【高考生物】微生物实验思考题参考答案及知识要点

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微生物学实验课后习题答案

微生物学实验课后习题答案

微生物学实验课后习题答案微生物学实验课后习题答案微生物学是研究微生物的一门学科,它涉及到微生物的分类、结构、功能以及与环境的相互作用等方面。

在微生物学实验课中,学生们通常会遇到一些习题,这些习题旨在帮助学生巩固所学的知识并提升他们的实验能力。

本文将为大家提供一些微生物学实验课后习题的答案,希望能够对大家的学习有所帮助。

1. 什么是微生物?微生物是指肉眼无法看见的微小生物体,包括细菌、真菌、病毒和原生动物等。

它们广泛存在于自然界中的各种环境中,如土壤、水体、空气以及人体内外等。

2. 请简述细菌的结构。

细菌是一类单细胞微生物,其结构包括细胞壁、细胞膜、质粒、核糖体和细胞质等。

细菌的细胞壁由多糖和蛋白质构成,可以提供细胞的形态和保护作用。

细菌的细胞膜则是控制物质进出细胞的关键结构。

质粒是细菌细胞中的一个环状DNA分子,可以携带一些特定的基因。

核糖体是细菌细胞中的蛋白质合成工厂,负责合成蛋白质。

细菌的细胞质则是细菌内部的液体环境,包含各种细胞器和溶质。

3. 请解释细菌的生长曲线。

细菌的生长曲线描述了细菌在培养基中的生长过程。

生长曲线通常分为四个阶段:潜伏期、指数期、平台期和死亡期。

在潜伏期,细菌适应环境并准备分裂。

指数期是细菌最快速增殖的阶段,细菌数量呈指数增长。

平台期是指细菌数量停止增长,细菌的繁殖和死亡速率达到平衡。

死亡期是指细菌数量开始减少,死亡速率大于繁殖速率。

4. 请简述细菌的培养方法。

细菌的培养方法主要包括液体培养和固体培养。

液体培养是将细菌接种到含有营养物质的液体培养基中,通过摇床或震荡器等设备进行培养。

固体培养是将细菌接种到含有琼脂或琼脂糖的固体培养基中,使其在培养皿上形成菌落。

此外,还可以利用选择性培养基和差异培养基来筛选和鉴定不同种类的细菌。

5. 请解释细菌的染色方法。

细菌的染色方法主要包括革兰氏染色和酸忍受染色。

革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法,通过使用革兰氏染色剂将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。

微生物实验思考题

微生物实验思考题

微生物实验思考题微生物学实验是生物学实验中较为复杂和繁琐的一类实验,它涉及到的实验类型和实验方法较多,而且每一种实验类型和实验方法都有其自身的特点和操作要求。

本文将从以下几个方面对微生物学实验中的一些常见问题进行思考和探讨。

一、实验前的准备工作在进行微生物学实验之前,我们需要做好充分的准备工作。

要了解实验的目的、要求和原理,确定所需的实验器材和试剂,并准备好相应的实验用品。

要对实验场所进行清洁和消毒处理,确保实验环境的无菌性。

要根据实验要求选择合适的菌种和培养基,并进行必要的预处理。

二、实验过程中的注意事项1、菌种保藏:在进行微生物学实验之前,需要对菌种进行保藏。

保藏方法应根据菌种的性质和实验要求进行选择。

常用的保藏方法有甘油管藏法、沙土管藏法、液体石蜡法等。

保藏过程中需要注意防止杂菌污染和防止菌种变异。

2、培养基的制备:制备培养基是微生物学实验中的一项基本操作技能。

在制备培养基时,需要注意根据菌种的营养需求和实验要求选择合适的配方和配制方法。

同时,要注意对培养基进行灭菌处理,确保无菌性。

3、接种与培养:在接种和培养过程中,需要注意无菌操作和防止杂菌污染。

接种时需要根据实验要求选择合适的接种方法和接种量,并注意对菌种进行纯化处理。

培养过程中需要注意控制温度、湿度、光照等环境因素,以保证微生物的正常生长和繁殖。

4、观察与记录:在观察和记录过程中,需要注意对微生物的生长情况、形态特征、生化反应等进行仔细观察和记录。

这些信息对于后续的数据分析和实验结果解释非常重要。

5、数据分析与总结:在完成实验后,需要对实验数据进行统计和分析,并将分析结果进行总结。

数据分析可以借助专业的统计软件进行,如SPSS、Excel等。

总结时需要注意对实验结果进行客观评价,并提出改进意见和建议。

三、实验后的整理与思考完成微生物学实验后,需要对实验场所进行清洁和消毒处理,并对实验器材和试剂进行整理和存放。

需要对实验数据进行整理和分析,并将分析结果进行总结和评价。

微生物实验思考题参考标准答案及知识要点

微生物实验思考题参考标准答案及知识要点

微生物实验思考题参考答案及知识要点一.酵母菌形态观察及死活细胞鉴别1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。

美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。

用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。

因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。

美蓝浓度高了,代谢不太活跃的活细胞也会被染色,从而使观察到的死细胞较多,活细胞较少;反之,则代谢微弱的细胞也能还原美蓝,不被染色,从而使观察到的死细胞较少,活细胞较多。

二.细菌的简单染色和革兰氏染色1.革兰氏染色中那一步是关键?为什么?你是如何操作的?革兰氏染色的关键步骤是:乙醇脱色(是脱色时间)。

如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。

脱色时间的长短还受涂片的厚薄,脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响,难以严格规定(脱色是应当控制速度,脱色时间一般为20—30s)。

2. 固定的目的之一是杀死菌体,这与自然死亡的菌体有何不同?自然死亡的菌体本身已经部分自溶,结构已经改变。

固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。

3. 不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌?能。

在酒精脱色后,不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌(G+),被酒精脱色为革兰氏阴性菌。

最后一步用番红染液复染,是为了让结果更清楚。

4.涂片为什么要固定,固定适应注意什么问题?a 杀死细菌并使菌体黏附与玻片上;b增加其对染料的亲和力。

固定时应注意:手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次(手指触摸玻片反面,不烫手为宜),固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩。

三. 霉菌、放线菌的形态观察1.镜检时,如何区分基内菌丝与气生菌丝?一般气生菌丝颜色较深,直生或分枝丝状,比基内菌丝粗;而基内菌丝色浅、发亮,可看到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体。

高中生物高考专题12 微生物的培养和应用(解析版)

高中生物高考专题12 微生物的培养和应用(解析版)

2020届高考生物难点及易错题精讲精练专题12 微生物的培养和应用【难点精讲】一、微生物的实验室培养和无菌技术例题:(2018·全国Ⅱ,37)在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。

回答下列问题:(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具___________(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。

(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是_____________________________________________________________________________。

(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能_______________________。

在照射前,适量喷洒________,可强化消毒效果。

(4)水厂供应的自来水通常是经过________(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。

(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是____________________。

【答案】(1)可以(2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷空气排尽【解析】(1)干热灭菌是指将物品放入干热灭菌箱内,在160~170 ℃条件下加热1~2 h。

耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等,可采用干热灭菌的方法。

(2)巴氏消毒法是在70~75 ℃条件下煮30 min或在80 ℃条件下煮15 min,可以杀死牛奶中的微生物,并且使牛奶的营养物质损失较少。

(3)接种室、接种箱或超净工作台在使用前,可以用紫外线照射30 min,紫外线能破坏微生物的DNA结构,以杀死物体表面或空气中的微生物。

在照射前,适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液,可以强化消毒效果。

(高考生物)食品微生物检验习题参考答案

(高考生物)食品微生物检验习题参考答案

(生物科技行业)食品微生物查验习题参照答案食品微生物查验习题参照答案1、答:(1)干热灭菌法将包扎好的玻璃器皿摆入电热烘箱中,互相间要留有必定的空隙,以便空气流通。

关紧箱门,翻开排气孔,接上电源。

待箱内空气排出到必定程度时,封闭上排气孔,加热至灭菌温度后,固定温度进行灭菌: 160 ℃— 165 ℃保持 2 小时。

2 小时后切断电源。

待烘箱内温度自然降温冷却到60 ℃以下后,再开门拿出玻璃器皿,防止因为温度忽然降落而惹起玻璃器皿碎裂。

(2 )高压蒸汽灭菌法关好排水阀门,放入纯净水或蒸馏水至标度。

注意水量必定要加足,不然简单造成事故。

将须要灭菌的器械、培育基等装入灭菌锅中,加盖密封。

旋紧螺旋时,先将每个螺旋旋转到必定程度(不要太紧),而后再旋紧相对的两个螺旋,以达到均衡旋紧,不然易造成漏气,达不到完全灭菌的目的。

通电加温,翻开排气活门,排尽锅内的空气。

往常当压力表指针升至 5 磅或 0.05MPa时,翻开排气活门放气,待压力表指针降至零点一小段时间后,再封闭活门。

即活门冲出的所有是蒸汽时则表示彻底,此时可封闭排气活门,假如过早封闭活门,排气不完全,也达不到完全灭菌的目的。

恒温灭菌 :0.1MPa或15磅压力保持20~30分钟。

压力表的指针上涨时,锅内温度也渐渐高升,当压力表指针升至0.1MPa时或15 磅时,锅内温度相当于 120 ℃~121 ℃(等于一个大气压),此时开始计算灭菌时间,控制热源,使处于 0.1MPa 或 15 磅压力保持 20 ~30 分钟,即能达到完整灭菌的目的,而后停止加温。

当达到所需温度时开始计时,并在此温度下保持所需的时间。

降温:自然降温或翻开活门排汽降温。

略微翻开一点排气活门,使锅内蒸汽迟缓清除,而后渐渐开大活门,气压渐渐降落,注意勿使排气过快,不然会使锅内的培育基沸腾而冲脱或沾染棉花塞,但排气太慢又使培育基在锅内,受高温办理时间过长,对培育基也是不利的。

一般从排气到翻开锅盖以10 分钟左右为好。

【高中生物】环境工程微生物学思考题及答案

【高中生物】环境工程微生物学思考题及答案

(生物科技行业)环境工程微生物学思虑题及答案现代环境工程微生物学思虑题及参照答案一、名词讲解1.孟德尔定律孟德尔定律是指孟德尔第必然律和孟德尔第二定律,即分别定律和自由组合定律。

分别定律是指:遗传性状由遗传因子决定,遗传因子在体细胞中成对出现,而在产生配子时相互分别,并独立地分配到不同样的性细胞中;自由组合定律是指:各种配子的数量相等,而且在形成配子的过程中两对或更多对遗传因子的组合是随机的。

2.连锁和连锁群连锁是指:来自同一亲本的两个基因在配子形成过程中有保留原来组合的倾向,这是由于这两个基因处在同一条染色体上的缘故,这类现象称为连锁。

同一染色体上相互连锁的基因称为连锁群,连锁群的数量等于单倍染色体的数量。

3.引起突变引起突变是利用物理的或化学因素办理微生物集体,促使少量个体细胞的DNA分子结构发生改变,在基因内部碱基配对发生差错,引起微生物的遗传性状发生突变。

引起突变其实不是新的突变,而是经过不同样的方式提高突变频率。

4.转变转变是指:同源或异源的游离DNA 分子(质粒和染色体DNA )被自然或人工感觉态细胞摄取,并获得表达的水平方向的基因转移过程。

依照感觉态成立的方式,转变可分为自然遗传转变和人工转变。

5.平易噬菌体当噬菌体侵入宿主细胞后,其核酸附着并整合在宿主细胞染色体上,和宿主的核酸同步复制,宿主细胞不裂解而连续生长,这类不引起宿主细胞裂解的噬菌体称作平易噬菌体。

6.宽泛性转导噬菌体可误包供体菌中的任何基因(包括质粒),并使受体菌获得各种性状的转导称为宽泛性转导。

宽泛性转导可分为两种:完好宽泛转导和流产宽泛转导。

7.F 因子F因子是一种核外质粒,决定着细菌的性别,即含有控制性菌毛合成的遗传信息,故称为致育因子或性质粒。

F 因子可整合到宿主染色体基因组上去而称为附加体,且能够正常或异常零散而成为各种菌株。

8.溶源化溶源化是指:以平易噬菌体感染非溶源性细菌细胞,并在附着位点的某一特定部位将噬菌体附加到细菌染色体上以成立溶源现象。

微生物工程思考题参考答案

微生物工程思考题参考答案

微生物工程思考题参考答案Ricky & Bullet 2017.11、举出几例微生物大规模表达的产品, 及其产生菌的特点?A.蛋白酶表达产物一般分泌至胞外,能利用廉价的氮源,生长温度较高,生长速度快,纯化、分离及分析快速;安全性高,得到FDA的批准的菌种。

B.单细胞蛋白生长迅速,营养要求不高,易培养,能利用廉价的培养基或生产废物。

适合大规模工业化生产,产量高,质量好。

安全性高,得到FDA的批准的菌种。

C. 不饱和脂肪酸生长温度较低,安全性高,能利用廉价的碳源,不饱和脂肪酸含量高,D.抗生素生产性能稳定,产量高,不产色素,,能利用廉价原料F. 氨基酸代谢途径比较清楚,代谢途径比较简单2、自然界分离微生物的一般操作步骤?样品的采取→预处理→培养→菌落的选择→初筛→复筛→性能的鉴定→菌种保藏3、从环境中分离目的微生物时,为何一定要进行富集培养?自然界中目的微生物含量很少,非目的微生物种类繁多,进行富集培养,使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖,数量增加,由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种,使筛选变得可能。

4、菌种选育分子改造的目的?防止菌种退化; 解决生产实际问题;提高生产能力; 提高产品质量; 开发新产品5、什么叫自然选育?自然选育在工艺生产中的意义?自然选育就是不经人工处理,利用微生物的自然突变进行菌种选育的过程。

自然选育在工业生产上的意义:自然选育可以有效地用于高性能突变株的分离。

然选育虽然突变率很低,但却是工厂保证稳产高产的重要措施。

6、什么是诱变育种?常用的诱变剂有哪些?诱变育种是指用物理、化学因素诱导植物的遗传特性发生变异,再从变异群体中选择符合人们某种要求的单株,进而培育成新的品种或种质的育种方法。

诱变剂有两大类:物理诱变剂和化学诱变剂。

常用的物理诱变剂有紫外线、x射线、γ射线(如Co60等)、等离子、快中子、α射线、β射线、超声波等。

常用的化学诱变剂有碱基类似物、烷化剂、羟胺、吖定类化合物等。

微生物学实验原理及思考题答案

微生物学实验原理及思考题答案

微生物学实验原理及思考题答案第一篇:微生物学实验原理及思考题答案油镜便于观察的原理是什么?用油镜观察时在油镜与载玻片之间加入了和玻璃折射率相近的香柏油,使进入透镜的光线增多,视野亮度增强,使物象明亮清晰。

1.细调节器每旋转一周使镜筒上升或下降0.1mm.一。

培养基的配制原理:微生物的生长发育都有一定的营养需要,培养基即人工培养物,为其生长发育提供所需营养的基质。

培养基配制好以后必须经过灭菌方能用于分离培养微生物实验。

一次培养基的配制和灭菌是微生物实验室中最基本的操作,通过本次实验学习微生物实验室中常用培养基的配制方法和灭菌方法。

1.称药品的钥匙不要混用称完药品应及时盖紧瓶盖,因为某些成分如蛋白胨极易吸水潮解调PH时要小心操作,避免回调。

配制培养基应注意哪些问题?要选定合适的培养基;培养基成分要称量准确;PH要适宜;灭菌要严格。

培养基配制完成后为什么要立即灭菌?已灭菌的培养基如何进行无菌检查?防止细菌污染培养基一旦细菌污染了培养基,由于培养基有丰富的营养物质,细菌会段时间内大量产生这样子就会跟培养物争夺营养物质,另一方面,细菌生长过程中会产生有毒物质致使培养物死亡。

放在37℃的恒温箱中一两天后,培养基上没有生长任何微生物的就可以使用(若有微生物则是以菌落出现的肉眼可以看见)二。

细菌的单染色技术原理:单染色法师利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。

在中性,碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,所以常用碱性染料进行染色。

碱性染料并不是碱,和其他染料一样是一种盐,电离时染料离子带正电,易于带负电荷的细菌结合而使细菌着色。

制备染色标本时的注意事项?选择合适菌龄的细菌;固定时避免火焰直接烘烤破坏细菌形态;染色时间要适宜;水洗时水不能直接冲在涂片处。

制片为什么要完全干燥后才能用油镜观察?油和水之间会分层,油就不能与标本接触还有光会发生折射等等原因,这样不利于油镜观察三。

细菌的革兰氏染色法原理:细菌先经碱性染料结晶紫染色,而经碘液媒染后用酒精脱色,在一定条件下有的细菌紫色不被脱去,为G+,有的可被脱去,为G-.1.革兰氏染色成败的关键是乙醇脱色。

微生物学实验理论及思考题

微生物学实验理论及思考题

实验一显微镜的使用及微生物大小测定的方法二、基本原理现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像,它们由机械装置和光学系统两大部分组成。

物镜的性能最为关键,它直接影响着显微镜的分辨率。

其中油镜的放大倍数最大,对微生物学最为重要。

微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征,也是分类鉴定的依据之一。

微生物大小的测定,需要在显微镜下,借助于特殊的测量工具—测微尺,包括目镜测微尺和镜台测微尺。

其中镜台测微尺并不直接用来测量细胞大小,而是用于校正目镜测微尺每格的相对长度。

目镜测微尺每小格所代表的实际长度因显微镜的不同放大倍数而异,因此用目镜测微尺测量微生物大小时,必须先用镜台测微尺进行校正,以求出该显微镜在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度,然后根据微生物细胞相当于目镜测微格数,即可计算出细胞的实际大小.两重合线间镜台测微尺格数×10目镜测微尺每格长度=两重合线间目镜测微尺格数思考题1、用油镜观察时应注意哪些问题?在载玻片和镜头之间加滴什么油?起什么作用?答(1)应先用摖镜纸将镜头摖干净,以防止实验的污染。

使用油镜时,应先用低倍镜再用高倍镜,然后再是油镜,用完之后也要用摖镜纸将油镜摖掉。

(2)滴加香柏油(3)作用是增加折射率,即增加了显微镜的分辨率,油的折射率和分辨率成反比,同时与波长成正比。

2、影响显微镜分辨率的因素有哪些?答:显微镜的分辨率指显微镜能辨别两点之间的最小距离的能力,最小分辨距离越小,分辨率越高,最小可分辨率距离=λ/2NA且NA=n.sin,所以,分辨率由物镜的NA值与照明光源的波长两个因素决定,当然还有介质的折射率。

3、为什么要换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须用镜台测微尺重新对目镜测微尺进行校正?答:不同放大倍数,目镜测微尺每小隔所代表实际长度不一样,必须用镜台测微尺进行重新校正,这样目镜测微尺测量的长度才是目前状态的准备长度。

4、在不改变目镜和目镜测微尺,而改用不同放大倍数的物镜来测定同一微生物的大小时,其测定的结果是否相同?为什么?答:相同的,不同的放大倍数,目镜测微尺每小格所代表实际长度不一样,必须重新校正,才能得到目前状态的准确长度。

微生物实验思考题参考答案及知识要点

微生物实验思考题参考答案及知识要点

微生物实验思考题参考答案及知识要点一.酵母菌形态观察及死活细胞鉴别1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。

美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。

用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。

因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。

美蓝浓度高了,代谢不太活跃的活细胞也会被染色,从而使观察到的死细胞较多,活细胞较少;反之,则代谢微弱的细胞也能还原美蓝,不被染色,从而使观察到的死细胞较少,活细胞较多。

二. 细菌的简单染色和革兰氏染色1. 革兰氏染色中那一步是关键?为什么?你是如何操作的?革兰氏染色的关键步骤是:乙醇脱色(是脱色时间)。

如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。

脱色时间的长短还受涂片的厚薄,脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响,难以严格规定(脱色是应当控制速度,脱色时间一般为20—30s)。

2. 固定的目的之一是杀死菌体,这与自然死亡的菌体有何不同?自然死亡的菌体本身已经部分自溶,结构已经改变。

固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。

3. 不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌?能。

在酒精脱色后,不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌(G+),被酒精脱色为革兰氏阴性菌。

最后一步用番红染液复染,是为了让结果更清楚。

4. 涂片为什么要固定,固定适应注意什么问题?a 杀死细菌并使菌体黏附与玻片上;b 增加其对染料的亲和力。

固定时应注意:手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次(手指触摸玻片反面,不烫手为宜),固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩。

三. 霉菌、放线菌的形态观察1. 镜检时,如何区分基内菌丝与气生菌丝?一般气生菌丝颜色较深,直生或分枝丝状,比基内菌丝粗;而基内菌丝色浅、发亮,可看到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体。

微生物思考题及参考答案之欧阳术创编

微生物思考题及参考答案之欧阳术创编

微生物思考题及参考答案1.用油镜观察时应注意哪些问题?在载玻片和镜头之间加滴什么油?起什么作用?答:应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染.操作时,先低倍再高倍.用完要擦掉油.加香柏油,作用是增加折光率,也就是增加了显微镜的分辨率.油的折光率和分辨率成反比(有公式),同时与波长成正比.2.什么是物镜的同焦现象?它在显微镜观察中有什么意义?答:在一般情况下,当物像在一种物镜中已清晰聚焦后,转动物镜转换器将其他物镜转到工作位置进行观察时,物像将保持基本准焦的状态,这种现象称为物镜的同焦。

利用这种同焦现象,可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短的物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦,从而避免由于使用粗调节器时可能的误操作而损坏镜头或载玻片。

3.影响显微镜分辨率的因素有哪些?答:物镜的NA值(物镜的数值孔径)与照明光源的波长.4.美蓝染色液作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响,试分析原因答:会造成更多的死细胞,在显微镜下观察,活的是透明无色,衰老的是淡蓝色,死亡的是蓝色,如果美蓝染色液作用时间过长,会造成细胞脱水死亡并渗透染液,影响实验结果。

5.镜检时如何区分放线菌基内菌丝,气生菌丝以及孢子丝一般气生菌丝颜色较深,直生或分枝丝状,比基内菌丝粗;而基内菌丝色浅、发亮,可看到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体。

6.在进行细菌涂片时应注意哪些环节1、载玻片应该冷却后再涂片。

2、如果是涂布液体,可以用毛细管或接种环滴一小滴,然后轻轻抹开,一圈足够。

3、如果是涂布菌落或菌苔,应该在载玻片上先滴一滴水,再将菌落或菌苔涂布上去,接种环的尖蘸一点点即可。

4、为了节省时间,可以将干燥和热固定合并成一步。

但是应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形。

5、染色时间视染色液种类而定。

如结晶紫只需几十秒,亚甲基蓝则需一到两分钟。

6、冲洗时,水流不能太大,而且尽量避免水流直接冲在涂片上。

7、冲洗后干燥,可以用酒精灯加热以节省时间,同样的,应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形。

食品·微生物学实验思考题答案

食品·微生物学实验思考题答案

食品微生物学技术思考题答案1.如何区别高倍镜和油镜?答:(1)油镜更接近标本片(2)油镜与标本间的介质是香柏油(3)油镜刻有“oil”或“Hi”字样,也刻有一圈红线或黑线为标记。

2.为什么在使用高倍镜及油镜是应特别注意避免粗调节器的错误操作?答:使用高倍镜及油镜时镜头距离标片很近,而粗调节器的调节幅度较大,粗调节器的错误操作会使镜头大幅度向标本移动,很容易损坏标本和镜头。

一般先用低倍镜找到物象后换到高倍镜,就只需要用细调节器了。

3.用油镜观察时应注意哪些问题?在载破片和镜头之间加滴什么油?起什么作用?答:(1)应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防止上次实验的污染,操作时,先低倍再高倍,用完要擦掉油。

(2)在转换油镜时,从侧面水平注视镜头注视镜头与玻片的距离。

使镜头浸入油中而不以压破载玻片为宜。

(3)从目镜内观察,把孔径光阑开到最大,使其明亮。

然后用微调将镜台下降,直至视野内物象清晰。

如油镜已离开油面仍未见物象,需重复操作。

加的是香柏油。

作用是增加折光率,增加显微镜的分辨率。

4.在调节焦距时,往往出现一些疑似观察标本的物象点,物象点可能是目镜或物镜上的杂质,也可能是标本片上的观察对象,如何通过操作判断这些物象点是否在标片上?答:移动标本片,看物象点是否移动,如果不移动,则不在标本片上。

5.如果涂片未经热固定或固定温度过高、时间过长,会出现什么现象?答:固定时间是杀死菌体,使菌体蛋白质凝固黏附于载玻片上,增加菌体对染色剂的结合力,易于着色。

但是如果没固定,不容易着色,且容易被清水冲走。

温度过高会使细胞收缩变形,时间过长会导致菌体变形或形态破坏,难以着色,从而导致难以着色。

6.为什么要培养18-24h的细菌菌体进行革兰氏染色?答:此时菌体进入比较活泼的繁殖生长期,细胞壁比较好着色。

若菌龄太老,由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应,关键在于细胞壁的通透性的改变。

如果菌龄过老,不便于显微镜下观察时阴性还是阳性菌。

高考生物微生物知识点总结归纳

高考生物微生物知识点总结归纳

高考生物微生物知识点总结归纳微生物是指那些微小到肉眼无法直接观察到的生物体,包括细菌、立克次体、放线菌、真菌、原生动物和病毒等。

在高考生物考试中,微生物是一个重要的知识点,下面将对微生物的相关知识进行总结归纳。

一、细菌1. 形态特征:细菌通常是单细胞的、成形单体或成堆,有球形、杆状、螺旋状等形态。

2. 细菌的结构:细菌主要由细胞壁、细胞膜、胞质、细胞核和细胞质外附属结构等组成。

3. 营养方式:根据营养方式的不同,细菌可分为自养细菌和异养细菌。

4. 影响人类的细菌:结核杆菌、炭疽杆菌、大肠杆菌等是常见的影响人类健康的细菌。

二、寄生虫1. 分类:寄生虫分为原生动物和蛔虫。

2. 传播途径:蚊虫叮咬传播、食物或水源感染、接触传播等方式。

3. 对人类的危害:寄生虫感染人体后会引起一系列疾病,如疟疾、阿米巴病等。

三、真菌1. 分类:真菌包括子囊菌和担子菌两大类。

2. 组成结构:真菌由菌丝、菌落和孢子三部分组成。

3. 影响人类的真菌:念珠菌、白色念珠菌等真菌会引发人体的真菌感染。

四、病毒1. 结构特征:病毒主要由核酸和蛋白质构成,没有真正的细胞结构。

2. 繁殖方式:病毒只能在宿主细胞内进行繁殖,根据繁殖方式的不同,可将病毒分为溶菌型和整合型。

3. 常见病毒:乙型肝炎病毒、HIV病毒等是常见的影响人类健康的病毒。

五、微生物的应用1. 工业应用:酶工程、发酵工程等利用微生物生产药品、食品、化学品等。

2. 农业应用:利用微生物制作有机肥料、生物农药等,提高农业生产效率。

3. 环境应用:微生物能够分解污染物,用于水体和土壤的净化。

4. 医学应用:利用微生物制作疫苗、抗生素等,用于预防和治疗疾病。

综上所述,微生物是生物学中一个重要的研究领域,掌握微生物的相关知识对于高考生物考试至关重要。

希望通过本文的总结归纳,能够帮助高考生系统地掌握微生物的知识要点,从而在考试中取得好成绩。

高考生物选修一思考题答案

高考生物选修一思考题答案

课题一果酒和果醋的制作疑难解答(1)你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗?为什么?应该先冲洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗时引起葡萄破损,增加被杂菌污染的机会。

(2)你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染?如:要先冲洗葡萄,再除去枝梗;榨汁机、发酵装置要清洗干净,并进行酒精消毒;每次排气时只需拧松瓶盖,不要完全揭开瓶盖等。

(3)制葡萄酒时,为什么要将温度控制在18~25℃?制葡萄醋时,为什么要将温度控制在30~35℃?温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。

20℃左右最适合酵母菌的繁殖。

因此需要将温度控制在其最适温度范围内。

而醋酸菌是嗜温菌,最适生长温度为30~35℃,因此要将温度控制在30~35℃。

课题二腐乳的制作疑难解答(1)利用所学的生物学知识,解释豆腐长白毛是怎么一回事?豆腐生长的白毛是毛霉的白色菌丝。

严格地说是直立菌丝,在豆腐中还有匍匐菌丝。

(2)为什么要撒许多盐,将长毛的豆腐腌起来?盐能防止杂菌污染,避免豆腐腐败。

(3)我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳。

用含水量高的豆腐制作腐乳,不易成形。

(4)吃腐乳时,你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”。

这层“皮”是怎样形成的呢?它对人体有害吗?它的作用是什么?“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝(匍匐菌丝),对人体无害。

它能形成腐乳的“体”,使腐乳成形。

课题三制作泡菜专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养·倒平板操作的讨论1.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。

你用什么办法来估计培养基的温度?提示:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。

2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。

3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。

微生物实验报告范文思考题答案

微生物实验报告范文思考题答案

微生物实验报告范文思考题答案
思考题
1、脱色环节,脱色不足会把革兰氏阳性菌染成阴性菌,脱色过度会
把阴性菌染成阳性菌;复染环节,染液不能干涸。

最关键的环节是乙醇脱
色环节。

2、菌龄太老会造成着色不均染色效果不好~阴性阳性不明显分不太清楚,不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌~
3、不可以。

因为革兰氏碘液的作用是增加结晶紫染料和细胞之间的
亲和性或附
着力,即以某种方式帮助染料固定在细胞上,使不易脱落。

改变顺序
可能会对效果有影响,所以最好按步骤做;脱色后复染前,理论上革兰氏
阳性菌呈紫色,阴性菌无色。

4、可以,因为脱色后G+是紫色的而G-是无色的,这时,已经可以区
分了,但是如果不经复染的话,镜检时看不清G-的细胞形态,而且如果
没有和G+一起混染的话,基本看不清什么,但是如果只做区分的话,可
以不经过复染。

5、注意菌龄,12-18小时的培养物;注意乙醇的脱色时间,20-30秒,时间过长或过短都会和结果不符。

6、因为用油镜观察时,镜头离玻片会很近.如果未完全干燥,载玻片上
的液体会污染油镜镜头.镜头非常精密,被污染后不利于下次观察。

另外,一般作细菌装片不用盖盖玻片,所以待干燥后才能观察.如果盖
上盖玻片后就不用考虑需要干燥的问题.
7、未经热固定,在剩下的步骤中,菌体会被液体冲走,镜检时出现在视野中的细菌极少,甚至没有;加热温度过高或时间过长会导致菌体变形或形态破坏。

高考生物实验题目练习参考答案

高考生物实验题目练习参考答案

高考生物实验题目练习参考答案一、酵母呼吸实验实验原理:酵母是一种微生物,可以进行呼吸作用。

在呼吸作用中,酵母产生能量,同时释放出二氧化碳。

通过观察酵母在不同条件下的呼吸作用情况,可以研究呼吸作用对酵母生长和活动的影响。

实验过程:1. 准备工作:a. 准备酵母悬浮液和葡萄糖溶液。

b. 预先标好试管,每个试管中加入不同浓度的酵母悬浮液和葡萄糖溶液。

2. 实验操作:a. 将1%浓度的酵母悬浮液分别加入不同浓度的葡萄糖溶液中,装入试管。

b. 然后,添加适量的水,使液位达到试管口或稍高于试管口。

c. 微晃试管,使酵母与葡萄糖充分接触。

d. 用橡皮塞封好试管。

3. 观察和记录:a. 放置一段时间后,观察试管内的气泡情况,并比较不同试管之间的差异。

b. 记录不同试管中气泡的数量和大小。

实验结果分析:根据观察到的结果,可以得出以下结论:1. 酵母在葡萄糖存在的条件下产生了呼吸作用,释放出了二氧化碳。

2. 酵母的呼吸作用受到葡萄糖浓度的影响,葡萄糖浓度越高,酵母的呼吸作用越旺盛,释放的二氧化碳越多。

二、叶绿素色素提取实验实验原理:叶绿素是植物中的一种重要色素,可以通过提取来观察其吸收光的特点。

叶绿素在不同波长的光下吸收的光强度不同,可以通过测量光的透过率来间接测定叶绿素的含量。

实验过程:1. 准备工作:a. 准备酒精、活性炭和鲜嫩的植物叶片。

b. 将植物叶片洗净,剪碎成小片备用。

2. 实验操作:a. 取适量的酒精倒入试管中,加入少量活性炭。

b. 将剪碎的植物叶片放入试管中,用塞子封好试管。

c. 用玻璃棒将叶片捣碎,使叶绿素溶解到酒精中。

d. 静置一段时间,使叶绿素充分溶解。

3. 观察和记录:a. 取一定量的叶绿素提取液,用分光光度计测定其在不同波长下的吸光度。

b. 绘制叶绿素的吸收光谱曲线。

实验结果分析:根据实验结果绘制的吸收光谱曲线可以得出以下结论:1. 叶绿素的吸收光谱曲线呈现特征性的吸收峰,在红光和蓝光波长范围内吸收最强。

微生物学实验复习资料题及其标准答案

微生物学实验复习资料题及其标准答案

微生物学实验复习资料题及其标准答案微生物学实验复习题一、选择题1.革兰氏染色的关键操作步骤是:A. 结晶紫染色B. 碘液固定C. 酒精脱色D. 复染2.放线菌印片染色的关键操作是:A. 印片时不能移动B. 染色C. 染色后不能吸干D. A和C3.高氏培养基用来培养:A. 细菌B. 真菌C. 放线菌4.肉汤培养基用来培养:A. 酵母菌B. 霉菌C. 细菌5.无氮培养基用来培养:A. 自生固氮菌。

B. 硅酸盐细菌C. 根瘤菌D. A、B 均可培养E. A、B、C 均可培养6.在使用显微镜油镜时,为了提高分辨力,通常在镜头和盖玻片之间滴加:A. 二甲苯B. 水C. 香柏油7.常用的消毒酒精浓度为:A. 75%B. 50%C. 90%8.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是:A. 20ml/M3B. 6ml/M3C. 1ml/M39.实验室培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是:A. 121℃/30minB. 115℃/30minC. 130℃/30min10.巴氏消毒的工艺条件是:A. 62-63℃/30minB. 71-72℃/15minC. A.B. 均可11.半固体培养基的主要用途是:A. 检查细菌的运动性B. 检查细菌的好氧性C. A.B. 两项12.半固体培养基的琼脂加入量通常是:A. 1%B. 0.5%C. 0.1%13.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是:A. 排冷气彻底B. 保温时间适当C. 灭菌完后排气不能太快D. A-C14.目镜头上的“K”字母表示:A. 广视野目镜B. 惠更斯目镜C. 补偿目镜15.目镜头上的“P”字母表示:A. 平场目镜B. 广视野目镜C. 平场补偿目镜16.物镜头上的“PL”字母表示:A.正低相差物镜B.正高相差物镜C.负高相差物镜17.物镜头上的“UVFL”字母表示。

A. 无荧光物镜B. 照相物镜C. 相差物镜18.镜头上标有“TC”字母的镜头是:A. 相差调整望远镜B. 摄影目镜C. 相差目镜19. “PA”表示:A. 马铃薯培养基B. 高氏培养基C. 肉汤培养基20.无菌室空气灭菌常用方法是:A. 甲醛熏蒸B. 紫外灯照射C. 喷石炭酸D. A.B. 并用21.干热灭菌的关键操作是:A. 灭菌物不能有水B. 保温过程中不能开箱门C. 降温不能太快22.霉菌水浸制片的关键操作是:A. 菌丝要分散B. 菌丝首先要用50% 的乙醇浸润C. 盖盖玻片不能有气泡D. A-C23.加热法染芽胞的染料通常是:A. 孔雀绿B. 结晶紫C. 复红D. 蕃红24.复红法染鞭毛的关键操作是:A. 玻片干净B. 染料新鲜C. 菌体活化适当D. A、B、C25.镀银法染鞭毛的关键操作是:A. 玻片干净B. 染料无沉淀C. 加热适当D. 菌体活化适当E. A-D26.进行简单染色使用的染色液通常是:A. 复红B. 蕃红C. 结晶紫D. 孔雀绿E. A-D 均可27.物镜头上的“APO”字母代表:A. 消色差物镜B. 复消色差物镜C. 半消色差物镜28.物镜头上的“Ach”字母表示:A. 平场物镜B. 超平场物镜C. 消色差物镜29.物镜头上的“NH”字母表示:A. 正相差物镜B. 负相差物镜30.物镜头上的“0.17”表示:A. 要求的盖玻片厚度B. 要求的载玻片厚度C. 镜头浸油的深度31.镜头上标有“NFK" 字母的镜头是:A. 照相目镜B. 荧光目镜C. 相差目镜32.目镜头上的“PK”字母表示:A. 平场目镜B. 补偿目镜C. 平场补偿目镜33.物镜头上的"Splan" 字母表示:A. 超平场物镜B. 平场物镜C. 消色差物镜。

高考生物考题集萃含答案解析——微生物的培养与应用

高考生物考题集萃含答案解析——微生物的培养与应用

第11章第49讲1.(2017·全国卷Ⅰ)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。

回答下列问题:(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生__脲酶__。

能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是__分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物__,但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是__为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料__(答出两点即可)。

(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择__尿素__(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是__其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用__。

(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有__为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定__(答出两点即可)。

解析(1)土壤中的某些细菌之所以能够分解尿素,是因为它们能产生脲酶。

尿素分解菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物,必须利用现成的有机物作为能源物质;葡萄糖通过呼吸作用被分解时,能为细胞生命活动提供能量,同时,葡萄糖还可以转化成脂肪、氨基酸等物质。

(2)选择培养基是只允许特定种类的微生物(目的微生物)生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。

本实验的目的菌是可分解尿素的细菌,因此,配制的培养基应只允许尿素分解菌生长,NH4NO3可以作为所有细菌的氮源,培养基中如含有NH4NO3,将不能起到筛选作用。

(3)KH2PO4和Na2HPO4能为细菌生长提供钾盐、钠盐和磷酸盐,而H2PO-4/HPO2-4可以使培养基中pH保持相对稳定。

2.(2016·全国卷Ⅰ)空气中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。

某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。

(完整版)微生物实验思考题

(完整版)微生物实验思考题

微生物实验思考题1、用油镜观察时应该注意哪些问题?在载破片和镜头之间加滴什么油?起什么作用?答:应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验的污染。

操作时,先低倍再高倍。

用完要擦掉油。

加滴香柏油。

作用:增加折光率,也就是增加了显微镜的分辨率.2、根据实验体会,谈谈应如何根据所观察微生物的大小,选择不同的物镜进行有效的观察.答:细菌用油镜,真菌用高倍镜.都是先用低倍镜找到目标后,再用高倍镜调到合适的视野和合适的清晰度.放线菌、酵母菌、多细胞真菌相对较大,用放大 40 倍的物镜就可以看了,细菌小,要用放大 1000 倍的物镜看,感觉还很小。

病毒那就要用电子显微镜看了。

3、哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性?其中最关键的环节是什么?答:涂片环节、加热固定环节、脱色环节;其中最关键的环节是脱色环节。

4、进行革兰氏染色时,为什么特别强调菌龄不能太老,用老龄细菌染色会出现什么问题?答:着色不均,染色效果不好。

阴性阳性不明显分不太清楚,问题是:不便于显微镜下观察是阳性菌还是阴性菌。

5、革兰氏染色时,初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染之前,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色?答:不可以.因为碘与染料会结合成大分子,使得染料分子不能穿过细胞的细胞壁,对实验结果造成影响。

脱色后复染前,革兰氏阳性菌呈紫色,阴性菌无色.6、不经过复染这一步,能否区别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌?答:不行。

在复染之前,革兰氏阴性菌是无色透明的,在显微镜下很难观察到;或者脱色过度,也会造成阳性菌脱色,不经过复染,无法进一步区别。

7、你认为制备细菌染色标本时,应该注意哪些环节?答:1制备适宜的培养基2在超净工作台上进行,保持无菌环境3对培养基,接种环等物品的高温高压灭菌。

4倒置培养基,防止冷凝水内流8. 为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察?答:1、若未完全干燥,载玻片上的液体会污染油镜镜头。

镜头非常精密,被污染后不利于下次观察;2、若未完全干燥,水滴会影响油与玻璃之间折光率,造成视野不够清晰。

微生物工程思考题参考答案

微生物工程思考题参考答案

微⽣物⼯程思考题参考答案微⽣物⼯程思考题参考答案Ricky & Bullet 2017.11、举出⼏例微⽣物⼤规模表达的产品, 及其产⽣菌的特点?A.蛋⽩酶表达产物⼀般分泌⾄胞外,能利⽤廉价的氮源,⽣长温度较⾼,⽣长速度快,纯化、分离及分析快速;安全性⾼,得到FDA的批准的菌种。

B.单细胞蛋⽩⽣长迅速,营养要求不⾼,易培养,能利⽤廉价的培养基或⽣产废物。

适合⼤规模⼯业化⽣产,产量⾼,质量好。

安全性⾼,得到FDA的批准的菌种。

C. 不饱和脂肪酸⽣长温度较低,安全性⾼,能利⽤廉价的碳源,不饱和脂肪酸含量⾼,D.抗⽣素⽣产性能稳定,产量⾼,不产⾊素,,能利⽤廉价原料F. 氨基酸代谢途径⽐较清楚,代谢途径⽐较简单2、⾃然界分离微⽣物的⼀般操作步骤?样品的采取→预处理→培养→菌落的选择→初筛→复筛→性能的鉴定→菌种保藏3、从环境中分离⽬的微⽣物时,为何⼀定要进⾏富集培养?⾃然界中⽬的微⽣物含量很少,⾮⽬的微⽣物种类繁多,进⾏富集培养,使⽬的微⽣物在最适的环境下迅速地⽣长繁殖,数量增加,由原来⾃然条件下的劣势种变成⼈⼯环境下的优势种,使筛选变得可能。

4、菌种选育分⼦改造的⽬的?防⽌菌种退化; 解决⽣产实际问题;提⾼⽣产能⼒; 提⾼产品质量; 开发新产品5、什么叫⾃然选育?⾃然选育在⼯艺⽣产中的意义?⾃然选育就是不经⼈⼯处理,利⽤微⽣物的⾃然突变进⾏菌种选育的过程。

⾃然选育在⼯业⽣产上的意义:⾃然选育可以有效地⽤于⾼性能突变株的分离。

然选育虽然突变率很低,但却是⼯⼚保证稳产⾼产的重要措施。

6、什么是诱变育种?常⽤的诱变剂有哪些?诱变育种是指⽤物理、化学因素诱导植物的遗传特性发⽣变异,再从变异群体中选择符合⼈们某种要求的单株,进⽽培育成新的品种或种质的育种⽅法。

诱变剂有两⼤类:物理诱变剂和化学诱变剂。

常⽤的物理诱变剂有紫外线、x射线、γ射线(如Co60等)、等离⼦、快中⼦、α射线、β射线、超声波等。

常⽤的化学诱变剂有碱基类似物、烷化剂、羟胺、吖定类化合物等。

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(生物科技行业)微生物实验思考题参考答案及知识要点微生物实验思考题参考答案及知识要点(可能在整理时部分问题未能考虑全面,若有异议,请同学们自行从网络或课本上搜索查找)微生物实验思考题参考答案一.酵母菌形态观察及死活细胞鉴别1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。

美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。

用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。

因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。

美蓝浓度高了,代谢不太活跃的活细胞也会被染色,从而使观察到的死细胞较多,活细胞较少;反之,则代谢微弱的细胞也能还原美蓝,不被染色,从而使观察到的死细胞较少,活细胞较多。

二.细菌的简单染色和革兰氏染色1.革兰氏染色中那一步是关键?为什么?你是如何操作的?革兰氏染色的关键步骤是:乙醇脱色(是脱色时间)。

如果脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。

脱色时间的长短还受涂片的厚薄,脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响,难以严格规定(脱色是应当控制速度,脱色时间一般为20—30s)。

2.固定的目的之一是杀死菌体,这与自然死亡的菌体有何不同?自然死亡的菌体本身已经部分自溶,结构已经改变。

固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。

3.不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌?能。

在酒精脱色后,不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌(G+),被酒精脱色为革兰氏阴性菌。

最后一步用番红染液复染,是为了让结果更清楚。

4.涂片为什么要固定,固定适应注意什么问题?a杀死细菌并使菌体黏附与玻片上;b增加其对染料的亲和力。

固定时应注意:手持玻片,菌膜朝上,在微火过3次(手指触摸玻片反面,不烫手为宜),固定时应尽可能维持细胞原有形态,防止细胞膨胀或收缩。

三.霉菌放线菌的形态观察1.镜检时,如何区分基内菌丝与气生菌丝?一般气生菌丝颜色较深,直生或分枝丝状,比基内菌丝粗;而基内菌丝色浅、发亮,可看到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体。

2.显微镜下细菌放线菌酵母菌和霉菌的主要区别是什么?放线菌与细菌需要在油镜下才能观察清楚,而霉菌和酵母菌在低倍镜下即可看到。

细菌:为细而短的单细胞微生物(个体微小),主要形态有:球、杆、螺旋状等。

(部分杆菌还可形成芽孢)放线菌:存在分枝丝状体和菌丝体,革兰氏阳性菌,有孢子丝和孢子(球形、椭圆形、杆状、柱状)。

酵母菌:单细胞,菌体呈圆球、卵形或椭圆形,少数呈柠檬形、尖形等。

菌体比细菌大几倍到几十倍,部分处于出芽繁殖过程中菌体还可观察到芽体,大多数菌体上还有芽痕。

霉菌:菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多,常是细菌菌体宽度的几倍到几十倍,在低倍镜下即可看到,并还可看到孢子囊梗、囊轴、孢子囊、包囊孢子等。

四.玻璃器皿的洗涤包扎与灭菌1.高压蒸汽灭菌开始时为什么要将锅内排尽?灭菌后为什么要待压力降低到“0”时,才能打开排气阀,开盖取物?因为空气的膨胀压大于水蒸汽的膨胀压,所以,当水蒸汽中含有空气时,在同一压力下,含空气蒸汽的温度低于饱和蒸汽的温度。

如果压力未降到0时,打开排气阀,就会因锅内压力突然下降,使容器内的培养基由于内外压力不平衡(压力突然下降而发生复沸腾)而冲出烧瓶口或试管口,造成培养基等液体沾湿棉塞或溢出等事故。

2.设计实验方案,比较干热灭菌和湿热灭菌的效果。

以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件和等量原则。

(一)实验材料试管镊子酒精灯嗜热脂肪芽孢杆菌ATCC7053菌片纸片(与菌片同大小同材料)溴甲酚紫蛋白冻水培养基(已灭菌)等实验材料(材料有余)。

(二)对照组取9支洁净试管,分为A1B1C1三组(每3支一组),将A1组中放入菌片,B1组中放入纸片,C1组中什么也不加;不经灭菌,直接加入溴甲酚紫蛋白冻水培养基(等量)。

(三)实验组取18支洁净试管,分为A21A22B21B22C21C22六组(每3支一组),将A21A22组中加入菌片,B21B22中加入纸片,C21C22中什么也不加;其中A21B21C21进行160℃2小时干热灭菌;其中A22B22C22进行121℃20分钟湿热灭菌,灭菌完毕,冷却后加入溴甲酚紫蛋白冻水培养基(等量)。

(四)恒为培养将上述所有试管按分组在56℃恒温条件下培养48小时。

(五)结果处理将培养后的结果进行记录,制表进行比较,得出灭菌效果。

(六)重复试验多次(10几次)重复以上实验步骤,得出普遍结果。

3.为什么干热灭菌比湿热灭菌所需温度高时间长?在湿热条件下,有水蒸汽的作用:a高温水蒸汽导热比干空气要快;b高温水蒸汽冷凝变水时有放热过程;c高温水蒸汽能穿透细菌的细胞膜,直接进入细胞内破坏细胞;c高温水蒸汽能水解一部分细胞结构,加速导热。

(湿热中细菌菌体吸收水分,蛋白质较易凝固,因蛋白质含水量增加,所需凝固温度降低;湿热的穿透力比干热大;湿热的蒸汽有潜热存在,每1克水在100℃时,由气态变为液态时可放出2.26kJ(千焦)的热量。

这种潜热,能迅速提高被灭菌物体的温度,从而增加灭菌效力。

)五.培养基的配置1.配制牛肉膏蛋白胨培养基,有哪些操作步骤?那几步易出错,如何防止?称取药品—加热溶化—分装—加棉塞—包扎—灭菌—搁置斜面易出错的步骤有:a称取药品称取时钥匙专用,瓶盖不要错盖,易吸水的药品要快速称取;b加热溶化加入药品后要用玻璃棒不停搅拌,以免糊底(在琼脂熔化过程中,应控制火力,以免培养基因沸腾而溢出容器,同时,需不断搅拌,以防琼脂糊底烧焦。

);c分装分装时培养基不能粘在三角瓶(或试管)口,以免接种时染菌;d搁置斜面斜面长度约试管长度一半为宜。

2.配制培养基的一般原则是什么?a目的明确b营养协调c理化适宜d经济节约六.平板菌落计数法1.平板菌落计数法的原理是什么?它适用于那些微生物的计数?平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后,其中的微生物充分分散为单个细胞,取一定量的稀释液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。

统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。

(但是,由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞,所以,长成的一个单菌落也可能来自样品中的2~3或更多个细胞。

因此平板菌落计数的结果往往偏低。

现在常使用菌落形成单位)。

平板计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个微生物繁殖而形成的现象进行的,也就是一个菌落可代表一种微生物(并不绝对)。

通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量。

2.菌落样液移入培养皿后,若不尽快地倒入培养基并充分摇匀,将会出现什么结果?为什么?出现的结果是:形成菌落过于集中,不能形成均匀分布的单菌落,导致无法计数。

因为:若不立即摇匀,菌体常会吸附在皿底上,不易形成均匀分布的单菌落,从而影响计数的准确性。

3.要获得本次试验的成功,那几步最为关键?为什么?a稀释菌液若在稀释时移液管混用可使稀释梯度不准确,从而导致计数误差(放菌液时吸管尖不要碰到液面,即每一支吸管只能接触一个稀释度的菌悬液,否则稀释不精确,结果误差大。

);b稀释倒平板1若再加入菌液不立即倒入培养基,可使菌体黏附于皿底;2若不注意培养基温度,温度过高会将菌体烧死,温度过低会使培养基一倒入立即凝固,从而菌体不能均匀分布;3倒入培养基需立即摇匀,否则菌体常会吸附在皿底上,不易形成均匀分布的单菌落,从而影响计数的准确性;4选择倒平板的稀释梯度也是很重要的,一般以三个连续稀释度中的第二个稀释度倒平板后所出现的平均菌落数在50个左右为宜,否则要适当增加(或减少)稀释度加以调整。

4.平板菌落计数法与显微镜直接计数法相比有何优缺点?微生物显微镜直接计数法随机性大,所以对菌体数量不能做出较为宏观,全面的反应.显微镜直接计数法一般与血球计数板配套使用.但显微镜直接计数法的优点是快速,观察到马上可以计数,而计的是相应微生物总数。

平板菌落计数法最大的缺点是速度慢,需要平板上长出菌落一段时间后才能计数.但是由于平板菌落计数法通常做梯度稀释,所以计数的线性范围大.由于是菌悬液涂布,所以比较均匀,能较好的反应菌落的疏密程度.重复性,平行性很好,而计的是活菌数。

是经典的计数方法.七.显微镜直接计数法1.为何用血细胞计数板可计得样品总菌值?叙述其适用范围。

a计数室体积一定;b在显微镜下,不经染色不能分辨菌体的死活,使计数所得的数目为一定体积内的总菌数,从而计得样品中总菌值。

适用范围:可单细胞存在的细菌酵母菌或显丝状生长的真菌,放线菌所生的孢子等。

2.为什么计数室内不能有气泡?试分析产生气泡的可能原因。

a气泡会占据计数室的空间,导致计数室中的菌体个数计数偏小,最后导致计数结果偏小。

b计数室内的气泡,可影响菌液的随机分布,使计数产生误差。

产生气泡原因:a操作不当,先放菌液再盖盖玻片;b计数室洗涤不干净;c盖玻片移动,造成空气进入而产生气泡。

3.试分析影响本实验结果的误差来源及提出改进措施?1、仪器误差:所用器材均应清洁干净,并且计数板计数区不应该有擦痕。

2、计数室内可能有气泡。

因为酵母细胞并没有染色,看起来是透明的,有气泡很容易被计入,使数值偏高;并且,气泡会影响菌悬液的随机分布。

改进:若产生气泡,则用吸水纸吸出。

3、菌体在计数板上分布不均,当用选取5格计数时,会造成很大误差。

改进:应使菌液自然流入并混匀,进行观察时尽可能多数几个格子。

4、配制稀释液时吸取的浓度过高或过低,导致稀释液浓度和原液不成正确比例,计算时产生误差。

应将原液摇晃均匀后取中部的液体进行稀释。

5、由于数菌体数目时视觉疲劳而导致的视觉误差。

应多人观察,取记录平均数。

6、计数时可能将格四周的菌都计算在内了,使数值偏高。

改进:谨遵一个规则,计上不计下,计左不计右,不可以重复计数。

7、可能出现有出芽的酵母菌,将出芽的酵母菌按两个计数了,使数值偏高。

改进:计数时,只有当芽体于母细胞一样大的时候,才能计为两个。

8、微量移液器的最小量程太大,在加样时,容易加多,使盖玻片鼓起,血球计数板所技术的体积变大,最终结果偏大。

改进:用量程的小的微量移液器并少加一些。

八.微生物的纯培养技术1.如果一项科学研究内容需从自然界中筛选到能产生高温蛋白酶的菌株,你将如何完成?写出实验方案(产蛋白酶菌株在酪素平板上能形成降解酪素透明圈)。

以下试验方案有关操作均遵循无菌操作条件一材料准备1土壤【有机质(特别是蛋白质)含量丰富的土壤】2灭菌生理盐水(0.85%NaCl)3灭菌移液管4添加酪素的B—4(牛肉膏蛋白胨完全培养基)经灭菌5B—4斜面(经灭菌)6其他材料:接种环酒精灯等二操作方法1在盛有10ml灭菌生理盐水的烧杯中添加1g土壤,配成悬浮液;2稍静止后,用灭菌移液管移取部分上清液,将其制成10^4—10^6倍的稀释液;3用灭菌移液管吸取各稀释液用稀释倒平板法(或涂布平板法)将其接入添加酪素的B—4平板上;4在55—65℃下培养1—2天;5挑取形成降解酪素透明圈的菌落(透明圈直径D与菌落直径d之比较大者),转接入B—4斜面上培养;(若无特定菌落形成,则需另取土样从开始重复试验)6将B—4斜面上的菌落再用平板纯培养,依次重复2—3次后即可得到纯培养(镜检);7纯培养细菌中蛋白酶的提取及活性鉴定【摇瓶培养(若提取蛋白酶及其活性正常,则纯培养成功,否则,重取土样重复以上实验)】。

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