抗核抗体ANA检测与临床应用
ANA、ANCA检测及临床应用
干燥综合征 （Sjögren‘s Syndrome）
SS特异性指标
Characteristic Antibodies SS-A SS-B 40-95% 40-95%
Ro-52抗体与SS
疾病 干燥综合征 系统性硬化症 肌炎 SLE MCTD RA n 88 81 26 210 21 165 抗Ro-52 阳性 81 % 28 % 31 % 38 % 19 % 5 %
SLE相关自身抗体检测的意义
自身抗体能被检测到的时间越早，提示这种抗体对早期预 防的意义越大。
自身抗体按照一定的时间顺序依次出现，可以作为反映疾
病进程的标记物。SLE自身抗体产生至少经历三个时期：
1）无临床症状，无自身抗体；2）无临床症状，但实验室检
查能发现自身抗体，如ANA，SSA等；3）导致疾病的特异性 自身抗体产生，如dsDNA,Sm等。 SLE抗体的检测应该保持连续性，才能实现有效预防自身抗 体对受累器官和疾病表型的预测。
某些自身抗体对自身免疫疾病发病有预警价值
ANA检测的临床意义
系统性红斑狼疮 活动期 非活动期 药物诱导的红斑狼疮 混合性结缔组织病（MCTD、Sharp综合征） 类风湿性关节炎
进行性系统性硬化症
多发性肌炎及皮肌炎 干燥综合征 慢性活动性肝炎 溃疡性结肠炎 其它风湿病
正常人
ANA阳性率% 95－100 80－100 100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40 26 5-10
局部的血管炎，这是神经精神狼疮的病理基础。
2012年系统性红斑狼疮国际临床合作组 （SLICC）制定的SLE分类标准
临床标准 1 急性皮肤狼疮 2. 慢性皮肤狼疮 3. 口腔溃疡 4. 非疤痕性脱发 5. 2个以上关节炎 6.浆膜炎（胸膜炎或心包炎） 7. 神经（癫痫或精神病） 8 肾脏（尿蛋白/肌酐比值尿蛋白> 0.5g/24h或红细胞管型） 9. 溶血性贫血 10. 白细胞减少症（<4000/ml）1次或 淋巴细胞减少症（<1000/ml）1次 11. 血小板减少症（<100000/ml） 至 少1 次 免疫学标准 1. ANA阳性 2. dsDNA抗体阳性（ELISA法需 两次阳性） 3. Sm抗体阳性 4. 磷脂抗体阳性(狼疮抗凝物或 梅毒血清试验假阳性、或中高 滴度心磷脂抗体（IgA、IgG或 IgM）、或抗β2糖蛋白I（ IgA、 IgG或IgM ）阳性） 5. 补体下降（C3 C4 CH50） 6. 直接Coombs试验阳性（除外 溶血性贫血）
抗核抗体的检测及医学意义
抗核抗体的检测及医学意义抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称。
ANA的性质主要是IgG，也有IgM、IgA 和IgD，其无器官和种属特异性，故该类抗体可与所有动物的细胞核发生反应。
迄今已有二十余种抗核内不同成分的抗核抗体被相继发现。
ANA主要存在于血清中，也可存在于胸水、关节滑膜液和尿液中。
ANA在未治疗的SLE 患者中的滴度较高，在大多数自身免疫性疾病中均可呈阳性，如SLE、R A、混合性结缔组织病（M CTD ）、干燥综合征（SS）、硬皮病、慢性活动性肝炎，正常老年人也可有低滴度的ANA。
ANA阳性并不一定患有自身免疫性疾病。
由于细胞核成分的复杂性，不同成分的抗原性不同，因此可产生多种类型的ANA，在其众多类型中，作为针对某一特定核成分的个别抗体，只在某一疾病中出现，成为诊断该疾病的血清标志性抗体。
各种ANA在不同的自身免疫性疾病中出现不同组合，可形成各种疾病或疾病亚群的特征性抗体谱。
因此，总的ANA检测在临床诊断与鉴别诊断中是一个极为重要的筛选试验，ANA阳性者进一步检测各亚类ANA抗体对明确诊断、临床分型、病情观察、预后及治疗评价都具有重要意义。
目前按细胞内分子理化特性与抗原分布部位将ANA分为四大类，即抗DNA抗体；抗组蛋白抗体；抗非组蛋白抗体和抗核仁抗体，每一大类又因不同的抗原特性再分为许多亚类。
在临床检测中ANA的命名通常按以下三种方式进行：1．根据抗原的化学名称命名如抗dsDNA、抗RNP、抗DNP抗体。
2．以第一位检出该抗体的患者命名如抗S m、抗Ro、抗La 抗体。
3．以相关疾病命名如抗SSA、抗SSB 抗体。
常见的AN A 荧光图形及临床意义1．均质性（homogeneous，H ）细胞核均匀着染荧光，有些核仁部位不着色，分裂期细胞染色体可被染色出现荧光。
与均质型相关的自身抗体主要有抗不溶性DNP，抗组蛋白抗体，抗dsDNA 抗体也可产生均质性。
抗核抗体和抗核抗体谱联合检测在自身免疫性疾病诊断和筛查中的应用价值
抗核抗体和抗核抗体谱联合检测在自身免疫性疾病诊断和筛查中的应用价值目的：探讨抗核抗体（ANA）和抗核抗体谱（ANAs）联合检测在自身免疫性疾病诊断和筛查中的应用价值。
方法：回顾性分析2014年1月-2015年1月本院门诊和住院部已确诊的80例自身免疫性疾病（AID）患者的临床资料，并选取20例健康体检者作为对照组。
ANA检测采用酶联免疫吸附试验（ELISA），而ANAs检测采用免疫印迹法（IBT），统计分析各检测结果及其相互关系。
结果：ANA在各种AID中均有一定的阳性检出率，以在系统性红斑狼疮（SLE）的阳性率最高，为93.75%；而ANA在类风湿性关节炎（RA）、干燥综合征（SS）、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、混合性结缔组织病（MCTD）、系统性硬化病（PSS）及对照组中的阳性率分别为25.00%、66.67%、50.00%、62.50%、50.00%和0；ANAs中的自身抗体在不同AID中均有不同的阳性检出率。
结论：ANA 敏感性好，但缺乏特异性，可作为AID的初筛试验，而ANAs中的自身抗体在不同的AID中有不同的阳性检出率，特异性好。
两者联合检测在AID诊断中具有互补性，可提高阳性检出率，对AID的诊断有着重要的临床意义。
自身免疫性疾病（AID）是指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病，临床表现为器官特异性自身免疫病和系统性自身免疫疾病。
研究显示，抗核抗体（ANA）对很多AID均有一定的诊断价值，酶联免疫吸附试验（ELISA）是常用的ANA筛查方法，操作简单快捷，重复性好，且还能避免人为主观判断的影响[1]。
近年来，随着免疫印迹法（IBT）的推广应用，抗核抗体谱（ANAs）检测应用于AID诊断和筛选的热点已受到广泛的关注[2]。
本研究旨在探讨ANA和ANAs联合检测在AID诊断和筛查中的应用价值，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料回顾性分析2014年1月-2015年1月本院门诊和住院部已确诊的80例AID患者的临床资料，其中男31例，女49例，年龄4～79岁，平均（43.52±1.02）岁，系统性红斑狼疮（SLE）32例，类风湿性关节炎（RA）28例，干燥综合征（SS）6例，特发性血小板减少性紫癜（ITP）2例，混合性结缔组织病（MCTD）8例，系统性硬化病（PSS）4例。
抗核抗体谱检测的临床意义
抗核抗体谱检测的临床意义抗核抗体谱检测是一种重要的免疫学检查方法，用于评估人体对自身细胞核成分的免疫反应。
该检测可检测多种抗核抗体，包括ANA（抗核抗体）、dsDNA（双链DNA抗体）、Sm（Sm抗体）、SSA/Ro（Sjögren综合征A/Ro抗体）和SSB/La（Sjögren综合征B/La抗体）等，对于自身免疫性疾病的诊断和治疗具有重要的临床意义。
1.早期诊断自身免疫性疾病：自身免疫性疾病是一类由机体免疫系统异常激活导致的疾病，如红斑狼疮、系统性硬化病、干燥综合征等。
这些疾病早期症状不典型，且病情发展较缓慢，常常导致延误诊断。
抗核抗体谱检测可以早期发现上述自身免疫性疾病相关的抗体异常，从而有助于早期诊断和治疗。
2. 疾病评估和监测：抗核抗体谱检测可用于评估自身免疫性疾病的病情严重程度和预后情况。
例如，在红斑狼疮患者中，高滴度的ANA和dsDNA抗体与疾病的活动性和严重程度相关。
通过定期检测抗核抗体水平的变化，可以及时调整治疗方案，监测疾病进展。
3.辅助诊断其他疾病：除了自身免疫性疾病，抗核抗体谱检测还可用于辅助诊断和鉴别其他疾病，如结缔组织病、肝病、肾脏疾病、甲状腺疾病等。
抗核抗体谱检测可以发现这些疾病患者中存在的抗核抗体异常，有助于快速确定疾病类型和定制相应的治疗方案。
4. 产前筛查：抗核抗体谱检测可用于孕妇产前筛查先天性心脏传导阻滞和小儿系统性红斑狼疮的风险。
抗SSA/Ro和抗SSB/La抗体阳性的孕妇生下的胎儿可能会出现心脏传导阻滞，而抗dsDNA抗体阳性的孕妇可能会生下患有系统性红斑狼疮的婴儿。
早期发现并跟踪这些孕妇的抗核抗体谱异常，有助于预防并管理这些婴儿的疾病。
总之，抗核抗体谱检测在临床中具有广泛的应用价值。
它可以提供自身免疫性疾病的早期诊断、疾病评估和监测，辅助诊断其他疾病，以及进行产前筛查等。
对于患者的个性化治疗和预后评估都有重要的临床意义。
随着技术的不断发展和研究的深入，未来抗核抗体谱检测的应用前景将更加广阔。
抗核抗体(ANA)检测与临床应用
临床发病特点
发病率: 40/100,000(北欧);200/100,000(黑人);250,000 (美国)
患者寿命:4年/50%(1950); 15/80%(当前); 20岁诊断/35岁死亡几率1:6
SLE—各器官的表现
神经系统受累（30%） 皮肤（蝴蝶状皮疹, 盘状狼疮; 74%）)
浆膜炎（胸膜炎, 心包炎； 77%）) 狼疮肾炎 (51%）
HEp-2细胞/猴肝
HEp-2细胞
猴肝
SS-A抗原
RNA + SS-A (60 kDa) + Ro-52
RNA + SS-A (60 kDa)
hY-RNA
hY-RNA
Boire et al., 1995: - Ro-52抗体不与SS-A 抗原结合 - 纯化的 SS-A 抗原不包含 Ro-52
SS-A(Ro-60), Ro-52, SS-B
ANA检测的临床意义
• ANA可见于多种疾病，特别是结缔组织疾病，常作为结缔组织病的诊 断、病情判断和疗效观察的指标 • 高滴度ANA则高度提示自身免疫性疾病 • 在非结缔组织病中也可出现阳性；正常人中（特别是老年人）也可出 现阳性，但滴度低
目前，ANA检测已成为临床上的一个极重要的自身免疫病的筛查实验。
抗Ro-52抗体
风湿性疾病中的阳性率
疾病 干燥综合症 系统性硬化症 肌炎 SLE MCTD RA n 88 81 26 210 21 165 抗Ro-52抗体阳性 81 % 28 % 31 % 38 % 19 % 5%
抗Ro-52抗体 在干燥综合症中阳性率较高，但没有疾病特异性
Meyer, Schlumberger et al., 4th Asian Congress on Autoimmunity, Singapore, Sept. 2009
抗核抗体检测的临床应用
三、ANA检测方法
ANA特异性自身抗体可采用多种免疫学方法检测，不同的检测方法具有 不同的临床应用优缺点。
ELISA具有高敏感性、定量及易自动化的优点，但需对每个自身抗体进 行逐项检测。
线性免疫印迹法(line immunoassay, LIA)具有高敏感性、易操作、易自动 化及一次实验操作可同时检测多种自身抗体的优点，但其检测结果为半 定量，某些自身抗体的特异性偏低。
二、ANA检测的临床应用范围
ANA作为AID重要的生物学标志，常见于SLE、干燥综合征(Sjögren′s syndrome，SS)、系统性硬化症(systemic sclerosis，SSc)、混合性结缔组织 病(mixed connective tissue disease，MCTD)及多发性肌炎(polymyositis， PM)/皮肌炎(dermatomyositis，DM)等系统性(非器官特异性)AID患者。
IIF-ANA检测结果判读及报告人员应有培训、考核及定期进行结果判读比 对。
采用ELISA等其他检测方法的ANA检测结果应包括检测结果的定量数值 和单位、参考区间及必要的临床建议。
ANA针对靶抗原的特异性自身抗体检测结果报告应包括检测方法、定性 结果(若为定量检测方法应包含定量数值和单位)及参考区间，同时应包括 必要的临床建议。
自身抗体检测实验室的ANA结果报告形式基于ANA的最新定义，将HEp2细胞胞浆荧光模型及细胞有丝分裂期荧光模型纳入ANA阳性结果。其报 告格式范例见表1。
五、ANA检测结果报告
六、临床意义及解读
IIF-ANA检测结果报告应包括：检测方法、定性结果(阳性/阴性)、荧光模 型、滴度及必要的临床建议。对于混合荧光模型，荧光模型的报告优先 级顺序为细胞核荧光模型、细胞浆荧光模型、细胞有丝分裂期荧光模型。 相同优先级的荧光模型，建议按滴度高低顺序依次报告。
自身免疫病的研究进展：ANA检测技术
自身免疫病的研究进展：ANA检测技术在自身免疫病的研究进展中，ANA检测技术起到了举足轻重的作用。
自身免疫病是一类免疫系统错误地攻击身体的正常组织的疾病，如系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎等。
ANA检测是自身免疫病诊断的重要手段之一，它可以帮助医生发现和确诊这些疾病，从而及时采取治疗措施。
ANA是抗核抗体的简称，是一种针对细胞核成分的自身免疫抗体。
ANA检测是通过检测血液中的ANA抗体来进行的。
ANA抗体的存在提示身体的免疫系统可能出现了问题，可能正在攻击自身的组织。
ANA检测不仅可以帮助医生诊断自身免疫病，还可以帮助医生判断病情的严重程度和治疗的效果。
在实际应用中，ANA检测技术已经取得了显著的进展。
ANA检测技术的灵敏度和特异性越来越高，可以帮助医生更准确地诊断自身免疫病。
ANA检测技术的发展也使得检测时间越来越短，患者不需要长时间等待结果。
ANA检测技术的应用范围也在不断扩大，不仅可以用于诊断自身免疫病，还可以用于评估疾病的进展和治疗的效果。
让我举一个例子来说明ANA检测技术在实际应用中的重要性。
假设有一个女性患者出现了疲劳、关节疼痛和皮肤红斑等症状，医生怀疑她可能患有系统性红斑狼疮(SLE)。
为了确诊，医生对她进行了ANA检测。
结果显示，她的ANA抗体呈阳性。
这个结果提示她的身体可能正在攻击自身的组织，支持了医生对SLE的诊断。
根据这个结果，医生可以及时为她制定治疗方案，帮助她控制病情，提高生活质量。
重点和难点解析：在上述内容中，有几个重点细节需要特别关注。
ANA检测技术的灵敏度和特异性是诊断自身免疫病的关键。
ANA检测技术的发展对疾病的早期发现和治疗具有重要意义。
ANA检测技术的实际应用案例也凸显了其重要性。
下面我将对这些重点细节进行详细补充和说明。
ANA检测技术的灵敏度和特异性是诊断自身免疫病的关键。
灵敏度指的是检测技术能够准确识别出ANA抗体的能力，而特异性指的是检测技术能够排除其他非自身免疫疾病的ANA抗体。
ANA及ANA谱联合检测在自身免疫性疾病中的临床价值
３ 讨 论
近年来 ，Ａ Ｉ Ｄ发病率呈 明显上升趋势 ，其 总
体 发病 率 占世 界 人 口的 ３ ． ０ ％～ ５ ． ０ ％。ＡＮ Ａ在 多种 Ａ Ｉ Ｄ中呈 不 同程 度 的 阳性 ，因 此 常 将 Ａ Ｎ Ａ 的检
测作为 Ａ Ｉ Ｄ的重要筛选试验。 间接免疫荧光（ Ｉ Ｆ Ａ）
・
９ ０ ８・
表１ １ ９ ８ ￣Ａ Ｉ Ｄ 患者血清Ａ Ｎ Ａ 及Ａ Ｎ Ａ 谱检测结果 ［ ｎ（ ％ ）］
尤其是风湿性疾病 ［ 。不 同 Ａ Ｉ Ｄ可形成各种特征
性 的抗核抗体谱 。Ａ Ｎ Ａ及 Ａ Ｎ Ａ谱 的检测为 Ａ Ｉ Ｄ 的早期诊 断、鉴 别诊 断 、疗 效观察 及 临床用 药 提供重要依据 。本文 旨在探讨 Ａ Ｉ Ｄ患者 Ａ Ｎ Ａ及
２ 结 果
２ ． １ Ａ Ｎ Ａ总 体 阳 性 率 在 １ ５ ２ ６例 患 者 中 ， Ａ Ｎ Ａ阳 性 ３ １ ５例 ， 阳 性 率 ２ ０ ． ６ ％， 其 中 男 ３ ５
２ ． ２ Ａ Ｎ Ａ与 Ａ Ｎ Ａ谱检测符合率
６ ８． ９％ 。
在３ １ ５ 例Ａ Ｎ Ａ
阳性患 者 中，Ａ Ｎ Ａ谱检 测 阳性 ２ １ ７ 例 ，符合率 ２ － ３ １ ９ ８ 例Ａ Ｉ Ｄ患者 Ａ Ｎ Ａ谱检测结果 见表 １ 。
其 中男 ３ ５ 例 ，女 ２ ８ ０ 例 。Ａ Ｎ Ａ阳性患者 血清再 进行 Ａ Ｎ Ａ谱 检测 ，阳性 ２ １ ７ 例 ，符 合美 国风湿 病学会 （ Ａ Ｃ Ｒ） 诊断标准的 Ａ Ｉ Ｄ患者 １ ９ ８ 例 ，其 中系统性红斑狼疮 （ Ｓ Ｌ Ｅ） ９ ８ 例， 干燥综合征 （ ｓ ｓ ） ２ ５ 例 ，夏普综合征 （ Ｍ Ｃ Ｔ Ｄ）１ ８ 例 ，类 风湿关节 炎 （ Ｒ Ａ） ３ ２ 例， 多肌炎 ／ 皮肌炎 （ Ｐ Ｍ ／ Ｄ Ｍ） ７ 例， 系统 性硬 化 症 （ Ｓ Ｓ ｃ ）８ 例 ，原 发 性胆 汁性 肝 硬 化
抗核抗体和抗核抗体谱联合检测在自身免疫性疾病诊断中的临床应用
抗核抗体和抗核抗体谱联合检测在自身免疫性疾病诊断中的临床应用(扬州洪泉医院检验科江苏江都 225200) 【摘要】目的：探讨自身免疫性疾病（AID）临床诊断联合应用抗核抗体（ANA）与抗核抗体谱（ANAs）检测的临床价值。
方法：以2018年7月-2019年7月我院收治的844例疑似AID患者为研究对象，全部患者均抽取静脉血液样本测定ANA和ANAs，统计阳性率，基于金标准，评价ANA与ANAs诊断AID准确度。
结果：844例患者中，ANA阳性50例（5.92%），ANAs阳性44例（5.21%），联合阳性42例（4.98%）。
基于金标准，ANA+ANAs阳性诊断AID准确率（97.62%）高于单一ANA阳性（80.0%）和ANAs阳性（86.36%），差异有统计学意义（P＜0.05）。
ANA滴度越大诊断AID准确率越高。
结论：ANA联合ANAs优势互补，诊断AID效果确切，可有效提高诊断准确率，减少漏误诊，值得临床推广使用。
【关键词】自身免疫性疾病；抗核抗体；抗核抗体谱；诊断价值【中图分类号】R821.4+2【文献标识码】A【文章编号】1004-7484（2019）04-0273-01 自身免疫性疾病是机体免疫系统对自身抗原发生免疫应答所引起自身组织相关损害的疾病统称，发病与隐蔽抗原释放、自身抗原改变、免疫调节异常、交叉抗原、遗传等多因素有关［1］。
ANAs是一组细胞内核糖核酸、蛋白等物质及其分子复合物产生的自身抗体，主要存在免疫球蛋白（Ig）G、M中，可以识别多种细胞核组分，在许多AID中有着特征性表达，成为临床诊断此类疾病、评估疗效、判断预后的重要标志物［2］。
既往，临床主要采用ANA进行AID辅助诊断，敏感度高，但特异性不足。
文章现择取我院近年收治病例，分析探讨ANA联合ANAs中其他IgG抗体用于AID诊断的临床价值，以期为临床提供参考，报道如下： 1 资料与方法 1.1 一般资料以2018年7月-2019年7月为时限，择取我院844例疑似AID患者为研究对象。
ANA抗核抗体
抗核抗体自身抗体的血清学检测，包括抗核抗体（ANAs）和特异性核抗原（如双链DNA （dsDNA））的抗体，在全身性风湿性疾病的诊断中发挥重要作用。
然而，单独的自身抗体的测试结果不足以确定全身性风湿性疾病的诊断。
如果没有导致推定诊断的临床评估，则不应进行自身抗体检测。
ANA的最初发现基于间接免疫荧光。
免疫荧光抗体（IFA）仍然是最常用的检测抗核抗体的方法。
在该方法中，将稀释的患者血清在含有单层人上皮细胞的载玻片上孵育。
如果存在抗体，则其与细胞核结合。
洗涤后，通过添加荧光抗人IgG 来检测结合的抗体。
阳性细胞显示出明亮的绿色核荧光，具有明显的染色模式。
最初以1:40至1：160的稀释度测试患者样品。
然后稀释阳性样品并报告荧光图案和滴度。
滴度是仍然显示免疫荧光核染色的最高血清稀释度。
Hep-2细胞是优选的细胞系，因为它们具有人源，高有丝分裂活性和诱导临床上重要抗原表达的能力。
HEp-2细胞估计有100至150种抗原，是所有方法中的大多数，允许检测最大数量的抗体特异性。
四种公认的染色模式是均匀的，斑点的，核仁的和着丝粒的。
以前，尝试将荧光模式与特定疾病相关联。
例如，认为均质模式表明SLE或药物诱导的SLE，核仁模式硬皮病，着丝粒模式CREST综合征和斑点模式多种疾病。
然而，在过去几年中，染色模式的临床重要性已经减弱。
不同的荧光模式和风湿性疾病之间存在相当大的重叠，并且已经可以获得更具体的自身抗体测试。
在20世纪80年代，开发了ANA ELISA筛选。
在该方法中，抗原从细胞中提取或合成，然后固定在微量滴定板的表面上。
将稀释的患者血清加入微孔中并使其孵育。
如果存在ANA，它们与固相抗原结合。
洗涤后，通过添加酶偶联的抗人IgG 抗体检测结合的抗体。
添加无色酶底物，如果存在酶偶联抗体，则将其转化为有色产物。
光度测量颜色强度。
颜色强度超过确定的截止值的微孔被认为是阳性的。
ELISA提供了优于IFA的几个优点，包括更自动化的样品制备和更客观的半定量测量。
ANA的检测及临床应用
精选ppt
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精选ppt
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核仁型
间期细胞核仁阳性、 分裂期细胞浓缩染 色体阴性 靶抗原：Sel-70、 RNA多聚酶
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线粒体型
Hep-2：细胞浆内 粗颗粒样荧光 肝细胞：呈颗粒样 荧光整个视野呈细 沙状荧光 靶抗原：线粒体
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ds-DNA的检测
核 动基体 鞭毛体
以 绿 蝇 短 膜 虫 为 基 质，其动基体有丰富 的 天 然 ds-DNA ， 一 般多以核和动基体同 时阳性出现，可在镜 下绿色荧光的大小点
3. ANA阳性的意义需结合临床资料综合分析，ANA阳 性并不能确立某种临床诊断，反之，ANA阴性也不 能排除自身免疫性病。
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4. IFANA作为总抗体筛查实验，应该结合抗体确认试 验为临床诊断起到更好的指导作用，必要时还应提 供抗体效价。
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抗核抗体的应用
抗U1-rRNP抗体： 高滴度的抗U1-rRNP抗体是混合性结缔组织病（MCTD，夏普综合征）的标志，阳性率95-100%，抗体滴度与疾病活
ANA检测及临床应用
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抗核抗体的定义
传统定义：针对细胞核成分自身抗体的总称。
广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体总称。对ANA的理解不再局限于核成分， 而是抗核酸和抗核蛋白抗体的总称。
ANA的把抗原分布：细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期蛋白等。
ENA：抗可提取核抗原，包括SSA,SSB,Scl-70,Jo-1,Sm,RNP/Sm六种靶抗原。
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粗颗粒
ANA的检测及临床应用ppt课件
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抗核抗体的检测方法
间接荧光免疫法
➢ 具有完整的抗原谱（细胞核和细胞浆） ➢ 检测ANA的金标准，具有很高的特异性跟敏感性 ➢ 基质组合：HEp-2细胞+组织切片
免疫印迹法
➢ 先将混合性抗原做凝胶电泳，分离开不同的区带，然后把区带转印到硝酸纤维膜上，加入待检血清，最后用相应的酶标抗体使 相应的抗原带显色
症中不出现。
抗PM-Scl抗体： 常见于多肌炎与硬化症的重叠综合征中，50%的该抗体阳性患者为肌炎与硬化症的重叠综合征，抗PM-Scl抗体也可见
于单独的多肌炎患者中，阳性率为8%，在弥散型硬化症中的阳性率为2-5%。 抗Jo-1抗体： 见于多肌炎，阳性率为25-35%。常与合并肺间质纤维化相关。
3. ANA阳性的意义需结合临床资料综合分析，ANA阳 性并不能确立某种临床诊断，反ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，ANA阴性也不 能排除自身免疫性病。
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4. IFANA作为总抗体筛查实验，应该结合抗体确认试 验为临床诊断起到更好的指导作用，必要时还应提 供抗体效价。
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抗核抗体的应用
抗U1-rRNP抗体： 高滴度的抗U1-rRNP抗体是混合性结缔组织病（MCTD，夏普综合征）的标志，阳性率95-100%，抗体滴度与疾病活
ANA ANCA检测及临床应用
Interpretation of results: Anti-nRNP/Sm
抗核糖体P蛋白（rRNP）抗体
多见于严重精神病表现的狼疮患者 诊断敏感性20～30%，敏感性低于dsDNA及Sm抗体 特异性较高 用于SLE 诊断时，核糖体P蛋白（P0, P1, P2）联合检
ANA检测的临床意义
系统性红斑狼疮 活动期
非活动期 药物诱导的红斑狼疮 混合性结缔组织病（MCTD、Sharp综合征）
类风湿性关节炎 进行性系统性硬化症 多发性肌炎及皮肌炎
干燥综合征 慢性活动性肝炎
溃疡性结肠炎 其它风湿病
正常人
ANA阳性率% 95－100 80－100
100
100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
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5-10
系统性红斑狼疮SLE
系统性红斑狼疮（SLE）
血清中出现以ANA为代表的多种自身抗体、多系统受累是SLE的两个 主要临床特征
SLE多发于生育年龄的女性，主要在15~45岁年龄段，男、女性比为 １：7—1: 9
肾功能衰竭、感染中枢神经系统损伤是死亡的主要因素。 SLE会引起心脏瓣膜的疣状赘生物，赘生物脱落栓塞在脑血管，形成
报告单解读：ANA和靶抗原结果不一致
ANA阳性，靶抗原阴性？ ANA阴性，靶抗原阳性？
报告单解读：ANA阳性，无相应临床症状
临床症状出现 前9.4年即可检测
到自身抗体！
(The New England J. Med., 349:1526(2003)
报告单解读：ANA阳性，无相应临床症状
1. ANA阳性
2. dsDNA抗体阳性（ELISA法需 两次阳性）
ana检测方法
ana检测方法ANA检测方法。
ANA（抗核抗体）是一种自身免疫性疾病的重要指标，其检测方法对于诊断和治疗自身免疫性疾病具有重要意义。
目前，常用的ANA检测方法包括间接免疫荧光法（IFA）、酶联免疫吸附法（ELISA）和免疫印迹法（immunoblotting）。
下面将分别介绍这几种方法的原理和应用。
首先，间接免疫荧光法（IFA）是目前临床上常用的一种ANA检测方法。
它通过将患者血清标本与细胞基质相结合，然后加入荧光标记的抗人球蛋白抗体，观察是否有荧光信号产生来判断抗核抗体的存在。
这种方法的优点是灵敏度高，能够检测出低滴度的抗核抗体，但缺点是操作复杂，需要专业技术人员进行操作。
其次，酶联免疫吸附法（ELISA）也是一种常用的ANA检测方法。
它利用固相酶标记技术，将抗核抗体与抗原结合后，通过酶标记的二抗结合，再加入底物产生显色反应来检测抗核抗体的存在。
这种方法操作简便，适合于大规模筛查，但灵敏度相对较低，不能检测出低滴度的抗核抗体。
最后，免疫印迹法（immunoblotting）是一种高度特异性的ANA检测方法。
它利用电泳将抗原分离，然后转移到膜上，再加入患者血清标本，通过特异性的抗人球蛋白抗体结合，最终通过显色反应来检测抗核抗体的存在。
这种方法的优点是特异性高，但缺点是操作复杂，需要较长的实验时间。
总的来说，不同的ANA检测方法各有优缺点，医生在选择适合的检测方法时需要根据临床情况和实验室条件进行综合考虑。
未来，随着技术的不断进步，相信会有更加快速、准确的ANA检测方法出现，为自身免疫性疾病的诊断和治疗提供更好的帮助。
ANA检测方法的研究和应用将继续为医学领域带来新的突破和进步。
抗核抗体（ANA）测定的临床意义
抗核抗体（ANA）测定的临床意义来源：hb省人民检验科抗核抗体(ANA)检查是风湿免疫科经常做的一个检查项目，大部分被怀疑风湿病的患者，医生都会给他们开这个检查项目，甚至在一部分健康体检中都会有这个检查项目。
目的就是为风湿病的诊断提供客观依据。
然而，很多人拿到检查报告，看到ANA阳性的结果(1:100、1:320等)，都会不由的开始紧张起来，以为自己一定就是风湿病了。
然而，这并不绝对，还有很多情况可以出现ANA阳性。
什么是抗核抗体ANA?我们都知道，人体的细胞里面有很多成分，包括细胞核、细胞质、细胞器等等。
人体有防御外来敌人(如细菌、病毒)的免疫系统，当敌人来临，人体会产生抗体，去对付敌人，这些抗体是对人有益处的，我们称为保护性抗体。
然而，当人体的免疫系统产生一些针对人体自身组织细胞的抗体，我们称之为自身抗体。
如产生针对细胞核的抗体，我们就称之为抗核抗体(ANA)。
这些抗体往往是自身免疫病(如风湿病)的罪魁祸首。
随着研究的不断深入，我们发现，人体不单会产生针对细胞核的抗体，也会产生针对细胞质或细胞器成分的抗体。
所以，现在我们已经把ANA的概念由原来的细胞核，扩展到了整个细胞，一共分为五大类：抗DNA、抗组蛋白、抗非组蛋白、抗核抗体及抗其他细胞成分抗体。
抗核抗体(ANA)强弱以滴度表示，从低到高依次为1：100(有的更小)、1:320...1:1000、1:3200等。
滴度越高，风湿病的可能性越大。
抗核抗体对于风湿病的诊断是非常重要的，它可以帮助医生更好的诊断疾病。
然而，抗核抗体阳性，就一定是风湿病了吗？未必，ANA阳性可以有以下几种可能：健康人健康人可以出现ANA阳性，阳性率约3%-19%，抗核抗体在健康人群中会受年龄和性别因素影响，老年人、青春期女性以及更年期女性比例更高。
健康人ANA阳性大多以低滴度为主，如1:100或1:320。
高滴度的较少。
风湿免疫疾病ANA阳性我们确实应该首先考虑风湿免疫疾病。
抗核抗体ANA检测与临床应用精品课件(一)
抗核抗体ANA检测与临床应用精品课件(一)抗核抗体ANA检测与临床应用精品课件抗核抗体（ANA）是人体自身免疫系统攻击细胞核中成分而产生的自身抗体，被广泛应用于自身免疫性疾病的检测。
本文将介绍ANA检测与临床应用，带您了解其作用以及如何正确解读结果。
一、ANA检测的作用1.检测自身免疫性疾病ANA是自身免疫性疾病毛囊性松解症、漆黑病、全身性红斑狼疮、系统性硬化症、类风湿性关节炎等常见病的标志性指标，正确地进行血清ANA检测能够筛查出疾病患者并进行早期干预和治疗。
2.指导疾病治疗不同原因引发的ANA阳性病人临床表现不同，如强阳性在临床表现上伴有关节炎、皮肤损伤等，而弱阳性则可能没有明显表现，但可能存在临床亚型或初期症状。
因此，病人的ANA检测结果可以指导医生选用合适的治疗方案。
二、ANA检测指标1.抗核抗体（ANA）在患者血浆中可检测到特异性抗原结合能力的自身抗体，是ANA检测的核心指标。
2.特异抗体可根据临床需要检测泛ANA、ds-DNA、SSA、SSB、Scl-70等特异抗体。
三、检测方法ANA检测采用免疫荧光技术和酶联免疫吸附试验（ELISA）两种方法。
1.免疫荧光技术该技术不同于其他免疫学技术，可以同时检测多种自身抗体，但特异性较低。
2.ELISA该技术不仅可以定量，而且可以在更大规模的人群中使用，是一种常用的定量检测方法。
四、结果解读1.阳性ANA阳性并不一定意味着患有自身免疫性疾病，但是阳性提示需要等待进一步检查以确定疾病类型。
另外，阳性还可能由感染、恶性肿瘤或吸入异物等各种非自身免疫性原因引起。
2.阴性ANA阴性结果的意义也很重要，可以排除自身免疫性疾病的可能性，但并不能完全排除自身免疫性疾病的存在。
结合临床症状及其他实验室指标，医生需要权衡多个因素，确定是否进行进一步检查或治疗。
五、结语ANA检测是临床诊断和治疗自身免疫性疾病的重要指标，但其检测结果需要结合其他临床表现及其他检查来作出合理判断。
抗核抗体的检测及临床应用
抗核抗体的检测及临床应用
郭旭
【期刊名称】《医学理论与实践》
【年(卷),期】2005(18)11
【摘要】自身免疫性疾病是一组多种临床症状重叠的疾病,因大多起病症状不典型,缺乏特异性,临床上极易误诊、漏诊,这组疾病具有明显的体液免疫功能异常,病人机体有多种多样的自身抗体,抗核抗体（ANA）是自身免疫性疾病中很重要的自身抗体之一.笔者对此类患者的抗核抗体（ANA）进行了检测,旨在探讨抗核抗体在结缔组织病中的诊断、鉴别诊断及疗效判断中的价值.现利用组织化学技术,特别是免疫组化技术,使检测同时具备了免疫反应的特异性、组织化学的灵敏性和显微镜的精确性,其检测结果对临床诊断具有较大确定性.
【总页数】1页(P1329-1329)
【作者】郭旭
【作者单位】解放军第252医院检验科,河北省保定市,071000
【正文语种】中文
【中图分类】R446.62
【相关文献】
1.抗核抗体谱的检测在临床应用中的研究进展 [J], 武彩红;银广悦;张继领
2.纳米磁微粒化学发光法定量检测抗核抗体谱的临床应用 [J], 罗宇维;全树绿;张明娇
3.蛋白芯片法在抗核抗体检测中的临床应用 [J], 陈建芸;石玉玲;李林海;黄雪霞
4.多重微球流式荧光免疫技术检测抗核抗体谱的评价与临床应用 [J], 尚晓莹;于腾;孙桂荣;姚远;张丽君;贺侠琴;刘明军
5.抗核抗体和抗核抗体谱联合检测在自身免疫性疾病诊断中的临床应用 [J], 李春江;周玉英;刘艳平;谢瑶;王蕊;刘晓彤
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细胞核
整个细胞，包括细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期蛋白等。
ENA：抗可提取核抗原，包括RNP/Sm, Sm, SS-A, SS-B, Scl-70和Jo-1等 六种靶抗原
抗核抗体ANA检测与临床应用
ANA检测的临床意义
ANA可见于多种疾病，特别是结缔组织疾病，常作为结缔组织病的诊断、 病情判断和疗效观察的指标
高滴度ANA则高度提示自身免疫性疾病 在非结缔组织病中也可出现阳性；正常人中（特别是老年人）也可出现阳
性，但滴度低
目前，ANA检测已成为临床上的一个极重要的自身免疫病的筛查实验。
抗核抗体ANA检测与临床应用
ANA检测的临床意义
系统性红斑狼疮
活动期 非活动期 药物诱导的红斑狼疮 混合性结缔组织病（MCTD、Sharp综合征） 类风湿性关节炎 进行性系统性硬化症 多发性肌炎及皮肌炎 干燥综合征 慢性活动性肝炎 溃疡性结肠炎 其它风湿病
抗原谱完整 (细胞核、细胞浆) 检测ANA的金标准，具有很高的敏感性和特异性 基质组合: HEp-2细胞+灵长类肝
抗核抗体ANA检测与临床应用
EUROIMMUN
HEp-2细胞: 筛查不同的自身抗体
均质型
核点型
着丝点型
核仁型
Scl-70
Sm/RNP
核膜型 核糖体P蛋白
AMA
高尔基体
溶酶体
肌动蛋白
夏普综合征 (MCTD)
RNP
ANCRAAhret相hurmi关taist性o(iRd血Ae 管) 炎
多肌炎/皮肌炎 (PM/DM)
抗核抗体ANA检测与临床应用 Myositis Profile
EUROIMMUN
系统性红斑狼疮 (SLE)
红斑狼疮的特点 临床医生: 容易误诊的一类致死性疾病 免疫学家: 所有免疫系统的要件均参与致病机理产生过程
抗核抗体ANA检测与临床应用
绿蝇短膜虫
抗dsDNA抗体与SLE
高度特异性抗体; 70%患者阳性，0.5%正常人或RA患者阳性 滴度与疾病活动性相关，但不适用于所有患者 抗体滴度上升但临床症状不明显的患者，抗体检测后5年内
80%患者进入活动期
抗核抗体ANA检测与临床应用
最新版“Autoantibodies” 描述
ANuA 与疾病的活动性相关性强 (SLE DAI score)
Su et al., Clin Immun抗ol核1抗22体: A1N15A-检1测20与, 2临0床07应用
EUROIMMUN
ANuA 与狼疮性肾炎
Stinton et al., Lupus 15: 394-400, 2007
• 狼疮肾炎是SLE的一种潜在的严重并发症 (高达 50%) • ~ 1.2% 需要进行肾移植的患者有狼疮肾炎
临床发病特点 发病率: 40/100,000(北欧);200/100,000(黑人);250,000 (美国) 患者寿命:4年/50%(1950); 15/80%(当前); 20岁诊断/35岁死亡几率1:6
抗核抗体ANA检测与临床应用
SLE – 各器官的表现
神经系统受累 (30%) 皮肤 (蝴蝶状皮疹, 盘状狼疮; 74%)
抗核抗体ANA检测与临床应用
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
Systemischer Lupus Erythematodes (SLE) 系统性红ds斑D狼NA疮 (SLE)
系统性硬化症 (SSc) Scl -70 and CenpB
干燥综合征 (SS) SS-A and SS-B
慢性炎症性结缔组织病 (CICTD)
浆膜炎 (胸膜炎, 心包炎; 77%)
抗核抗体ANA检测与临床应用
狼疮肾炎 (51%) 血液系统受累 (贫血等; 60%)
关节炎 (至少2个关节 以上受累;96%)
EUROIMMUN
系统性红斑狼疮(SLE)
代表性的抗体 抗 dsDNA 抗体 抗核小体抗体 抗 Sm 抗体 抗核糖体 P 蛋白抗体
30-90% 50-95%
建议： • IIFT-ANA仍然为ANA检测的金标准 • 医院或商业诊断所应用其它ANA检测方法时，必须要求为临床大夫提供足够 的数据证明其它ANA检测方法与IFT比较具有同样或更高的敏感度和特异性 • 实验室在ANA报告当中必须注明ANA检测方法
抗核抗体ANA检测与临床应用
ANA筛查: 间接免疫荧光法(IFT)
抗核抗体ANA检测与临床应用
抗核小体 ELISA: 敏感性、特异性、疾病活动度
分组
n
抗核小体阳性
SLE
233
干燥综合症
41
皮肌炎/多肌炎
40
系统性硬化症
33
类风湿/骨关节炎
60
强直性脊柱炎
20
健康对照组
31
特异性
225
144 (61.8%) 1 (2.4%) 1 (2.5%) 1 (3.0%) 1 (1.7%) 0 0 98.2%
5-10% 5-15%
抗核抗体ANA检测与临床应用
EUROIMMUN
核均质型 HEp-2细胞/猴肝
抗核抗体ANAH检测E与p临-床2应细用 胞
EUROIMMUN
抗dsDNA 抗体
- 检测方法: IIFT, Farr-法 (RIA), ELISA or Blot IIFT dsDNA
HEp-2细胞
正常人
95－100 80－100
100 100 20－40 20－50 85－95 30－50 70－80 30－40
26 5-10
抗核抗体ANA检测与临床应用
美国风湿学会(ACR)立场声明
• HEp-2 细胞包含大约100 至150 种自身抗原 • 其它初筛方法仅具有少量自身抗原
…大约 35% SLE患者和IFT-ANA阳性患 者在其它初筛实验中为阴性结果…
自身免疫抗体检测及临床意义
抗核抗体ANA检测与临床应用
抗核抗体（ANA）
检测与临床应用
抗核抗体ANA检测与临床应用
抗核抗体的定义
传统定义：针对细胞核成分的自身抗体的总称。
广义定义：针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。对ANA的理 解不再局限于核成分，而是指核酸和核蛋白抗体的总称
ANA的靶抗原分布：
不同实验方法的结果并无可比性： 1、抗原来源不同； 2、抗原展现形式不同； 3、实验体系反应条件不同。
抗核抗体ANA检测与临床应用
核均质: 抗核小体抗体(ANuA)
靶抗原: dsDNA-组蛋白-复合物的构象决定簇 方法: IIFA ELISA, Blot 临床意义: SLE, 阳性率 50-95% (特异性100%)