决明子中有效成分的测定方法浅析【文献综述】

文献综述

生物工程

决明子中有效成分的测定方法浅析

摘要：决明子及其成方制剂以其指标性成分蒽醌及其衍生物作为含量测定项。对蒽醌含量测定的方法有：紫外-可见分光光度法、荧光光度法、高效液相色谱法等，各种方法均有其优缺点。本文主要综述了决明子及其成方制剂中蒽醌及其衍生物的含量测定的各种方法。为该中药的质量评价与资源开发提供了科学依据和方法依据。

关键词：决明子；HPCL；含量测定；蒽醌

决明子含有蒽醌类、萘并吡咯酮类、脂肪酸类、氨基酸和微量元素等物质，这些成分对生理的生命活动都具有很好的作用。多年来国内外学者对决明子进行了大量研究，发现决明子的主要功效成分是蒽醌类化学物质。蒽醌类成分具有降血脂、润肠通便、抑菌、减肥、抗癌、抗诱变、抗血小板聚焦、收缩子宫等药理作用[1]。同时，决明子又可作食用中药，是保健饮料的良好原料。此外，决明子种子胶是良好的悬浮剂，也可作橄榄油、液体石蜡和松节油的乳化剂。所以，决明子无论在药用、保健，还是化工方面都具有广泛的研究、利用和开发前景。

1 决明子概述

1.1 蒽醌类物质

决明子中蒽醌类物质主要含有大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酸、决明素、橙黄决明素、黄决明素、美决明子素、大黄素蒽酮、大黄素-6-葡萄糖苷、葡萄糖基美决明子素、葡萄糖基黄决明素和葡萄糖基橙黄决明素等。蒽醌类成分，含量约占1%，其中以大黄酚为主。此外，郭洪祝等[2]对诱导的发根决明子中蒽醌类成分进行定性分析，发现了四种在决明子中未发现或未分离得到的游离型蒽醌类物质，如：1-羟基-3-甲氧基-8-甲基蒽醌、1-羟基-7-甲氧基-3-甲基蒽醌等。李楚华等[3]从决明子水提物中分离得到新化合物大黄素-1-O-β-龙胆二糖苷，并首次分离得到大黄酚-1-O-β-龙胆二糖苷大黄酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(l，3)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1，6)-β-D-毗喃葡萄糖苷。

1.2 萘并吡咯酮类物质

决明子含决明苷、决明种内酯和红镰霉素、决明内酯、异决明种内酯等萘并吡咯酮类物质。决明中均含有红镰霉素(rubrofusarin)、决明子苷(Cassiaside)、决明内酯(toralactone)、决明子苷B及C、红镰霉素-6-O-龙胆二糖苷(brofusarin-6-O-gentio-bioside)。大决明中还有决明蒽酮(torosaehrysone)、异决明内酯(isotoralaetone)、决明子内酯(eassialaetone)、2，5-二甲氧基苯醌(2，5-dimethOXybenZOquinnone)、决明子苷B2及C2。小决明中还含有红镰霉素-6-O-芹糖葡萄糖苷及CaSSitoroside[4]。

1.3 其它

有文献[5]报道，决明子中含有大量的不饱和脂肪酸，相对含量占71.13%，其中亚油酸(41.80%)、油酸(27.82%)含量较高；而饱和脂肪酸以棕桐酸(15.33%)、硬脂酸(8.17%)、花生酸(1.66%)为主。另决明子含有对人体健康有益的17种氨基酸(包括8种人体必需氨基酸)，其中谷氨酸和天冬氨酸的含量最高。决明子中还含有大量的人体必需微量元素，如镁、锌、铁、铜、锰、钠、钾等，钙含量十分丰富。

2 蒽醌测定方法

总蒽醌类化合物的测定方法目前应用较多的有荧光法、分光光度法、液相色谱法、比色法等[6-8]。其中分光光度法在总蒽醌测定中应用最多，主要有醋酸镁显色法、混合碱显色法、未显色直接测定法等。液相色谱法则常应用于分别测定各种蒽醌含量。

2.1 HPCL法分析决明子中各组分蒽醌

2.1.1 《中国药典》2010版中对决明子含量测定方法

中国药典2005版以大黄酚作为主要含量测定指标，而大黄酚为大黄、何首乌、虎杖、芦荟等药材的共有活性成分，非决明子的专属性成分，其含量只能在一定程度上反映决明子的质量。因此，《中国药典》2005年版决明子的含量测定方法缺乏专属性。中国药典2010版在此基础上则增加了橙黄决明素作为指标性成分进行质量控制。

2.1.2 高效液相色谱法测定决明子中蒽醌及其衍生物含量的方法[6]

近年来，文献相继报道了用高效液相色谱法分析决明子药材及其制剂中蒽醌及其衍生物的含量，见表1。可见，决明子及其制剂大多数只需简单的醇提水解

氯仿分离萃取后就能进行蒽醌的分析测定，但对于测定含量较低的蒽醌及其衍生

物则需进一步纯化。其次，蒽醌类成分使用C18反相色谱柱进行分析时，由于反

相色谱柱的封尾不完全，残存的微酸性硅醇基团会与蒽醌类成分发生化学吸附而

导致拖尾现象，而流动相中微量的酸能使蒽醌类成分预先达到“酸饱和”的效果，减少了蒽醌类成分与反相柱硅醇基的吸附，改善拖尾；因此，较多文献采用乙腈

或甲醇与0.1mol/L磷酸水溶液作为流动相梯度分离，以期达到分离效果好，保

留时间适当。

表1 决明子药材及其制剂中测定蒽醌及其衍生物含量的方法

编号色谱柱流动相波长供试品溶液制备方法

1 Intertsil ODS-3 乙腈-0.1%磷酸水溶液278nm 甲醇提取样品，酸水解后用氯仿萃取[8]

2 Eclipse XDB 甲醇-0.1%磷酸溶液254nm 甲醇加热回流提取[9]

3 Shim-pack 甲醇-水(80∶20V/V) 223nm 甲醇加热回流提取[10]

4 AgilentZorbaxC甲醇-0.1%磷酸水溶液254nm 丙酮-水(1：1)超声提取

5 KromasillooAC1甲醇-0.1%磷酸溶液285nm 甲醇提取样品，酸水解后用氯仿萃取[11]

2.2 紫外可见分光光度法测定总蒽醌

近年来，文献相关报道了决明子含量测定的紫外分光光度法。大多以母核1，8-二羟基蒽醌为标准样品测定提取液中总蒽醌类化合物的含量。

2.2.1 醋酸镁显色法

李伟民等[12]采用醋酸镁显色法测定决明子中总蒽醌含量。文中并未准确提及供试品与对照品最大吸收波长一致性，且该方法未纯化样品，干扰因子较多，缺乏准确性。

2.2.2 直接测定法

文献[13]研究指出，蒽醌于可见光区的吸收虽弱，但428nm波长处的较强吸收峰，正是由醌式结构引起的，且背景干扰少，因此无需复杂的显色处理过程。

故实验以以乙醇-水（6+4）溶液为提取剂，回流提取次数为3次，直接测定。得

到如下图：