常见因素对胰岛素检测的干扰分析

常见因素对胰岛素检测的干扰分析

【摘要】［目的］分析常见的因素对胰岛素检测的干扰。［方法］分别评价抗凝剂三种可能出现的异常增高的干扰因素胆红素、甘油三酯、蛋白质，标本溶血以及标本保存温度和时间对结果的影响。［结果］EDTA?K2、肝素抗凝血，与血清管比较胰岛素检测结果无显著差异；高浓度的胆红素、甘油三酯、蛋白质对结果没有显著的干扰作用；溶血可造成胰岛素结果的下降，而且与溶血程度和温度呈正相关，随着放置时间的延长，胰岛素值会进一步下降。［结论］EDTA?K2、肝素抗凝剂，病理情况下高浓度的胆红素、甘油三酯、蛋白质不会引起胰岛素检测结果显著的变化；溶血可以引起胰岛素结果的下降，应加以避免。

血清胰岛素测定，在糖尿病的诊断、分型和治疗上有重要的指导作用，然而，常会遇到一些不符合临床的结果，给诊治带来困难，我们分析了一部分常见的因素，来评价利用化学发光技术检测胰岛素的干扰作用，现报告如下。

1材料与方法

1.1仪器与试剂

全自动化学发光分析仪Abbotti2000，使用配套原装胰岛素检测试剂、标准品、质控品，美国雅培公司生产。胰岛素测定方法：化学发光免疫分析。标本本院新鲜无溶血、脂血及黄疸的病人标本，胰岛素浓度分布，5.7～154.6mU/L，共20例。影响因素的评价方法：（1）抗凝剂：分别用EDTA?K2，肝素抗凝，与血清管比较。（2）干扰物质：在血清中加入高浓度胆红素、甘油三酯、蛋白质标准品（均由北京利德曼公司提供），使成可能出现的不同病理高浓度，对照管中加入等量的生理盐水，与各管比较。（3）溶血及标本保存条件在血清中加入血红蛋白（血红蛋白经新鲜血标本溶血自制），使标本呈轻微溶血和明显溶血，对照管加等量生理盐水，分别于4℃保存1h、4h，25℃保存1h、4h后检测。

1.2统计学处理

各组数据以x±s表示，分别与对照进行配对t检验。

2结果

2.1用EDTA?K2，肝素抗凝组与对照血清组比较，无显著差异，结果见表1。表1不同抗凝剂对胰岛素测定的影响（略）

2.2病理情况下异常增高的胆红素，甘油三酯，蛋白质干扰试验组与对照组比较，结果没有显著差异，结果见表2。表2三种干扰物对胰岛素测定的影响（略）

2.3正常无溶血标本4℃放置1h、4h，25℃放置4h后，与对照比对结果无显著变化，轻微溶血标本（血红蛋白浓度0.5g/L）4℃放置1h、4h后与对照比较无显著变化，而25℃放置1h与对照比较，P<0.05，放置4h后与对照比较，P<0.05，而25℃放置1h、4h与对照比较，P<0.01，结果见表3。表3溶血标本保存条件对胰岛素测定的影响（略）

3讨论

胰岛素检测，通常使用血清标本，本实验使用临床常用的EDTA?K2、肝素抗凝血，结果与血清无显著差异，说明胰岛素检测也可以选择以二者抗凝的血浆标本；评价了病理情况下出现的高浓度胆红素、甘油三酯、蛋白质的干扰作用，结果表明，当标本中的总胆红素达到200μmol/L，甘油三酯达到10.0mmol/L，蛋白质达到120.0g/L时，结果没有显著差异，没有产生明显的干扰作用。

溶血可以严重影响胰岛素测定值，国内也曾有报道认为溶血标本会影响胰岛素的测定结果［1］，这是由于红细胞内存在胰岛素降解酶，能水解胰岛素成为小分子片段，引起检测结果的下降［2?3］。

从表3中可看出，下降的程度与血红蛋白含量呈正相关，血红蛋白含量越高，胰岛素下降越明显。同一份溶血样本在25℃保存与4℃保存相比结果更低，说明低温能抑制酶的活性，样本在4℃保存能有效减少溶血干扰。面对临床对免疫检验速度的要求，胰岛素检测标本会在4h内完成标本分离及测试，我们以4h为限评价了标本放置时间对胰岛素检测的影响，结果显示，无溶血样本放置1h、4h后，胰岛素结果没有显著差异，说明无溶血标本在4h内完成检测可以满足质量要求，而溶血标本在室温下放置4h后会出现结果明显的下降。

标本溶血是造成胰岛素检测结果差异的主要原因，提示在标本采集，处理过程中应该尽可能避免溶血的发生，已有报道对溶血的原因和对策作了分析［4］。当然，溶血很难完全避免，一旦发生标本溶血，应重新抽血检测，为了降低不易发现的轻微溶血造成的结果差异，建议标本尽快进行血清分离并于4℃保存，尽快检测，确保胰岛素检测的准确性。

内容仅供参考