紫外分光光度计分析
紫外可见分光光度计分析方法
紫外可见分光光度计是一种应用很广的分析仪器。
它的应用领域涉及制药、医疗卫生、化学化工、环保、地质、机械、冶金、石油、食品、生物、材料、计量科学、农业、林业、渔业等领域中的科研、教学等各个方面，用来进行定性分析、纯度检查、结构分析、络合物组成及稳定常数的测定、反应动力学研究等。
因为仪器涉及到光学、电学和结构等，所以它需要在一定的环境中应用。
(1)定量分析根据琅伯-比尔定律，样品的浓度和吸光度是成正比关系的，浓度越大，吸收值越高，所以分光光度计用的的还是定量分析，定量分析的种类有很多，这里介绍常用的几种定量分析方法：A、法：法是紫外可见分光光度计诸多分析方法中使用较多的一种方法。
这是一种以琅伯-比尔定律A=£bC为基础的分析方法，某一物质在一定波长下£值是一个常数，石英比色皿的光程是已知的，也是一个常数。
因此，可用紫外可见分光光度计在入max波长处，测定样品溶液的吸光度值A。
然后，根据琅伯比尔定律求出C=A/£b,则可求出该样品溶液的含量或浓度。
B、标准法：在选定的波长处，在相同的测试条件下，分别测试标准样品溶液C标和被测试样品溶液C样的吸光度A标和A样。
然后，按下式求得样品溶液的浓度或含量。
C样二A样/A标XC标C、标准曲线法紫外可见分光光度计常用的定量分析方法是标准曲线法。
即先用标准物质配制一定浓度的溶液，再将该溶液配制成一系列的标准溶液。
在一定波长下，测试每个标准溶液的吸光度，以吸光度值为纵坐标，标准溶液对应得浓度为横坐标，绘制标准曲线。
将样品溶液按标准曲线绘制程序测得吸光度值，在标准曲线上查出样品溶液对应的浓度或含量。
A、其它分析方法除上述几个分析方法外经常使用的分析方法外,还有比吸收系数法、二乘法、解联立方程法和示差分光光度法。
(2)定性分析如果未知物的紫外吸收光谱的吸收峰波长入max、吸收峰波长入Inin、摩尔吸光系数£max,以及吸收峰的数目、位置、拐点与标准光谱数据完全一致，就可以认为是同一种化合物。
紫外可见分光光度计检定误差分析及控制
紫外可见分光光度计检定误差分析及控制摘要：紫外可见分光光度计用于测定190nm-900nm波长范围内物质的吸光度，以及物质的鉴别、杂质检查和定量测定，广泛用于食品药品理化检验，仪器的性能严重影响检验结果。
紫外可见分光光度计是一种常见的实验分析仪器，由于其操作便利、结构简单，在实验检测分析中的运用较普遍。
为了保证实验数据的准确性，避免实验误差过大的问题，在应用过程中，针对其可能出现的部分误差，实验人员需采用适宜措施来开展误差缩减。
基于此，本文主要针对紫外可见分光光度计检定误差分析及相关控制措施展开研究。
关键词：紫外可见分光；光度计检定误差；控制引言紫外可见分光光度计是以被测物质在不同波长范围内，对光的吸收度反应作为物质分析依据的设备。
为满足物质测量的需求，其具有高灵敏度、操作简便等特点。
紫外可见分光光度计在使用中依据JJG178—2007《紫外、可见、近红外分光光度计》检定规程，其计量性能需要满足诸多要求，包括波长误差、波长重复性、噪声与漂移、透射比重复性、基线平直度、电源电压适应性、最小光谱带宽、透射比最大允许误差，另外还包括杂散光和吸收池配套性等10项。
1相关国家标准和检定规程目前，紫外可见分光光度计现行的国家标准为GB/T26798－2011《单光束紫外可见分光光度计》和GB/T26813－2011《双光束紫外可见分光光度计》，由国家质量监督检验检疫总局和国家标准化管理委员会联合发布，归口单位为全国工业过程测量和控制标准化技术委员会。
历经四次的修订和整合，由黑龙江省计量检定测试院等四家单位起草了国家计量检定规程JJG178－2007《紫外、可见、近红外分光光度计》，由国家质量监督检验检疫总局于2007年批准，并于2008年起施行，归口单位为全国物理化学计量技术委员会。
2紫外可见分光光度计检定误差分析2.1标准滤光片造成的误差标准滤光片的误差来源，主要是由于其定值误差及方向性所引发。
一般情况下，直接比较法是常见的检定方式，而这种方式对标准滤光片定值的准确性具有更高要求。
紫外分光光度法实验报告
一、实验目的1. 掌握紫外分光光度法的基本原理和操作方法。
2. 学会使用紫外分光光度计进行物质的定量分析。
3. 了解紫外吸收光谱的特点和应用。
二、实验原理紫外分光光度法是利用物质在紫外光区域（波长范围为190-400nm）对光的吸收特性来进行定量分析的方法。
根据朗伯-比尔定律，当一束单色光通过含有吸光物质的溶液时，溶液的吸光度（A）与溶液的浓度（c）和光程（l）成正比，即 A = εcl，其中ε为摩尔吸光系数。
三、实验仪器与试剂仪器：1. 紫外分光光度计2. 移液器3. 容量瓶4. 烧杯5. 玻璃棒试剂：1. 标准溶液：已知浓度的待测物质溶液2. 水为溶剂3. 乙醇或其他有机溶剂四、实验步骤1. 仪器准备：打开紫外分光光度计，预热10分钟，确保仪器稳定。
2. 空白实验：用移液器取少量溶剂，加入比色皿中，置于紫外分光光度计的样品室，调节仪器至650nm波长，记录吸光度值（A0）。
3. 标准溶液测定：用移液器取不同体积的标准溶液，分别加入比色皿中，重复步骤2，记录吸光度值。
4. 待测溶液测定：用移液器取少量待测溶液，重复步骤2和3，记录吸光度值。
5. 数据处理：以标准溶液的浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
根据待测溶液的吸光度值，从标准曲线上查得待测溶液的浓度。
五、实验结果与讨论1. 标准曲线：根据实验数据绘制标准曲线，曲线呈线性关系，相关系数R²>0.99，说明实验结果可靠。
2. 待测溶液浓度：根据标准曲线，从待测溶液的吸光度值查得待测溶液的浓度为x mol/L。
3. 误差分析：实验过程中可能存在的误差包括移液器误差、比色皿误差、操作误差等。
通过多次重复实验，可以减小误差的影响。
六、结论本实验通过紫外分光光度法测定了待测物质的浓度，结果表明该方法操作简便、准确度高、重复性好，适用于物质的定量分析。
七、注意事项1. 实验过程中应保持比色皿的清洁，避免污染。
2. 严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性。
紫外可见分光光度计检定误差分析及控制
紫外可见分光光度计检定误差分析及控制摘要：紫外可见分光光度计在使用过程中，由于多种原因会引起波长或杂散光检定误差，导致测量结果不准确，为了得到更为准确的实验结果，必须进一步控制紫外可见分光光度计检定误差。
分光光度计广泛应用于食品、化工、环保等各个行业，量大面广，JJG178-2007紫外、可见、近红外分光光度计国家计量检定规程中，规定了检定的具体参数，其中透射比误差是最关键的参数，它的准确与否直接影响仪器的测量准确性。
而透射比滤光片标准物质是目前检定校准各类型分光光度计的主要标准器之一，在一次计量比武中，出现了测量值的异常偏离，经过短时间内两名人员多次重复测量，得到的数据与第一次测量时基本一致。
关键词：紫外可见分光光度计；检定误差；控制引言紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理，利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。
分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
1紫外可见分光光度计检定误差分析1.1波长显示数值误差实际测量波长点调节至0度时，需要将检测物质放置在吸收池中，随后沿着相同波长方向逐个位置点测试物质的透射比例值，最终计算出相应的峰值波长数据。
而波长在实际测量过程中所得的平均数值和标准数值之差被称为波长显示数值差。
1.2透视比例误差技术人员需要在235nm、257nm、313nm波长下，分别矫正仪器设备的0度范围以及满度范围，进一步测量出各标准物质的基础透射比。
紫外可见分光光度计工作时，数据测量的平均数值以及标准值之差一般为透射比例数值误差，为此各个波长透射比所展现的数值误差最大范围则为各个波长段透射比例数值误差。
2紫外可见分光光度计检定误差控制2.1强化检测人员技能提升为进一步提高检测人员的检测技能，确保检测数据的稳定和安全，应不断强化检测人员对检定规程的理论学习，认真学习JJG178—2007《紫外、可见、近红外分光光度计》，并且将理论与实际操作相互结合，积极总结工作中的工作经验和教训，不断提升自身检测水平和处理问题能力，有效防止检测误差性的产生。
紫外分光光度计八大问题分析及解决方案
紫外分光光度计八大问题分析及解决方案一、仪器使用肯定周期后，内部会积累肯定量的灰尘，应由维护和修理工程师或在工程师引导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘工作，同时将各发热元件的散热器重新紧固，对光学盒的密封窗口进行清洁，必须时对光路进行校准，对机械部分进行清洁和必须的润滑，后，恢复原状，再进行一些必须的检测、调校与记录。
二、环境中的灰尘和腐蚀性气体亦可以影响机械系统的快捷性、降低各种限位开关、按键、光电偶合器的牢靠性，也是造成必须学部件铝膜锈蚀的原因之一、因此必须定期清洁，保障环境和仪器室内卫生条件，防尘。
三、温度和湿度是影响仪器性能的紧要因素。
他们可以引起机械部件的锈蚀，使金属镜面的干净度下降，引起仪器机械部分的误差或性能下降；造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀，产生光能不足、杂散光、噪声等，甚至仪器停止工作，从而影响仪器寿命。
维护保养时应定期加以校正。
应具备四季恒湿的仪器室，配置恒温设备，特别是地处南方地区的试验室。
可见分光光度计可做定量分析、纯度分析、结构分析和定性分析，在制药、食德性业中的产品质量掌控、各级药检系统的产品质量检查中更是必备的分析仪器.可见分光光度计，不同型号的仪器，基本上均由五大部分构成：光源、单色器、汲取池、检测系统、显示系统。
1、光源：可见光区通常使用6～12v低压钨丝灯作为光源，其发射波长为360～1100nm，近紫外光区常采纳氢等或氙灯产生的200～375nm的连续光谱作为光源。
2、单色器：即将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。
单色器重要是由棱镜或光栅等色散元件及狭缝和透镜等构成。
3、汲取池：汲取池是用于盛装被测量溶液的装置。
一般可见光区使用玻璃汲取池紫外光区使用石英汲取池。
紫外可见分光光度计常用的汲取池规格有0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm、5.0cm等使用时，依据实际需要选择。
4、检测器：检测器是将光信号变更为电信号的装置。
常用的检测器有硒光电池、光电管、光电倍增管和光电二极管阵列检测器。
紫外可见分光光度计 普析
紫外可见分光光度计普析紫外可见分光光度计（UV-Vis spectrophotometer）是一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、生物、环境等领域的研究和实验中。
本文将从紫外可见分光光度计的原理、应用以及操作步骤等方面进行介绍。
一、紫外可见分光光度计的原理紫外可见分光光度计是利用物质对紫外可见光的吸收特性进行定量分析的仪器。
根据光的波长范围，可分为紫外光区和可见光区两部分。
紫外光区的波长范围为200-400 nm，可见光区的波长范围为400-800 nm。
紫外可见分光光度计的工作原理是通过光源产生的光经过样品后，被光电二极管或光电倍增管接收，形成光谱图，再通过计算机进行数据处理和分析。
在分析过程中，样品溶液的吸收特性会使光强发生变化，根据吸光度与物质浓度之间的线性关系，可以通过测量吸光度来确定物质的浓度。
二、紫外可见分光光度计的应用紫外可见分光光度计在科研和实验中有着广泛的应用。
以下是其中几个常见的应用领域：1. 生物化学分析：紫外可见分光光度计可用于蛋白质、核酸、酶等生物大分子的浓度测定和纯度分析，如蛋白质含量的测定、核酸的纯度检测等。
2. 药物分析：紫外可见分光光度计可用于药物的含量测定、质量控制和稳定性研究，如药物溶液的吸光度测定、药物的光解动力学研究等。
3. 环境监测：紫外可见分光光度计可用于水质、大气和土壤等环境样品的污染物分析和监测，如水中重金属离子的测定、大气中挥发性有机物的测定等。
4. 食品安全检测：紫外可见分光光度计可用于食品中添加剂、农药残留、重金属等有害物质的检测，如食品中硝酸盐含量的测定、食品中防腐剂的测定等。
三、紫外可见分光光度计的操作步骤使用紫外可见分光光度计进行实验时，需要按照以下步骤进行操作：1. 打开仪器电源，并预热一段时间，使光源和光电二极管稳定工作。
2. 根据实验需要选择合适的光源和检测器，设置光的波长范围。
3. 取一定量的样品溶液，注入样品池中，并调节样品池的位置，使光线通过样品溶液。
紫外可见分光光度计实验报告
紫外可见分光光度计实验报告实验目的：1.学习操作紫外可见分光光度计，并了解其原理和使用方法。
2.通过测量不同溶液的吸光度，了解溶液的浓度与吸光度之间的关系。
3.掌握分光光度计的标定方法。
实验原理：紫外可见分光光度计是一种常用的光谱仪器，可用于测定溶液吸光度。
其原理是通过将入射光分光为不同波长的光束，经过被测溶液后，测量出透射光强度与入射光强度的比值，即吸光度。
吸光度与溶液浓度之间通常存在一定的线性关系。
实验步骤：1.打开紫外可见分光光度计的电源，待仪器启动后进行预热。
2.调节光电倍增管的位置，使得入射光线居中。
3.根据实验要求选择合适的波长范围和检测波长。
4.调节样品舱盖，将待测样品放入样品舱内。
5.按下“调零”按钮，将吸光度调零。
6.按下“测量”按钮，记录下测量的吸光度数值。
7.将待测样品取出，用试剂喷洒清洗样品舱。
8.重复步骤4-7，测量其他样品的吸光度。
实验结果与讨论：1.测量了一系列浓度不同的对苯二酚溶液的吸光度，并绘制了吸光度与浓度之间的曲线。
通过拟合可以得到该溶液的吸光度与浓度的线性关系，这为后续测量其他溶液的浓度提供了基础。
2.在测量过程中，注意避免样品舱残留上一次测量的溶液，以免影响测量结果。
3.在选择波长时，应根据被测样品的特性和需要，选择合适的波长范围和检测波长，以提高测量精度。
实验体会：通过这次实验，我初步掌握了紫外可见分光光度计的使用方法和原理，了解了溶液浓度与吸光度之间的关系。
实验中需要注意操作的细节，如样品舱的清洗、选择合适的波长等。
在实验过程中，我也遇到了一些问题，但在指导老师的帮助下，逐渐解决了这些问题。
总的来说，这次实验对我深化了对光谱仪器的理解，并提高了我的实验操作能力。
紫外可见分光光度计光度准确度分析
紫外可见分光光度计光度准确度分析王 慧 三明市计量所摘 要：紫外可见分光光度计（UVS）作为集光、机、电、计算机为一体的密集高科技产品，具有多种性能指标，其中根本性的技术指标为光度准确度（PA）。
基于此，对紫外可见分光光度计光度准确度分析极为重要。
本文主要从PA的表征方法、层级间的影响因素，对紫外可见分光光度计光度准确度进行分析。
希望通过本文分析，为相关人员进行紫外可见分光光度计检定提供借鉴。
关键词：紫外可见分光光度计 光度准确度一、引言紫外可见分光光度计（UVS）作为集光、机、电、计算机为一体的密集高科技产品，历史悠久、使用最多，且覆盖面最广。
PA作为UVS的根本性技术指标，与测量数据的准确性、可靠性等密切相关。
目前，国际上存在数百家企业从事UVS生产，但基于PA技术指标的具体数据，在准确性方面还存在很多问题。
基于此，本文主要从仪器学理论角度，分析PA的表征方法、层级间的影响因素，进而分析紫外可见分光光度计的光度准确度。
希望通过本文分析，为相关人员进行紫外可见分光光度计检定提供借鉴与参考。
二、PA的检定方法1.PA表示方法。
现今，国际上关于PA的表示，主要通过透射比误差（ΔT）或者是吸光度误差（ΔA），有的厂商同时给出ΔT与ΔA，有的厂商只给其中一个。
这两种表示方式，在规则上都被允许，但实践证明，同时给出ΔT与ΔA的UVS中，几乎都是错误的。
这主要由于ΔT是在整个T值范围内无法做到与ΔA一致。
规程是用透射比误差（ΔT）表示PA。
2. PA检定方法。
基于UVS的PA检定，所选用的材料都是高纯度、高稳定性的物质，其中在碱性溶液中通常选用铬酸钾，在酸性溶液中选用重铬酸钾。
基于碱性溶液中的铬酸钾，在存储时，不能存放在玻璃容器中，最好存放在石英器皿中。
许多学者认为利用紫外滤光片进行检定，具有较好的稳定性以及便于携带的优点。
基于UVS的PA检定方法，目前还没有统一的标准，譬如，美国国家标准规定：选择合适的标准参比材料，在规定的波长位置，连续测量10个吸光度或者是透射比读数，取这10个数的平均值，并将实际吸光度或透射比与观测值的平均值做差，所获得的值则是PA。
紫外可见分光光度分析法
第9章紫外-可见分光光度分析法紫外-可见分光光度分析法原理紫外-可见分光光度法是利用物质的分子对200～800nm光的吸收特性进行分析测定的方式。
紫外-可见分光光度分析法的应用超级普遍，因为它具有以下特点。
①灵敏度高，测定下限可达10-8.②选择性好，可在多种组分共存的溶液中，不经分离而测定某种欲测定的组分。
③通用性强，用途普遍。
大部份无机元素都可用分光光度分析法测定，许多有机化合物的官能团，和某些平稳常数、配位数等，也可用分光光度分析法测定。
④设备和操作简单，分析速度快。
⑤准确度较好，通常相对误差为2﹪～5﹪，适用于微量组分的测定。
物质对光的吸收⑴光的颜色与波长光是一种电磁辐射，在同一介质中直线传播，而且具有恒定的速度。
光具有必然的波长和频率，人们眼睛能感觉到的光是可见光，它只是电磁辐射中的一小部份。
各类颜色光的近似波长范围列于表9-1.⑵光的色散与互补当一束白光通过光学棱镜时，即可取得不同颜色的谱带也叫光谱，这种现象叫光的色散。
白光经色散后成为红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等七色光，说明白光是由这7种颜色的光按必然比例混合而成的，因此叫复合光。
将白光中不同颜色的光彼此分开，即可取得不同波长的单色光。
若是只把白光中某一颜色的光分离出去，剩余的各类波长的光将再也不是白光，而是呈现必然的颜色，这两种颜色称为“互补色”。
例如在白光中分成蓝光，剩余的混合光呈黄色，因此黄色是蓝色的互补色，蓝色也是黄色的互补色。
换句话说，假设两种适当颜色的光，按必然的强度比例混合后能取得白光，这两种颜色的光称为互补色光。
这种色光的互补关系见表9-1。
表9-1 可见光中各类吸收光颜色、波长与物质颜色之间的关系⑶物质的颜色物质呈现的颜色与光有紧密的关系。
物质因此呈现不同的颜色，是由于物质对不同波长的光具有不同程度的透射或反射。
当白光照射到不透明的物质时，某些波长的光被吸收，其余波长的光被反射，人们看到的是物质所反射的光的颜色。
由于色光的互补，因此物质呈现出所吸收光的互补色。
紫外分光光度计实验报告
紫外分光光度计实验报告紫外分光光度计实验报告简介：紫外分光光度计是一种常用的实验仪器，用于测量物质在紫外光区域的吸光度。
本实验旨在通过使用紫外分光光度计，测定不同浓度的对苯二酚溶液在紫外光区域的吸光度，并分析吸光度与浓度之间的关系。
实验步骤：1. 准备工作：将紫外分光光度计打开，并预热一段时间，以确保仪器的稳定性。
2. 校准仪器：使用标准溶液进行仪器校准，确保仪器读数的准确性。
3. 准备样品：按照一定比例配制不同浓度的对苯二酚溶液。
4. 测量吸光度：将样品分别倒入紫外分光光度计的比色皿中，选择紫外光区域进行测量，并记录吸光度值。
5. 绘制标准曲线：根据吸光度与浓度之间的关系，绘制对苯二酚的标准曲线。
6. 测量未知样品：使用相同的方法，测量未知浓度的对苯二酚溶液的吸光度，并利用标准曲线求得其浓度。
实验结果与分析：在本实验中，我们测量了不同浓度的对苯二酚溶液在紫外光区域的吸光度，并绘制了标准曲线。
实验结果显示，对苯二酚溶液的吸光度与其浓度呈正相关关系，即浓度越高，吸光度越大。
这符合兰伯特-比尔定律，即溶液的吸光度与溶液中物质的浓度成正比。
通过标准曲线，我们可以确定未知样品的浓度。
以实验数据为例，我们测得未知样品的吸光度为0.5，通过标准曲线的插值，我们可以得知该样品的浓度为0.2mol/L。
这种通过吸光度和标准曲线来确定物质浓度的方法，被广泛应用于化学和生物学领域。
实验中可能存在的误差主要来自以下几个方面：1. 仪器误差：紫外分光光度计本身存在一定的误差，可能会对测量结果产生影响。
为了减小仪器误差，我们在实验前进行了仪器的校准，并保持仪器的稳定性。
2. 操作误差：在样品制备和测量过程中，操作不当可能会导致误差的产生。
为了减小操作误差，我们在实验中严格按照操作步骤进行，并重复测量以提高结果的准确性。
3. 光线干扰：实验室环境中可能存在光线干扰，如强光的照射或杂散光的干扰，这些因素都可能对测量结果产生影响。
紫外分光光度计分析PPT课件
⑤ 盖上样品盖，拉动拉杆，测量待测液并记录 读数。
⑥ 测量完毕后，取出吸收池，洗净后倒置晾干， 各旋钮归位，关闭电源。
（2）754型紫外-可见分光光度计 ① 开机 打开样品室暗箱盖，接通电源，仪器
进入自检状态，预热20min后，仪器进入工 作状态。
写在最后
成功的基础在于好的学习习惯
The foundation of success lies in good habits
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谢谢聆听
·学习就是为了达到一定目的而努力去干, 是为一个目标去 战胜各种困难的过程,这个过程会充满压力、痛苦和挫折
Learning Is To Achieve A Certain Goal And Work Hard, Is A Process To Overcome Various Difficulties For A Goal
2）在吸收池中装入相同的溶剂，吸光度相同 即可成套，若不同可求出修正值后使用。
分光光度计的使用
（1）721型可见分光光度计 ① 检查各调节钮处于起始位置，接通电源，打
开样品室暗箱盖，预热20min。
② 选择调节至所需用波长，并调节相关波长的 灵敏档。
③ 用调“0”电位器调整电表于T=0%，安放 参比溶液（第一格）和待测液，盖上样品 室盖，拉动拉杆，使参比溶液在光路上时 调节“100%”电位器，使电表指针在 T=100%
第二节 紫外-可见分光光度计
1 仪器的基本组件
五大部件：
光源 单色器
样品装置钨丝灯：最常用的可见光光源，发射波长：
325nm～2500nm；
使用范围：320nm～1000nm。
紫外可见分光光度计实验报告
紫外可见分光光度计实验报告一、实验目的1. 掌握紫外可见分光光度计的基本原理和技术。
2. 了解紫外光、可见光和小分子有机化合物吸收光谱的基本特征。
3. 通过构建标准吸光度 / 标准曲线，掌握测定小分子有机化合物浓度的方法。
二、实验原理及方法1. 实验原理：紫外可见分光光度计是利用小分子有机化合物在紫外光和可见光区吸收光能的特性，通过光谱分析技术测定样品的质量浓度的仪器。
光谱分析技术基于化合物所吸收光的波长，以及被吸收的光的传递程度，根据比色法或色度法计算样品中化合物的浓度。
紫外可见分光光度计、量筒、离心管、吸光度池、样品瓶、试剂瓶、移液器等。
1）制备标准溶液：取0.1g/L的对苯二酚溶液10ml，分别用移液器移取不同的体积转移到标准瓶中，加去离子水至刻度，制备几个不同浓度的标准溶液。
2）构建标准吸光度曲线：对各标准溶液测得其吸光度，根据吸光度值绘制标准吸光度曲线图。
3）测定样品吸光度：将待测样品加入吸光度池中，分别测量在紫外区（200-400nm）和可见区（400-700nm）的吸光度。
4）计算样品浓度：根据样品的吸光度和标准吸光度曲线，计算出样品的浓度。
三、实验结果及讨论实验中，我们首先制备了不同浓度的对苯二酚标准溶液，并构建标准吸光度曲线如下图所示：在紫外区和可见区测量了待测样品的吸光度，记录结果如下表所示：(插入计算样品浓度表格)通过实验数据，我们可以得出以下结论：1. 标准曲线是一条直线，说明样品中对苯二酚的吸光度和浓度成正比关系，符合比色法原理。
2. 样品的吸光度与浓度、光路长度和吸光度系数有关，而对苯二酚的吸光度在紫外区较高，在可见光区较低，符合分子光谱学原理。
3. 由于实验测量误差、环境因素等原因，在实验中尽量减少这些影响，保证数据的准确性，加深对紫外可见分光光度计的认识。
四、实验总结本次实验，我们成功掌握了紫外可见分光光度计的基本原理和技术，并通过构建标准吸光度曲线，掌握了测定小分子有机化合物浓度的方法。
紫外可见分光光度计实验报告
紫外-可见分光光度计(UVPROBE)一(实验目的: 紫外可见分光光度计是一种历史悠久、覆盖面很广、在有机化学、生物化学、药品分析、食品检验、医药卫生、环境保护、生命科学等各个领域的科研、生产工作中都得到了极其广泛的应用。
因此通过此实验，可以了解 UVPROBE 仪器的实验结构和实验原理，简单操作步骤和注意事项，会用光度计仪器来分析样品镀膜的透射率，来达到工作上对镀膜性质分析的需要。
二(实验原理: 物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。
分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
物质在光的照射下会产生对光的吸收效应，而且物质对光的吸收是具有选择性的。
各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱。
因此不同波长的单色光通过溶液时其光的能量就会被不同程度的吸收，光能量被吸收的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也就是紫外可见分光光度法的定量分析基础是朗伯 - 比尔Lambert-Beer定律。
即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比。
三(实验器材: 台式电脑，紫外-可见分光光度计 UV2550，干净的玻璃片，镀膜的玻璃片。
四(实验步骤: 1. 首先打开电源的总开关，然后打开电脑，等电脑待机状态的时候再打开光度计仪器的开关。
2. 要预热五到十分钟，然后打开软件，进入软件的操作界面。
3. 然后初始化，点击菜单的“M” ，在“测定”菜单中中的波长范围中改变参数，开始选择 900，结束选择 300。
然后选择吸收或者透射，点击“baseline”按键，然后点击“connect”按键，开始初始化。
紫外可见分光光度计原理及操作
紫外可见分光光度法的原理及应用原理：紫外可见分光光度法基于物质对紫外-可见光的吸收特性进行测定。
当光线通过样品时，样品中的分子会吸收特定波长的光，从而产生吸收峰。
通过测量样品吸收的光强，可以得到样品在不同波长下的吸光度。
常用的光谱仪器是分光光度计，它能够实现对不同波长光的选择和测量。
应用：1.定量分析：紫外可见分光光度法可以用于定量分析各种物质。
根据比尔定律，吸光度与物质浓度之间存在一定的线性关系，因此可以根据吸光度测量值推算出物质的浓度。
这在医药、环境监测、食品安全等领域中具有重要意义。
2.药物分析：紫外可见分光光度法广泛应用于药物分析中。
例如，可以利用紫外光谱测定药物的浓度、纯度和含量，评价药物的质量。
同时，通过分析药物在不同波长下的吸收特性，可以了解药物的结构和反应机理，为新药的研发提供重要的信息。
3.生化分析：生物体内的很多生物分子都具有紫外可见吸收特性，这使得紫外可见分光光度法成为生化分析中常用的工具。
例如，可以通过测定蛋白质和核酸在特定波长下的吸光度来研究其构象和浓度。
此外，也可以用于测定血液中的代谢产物、激素和维生素等的浓度。
4.环境监测：在环境监测中，紫外可见分光光度法可用于分析水质、空气中的有害物质和污染物。
例如，可以利用其测定水中化学需氧量（COD）、氨氮（NH3-N）和磷酸盐等的浓度。
这对于环境保护和水质安全具有重要意义。
5.食品检测：紫外可见分光光度法在食品行业中也具有广泛应用。
可以通过测定食品中的营养成分和添加剂的含量来评价食品质量和安全性。
例如，可以测定维生素、氨基酸、酚类和色素等在食品中的含量。
总之，紫外可见分光光度法具有简单、快速、高灵敏度和高选择性等优点，且适用范围广泛。
它在化学、制药、环保、医疗和食品等领域中都有不可替代的地位，对于研究物质性质和反应机理，以及保障人类健康和环境安全都起着重要作用。
紫外可见—分光光度计分析原始记录
紫外可见—分光光度计分析原始记录紫外可见—分光光度计是一种用于分析物质的浓度或反应动力学的常用仪器。
其工作原理是通过测量物质在紫外可见光谱范围内的吸光度来获得分析数据。
而分析原始记录是测量实验中收集到的数据的记录，通常用于后续数据处理和分析。
在进行分光光度计分析时，首先需要准备样品和标准溶液。
样品是要分析的物质，而标准溶液是已知浓度的物质，用来建立浓度和吸光度之间的关系。
然后，将样品和标准溶液分别放入分光光度计的样品池中。
接下来，通过调整分光光度计的波长选择器，选择适当的波长。
不同物质的吸光度峰值出现在不同波长下，因此选择合适的波长可以获得最佳的分析结果。
然后通过设置检测器的初始值，并对零点进行调整。
这是为了确保在测量过程中减少误差。
通常，将未经处理的纯溶剂或空的样品池用作参照物，并将其吸光度设置为零。
接下来，可以开始记录吸光度数据。
通过启动分光光度计的数据记录功能，仪器将会持续记录样品和标准溶液的吸光度值。
通常，需要在一定时间间隔内记录一系列数据点，以获得反应的动力学信息。
在记录数据过程中，需要定期检查仪器的稳定性。
例如，可以随机选择一些标准溶液进行测量，以检查其吸光度是否与已知值相符。
如果不符合预期，可能需要重新校准仪器。
完成测量后，可以导出原始记录。
原始记录通常以表格或图形的形式呈现。
对于每个测量点，包括波长、时间和吸光度值。
如果有多个样品或标准溶液，可以分别列出各自的数据。
在分析原始记录时，通常需要进行数据处理，例如绘制标准曲线、计算吸光度差、计算浓度等。
这些处理步骤可以帮助确定样品的浓度或反应的速率。
总结起来，紫外可见—分光光度计分析原始记录是通过测量物质在紫外可见光谱范围内的吸光度来获得实验数据的记录。
这些记录可用于后续数据处理和分析，以得出分析物质的浓度或反应动力学等信息。
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吸收池
按材质一般分为： 玻璃：用于可见光，波长范围：400nm～ 2000nm。
石英：可用于紫外光、可见光和红外光， 波长范围：180nm～3000nm。 一般配有盖子，价格较贵。
按规格一般分为： 0.5cm 1.0 cm 2.0 cm 3.0 cm 5.0 cm
使用时注意： ⅰ使用前后彻底清洗，尤其对于有附着的液体 需用合适的溶剂洗涤。
③ 调节波长旋钮，选择所需用的单色波长。
④ 按“100%”键，仪器显示T=0.0。 ⑤ 放入参比溶液和待测液后，盖上样品室盖， 将参比液推入光路，按“100%”，仪器显示 为100，测量待测液后打印出数据。
⑥ 测量完毕后，取出吸收池，洗净后倒置晾 干，关闭电源。
5 分光光度计的维护和保养
（1）仪器工作环境 仪器应安放在稳固的工作台上，避免周围有强 磁场。室内温度：15-28℃，相对湿度： 45%-65%，室内不宜有腐蚀性气体，不宜光 线过强。
对单色器的分辨率起重要作用，它对单色 光的纯度在一定范围内起着调节作用。
准直和汇聚系统 准直装置：把入射光束转化为平行光束。
汇聚装置：把色散后的光束按波长不同进行汇 聚。
色散元件 是单色器的关键部分。
作用：使不同波长的光以不同的角度传播，从 而使复合光分解为单色光，按一定的波长顺 序排列。
单色器 分类 棱镜 单色器
光电管 按光敏材料不同分为： 蓝敏：可用波长210nm-625nm
光电管示意图
红敏：可用波长625nm-1000nm 优点：灵敏度高，光敏范围广，不易疲劳。
光敏倍增管 常用于检测弱光。 优势：响应速度快，灵敏度高，比一般光电 管高200倍 目前紫外-可见分光光度计广泛使用光电倍 增管作为检测器
光电倍增管示意图
双波长分光光度计 特点：可测定高浓度、多组分混合试样，浑 浊试样；精确度高，操作简单。 缺点：价格昂贵
分光光度计的检验
1 指示波长准确度的检验 检验原因：使用过程中，由于振动、温度变 化 、灯座松动、更换灯泡等原 因，出现仪器指示波长与实际波 长出现不符。，导致检测结果不 准确。
检验方法： 可见分光光度区：绘制镨钕滤光片的吸收 光谱曲线。
ⅱ严禁用手触摸透光面，用镜头纸或绸布擦拭 透光面。
ⅲ严禁加热烘烤。
ⅳ样品用量以吸收池的4/5为宜，使用挥发性溶 剂时加盖。
ⅴ凡含腐蚀玻璃物质的溶剂，不得长时间盛放 在吸收池中。(F-、H3PO4)
检测器
又称为接收器，作用是对透过吸收池的光做出 响应，并把它转变成电信号输出，其输出的 电信号大小与透过光的强度有对应的函数关 系。
准直和汇聚 装置 透镜
色散元件
原理
棱镜
折射
光栅 单色器
反射镜
光栅
干涉 衍射
杂散光： 无论何种单色器，出射光光束常混有少量与 仪器指示波长不同的光。由仪器器件反射或 尘埃散射形成，会影响吸光度的准确测量。
样品装置
是光与试样相互作用的场所。 包括样品室、池架、吸收池等。
吸收池:又叫比色皿，一般为长方体，用于盛放 待测液和决定液层厚度的器件。池底和两侧 为毛玻璃，另两面为光学透光面。
分光光度计的使用
（1）721型可见分光光度计 ① 检查各调节钮处于起始位置，接通电源，打 开样品室暗箱盖，预热20min。
② 选择调节至所需用波长，并调节相关波长的 灵敏档。
③ 用调“0”电位器调整电表于T=0%，安放 参比溶液（第一格）和待测液，盖上样品 室盖，拉动拉杆，使参比溶液在光路上时 调节“100%”电位器，使电表指针在 T=100% ④重复打开样品盖调“0”和盖上样品盖 “100%”，直至仪器稳定。
（2）仪器保养 ① 电压 一般为220V，在电压波动较大的实验 室，最好有稳压器。 ② 光源 在不用时不要开光源灯，延长光源的使 用寿命。要注意及时更换光源不稳的灯泡， 更换时不要直接用手接触，以免沾上油污。
③单色器 勿擅自拆开单色器密封盒，并经常更换 单色器盒的干燥剂。 ④吸收池 注意保护吸收池的光学表面。 ⑤光电器件 注意光电器件的受潮积尘，避免强光照 射。
第二节 紫外-可见分光光度计
主讲：陈小蒙
1 仪器的基本组件
五大部件： 光源
单色器
检测器
样品装置
信号显示器
光源
1 可见光光源 钨丝灯：最常用的可见光光源，发射波长： 325nm～2500nm；
使用范围：320nm～1000nm。
卤钨灯：在钨丝中加入适量的卤化物或卤素。 具有较长的寿命和高的发光效率。Fra bibliotek信号显示器
1 以检流计或微安表为指示仪表。 标尺分上下两部分：上半部分是透光度T 下半部分是吸光度A 2 数字显示和自动记录型装置。 直接数字显示可避免人为误读。
紫外-可见分光光度计类型及特点
按使用波长范围可分为 1 可见分光光度计 ：400nm-780nm
2 紫外-可见分光光度计：200nm-1000nm 3 紫外分光光度计： 200nm-400nm
⑤ 盖上样品盖，拉动拉杆，测量待测液并记录 读数。
⑥ 测量完毕后，取出吸收池，洗净后倒置晾干， 各旋钮归位，关闭电源。
（2）754型紫外-可见分光光度计 ① 开机 打开样品室暗箱盖，接通电源，仪器 进入自检状态，预热20min后，仪器进入工 作状态。 ② 选择光源 仪器开启后，钨灯即亮，若使用 紫外区则需打开氘灯。
2 紫外光光源： 多为气体放电光源：氢灯、氘灯。
氘灯光强比同功率的氢灯要大3-5倍，寿命比 氢灯长，在紫外光区广泛使用。
单色器
定义：将光源发出的光分离成所需要的单色光 的器件称为单色器。 它是分光光度计的心脏部分。
构成：由狭缝、准直装置、色散元件、透镜 等构成。
狭缝 可分为：入射狭缝和出射狭缝
检测器分类 光电检测器：基于光电转换原理。分为：光 电池、光电管等 热电检测器：一般用于红外，红外光子能量 较弱，不易引发光电子。 其他检测器
光电池 表层：导电性能良好的 可透光金属薄膜
中层：具有光电效应的半 导体（硒、硅等） 底层：铁片或铝片， 称为基体
光电池优点：不需要外界电源，不需要放大 装置就可直接测量电流。 光电池缺点：1不适宜使用一般直流放大器， 故不适合较微弱光的测量 2光照时间太久会产生“疲劳”， 失去响应，不宜连续使用2小 时以上
紫外-可见分光光度计类型及特点
单光束分光光度计
单波长分光光度计
分类 双波长分光光度计 双光束分光光度计
单波长单光束分光光度计 光源发出的光经过单色器后，轮流通过 参比溶液和样品溶液进行测定。 721型、754型 结构简单，误差大，操作繁琐，用于定 量分析。
单波长双光束分光光度计 特点：能连续改变波长，自动比较样品和参 比溶液的透光强度，自动消除光源强 度引起的误差 适用：在较宽波长范围内获得复杂的吸收光 谱曲线的分析
紫外光区：绘制苯蒸气的吸收光谱曲线。
2 透光度准确度的检验 3 杂散光的检验 4 分辨率的检验 5基线稳定度和平直度的检验
6 吸收池配套性检验 方法： 1）以其中一个吸收池为参比测量其它各池的 透光度，其结果偏差小于0.5%的吸收池为 一套。 2）在吸收池中装入相同的溶剂，吸光度相同 即可成套，若不同可求出修正值后使用。