生物技术综合实验课：导言
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生物技术综合实验课导言
一 课程目的与教学基本要求 二 教学内容及安排 三 教学的手段和方法 四 教学管理事项
教学安排－教学单元
单元
内容
目的基因的制取
一 真核生物总RNA的提取 二 琼脂糖凝胶电泳
三 RT-PCR扩增EF1基因片段
基因克隆、转化和重组 子筛选
六 质粒的提取 七 DNA的酶切、回收和连接
实验安排的特点2－实验具有可行性
所设立的实验方法和策略得当，只要操 作正确，就会获得结果。
实验安排的特点3－实验材料可观性强
选用直观性强的材料： ――绿色荧光蛋白基因作为操作对象，其
重组后表达的产物在紫外光下即可见其 特有的黄绿色荧光，便可断定其是否重 组成功及有无表达 －－基因重组子的蓝白斑筛选 －－亲和层析剂在层析过程中的颜色变化
干净利落 了解每一步骤的作用 了解每一种试剂的用途 仔细观察、忠实记录
实验教学管理
由于这门课教学内容多，涉及面广，同学们 独立操作时间长，有必要建立一系列的分项 管理制度，如仪器损坏赔偿、实验室卫生、 安全责任制等，更好地督促大家养成良好的 学习、工作习惯，保证整个课程教学有序顺 利地进行。
管理制度1－以小组为单位保管器具
下游的生化技术：目的基因表达调控、目标产物的 提取、纯化、鉴定、SDS-PAGE电泳、柱层析、 Western技术
特点：直观。GFP
实验安排的特点1－独立性和连贯性
每个实验单元本身既有相对的独立性，单元之 间又有紧密的连贯性。即每个实验单元都有实 验结果（有产物），上一实验单元的产物是下 一单元的材料，联系紧密。每个实验单元的产 物要保存好，留作下一单元用。
基地班 60
分班 39 38 10 25 35
实验室 209 209 119
119
实验时间 周5、6 周3、4 周3、4
周5、6
不选周3课程者；209第4周开始上课。
目前工作
按学号分组，3－4人一组 选组长 第3（4）周始，各组清点仪器设备、
玻璃器皿 组长签领微量移液器 各实验单元开始
各班到实验室分配桌面
教学方式－共同参与
教师讲授每单元内容，每个同学全程参与， 动手操作，包括试剂的配制、仪器的安装、 样品的处理
教学方式－自主开展
小组制，实行组长制，各组自主开展每 个单元的设计和实验，组长负责协调组 员与教师和实验员的联系（仪器及试剂 的领取）
教学方式－开放实验
实验室全天开放。 各单元实验要在规定时间内完成。
管理制度3－卫生责任制
注意实验室 的卫生，实验桌面及公共区域 要及时清理干净，值日安排表见门后。
管理制度4－安全工作
实验室的锁匙只能交给各班的班长负责， 没有人做实验时要锁门，离开实验室前 要关好水阀、拉下照明和空调电闸，注 意防火、注意人身及钱财安全。
参考书：
1．现代分子生物学实验技术（第二版） 卢圣栋等编 高等教育出社出版
法和技术 基因工程常规操作技术 了解并掌握各种常规生化仪器及发酵器材的使用和保养； 在科研素质，如分析和解决问题的能力方面获得培养和
训练，为今后独立从事生物技术及相关学科领域的研究 奠定基础。
教学内容－“一条龙”的综合性实验体 系
上游的基因克隆技术：包括总RNA的提取、检测、 逆转录PCR获得cDNA、质粒的酶切、连接技术、感 受态细胞的制备、质粒的转化、质粒提取纯化、定 量、重组质粒的鉴定
由于实验是分组进行，每一组都有一套固定 的玻璃仪器、层析柱、微量移液器、电泳 仪等由各组使用和保管，特别是微量移液 器由各组长签领，全部实验结束后再亲自 交回老师注销。损坏或丢失要赔偿。
管理制度2－岗位责任制
由于独立实验时长，要求每位同学都 要 有很强的责任心，认真、细致做好每一 步实验。对仪器的使用、试剂的配制， 不懂或不很明确时，要问老师或其他同 学，千万不要想当然。组长有协调本组 和其它组之间关系的责任。
课程作业和考核
实验报告 40％
总结汇报
总
2wenku.baidu.com％
成
绩
笔试
30％
实验表现 10％
课程作业－实验报告
❖ 每做完一项实验需写一份规范的实验报告。 ❖ 每个同学各自写出有具体数据、符合逻辑
推理的实验报告。 ❖ 能对实验中碰到的问题进行分析并提出解
决方法，或对实验方案提出修改。 ❖ 实验报告要及时交给老师。
2．精编分子生物学实验指南 颜子颖等译 科学出版社出版
3．分子克隆实验指南（第二版） 金冬雁等译 科学出版社出版
多媒体设施
分子生物学实验操作录像 电子PCR实验软件 层析操作技术
教学安排
见下表 建议由每周4、5改为每周3、
4、5、6连续4天，每班2天
分组安排
班级 人数 生技班 39 生技A班 48
各班班长将各组长名字送给伍俭儿老师 （211，84113799）
未定班的同学尽快和班长联系，安排好 后通知伍俭儿老师
原始数据的记录！
总结报告会
整个课程完成后，每组对整个实验做一个 综合性总结，并推出1人以PowerPoint的 形式在全班进行口头报告。老师或其他组 的同学提出问题，请该组同学答辩。
卷面考试
主要进行实验原理、实验技巧、实验思路、 实验分析和综合能力方面的考核
如何才能做好实验
充分预习 充分讨论 胸有成竹 充分准备 胆大心细
八 重组DNA的转化和鉴定
重组DNA在细菌中的表 十 重组DNA在大肠杆菌中的诱导表达
达调控、表达蛋白的分 十一 SDS-PAGE电泳技术
离纯化及检测
十二 金属鳌合亲和层析分离蛋白质
纯化蛋白的鉴定
十四 Western 印迹
笔试和总结报告
课程的目的和基本要求
基础和专业课程知识的综合运用 学习和掌握一系列生物大分子的制备、分离、纯化的方
一 课程目的与教学基本要求 二 教学内容及安排 三 教学的手段和方法 四 教学管理事项
教学安排－教学单元
单元
内容
目的基因的制取
一 真核生物总RNA的提取 二 琼脂糖凝胶电泳
三 RT-PCR扩增EF1基因片段
基因克隆、转化和重组 子筛选
六 质粒的提取 七 DNA的酶切、回收和连接
实验安排的特点2－实验具有可行性
所设立的实验方法和策略得当，只要操 作正确，就会获得结果。
实验安排的特点3－实验材料可观性强
选用直观性强的材料： ――绿色荧光蛋白基因作为操作对象，其
重组后表达的产物在紫外光下即可见其 特有的黄绿色荧光，便可断定其是否重 组成功及有无表达 －－基因重组子的蓝白斑筛选 －－亲和层析剂在层析过程中的颜色变化
干净利落 了解每一步骤的作用 了解每一种试剂的用途 仔细观察、忠实记录
实验教学管理
由于这门课教学内容多，涉及面广，同学们 独立操作时间长，有必要建立一系列的分项 管理制度，如仪器损坏赔偿、实验室卫生、 安全责任制等，更好地督促大家养成良好的 学习、工作习惯，保证整个课程教学有序顺 利地进行。
管理制度1－以小组为单位保管器具
下游的生化技术：目的基因表达调控、目标产物的 提取、纯化、鉴定、SDS-PAGE电泳、柱层析、 Western技术
特点：直观。GFP
实验安排的特点1－独立性和连贯性
每个实验单元本身既有相对的独立性，单元之 间又有紧密的连贯性。即每个实验单元都有实 验结果（有产物），上一实验单元的产物是下 一单元的材料，联系紧密。每个实验单元的产 物要保存好，留作下一单元用。
基地班 60
分班 39 38 10 25 35
实验室 209 209 119
119
实验时间 周5、6 周3、4 周3、4
周5、6
不选周3课程者；209第4周开始上课。
目前工作
按学号分组，3－4人一组 选组长 第3（4）周始，各组清点仪器设备、
玻璃器皿 组长签领微量移液器 各实验单元开始
各班到实验室分配桌面
教学方式－共同参与
教师讲授每单元内容，每个同学全程参与， 动手操作，包括试剂的配制、仪器的安装、 样品的处理
教学方式－自主开展
小组制，实行组长制，各组自主开展每 个单元的设计和实验，组长负责协调组 员与教师和实验员的联系（仪器及试剂 的领取）
教学方式－开放实验
实验室全天开放。 各单元实验要在规定时间内完成。
管理制度3－卫生责任制
注意实验室 的卫生，实验桌面及公共区域 要及时清理干净，值日安排表见门后。
管理制度4－安全工作
实验室的锁匙只能交给各班的班长负责， 没有人做实验时要锁门，离开实验室前 要关好水阀、拉下照明和空调电闸，注 意防火、注意人身及钱财安全。
参考书：
1．现代分子生物学实验技术（第二版） 卢圣栋等编 高等教育出社出版
法和技术 基因工程常规操作技术 了解并掌握各种常规生化仪器及发酵器材的使用和保养； 在科研素质，如分析和解决问题的能力方面获得培养和
训练，为今后独立从事生物技术及相关学科领域的研究 奠定基础。
教学内容－“一条龙”的综合性实验体 系
上游的基因克隆技术：包括总RNA的提取、检测、 逆转录PCR获得cDNA、质粒的酶切、连接技术、感 受态细胞的制备、质粒的转化、质粒提取纯化、定 量、重组质粒的鉴定
由于实验是分组进行，每一组都有一套固定 的玻璃仪器、层析柱、微量移液器、电泳 仪等由各组使用和保管，特别是微量移液 器由各组长签领，全部实验结束后再亲自 交回老师注销。损坏或丢失要赔偿。
管理制度2－岗位责任制
由于独立实验时长，要求每位同学都 要 有很强的责任心，认真、细致做好每一 步实验。对仪器的使用、试剂的配制， 不懂或不很明确时，要问老师或其他同 学，千万不要想当然。组长有协调本组 和其它组之间关系的责任。
课程作业和考核
实验报告 40％
总结汇报
总
2wenku.baidu.com％
成
绩
笔试
30％
实验表现 10％
课程作业－实验报告
❖ 每做完一项实验需写一份规范的实验报告。 ❖ 每个同学各自写出有具体数据、符合逻辑
推理的实验报告。 ❖ 能对实验中碰到的问题进行分析并提出解
决方法，或对实验方案提出修改。 ❖ 实验报告要及时交给老师。
2．精编分子生物学实验指南 颜子颖等译 科学出版社出版
3．分子克隆实验指南（第二版） 金冬雁等译 科学出版社出版
多媒体设施
分子生物学实验操作录像 电子PCR实验软件 层析操作技术
教学安排
见下表 建议由每周4、5改为每周3、
4、5、6连续4天，每班2天
分组安排
班级 人数 生技班 39 生技A班 48
各班班长将各组长名字送给伍俭儿老师 （211，84113799）
未定班的同学尽快和班长联系，安排好 后通知伍俭儿老师
原始数据的记录！
总结报告会
整个课程完成后，每组对整个实验做一个 综合性总结，并推出1人以PowerPoint的 形式在全班进行口头报告。老师或其他组 的同学提出问题，请该组同学答辩。
卷面考试
主要进行实验原理、实验技巧、实验思路、 实验分析和综合能力方面的考核
如何才能做好实验
充分预习 充分讨论 胸有成竹 充分准备 胆大心细
八 重组DNA的转化和鉴定
重组DNA在细菌中的表 十 重组DNA在大肠杆菌中的诱导表达
达调控、表达蛋白的分 十一 SDS-PAGE电泳技术
离纯化及检测
十二 金属鳌合亲和层析分离蛋白质
纯化蛋白的鉴定
十四 Western 印迹
笔试和总结报告
课程的目的和基本要求
基础和专业课程知识的综合运用 学习和掌握一系列生物大分子的制备、分离、纯化的方