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HDN的血清学实验室检测

结果：383例新生儿溶血病患者中，直接抗人球蛋白试验阳性率为53.12%，游离抗体试验阳性率为71.54%，抗体释放试验阳性率为83.29%。

结论：释放试验敏感度最高，是判定新生儿溶血病最有力的实验室证据。

Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.08.538

新生儿溶血症（hemolytic disease of the newborn，HDN）是指母婴血型不合，母体血液中针对胎儿红细胞的免疫抗体IgG通过胎盘进入胎儿循环，发生同种免疫而引起的溶血。在人类已发现的血型系统中，以ABO 血型系统不合引起的新生儿溶血病最常见，其次为Rh血型系统。新生儿溶血病的临床表现轻重不一，取决于抗原性的强弱、个体的免疫反应、胎儿的代偿能力和产前的干预措施等因素。Rh溶血病临床表现较为严重，进展快，而ABO溶血病的临床表现多数较轻。Rh溶血病一般不发生在第一胎，而ABO溶血病可发生在第一胎。HDN的血清学检测对该疾病的临床诊断具有重要的价值。笔者就我市近年来发生的383例HDN的血清学检测结果分析报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源。2010年1月～2013年1月本市4家医院送检的临床高胆红素血症或母亲血型为Rh阴性的HDN患儿383例，标本为患儿及母亲血液。

1.2 试剂。抗-A（B）血清（长春生物制品研究所）；抗-D、抗人球蛋白试剂（广谱）、单克隆IgG、单抗C3（上海市血液中心）；ABO标准红细

胞（本站自制）。

2 结果

383例新生儿溶血病患者中，直接抗人球蛋白试验阳性率为53.12%，游离抗体试验阳性率为71.54%，抗体释放试验阳性率为83.29%。

3 讨论

3.1 发病原因。由于母亲的血型与胎儿（或婴儿）的血型不合，如Rh 血型不合或ABO血型不合引起同族免疫性溶血病，Rh血型不合所致溶血常较ABO血型不合为严重。

3.1.1 Rh血型不合。Rh血型不合引起的新生儿溶血症在中国的发病率较低。通常是母亲为Rh阴性，胎儿为Rh阳性而血型不合，并引起溶血，一般第一胎不发病，而从第二胎起发病，但如果Rh阴性的母亲在第一胎前曾接受过Rh阳性的输血，则第一胎也可发病。

3.1.2 ABO血型不合。该病以ABO血型不合最常见，其中最多见的是母亲为O型，胎儿（或婴儿）为A型或B型。第一胎即可发病，分娩次数越多，发病率越高，且一次比一次严重。尚可见于母亲为A型，胎儿（或婴儿）为B型或AB型，或母亲为B型，胎儿（或婴儿）为A型或AB型，但少见。胎儿（或婴儿）为O型者，可排除该病。

3.2 发病机制。胎儿由父亲方面遗传来的显性抗原恰为母亲所缺少，胎儿血因某种原因进入母体，母体产生相应的IgM抗体，当胎儿血再次进入母体，母体发生次发免疫反应，产生大量IgG抗体，通过胎盘进入胎儿，使胎儿、新生儿发生溶血。只要0.1～0.2ml的胎儿红细胞进入母体循环就足以使母亲致敏。

3.2.1 Rh血型不合溶血病。多数是母亲为Rh阴性，但Rh阳性母亲的婴儿同样也可以发病。第一胎发病率很低，因为初次免疫反应产生IgM抗体需要2～6个月，且较弱，不能通过胎盘进入胎儿体内，而胎儿红细胞进入母体多数发生在妊娠末期或临产时，故第一胎常处于初次免疫反应的潜伏阶段。当再次妊娠第2次发生免疫反应时，仅需数天就可出现，主要为IgG能通过胎盘的抗体，并能迅速增多，故往往第二胎才发病。Rh系统的抗体只能由人类红细胞引起，若母亲有过输血史，且Rh血型又不合，则第一胎也可发病。母亲的母亲（外祖母）为Rh阳性，母亲出生前已被致敏，则第一胎也可发病，此即外祖母学说。

3.2.2 ABO血型不合溶血病。多数是母亲O型、胎儿A型或B型；少数为母亲A型、胎儿B型或AB型，或母亲B型、胎儿A型或AB型时发病。因为A或B型母亲的天然抗A或抗B抗体主要为不能通过胎盘的IgM抗体，而存在于O型母亲中的同种抗体以IgG为主，因此ABO溶血病主要见于O 型母亲、A或B型胎儿。ABO溶血病可发生在第一胎，这是因为食物、革兰阴性细菌、肠道寄生虫、疫苗等也具有A或B血型物质，持续的免疫刺激可使机体产生IgG抗A或抗B抗体，怀孕后这类抗体通过胎盘进入胎儿体内可引起溶血。由于A和B抗原也存在于红细胞外的许多组织中，通过胎盘的抗A或抗B抗体仅少量与红细胞结合，其余都被其他组织和血浆中的可溶性A和B血型物质的中和和吸收，因此虽然母婴ABO血型不合很常见，但发病者仅占少数。

在383例新生儿溶血病患者中，抗体释放试验阳性率（83.29%）、游离抗体试验阳性率（71.54%）与文献报道的释放试验阳性率为88.0%、游

离试验阳性率为69.16%大致相同，但直接抗人球蛋白试验阳性率（53.12%）高于文献报道（39.12%），可能与所用试剂、仪器及血样采集时机和来源不同有关[1]。研究结果证实释放试验是“三项试验”中敏感度最高，也是判定HDN 最有力的证据[2]。抗体释放试验操作比较繁琐，耗时较长，在实际工作中应仔细认真，否则可能得到错误的结论。研究结果还表明，直接抗人球蛋白试验比游离抗体试验更具有诊断价值，因为，直接抗人球蛋白试验阳性说明红细胞已经被血清中的游离抗体致敏。在383例的HND 患者中，“三项试验”结果分布规律为直接抗人球蛋白试验、游离抗体试验、抗体释放试验同时呈阳性所占比例较低；游离抗体试验、抗体释放试验均阳性所占比例次之，抗体释放试验阳性者占比例最高。单是直接抗人球蛋白试验阳性者，就可以确认HDN。如果单是直接抗人球蛋白试验阴性，还需要做游离试验或者释放试验进一步确诊。

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