组织ros含量检测方法
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ROS 含量检测方法
1. 荧光染料法
•DCFH-DA:一种非荧光的醋酸酯,进入细胞后被酯酶水解为 DCFH,而后被活性氧氧化为高度荧光的 DCF。
•H2DCFDA:类似于 DCFH-DA,但具有更高的水溶性和更快的氧化速度。
•DHE:一种非荧光染料,与细胞内的超氧化物反应形成荧光产物 ethidium。
2. 化学发光法
•Lucigenin:一种非荧光化合物,在与超氧化物反应后发出化学发光。
•L-012:一种化学发光探针,与活性氧反应发出荧光。
3. 电化学法
•ROS 电极:一种选择性电极,可检测特定类型的活性氧,如超氧化物或过氧化氢。
4. 蛋白质氧化法
•羰基化:检测蛋白质羰基含量,它是脂质过氧化和蛋白质氧化的标志。
•硝基化:检测蛋白质硝基含量,它是自由基攻击的标志。
5. 脂质氧化法
•丙二醛 (MDA) 测定:检测 MDA 含量,它是脂质过氧化产物。
•脂质过氧化物检测:测量双键脂质产物,如 F2-异前列腺素。
6. DNA 氧化法
•8-羟基脱氧鸟嘌呤 (8-OHdG) 测定:检测 DNA 氧化产物 8-OHdG 含量。
•单链 DNA 断裂测定:测量单链 DNA 断裂的频率。
7. 抗氧化剂水平测量
•谷胱甘肽测定:检测谷胱甘肽含量,它是主要的抗氧化剂。
•维生素 E 测定:检测维生素 E 含量,它是脂溶性抗氧化剂。
选择方法时的考虑因素
•ROS 类型:不同的方法对不同类型的 ROS 有选择性。
•样本类型:一些方法需要特定的样本类型,如细胞悬液或组织匀浆。
•检测灵敏度:一些方法比其他方法更灵敏。
•成本和复杂性:不同的方法具有不同的成本和复杂性。