蛙心灌流实验报告

实验二离体蛙心灌流实验

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实验目的

1•学习离体器官（蛙心）灌流的方法。

2.观察理化因素对蛙心活动的影响。

二、实验原理

蛙心的灌流：蛙心无营养性血管，离体之后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间，心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。

心肌：

1任氏液：正常对照

含有NaC k CaC2、KC、NaH2PQ、N&HPQ

和蒸馏水，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。灌流：

细胞』液C爼州

心肌细胞动作电位期间C护+内流H

心肌细胞胞浆C屛+浓度W

心肌收缩力卄

%CaQ灌流:

细胞外液C汁浓度显著升髙膜内■外C B孝度梯度增大

慢反应细胞4期. 自动去极速度:

=r—~ ==

工作细胞动為电位期间C』内流怦

' ---

肌浆C乳浓度料肌浆cf浓度

持续升高

自律性'Cn古与肌钙蛋白

结合数量忖

心率专

心肌收缩力怦C強与肌钙蛋白只结合币解离

心肌持续收缩

%KC灌流:

辘楝K理度協牖

K帥制層内沆郞•屉糕梯黠小

1

Ca纳巔少

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鶉电位与胃电住

般作用减小J灯的电雌减小

「1 1

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心M瞅葩升高

细胞膜对通透性4

窦房结细胞最大复极电位绝 对值增大.4期K 亠外流增加

动作电位期iWCa^內流只

心肌收缩力井

心率*

7. 心得安

3受体阻断剂，抑制肾上腺素与

8. 阿托品

M 受体阻断剂，抑制Ach 减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。

细胞外液Q 浓度显著升高 膜内■外哎浓度梯度减小 静息电位绝对值减小至■55inV

Na 通道失活

心肌细胞兴奋性丧失

心脏停»于舒张状态

:10000 E 灌流

肾上腺素(E) 心肌细胞膜Bj 受体结合

6呜肌钙蛋自亲 细胞膜対C 尹通透性彳 和力#

肌浆网摄C0速度t

4期自动去极化速度丰

复扱期肌浆C 必

浓度降低速度聲

心肌舒张丰

:10000 Ach 灌流

自律性齐

心率彳

浆网对A C 产逋透性I I

T

动作电位期钳t

间C 尹内流丨丨 Jr

心肌收缩力存

乙酰胆＜(Ach) 心肌细胞膜M 受体结合

TC1

抑制钙通道

自律性*

3受体结合，使E 不能发挥作用。

心率：35次/min 最大收缩力： 最小收缩力：

实验器材

离体蛙心

任氏液、I % KCI 溶液、2%CaC1溶液、%NaCI 溶液、1:10000肾上腺素、1:10000 乙酰胆碱、心得安、阿托品

四、实验步骤

图2 %NaCI 灌流脉搏曲线

1.离子试剂 任氏剂-

4 %NaCI

1%KCI 任氏液清洗

任氏液清洗

2%CaQ -------------

任氏液

2.药物试剂

任氏液清洗

E ------------ 心得安+E 任氏液清洗

Ach

任氏液清洗

阿托品+Ach

任氏液 五、结果与分析

w-dcai

IITII

仙脚

uihlHIMllNllIMIIIMTU

■J

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冲尅

图1 正常脉搏曲线

NdCD I

心率：35次/min 最大收缩力： 最小收缩力：

分析：细胞外液中C22+浓度降低，2期Ca 2+内流减少，胞浆中 缩力降低。

Ca 2+减少，心肌收

图3 2%CaQ 灌流脉搏曲线

分析：心肌的舒缩活动与心肌肌浆中的钙离子浓度的高低有关。 达，储钙能力差，易受细胞外钙离子浓度高低影响。细胞外液中 争性抑制，细胞外液C 計浓度升高，细胞兴奋时内流C 計增加, 慢反应细胞4期去极速度加快，心率增快。

心肌肌浆网不发 Na +与 Cc 2+W 竞 心肌收缩力增强。

心率：38次/min 最大收缩力： 最小收缩力：

分析：K +与C22+在细胞膜上有竞争性抑制，细胞外液中 々浓度升高，K +抑制细 胞膜对C22+转运，因此进入细胞内Ca 2+降低，心肌的兴奋一收缩耦联作用减小， 心肌收缩力减弱。

分析：肾上腺素与心肌细胞膜上的 &受体结合，心肌细胞和肌浆网膜C22+通透性增强，肌浆中C22+浓度升高，心肌收缩力增强。而且肾上腺素使肌钙蛋白与钙离子亲和力下降，肌钙蛋白对钙离子的释放增强，肌浆网膜摄取钙离子的速度加快，钠-钙离子的交换增加，复极期向细胞外排出钙离子增多，心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显加强。

心率：34次/min

最大收缩力：

最小收缩力：图6 心得安+E灌流脉搏曲线

分析：心得安是P 1受体阻断剂，能够抑制肾上腺素与P 1受体结合，使E不能发挥作用，因此心率及心肌收缩力保持不变。

K通道的通透性增图7 乙酰胆碱灌流脉搏曲线

分析：乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合，心肌细胞膜

强，促进々外流，动作电位期间C計内流减少，心肌

收缩力降低。同时乙酰胆碱可直接抑制C尹通道，导

致Cc2+rt流减少，心肌收缩力降低。

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心率：35次/min

最大收缩力：

最小收缩力：