流式细胞术的质量控制

流式细胞术的质量控制

流式细胞术的质量控制

一、引言

流式细胞术是一种重要的细胞分析技术，可以用于细胞计数、细胞表型分析和细胞排序等。在进行流式细胞术之前，进行质量控制是非常重要的，以确保实验的准确性和可靠性。本文将详细介绍流式细胞术的质量控制方法。

二、仪器校准

⒈流式细胞仪校准

●清洁流式细胞仪的样品室，并检查激光器和光路系统是否正常工作。

●使用粒子标准物质检查细胞仪的散射、荧光和时间参数的准确性。

●清洗和校准流式细胞仪的液体系统，确保流速和样本量的准确控制。

⒉样品准备

●均匀悬浮细胞样本，避免细胞团聚和沉积。可通过离心和重新悬浮样本来实现。

●使用质量可靠的细胞染色方法，确保染色的准确性和一致性。

●调整样本的浓度，以避免过度聚焦和细胞过于稀疏而损失信号。

三、质量控制指标

⒈样本纯度的质量控制

●使用合适的负对照和正对照来评估染色的纯度。例如，使用

未染色细胞作为负对照，使用已知阳性标记的细胞作为正对照。

●定期检查染色结果的一致性，确保负对照细胞没有阳性标记，正对照细胞有预期的阳性标记。

⒉流式细胞仪性能的质量控制

●定期检查流式细胞仪的性能参数，包括散射灵敏度、荧光检

测灵敏度和时间分辨率。

●使用校准颗粒检验流速的准确性和一致性。

●根据实验需要，使用合适的质检颗粒进行分辨率和强度的调整。

四、数据分析和结果解释

⒈数据质量控制

●检查数据文件的完整性，确保数据文件包含所有需要的参数和样本。

●清除实验过程中的噪声信号和非特异性染色的细胞。

●根据预设的阈值和门控策略进行数据清洗和筛选。

⒉数据解释和结果报告

●根据实验的目的和结果，选择合适的数据可视化方法，如频率直方图、散点图或密度图等。

●在报告中注明样本总数、阳性细胞比例、细胞亚群的比例等相关指标。

●提供结果的解释和分析，例如细胞表型的变化趋势、不同实验组间的比较等。

五、附件

附件1、样本染色方案

附件2、流式细胞仪校准记录表

附件3、数据分析结果表格

六、法律名词及注释

⒈ IRB：Institutional Review Board，即伦理审查委员会，负责审查人体试验和研究项目的合法性和伦理性问题。

⒉ HIPAA：Health Insurance Portability and Accountability Act，即健康保险流通责任法，为保护个人健康信息的隐私而制定的法律。