀,即得。

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多,根据实验需求,可以根据不同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。

以下是一些常见的试剂和缓冲液配方,以及其用途和制备方法。

1. 磷酸缓冲液(Phosphate buffer)磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中,用于控制溶液的pH值,适用于酸性和碱性条件下。

常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。

2. 氯化钠溶液(Sodium chloride solution)氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一,通常用于调节生物样品的渗透压和离子浓度。

可以制备不同浓度的氯化钠溶液,常见的配方为0.9%氯化钠溶液(生理盐水)。

3. 碳酸氢盐缓冲液(Bicarbonate buffer)碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中,用于维持细胞培养基或实验液的pH稳定。

一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。

4. Tris缓冲液(Tris buffer)Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液,可以调节到不同的pH值。

常见的配方为50 mM Tris缓冲液(pH 7.4),需要用Tris(三氯甲烷磺酸,Tris-HCl)和盐酸来制备。

5. PBS缓冲液(Phosphate-buffered saline)PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液,具有稳定pH值和离子浓度的特点。

常见的配方为10mMPBS缓冲液(pH7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。

6. 甘氨酸缓冲液(Glycine buffer)甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中,用作电泳缓冲液和传递缓冲液。

常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液(pH8.3),需要用甘氨酸和盐酸来制备。

7. BSA溶液(Bovine serum albumin solution)BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质,用于测定蛋白质浓度和酶活性等实验。

常用缓冲溶液的配制方法

常用缓冲溶液的配制方法

常用缓冲溶液的配制方法简介缓冲溶液是一种能够稳定溶液中pH值的溶液,它通常由弱酸和其共轭碱(或弱碱和其共轭酸)组成。

在科学实验和生物学研究中,常常需要精确控制溶液的pH值,这就需要使用缓冲溶液。

本文将介绍几种常用的缓冲溶液及其配制方法,希望对实验科研工作者提供参考。

磷酸盐缓冲溶液磷酸盐缓冲溶液是一种常用的缓冲溶液,常被用于分子生物学和细胞生物学实验中。

它由磷酸盐酸(或碱)和其共轭碱(或酸)组成,可以在特定的pH范围内有效地稳定溶液的pH值。

配制方法磷酸盐缓冲溶液的配制方法如下:1.准备1M的磷酸盐酸(或碱)溶液,可以通过向蒸馏水中加入适量的磷酸(或磷酸盐)并搅拌溶解得到。

2.准备1M的磷酸盐共轭碱(或共轭酸)溶液,可以通过向蒸馏水中加入适量的磷酸(或磷酸盐)对应的碱(或酸)并搅拌溶解得到。

3.根据需要的缓冲溶液pH值,通过适当比例混合磷酸盐酸和磷酸盐共轭碱溶液,可以使用酸碱滴定法或pH计来完成溶液的调节。

需要注意的是,磷酸盐缓冲溶液在不同pH值下的配比不同,建议根据需要的pH值在事先制定好缓冲溶液的配比表。

Tris缓冲溶液Tris缓冲溶液是一种广泛应用于生化和分子生物学实验中的缓冲溶液。

它由Tris(Tris(hydroxymethyl)aminomethane)酸和其共轭碱(或酸)组成。

配制方法Tris缓冲溶液的配制方法如下:1.准备1M的Tris酸溶液,将适量的Tris酸加入蒸馏水中,并搅拌溶解得到。

2.准备1M的Tris共轭碱(或共轭酸)溶液,将适量的Tris共轭碱(或共轭酸)加入蒸馏水中,并搅拌溶解得到。

3.根据需要的缓冲溶液pH值,通过适当比例混合Tris酸和Tris共轭碱溶液,可以使用酸碱滴定法或pH计来完成溶液的调节。

需要注意的是,Tris缓冲溶液的pH值在不同温度下可能会有所偏差,因此在制备过程中可以参考相应的pH温度校正表。

PBS缓冲溶液PBS缓冲溶液是一种常用的生物学实验缓冲溶液,它是一种含磷酸盐的缓冲溶液。

常用pH缓冲溶液的配制和pH值

常用pH缓冲溶液的配制和pH值

(一)溶液配制注意事项1.药品要有较好的质量试剂分为优级纯(保证试剂,Guaranteed reagent,G.R.)、分析试剂(Antalytical reagent,A.R.)化学纯(Chemical pure,C.P.)和实验试剂(Laboratory reagent,L.R.)等等。

工业用的化学试剂,杂质较多,只在个别情况下应用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。

2.药品称量要精确。

3.配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水,比电阻值在50万欧姆以上,pH在5.5~7.0之间才可应用,在组织培养等特殊用途时应注意此项要求,配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。

4.配好后的溶液,应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质),以防杂菌生长。

(二)0.067(1/15)Mol/L磷酸缓冲液1.1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制:称取磷酸二氢钾(KH2PO4,A.R.)9.08g,用蒸馏水溶解后,倾入 1 000ml容量瓶内,再稀释至刻度(1 000ml)。

2.1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制:称取无水磷酸氢二钠(Na2HPO4,A.R.)9.47g(或者Na2HPO4·2H2O11.87g)用蒸馏水溶解后,放入 1 000ml容量瓶内,再加蒸馏水稀释至刻度(1 000ml)。

3.按附表的比例,配制成不同pH值的缓冲溶液。

附表1 磷酸盐缓冲液配制法(单位:毫升)pH 1/15Mol/L Na2HPO4 1/15Mol/L KH2PO4 pH 1/15Mol/L N a2HPO4 1/15Mol/L KH2PO45.8 8.0 92.0 7.1 66.6 23.45.9 9.9 90.1 7.2 72.0 28.06.0 12.2 87.8 7.3 76.8 23.26.1 15.3 84.77.3 80.8 19.26.2 18.6 81.47.5 84.1 15.96.3 22.4 77.6 7.6 87.0 13.06.4 26.7 73.37.7 89.4 10.66.5 31.8 68.27.8 91.58.56.6 37.5 62.5 7.9 93.2 6.86.7 43.5 56.5 8.8 94.7 5.36.8 49.6 50.4 8.1 95.8 4.26.9 55.4 44.6 8.2 97.0 3.07.0 61.1 38.9 8.4 98.0 2.0(三)0.15Mol/L PB液附表2 0.15Mol/LPB液配制法pH 0.15Mol/L Na2HPO4(ml)0.15Mol/L NaH2PO4(ml)6.4 26.5 73.56.6 37.5 62.57.0 61.0 39.07.2 72.0 28.07.4 81.0 19.07.6 87.0 13.0Na2HPO4·2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.7g/L。

生化实验常用溶液配制

生化实验常用溶液配制

⽣化实验常⽤溶液配制⽣化实验常⽤溶液的配制⼀.常⽤贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于⾜量的⽔中,使终体积为10ml。

分装成⼩份贮存于-20℃。

1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于⾜量的⽔中,使终体积为10ml。

分装成⼩份贮存于-20℃。

10mol/L⼄酸胺(ammonium acetate):将77.1g⼄酸胺溶解于⽔中,加⽔定容⾄1L后,⽤0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml⽜⾎清蛋⽩(BSA):加100mg的⽜⾎清蛋⽩(组分V或分⼦⽣物学试剂级,⽆DNA 酶)于9.5ml⽔中(为减少变性,须将蛋⽩加⼊⽔中,⽽不是将⽔加⼊蛋⽩),盖好盖后,轻轻摇动,直⾄⽜⾎清蛋⽩完全溶解为⽌。

不要涡旋混合。

加⽔定容到10ml,然后分装成⼩份贮存于-20℃。

1mol/L⼆硫苏糖醇(DTT):在⼆硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml⽔,分成⼩份贮存于-20℃。

或转移100mg的⼆硫苏糖醇⾄微量离⼼管,加0.65ml的⽔配制成1mol/L⼆硫苏糖醇溶液。

8mol/L⼄酸钾(potassium acetate):溶解78.5g⼄酸钾于⾜量的⽔中,加⽔定容到100ml。

1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于⾜量的⽔中,加⽔定容到100ml。

3mol/L⼄酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三⽔⼄酸钠于约90ml⽔中,⽤冰⼄酸调溶液的pH⾄5.2,再加⽔定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于⽔中,定容⾄1L。

1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的⽔中,⽤NaOH调pH(6.8-8.2),然后⽤⽔定容⾄100ml。

1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸⾄91.4ml的⽔中。

生化试剂配制实验报告(3篇)

生化试剂配制实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握常用生化试剂的配制方法。

2. 熟悉实验操作规范,提高实验技能。

3. 了解不同生化试剂的用途和注意事项。

二、实验原理生化试剂在生物化学实验中起着至关重要的作用,它们可以用于检测、分析、分离和鉴定生物分子。

本实验旨在通过配制不同类型的生化试剂,加深对实验原理和操作步骤的理解。

三、实验仪器与试剂1. 仪器:分析天平、移液器、容量瓶、烧杯、玻璃棒、滴定管、滴定台、试管等。

2. 试剂:氯化钠、氢氧化钠、硫酸铜、硼酸、葡萄糖、丙酮、苯酚等。

四、实验步骤1. 氯化钠溶液的配制a. 称取5.85g氯化钠,置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液,备用。

2. 氢氧化钠溶液的配制a. 称取4.0g氢氧化钠,置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液,备用。

3. 硫酸铜溶液的配制a. 称取0.5g硫酸铜,置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液,备用。

4. 硼酸溶液的配制a. 称取5.2g硼酸,置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液,备用。

5. 葡萄糖溶液的配制a. 称取5.0g葡萄糖,置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液,备用。

6. 丙酮溶液的配制a. 称取5.0g丙酮,置于烧杯中。

b. 加入少量蒸馏水,用玻璃棒搅拌使其溶解。

c. 将溶液转移至100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。

d. 摇匀溶液,备用。

7. 苯酚溶液的配制a. 称取5.0g苯酚,置于烧杯中。

生化常用试剂配制

生化常用试剂配制

生物化学实验常用试剂的配制方法使用Ctrl+F 组合键可以快速的查找所需的配方。

1、0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L ;配制量2L配置方法1.准确称取氢氧化钠40g。

2.用去离子水溶解并稀释至2L。

2、0.5mol/L盐酸溶液组份浓度0.5mol/L ;配制量2L配置方法1.准确量取盐酸83.4mL。

2.用去离子水稀释至2L。

3、含0.5mol/L氯化钠的0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L氯化钠、0.5mol/L氢氧化钠;配制量1L配置方法1.准确量取氯化钠29.3g。

2.准确量取氢氧化钠20g。

3.用去离子水稀释至1L。

注意:此溶液供回收纤维素时使用。

4、0.2%葡萄糖标准溶液组份浓度0.2%;配制量1L配置方法1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中,在70℃干燥2小时。

2.干燥器中冷却至室温,重复干燥,冷却至恒重。

3.准确称取葡萄糖2.000g。

4.用去离子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。

5、250μg/mL牛血清白蛋白标准液组份浓度250μg/mL ;配制量2L配置方法1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。

2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。

3.4℃保存。

6、Folin试剂甲配置方法1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中,加入50g无水碳酸钠,溶解,待用。

2.称取0.5g 酒石酸钾钠,溶于80mL去离子水中,加入0.25g硫酸铜?5水,溶解。

3.将1:2:去离子水按20:4:1的比例混合即可。

4. 4℃保存,可用一周。

7、Folin试剂乙配置方法:1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠?2水25.0359g,钼酸钠?2水6.2526g,去离子水175mL,85%磷酸12.5mL,浓盐酸25mL,充分混合。

2.回流10小时,再加硫酸锂37.5g,去离子水12.5mL及数滴溴。

3.然后开口沸腾15min,以驱除过量的溴,冷却后定容到250mL。

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液,以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。

1.NaCl溶液配制:NaCl作为实验室常用的盐类试剂,可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。

常用浓度为0.9%(w/v)的生理盐水。

配制方法如下:称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中,搅拌溶解,用蒸馏水调整至最终体积。

2.血红蛋白溶液配制:血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。

常用方法如下:从新鲜血液中分离出血红蛋白,加入适量的生理盐水或缓冲液,控制pH值为7.4-7.6,并用密闭容器保存。

3. Tris-HCl缓冲液配制:Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。

常用方法如下:按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中,搅拌溶解,用强碱(比如氢氧化钠)或强酸(比如盐酸)调整pH值至所需范围。

1. Tris缓冲液配制:Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,并用去离子水稀释至最终体积。

2.PBS缓冲液配制:PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。

配制方法如下:称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积,调整pH值至所需范围。

3. Tris-Borate-EDTA(TBE)缓冲液配制:TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,然后加入Boric acid和EDTA固体,继续搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积。

以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法,实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。

在配制试剂和缓冲液时,需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台,并遵循相应的实验操作规范和安全要求。

常用缓冲溶液的配制方法

常用缓冲溶液的配制方法

常用缓冲溶液的配制方法1.甘氨酸–盐酸缓冲液(0.05mol/L)X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI,再加水稀释至200毫升甘氨酸分子量 = 75.07,0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0.05 mol/L)X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl,再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23,0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量 = 14.98,0.2 mol/L溶液为28.40克/升。

Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05,0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量 = 210.14,0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

4.柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液①使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH值有变化,再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。

5.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L)柠檬酸C6H8O7·H2O:分子量210.14,0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O:分子量294.12,0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。

6.乙酸–乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L)Na2Ac·3H2O分子量 = 136.09,0.2 mol/L溶液为27.22克/升。

7.磷酸盐缓冲液(1)磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液(0.2)Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05,0.2 mol/L 溶液为85.61克/升。

Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 358.22,0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。

Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03,0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。

生化实验溶液的配制

生化实验溶液的配制

甲基红(MR)试验/VP试验.原理细菌分解培养基中的葡萄糖产酸,当产酸量大,使培养基的pH降至4。

5以下时,加入甲基红指示剂而变红E甲基红的变色范围为pH4.4(红色)~pH 6.2(黄色)),此为甲基红试验。

当细菌发酵葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸再变为乙酰甲基甲醇;乙酰甲基甲醇又变成2,3—丁二烯醇,2,3—丁二烯醇在碱性条件下氧化成为二乙酰,二乙酰和蛋白胨中精氨酸胍基起作用产生粉红色的化合物,此为VP试验。

这两个试验密切相关,对一种细菌而言,两者只能居其一.培养基及试剂葡萄糖蛋白胨水溶液。

甲基红试剂:甲基红0.02g,95%酒精60mL,蒸馏水40ral。

VP试剂:甲液、:a—萘酚酒精溶液(o—萘酚5g,无水乙醇100mL)。

乙液:KOH溶液(KOH40g,水l00mL)o将甲液和乙液分别装于棕色瓶中,于4~10C保存。

或:硫酸铜1g,浓氨水40mL,10%KOH950mL,蒸馏水10mLoMR试验方法取一种细菌的24h培养物,接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中,置37C培养48~72h,取出后加甲基红试剂3~5滴,凡培养液呈红色者为阳性,以……十”表示;橙色者为可疑,以“±”表示;黄色者为阴性,以“―”表示。

VP试验方法取一种细菌的•24h纯培养物,接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中,置37'C培养48~72ho取出后在培养液中先加VP试剂甲液0.6mL,再加乙液0.2mL,充分混匀。

静置在试管架上,15min后培养液呈红色者为阳性,以“ +”表示;不变色为阴性,以“—”表示。

1h后可出现假阳性。

或者可以用等量的硫酸铜试剂于培养液中混合,静置,强阳性者约5min后就可产生粉红色反应。

硫化氢试验原理细菌分解含硫氨基酸,产生HS,与培养基中的醋酸铅或FeS04发生反应,形成黑色的硫化铅或硫化亚铁。

培养基可用成品微量发酵管、醋酸铅琼脂或三糖铁琼脂斜面。

微量法取一种细菌纯培养物,接种于H2S微量发酵管中,置37℃培养24h 后观察结果。

各种缓冲液配方范文

各种缓冲液配方范文

各种缓冲液配方范文缓冲液是一种在化学、生物学和其他实验室应用中常用的溶液,用于稳定试剂的pH值,以保持实验条件的稳定性。

下面列举了几种常见的缓冲液配方。

1. Tris缓冲液Tris缓冲液是一种非常常见的缓冲液,常用于酶反应和核酸电泳。

它的配方如下:- 200 mM Tris-相应量的盐酸(pH值调节)2.PBS缓冲液PBS缓冲液是一种用于细胞培养和免疫试剂的常用缓冲液。

它的配方参考如下:-137mMNaCl-2.7mMKCl-10mMNa2HPO4-2mMKH2PO4-(pH值调节)3.HEPES缓冲液HEPES缓冲液是一种用于细胞培养和生化实验的常用缓冲液。

它的配方如下:-25mMHEPES-115mMNaCl-5mMKCl-1mMMgCl2-1mMCaCl2-(pH值调节)4.MES缓冲液MES缓冲液是一种用于生化实验和电泳的常用缓冲液。

它的配方如下:-50mMMES- 50 mM Tris-1mMEDTA-相应量的盐酸(pH值调节)5.ACES缓冲液ACES缓冲液是一种用于生化实验和细胞培养的常用缓冲液。

它的配方如下:-10mMACES- 5 mM Tris-10mMCaCl2-(pH值调节)6.TE缓冲液TE缓冲液是一种用于DNA和RNA实验的常用缓冲液。

它的配方如下:- 10 mM Tris-1mMEDTA-(pH值调节)以上列举的是一些常见的缓冲液配方,具体的配方和浓度可能会因实验目的和样品类型而有所不同。

在制备缓冲液时,应该按照实验要求仔细调节pH值,并使用高质量的试剂和纯水来制备缓冲液。

此外,一些缓冲液可能需要在特定的温度下保存或使用,因此在实验之前要对缓冲液的相关要求进行仔细了解和准备。

常用缓冲溶液的配制方法

常用缓冲溶液的配制方法

常用缓冲溶液的配制方法缓冲溶液是在化学实验和生物实验中常用的一种溶液,用于调节溶液的pH值,使其保持在特定的pH范围内。

常用缓冲溶液的配制方法有许多种,下面将介绍几种常见的缓冲溶液的配制方法。

一、Tris缓冲液配制方法:Tris缓冲液是一种常用的生物学缓冲液,常用于蛋白质电泳、酶反应等实验中,其配制方法如下:1. 准备所需的试剂:Tris碱(Tris base,化学名三羟基甲基氨基甲烷)。

2. 在计量瓶中称取适量的Tris碱,并将其溶解于蒸馏水中,得到所需浓度的Tris碱溶液。

3. 调节溶液pH值:使用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)调节Tris溶液的pH值。

通常,Tris缓冲液的pH范围为7-9,具体的pH值取决于实验的要求。

4.定容:将溶液调节至最终所需体积,通过加入蒸馏水来调节。

二、Phosphate缓冲液配制方法:Phosphate缓冲液是生化实验中常用的一种缓冲液,其配制方法如下:1.准备所需的试剂:磷酸二氢钠(NaH2PO4)和磷酸氢二钠(Na2HPO4)。

2.在计量瓶中称取适量的NaH2PO4和Na2HPO4,分别溶解于蒸馏水中,得到所需浓度的NaH2PO4和Na2HPO4溶液。

3.调节溶液pH值:根据所需pH范围选择NaH2PO4和Na2HPO4的比例,同时用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)调节pH值。

4.定容:将溶液调节至最终所需体积。

三、Acetate缓冲液配制方法:Acetate缓冲液是一种常用的酸性缓冲液,在酶反应、DNA电泳等实验中常用,其配制方法如下:1. 准备所需的试剂:乙酸(Acetic acid)和醋酸钠(Sodium acetate)。

2.在计量瓶中称取适量的乙酸和醋酸钠,分别溶解于蒸馏水中,得到所需浓度的乙酸和醋酸钠溶液。

3.调节溶液pH值:根据所需pH范围选择乙酸和醋酸钠的比例,同时用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)调节pH值。

4.定容:将溶液调节至最终所需体积。

缓冲溶液的配制

缓冲溶液的配制

一、常用溶液的配制(一)溶液配制注意事项1.药品要有较好的质量试剂分为优级纯(保证试剂,Guaranteed reagent,G.R.)、分析试剂(Antalytical reagent,A.R.)化学纯(Chemical pure,C.P.)和实验试剂(Laboratory reagent,L.R.)等等。

工业用的化学试剂,杂质较多,只在个别情况下应用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。

2.药品称量要精确。

3.配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水,比电阻值在50万欧姆以上,pH在5.5~7.0之间才可应用,在组织培养等特殊用途时应注意此项要求,配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。

4.配好后的溶液,应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质),以防杂菌生长。

(二)0.067(1/15)Mol/L磷酸缓冲液1.1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制:称取磷酸二氢钾(KH2PO4,A.R.)9.08g,用蒸馏水溶解后,倾入1 000ml容量瓶内,再稀释至刻度(1 000ml)。

2.1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制:称取无水磷酸氢二钠(Na2HPO4,A.R.)9.47g(或者Na2HPO4·2H2O 11.87g)用蒸馏水溶解后,放入1 000ml容量瓶内,再加蒸馏水稀释至刻度(1 000ml)。

3.按附表的比例,配制成不同pH值的缓冲溶液。

附表1 磷酸盐缓冲液配制法(单位:毫升)pH 1/15Mol/L Na2HPO4 1/15Mol/L KH2PO4 pH 1/15Mol/L Na2HPO4 1/15Mol/L K H2PO45.8 8.0 92.0 7.1 66.6 23.45.9 9.9 90.1 7.2 72.0 28.06.0 12.2 87.8 7.3 76.8 23.26.1 15.3 84.77.3 80.8 19.26.2 18.6 81.47.5 84.1 15.96.3 22.4 77.6 7.6 87.0 13.06.4 26.7 73.37.7 89.4 10.66.5 31.8 68.27.8 91.58.56.6 37.5 62.5 7.9 93.2 6.86.7 43.5 56.5 8.8 94.7 5.36.8 49.6 50.4 8.1 95.8 4.26.9 55.4 44.6 8.2 97.0 3.07.0 61.1 38.9 8.4 98.0 2.0(三)0.15Mol/L PB液附表2 0.15Mol/LPB液配制法pH 0.15Mol/L Na2HPO4(ml)0.15Mol/L NaH2PO4(ml)6.4 26.5 73.56.6 37.5 62.56.8 49.0 51.07.0 61.0 39.07.2 72.0 28.07.4 81.0 19.07.6 87.0 13.0Na2HPO4·2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.7g/L。

53种常用缓冲液配制

53种常用缓冲液配制

53种缓冲液配制缓冲液乙醇-醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7,用水稀释至1000ml,即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1,加水稀释至100ml,即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g,再加水溶解使成1000ml,调节pH值至9.0,即得。

乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g,加水溶解后,加浓氨溶液4.2ml,再用水稀释至250ml,即得。

巴比妥缓冲液(pH7.4) 取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml,用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4,滤过,即得。

巴比妥缓冲液(pH8.6) 取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml,即得。

巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8) 取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0.2mol/L 盐酸溶液调节pH值至7.8,再用水稀释至500ml,即得。

甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml,加酚酞指示液1滴,用2mol/L 氢氧化钠溶液中和,再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25~3.30,即得。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g,加水900ml,搅拌使溶解,用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml,混匀,即得。

生化实验

生化实验

一,溶液配制步骤用容量瓶配制溶液,如是固体物质,先要在烧杯内溶解,再转移到容量瓶中,转移溶液时用搅拌棒引流。

用蒸馏水冲洗烧杯几次,洗涤液转入容量瓶中。

然后慢慢往容量瓶中加入蒸馏水,当液面接近刻线约1cm时,稍停后待附在瓶颈上的水流下后,用洗瓶滴加水到水的弯月面与标线相切。

盖好瓶塞,将容量瓶倒置摇动,重复几次,使溶液混合均匀。

如固体是经加热溶解的,溶液冷却后才能转入容量瓶内。

如果要把浓溶液稀释,要用移液管吸取一定体积浓溶液放入容量瓶中,然后按上述操作加水稀至刻度线。

二,制备无蛋白滤液原因及步骤原因:测定血液或其他体液的化学成分是,样品内蛋白质的存在常常干扰测定。

步骤:1,取50mL锥形瓶或大试管一支;2,用奥氏吸管吸取充分混匀的抗凝血1份,擦去管外血液,缓慢放入锥形瓶或试管底部;3,准确加入蒸馏水7份,混匀,使完全溶血;4,加入1/3mol/L硫酸溶液1份,随加随摇,5,加入10%钨酸钠1份,随加随摇;6,放置约5min后,如振摇亦不再发生泡沫,说明蛋白质完全变性沉淀,然后过滤,即得完全澄清无色的无蛋白血滤液。

三,离心机使用方法和注意事项使用方法:1.将离心机放在坚实而平整的工作台上;2.在适用的离心管中加入样品,必须对称配重,否则会损坏离心机;3.按离心机转头的离心管位置刻度所对应孔插入,放下离心机顶盖;4.检查确认调速钮处于最低速位置;5.打开电源开关,调速到需要的转速;6.选择工作时间,调“选时”钮到需要的位置。

7.离心完成,离心机自然停止。

注意事项:1,恰当选择离心管;2,注意配平;3,离心过程中不得随意离开;4,不得过速使用;5,注意保护转头。

四,肝糖原提取与DNA提取的异同(从思路、步骤、原理等方面)不同点:提取肝糖原是用三氯乙酸破坏肝组织中的蛋白酶,并沉淀肝组织中的蛋白质的,而DNA提取是用EDTA抑制核酶的活性,用SDS是蛋白质变性而沉淀下来的。

相同点:需要研磨,恒温水浴加热,离心,加95﹪乙醇;五,温度怎样影响酶活性?其机理、最适温度是什么?酶是一种蛋白质,在一定温度范围内,随着温度的升高,酶的活性也增强,但温度过高会使蛋白质变性,酶失去活性,温度过低则抑制酶的活性。

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生化实验常用溶液的配制一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA 酶)于9.5ml水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。

或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。

1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。

3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。

1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。

1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

25mg/ml IPGT:溶解250mg的IPGT(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)于10ml水中,分成小份贮存于-20℃。

1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml。

100mmol/L PMSF:溶解174mg的PMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容到10ml。

分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20℃。

20mg/ml蛋白酶K(proteinase K):将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。

10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH 5.0)。

溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。

用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。

(配制过程中要戴手套)5mol/L氯化钠(NaCl):溶解29.2g氯化钠于足量的水中,定容至100ml。

10N氢氧化钠(NaOH):溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中(磁力搅拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。

10%SDS(十二烷基硫酸钠):称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。

用水定容至1L。

2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使终体积为100ml。

100%三氯乙酸(TCA):在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。

(稀释液应在临用前配制)2.5% X -gal (5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷):溶解25mg 的X -gal 于1ml 的二甲基甲酰胺(DMF ),用铝箔包裹装液管,贮存于-20℃。

100×Denhardt 试剂(Denhardt's regent )-20℃贮存。

将配制好的缓冲液分装成小份,贮存于-20℃ 。

100 mmol/L dNTP 溶液(dNTP solutions )可以购买到100mmol/L 纯dNTPs 贮液,-80℃可贮存至少6个月。

加聚乙二醇于含有氯化钠的烧杯中,加水至终体积100ml ,用磁力搅拌器搅拌溶解。

溶解柠檬酸三钠(二水)和氯化钠于约0.9L水中,加几滴10N NaOH溶液调pH为7.0,用水补足体积至1L。

DEPC(焦碳酸二乙酯)处理水加100ul DEPC 于100ml 水中,使DEPC的体积分数为0.1%。

在37℃温浴至少12h,然后在15 psi 条件下高压灭菌20min,以使残余的DEPC失活。

DEPC会与胺起反应,不可用DEPC处理Tris缓冲液。

甲酰胺(deionized formamide)直接购买或加Dowex XG8 混合树脂于装有甲酰胺的玻璃烧杯中,用磁力搅拌器轻轻搅拌1h,可去除甲酰胺中的离子。

经Whatman 1号滤纸过滤除去树脂后分成小份,充氮气于-80℃贮存(防止氧化)。

磷酸缓冲液(phosphate buffer)按照下表所给定的体积,混合1 mol/L 的磷酸二氢钠(单碱)和1mol/L 磷酸氢二钠(双碱)贮液,获得所需pH的磷酸缓冲液。

配制1 mol/L 的磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)贮液:溶解138g于足量水中,使终体积为1L;1mol/L 磷酸氢二钠(Na2HPO4)贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。

将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中,再根据所要求的pH(25℃下)加一定量的浓盐酸(11.6N),用水调整终体积至1L。

二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液电泳缓冲液染料1%溴酚蓝(bromophenol blue)加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。

1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。

10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide)小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。

用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。

凝胶上样液(gel loading solutions)三.常用培养基LB培养基粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

SOB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:用水补足体积到1L。

分成100ml的小份,高压灭菌。

培养基冷却到室温后,再在每100ml 的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。

SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制,只是在培养基冷却到室温后,除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外,再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖(18g葡萄糖溶于足够水中,再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌)。

TB培养基将下列组分溶解在0.9L水中:各组分溶解后高压灭菌。

冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液(2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使终体积为100ml。

高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌)。

2×YT培养基粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。

YPD培养基将下列组分溶解在0.9L水中:用水补足体积为1L后,高压灭菌。

建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加1.6g色氨酸,因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。

为了配制平板,需要在高压灭菌前加入20g琼脂粉。

四.常用抗生素氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml)溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)溶解1g甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以37.5ug/ml 终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。

卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以12.5ug/ml~25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

链霉素(streptomycin)(50mg/ml)溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。

分装成小份于-20℃贮存。

常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

四环素(tetracyyline)(10mg/ml)溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至10ml。

分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20℃贮存。

常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。

一、常规溶液(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution,PBS)甲液:1/15mol/L Na2HPO4溶液Na2HPO4 9.465g蒸馏水加至1000ml乙液:l/15mol/L KH2PO4溶液KH2P04 9.07g蒸馏水加至1000m1分装在棕色瓶内,于4℃冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需pH 的缓冲液,见下表:pH 甲液ml 乙液mI pH 甲液ml 乙液mI5.29 5.595.916.24 6.47 6.64 2.55.010.020.030.040.097.595.090.080.070.060.06.816.987.177.387.738.0450.060.070.080.090.095.050.040.030.020.010.05.0(二)0.3%台盼兰染液称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克,溶于100ml生理盐水中,加热使之完全溶解,用滤纸过滤除渣,装入瓶内室温保存。

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