实验4 总氮量的测定凯氏定氮法

收瓶下移，使接收瓶离开液面，继续蒸馏30s，取下接
收瓶滴定。
定氮仪
碱 泵 水 泵 进 水 排 水 出 水
3.3
滴定 用0.1mol/L的盐酸滴定接收瓶内的溶液，滴
至溶液由蓝色变成微红色时为止，记下消耗的
盐酸的毫升数。
3.4
计算
•
(V V0 ) N 0.014 100 A 蛋白质的含量(%)= W
实验四 总氮量的测定
凯氏定氮法
实验类型：基础验证型
实验学时：4学时
实验目的
理解与掌握凯氏定氮法测定氮含量的原理，掌 握样品消化、蒸馏、吸收和滴定的正确操作方法，智 能开启式定氮仪的原理和使用方法 。
1 原理
有机物与浓硫酸共热，有机氮转变为无机氮（氨），
氨与硫酸作用生成硫酸氨，硫酸氨与强碱作用释放出氨，
2.2
主要设备
Leabharlann Baidu
粉碎机，研钵，分样筛，分析天平，消化炉，滴定管， 容量瓶，智能开启式定氮仪，三角瓶。
2.3
材料:黄豆粉
3 实验方法
3.1 消化
称0.5黄豆粉样品于消化管中，加入6.4g[硫酸钾:硫酸铜
=3:1（W/W）]混合的催化剂，与试样混合均匀，再加入
12mL硫酸，置于消化炉上加热,开始小火5min，待样品焦 化，泡沫消失后，再加强火力(360-410℃)直至呈透明的蓝 绿色，然后再继续加热,至少2 h。
消化炉
消化管
3.2
蒸馏
将试样消化液冷却，加入50mL蒸馏水，摇匀，冷却，
并加入40%NaOH溶液50ml。
在250mL三角接收瓶中加入25mL 2%的H3BO3和2滴
混合指示剂，将该瓶套在蒸馏器的接收管上，并且让管口 浸没在H3BO3溶液中。 扳动蒸馏托盘架把准备好的消化管固定在托盘架上， 按蒸汽键蒸馏6-7min，待接收瓶液面高于150ml时将接
式中:V: 消耗盐酸标准液的体积（mL）
V0: 空白实验消耗盐酸标准液的体积（mL）
N: 盐酸标准溶液浓度（mol/L） A: 固定值(6.25) 0.014:每毫克当量氮的克数 W: 试样的重量g
4
思考题
总氮测定时，消化至关重要，样品消化 时注意事项有哪些？
借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此过量酸液被中和的程度， 即可计算出样品的含氮量。
用反应式表示如下：
(1) 消化 (2) 蒸馏 (3) 吸收: (4) 滴定:
蛋白质 + H2SO4 (NH4)2SO4 + 2NaOH 2NH3 + 4H3BO3
(NH4)2SO4 + CO2↑+ SO2↑ + H2O 2NH3↑+ Na2SO4 + 2H2O (NH4)2B4O7 + 5H2O 2NH4Cl + 4H3BO3
(NH4)2B4O7 + 2HCl + 5H2O
2 试剂、材料与设备
2.1 主要试剂 • 浓硫酸（A.R.）;
• 硫酸钾：硫酸铜=3:1（W/W）混匀研成粉末;
• 40%NaOH溶液：40gNaOH溶于蒸馏水，释至100mL;
• 2%硼酸溶液：2g硼酸溶于蒸馏水，释至100mL;
• 混合指试剂：0.1%甲基红乙醇溶液和0.5%溴甲酚绿乙醇溶 液,两溶液等体积混合; • 0.1mol/L标准HCl溶液：8.3mLHCl定溶至1000mL。