炮制前后何首乌蒽醌类含量的比较研究
炮制前后何首乌蒽醌类含量的比较研究
【摘要】比较用相同方法炮制的不同产地何首乌中蒽醌类含量的差异。
[方法]采用紫外分光光度法,以0.5%醋酸镁-甲醇溶液显色测定蒽醌含量,采用hplc方法测定大黄素的含量。
[结果]炮制后,何首乌中结合蒽醌类成分明显降低,总蒽醌类含量有所升高,但结合蒽醌占总蒽琨的比例明显降低;结合大黄素含量明显降低,总大黄素含量有所升高,但结合大黄素占总大黄素的比例明显降低。
[结论]炮制对何首乌中蒽醌类成分的含量有影响。
相比生首乌,制首乌中结合蒽醌含量明显降低,而总蒽醌含量有所上升;临床发现生首乌具有一定毒性而制首乌毒性较小,这可能和炮制后结合蒽醌含量降低有关系。
【关键词】何首乌;大黄素;结合蒽醌;总蒽醌;毒性何首乌(polygonummultiflorumthunb.)为常用中药,药用历史悠久。
生、制首乌性味相同,功效主治不同。
有研究表明生首乌和制首乌相比,生首乌结合蒽醌含量高,游离蒽醌含量低;生首乌的泻下作用主要是由结合蒽醌引起的,经炮制后,结合蒽醌水解成为游离蒽醌,故其泻下作用明显降低,临床功效也发生了变化[1]。
本实验采用相同的炮制方法对不同产地的何首乌进行处理,比较炮制前后不同产地的何首乌中蒽醌类成分含量的变化情况,为临床生制首乌的不同应用提供实验依据。
1 仪器和材料仪器:中药粉碎机(dj-041,上海);紫外分光光度计(lambada 12型,德国);药材:何首乌药材分别购自:①浙江中医药大学中药饮片厂(批号:20080815;产地:浙江);②北京同仁堂(批号:20080716;产地:四川);③胡庆余堂(批号:20081015;产地:贵州);④方回春堂(批号:20080621;产地:广东)。
对照品:1,8-二羟基蒽醌对照品(含量测定用,批号:0829-9702,中国药品生物制品检定所);大黄素(含量测定用,批号:110756-200110,中国药品生物制品检定所)。
2 实验方法2.1 uv-vis法测定总蒽醌和游离蒽醌的含量(1)制首乌的制备:取四个产地的何首乌各250g,参照中药材炮制规范,采用蒸法炮制所得[2]。
何首乌黑豆制前后蒽醌类含量变化研究
何首乌黑豆制前后蒽醌类含量变化研究【实验目的】1.掌握何首乌黑豆的经典加工方法。
2.探讨何首乌炮制前后蒽醌类成分的含量变化。
[实验设计理念]实践证明何首乌经黑豆制后,可除其滑肠致泻的副作用,增强滋润补肾养肝益血乌须发的功能。
何首乌的通便作用与蒽醌的结合有关。
测定何首乌炮制前后结合蒽醌和总蒽醌的含量,以研究何首乌炮制的意义。
[实验用品]仪器设备:药材粉碎机、索氏提取器、752紫外分光光度计、蒸锅、电炉、烧杯、量筒、125ml分液漏斗、25ml容量瓶7个、移液管(1ml、5ml)、脱脂棉药材:何首乌饮片、黑豆、0.5%mgac2-MeOH、氯仿、2.5mol/ml硫酸、大黄素标准品【实验内容】一、何首乌的加工先制取黑豆汁:取黑豆2g,加水适量,约煮4小时,熬汁约3g,黑豆渣再加水煮3小时,熬汁约2g,合并黑豆汁约5g。
黑豆制首乌:取生首乌片20g于烧杯内用黑豆汁拌匀,润湿,置蒸锅内,蒸至汁液吸尽,并显棕褐色时取出,干燥。
二.蒽醌成分含量测定1.标准曲线制定取2.5mg大黄素,置于25ml容量瓶中,加乙醚溶解,稀释至刻度。
准确吸取上述溶液的0.40、0.80、1.20、1.60、2.00、2.50和3.00 ml,放入25 ml容量瓶中,在水浴上蒸发乙醚,用0.5%mgac2-MeOH溶解残留物并固定体积。
在513nm处测量吸光度,并绘制吸光度-浓度曲线。
2.何首乌原料/制品中游离蒽醌的测定粉碎粉精密称取0.4g30ml氯仿,索氏提取1H提取液将氯仿回收至干燥残渣0.5%mgac2-meoh溶解转移至25ml容量瓶中,定容游离蒽醌试液于513nm处测吸光度,有标准曲线得浓度,并计算含量。
3.结合蒽醌的测定生何首乌和制备何首乌各0.2g,加入2.5mol/ml硫酸30ml,直接火水解1H,加入氯仿30ml,水浴回流12min,脱脂棉过滤至125ml,氯仿层酸层加入氯仿30ml,水浴回流12min,氯仿层洗涤至中性,无水硫酸钠使总蒽醌脱水按游离蒽醌测定法测总蒽醌含量。
不同炮制方法对何首乌有效成分的影响
不同炮制方法对何首乌有效成分的影响何首乌是一种常见的中草药材,被广泛应用于中医药领域。
何首乌具有补肝肾、益精血、黑发等功效,被誉为“黑发圣草”。
何首乌中含有多种有效成分,如蒽醌类、糖类、磷脂等,这些有效成分对人体具有积极作用。
而何首乌的炮制方法对其中的有效成分也有一定的影响。
不同的炮制方法会改变何首乌的化学成分,从而影响其药效。
本文将针对不同炮制方法对何首乌有效成分的影响进行探讨。
何首乌的传统炮制方法主要包括生用、制首乌、炭煅首乌等。
每种炮制方法都具有独特的炮制过程和工艺要求,因此对何首乌的有效成分会产生不同的影响。
在生用状态下,何首乌的有效成分主要是生物碱、多酚类、黄酮类等,含量较低,而且易受外界环境和储存条件的影响,稳定性差。
生用何首乌具有补肝肾、益精血、润肠通便等功效,被广泛应用于临床治疗。
生用何首乌的有效成分在加工过程中易受到氧化、挥发和分解等因素的影响,失去一定的药效。
制首乌是指将何首乌煅制成黑色,常见的制首乌有“制黑首乌”和“制青首乌”两种。
制首乌过程中,何首乌的有效成分会发生改变,多酚类、蒽醌类等成分含量增加,具有更好的稳定性和保存性。
制首乌后的何首乌除具有补肝肾、益精血等传统功效外,还具有抗氧化、抗衰老等新功效,这些功效与制首乌过程中形成的多酚类、蒽醌类等有效成分密切相关。
炭煅首乌是将何首乌煅制成炭状,主要成分在降解和燃烧过程中发生变化。
炭煅首乌中,何首乌的有效成分主要是活性炭、蒽醌类等,含量较高,具有更好的药效和生物利用度,对人体的益处更为明显。
炭煅首乌具有养血安神、健脾和胃、清热解毒等功效,被广泛应用于中药制剂中。
何首乌的炮制方法对其有效成分是会产生一定影响的。
生用何首乌中有效成分含量低,不稳定,药效差;制首乌中,有效成分含量增加,稳定性改善,具有更好的药效和生物利用度;炭煅首乌中,有效成分含量较高,药效更佳。
在使用何首乌时,应根据具体情况选择适合的炮制方法,以达到最佳的药效。
膨化炮制对何首乌中蒽醌含量的影响
膨化炮制对何首乌中蒽醌含量的影响【摘要】[目的]运用醋酸镁比色法对膨化炮制前后的何首乌中的蒽醌成分进行含量测定。
考察膨化炮制对何首乌中蒽醌含量的影响。
[方法]膨化炮制前后的何首乌分别经直接超声处理、酸水解后超声处理,以1,8—二羟基蒽醌为考察指标,分别测定膨化前后游离蒽醌、结合蒽醌含量。
[结果]膨化后何首乌中游离蒽醌和结合蒽醌都有所下降,但结合蒽醌要比游离下降更明显。
[结论]以何首乌中蒽醌含量作参考,挤压膨化适合何首乌炮制加工。
【关键词】醋酸镁比色法膨化炮制结合蒽琨游离蒽醌何首乌具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨之功效,在抗衰老、增强机体免疫、抗菌、造血和改善心血管功能等方面有许多独到之处,是滋补肝肾的常用中药,但几种现行的何首乌炮制工艺,如清蒸法、黑豆炮制法、姜制法和酒制法等具有耗时长,操作繁琐,而且连续化操作性差的缺点。
所以我们把食品加工中的挤压膨化技术应用于何首乌的炮制加工,这种炮制方法加工方便,口感好。
但是膨化加工后何首乌中主要成分含量如何变化,将影响到我们这个技术的可行性。
因此我们进行下面的实验对膨化前后何首乌中蒽醌含量进行测定。
1.实验仪器和材料。
TU—1901紫外分光光度计,FA1004型精密电子天平,SK8200LH超声仪,DGG-9246A恒温干燥箱、1,8—二羟基蒽醌对照品(中国药品生物制品检定所,批号0829-9702)、何首乌饮片(购买自峨眉仙山中药厂)。
2.蒽醌含量测定。
2.1 对照品溶液的制备。
取经105℃干燥至恒重的1,8—二羟基蒽醌对照品适量,精密称定0.5mg置25mL的容量瓶中,用甲醇溶解并定容,作为对照品溶液。
2.2 供试品溶液的制备。
分别称取何首乌饮片粉末、膨化后何首乌(过80目筛)各0.5g,分别置于具塞锥形瓶中,加入25mL甲醇,称重。
超声处理30min,放冷,再次称重,用氯仿补足重量。
过滤,残留物用甲醇5mL,洗涤2次,合并滤液。
将滤液蒸干,加入10mL水使溶解,分别用氯仿10mL萃取3次,合并氯仿萃取液,水层留下备下面试验用[1]。
炮制时间对何首乌中有效成分的影响
炮制时间对何首乌中有效成分的影响【摘要】目的: 探讨炮制时间与制首乌内在质量的关系。
方法: 用偏光显微镜观察了淀粉粒在何首乌炮制过程中的变化并比较何首乌各炮制品的蒽醌类成分、总糖、卵磷脂、二本乙烯苷、水溶性浸出物的含量。
结果:采用同一种炮制方法炮制,随着蒸制时间增加,水溶性浸出物的含量不断增加,何首乌中结合蒽醌含量越来越低,游离蒽醌、总糖、卵磷脂等成分的含量在一定蒸制时间范围内随着蒸制时间的增多而增加,二苯乙烯苷的含量随着蒸制时间的增加而逐渐降低,以笼屉蒸48h含量最高,随后各成分的含量有所下降。
结论: 何首乌作为补益药应用时采用笼屉蒸48h炮制品较好。
用偏光显微镜观察了淀粉粒在何首乌炮制过程中的变化,能有效控制何首乌炮制品的质量。
【关键词】何首乌;不同炮制方法;质量标准;探讨何首乌为临床常用中药,生品长于解毒散结,润肠通便;蒸制后可消除令人致泻的副作用,增强补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨的功效。
何首乌多以制首乌入药,何首乌的炮制,药典有蒸法、炖法,历代以黑豆为辅料炮制,炮制时间也可参考“煮熟”、“煮透”乃至“九蒸九晒”。
成分主要有卵磷脂、蒽醌衍生物、二苯乙烯苷类化合物,淀粉、脂肪、矿物质、糖类等成分。
二本已烯苷具有降低胆固醇和保肝作用,卵磷脂能促进血液细胞的生长发育,为其补肝肾,益精血的主要成分,总糖及还原糖具有滋补作用,结合蒽醌衍生物可促进肠管的蠕动以通便,游离蒽醌衍生物具有补益作用,能抑制肠道对胆固醇的再吸收。
中药炮生为熟引起的药性改变与其内在物质基础的变化有关,以往不少何首乌炮制的研究报道大多用单一成分为指标,单纯一种成分的变化并不能全面解释整个单味中药饮片功效的改变。
为说明炮制引起化学成分的变化,本文全面考察了用笼屉常压蒸制不同时间制得的何首乌炮制品中游离蒽酯、结合蒽醌、总糖、卵磷脂以及二苯乙烯苷类成分的含量及其变化规律并对何首乌各种炮制品样品进行炮制效果的比较,探讨现代炮制方法和炮制时间对何首乌炮制品质量的影响,同时分析炮制过程中有效成分的变化,为何首乌炮制工艺研究提供参考和依据。
中药何首乌炮制前后化学成分分析-化学工程论文-工业论文
中药何首乌炮制前后化学成分分析-化学工程论文-工业论文——文章均为WORD文档,下载后可直接编辑使用亦可打印——摘要:目的:观察分析中药何首乌炮制前后特征化学成分的变化。
方法:取5kg新鲜何首乌药材,清洗切片烘干后随机分为A、B、C、D、E五组,A组进一步进行黑豆汁蒸,B组进一步进行黑豆汁炖,C组进一步进行清蒸、D组进一步进行黑豆汁加黄酒蒸,E组进一步进行黑豆汁加甘草蒸,比较炮制与炮制前后何首乌化学成分变化情况。
结果:五组炮制后何首乌所含二苯乙烯苷以及儿茶素水平明显降低,没食子酸、大黄素、大黄素甲醚水平明显提高,差异具有统计学意义(P0.05)。
结论:何首乌炮制可有效提高何首乌中所含没食子酸、大黄素、大黄素甲醚等化学成分水平,降低二苯乙烯苷以及儿茶素水平。
关键词:中药何首乌;炮制;化学成分何首乌属于蓼科植物何首乌的干燥块根,生品名为“何首乌”,炮制品名为“制何首乌”,自古至今,国人认为何首乌生、制作用不同,《中国药典》记录生品何首乌具有消痈解毒、润肠通便的作用,制何首乌具有补益肝肾、强筋壮骨的作用[1,2]。
现代药理研究显示何首乌主要化学成分有二苯乙烯苷、蒽醌类以及鞣质成分,目前可测的物质主要为二苯乙烯苷、没食子酸、大黄素、大黄素甲醚、儿茶素等[3]。
本次研究分别将何首乌依次用黑豆汁蒸、黑豆汁炖、清蒸、黑豆汁加黄酒蒸以及黑豆汁加甘草蒸等五种方法炮制后比较炮制前后化学成分的变化情况。
1资料与方法1.1一般资料:本次研究随机选取5kg新鲜何首乌,经食品药品鉴定为蓼科植物何首乌的块根,采用超声波清洗器对所有药材进行清洗,清洗干净后对其进行干燥,而后将所有何首乌切成厚度1.2~1.5厘米片状,随机均分为A、B、C、D、E五组,每组均有1kg何首乌。
1.2方法:取黑豆425g,将黑豆与8倍水共煮4h后,熬汁约650g,提取豆渣加6倍水再煮3h,熬汁约425g后,合并得黑豆汁约1075g,备用。
A组将1kg何首乌与适量黑豆汁放入非铁质蒸制容器充分拌匀(不密封),炮制12h后将黑豆汁蒸何首乌使用50℃烘箱吹至含水量小于12%。
炮制对何首乌总蒽醌含量的变化研究_施群
[4] 张金成,郭莉君,左慧芳. RP_HPLC 法测定咳特灵胶囊中马 来酸氯苯那敏的含量[J]. 西北药学杂志,2011,24( 4) : 261 - 263.
DOI:10.13193/j.archtcm.2012.12.180.shiq.058
第 30 卷 第 12 期 2012 年12 月
中华中医药学刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDIC 1 2
炮制对何首乌总蒽醌含量的变化研究
Vol. 30 No. 12 Dec. 2 0 1 2
photometry can be used to determine the anthraquinones content from The Polygonum multiflorum Thunb. and the study provides a new experimental basis for clinical use and quality control of Polygonum multiflorum Thunb.
UV - 2550 紫外可见分光光度计( 日本岛津公司) ,UV probe 紫外工作站,KQ - 5200 型超声波清洗器( 40 kHz,200 W,昆山超声仪器有限公司) 公司) ,0412 - 1 型高速离心机 ( 上海手术器械厂) ,BS110S 电子分析天平( 北京赛多利斯 天平有限公司) ,DHG - 9035 热风循环烘箱( 上海林频仪器 设备有限公司) 。
中 华 中 医 药
2770
炮制对何首乌有效成分含量的影响
炮制对何首乌有效成分含量的影响
周春红
【期刊名称】《中医研究》
【年(卷),期】2005(018)009
【摘要】目的:测定何首乌炮制前后蒽醌类和二苯乙烯苷的含量变化.方法:大黄素对照品溶液与0.5%Mg(AC)2显色,在510 nm处以0.5%Mg(AC)2为空白,测其吸收度.二苯乙烯苷对照溶液以95%乙醇稀释定容,在310 nm处测其吸收度.结果:大黄素和二苯乙烯苷测定回归方程分别为Y=29.70 X+7.95×10-3,r=0.9993和
Y=73.00 X+0.0420,r=0.99992.结论:制何首乌中游离蒽醌的含量略高于生何首乌;而生何首乌中结合蒽醌的含量则明显高于制何首乌,二苯乙烯苷的含量亦高于制何首乌.
【总页数】2页(P18-19)
【作者】周春红
【作者单位】南阳市第一人民医院,河南,南阳,473010
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.不同炮制方法对何首乌有效成分含量的影响分析 [J], 拱宝香
2.土壤pH值对何首乌生理及其光合特性和有效成分含量的影响 [J], 冷芬;杨在君;吴一超;何道文
3.不同炮制方法对吴茱萸生物碱类有效成分含量的影响 [J], 陈路;冯世鑫;蒋妮;宋利沙;白隆华;陈乾平
4.不同炮制工艺对何首乌有效成分含量的影响 [J], 卢吉燕;龙明
5.炮制对不同采收季节何首乌有效成分含量的影响 [J], 翟德银
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
炮制时间对何首乌中蒽醌含量的影响
B < 07 , 4 * 4 /( #! D0 B -
参考文献
第 !版 M上海: 上海 W $ X 江苏新医学院编 M中药大辞典W L X S : 科学技术出版社, $ + + %% # # M 药物新剂型与新技术W 第 !版 M北京: W ! X 陆 彬主编S L X S 人民卫生出版社, : ! " " " & $ M 谢 辉, 狄留庆 M片姜黄挥发油" W & X 毛春芹, 2 环糊精包合 物的制备研究 中成药, , ( ) : W F X M ! " " !! *% % ! M (二部) W * X 国家药典委员会编M中华人民共和国药典 W > X M ! " " 年版 M北京: 化学工业出版社, : 附录# M ! " " (收稿日期: ! " " , 2 " , 2 " % 修回日期: ) ! " " , 2 " + 2 " , ・’ ・ ( )
’ 5 肝肾、 益精血、 强筋骨的作用4 。 其原因是生品中具有泻下作用
法测定 -次, 测得吸光度的相对标准差 (C 为% 8 D) 3 ) * E。 " ! & 回收率试验 称取已知含量的样品 -份,每份 % ,置 3 -> % ( ? 容量瓶 中,加入 ’ 对照品 溶液 ,再 加 入氯 仿 , 超 声处 理 ( ? * % ( ? , 放冷, 氯仿定容, 过滤。精密吸取续滤液 ( 置’ * % ( # $ ( ?, % ( ? 容量瓶中, 水浴蒸干, 放冷, 得残渣。 按醋酸镁比色法测定, 计算 , —二羟基蒽醌的回收率。结果表明,平均回收率 C ’ ( 8 DA ’ 3 , ( E。 " ! ’ 含量测定 精密吸取 “$ ” 项下的供试品溶液 (’ ) 置’ 3 ) ( ( ?, % ( ? 容量 瓶中, 水浴蒸干, 放冷, 将残渣用 % ・?7’ 醋酸镁 7 3 % ) -( , 甲醇溶液溶解并定容。以醋酸镁 7 甲醇溶液为空白对照品, 在计算游离蒽醌的含量, 结果详 ’ % $ ( 波长处测定吸光度, 见表’ 。 精密吸取 “$ ” 项下的供试品溶液 ($ ) 置’ 3 ) * ( ?, % ( ? 容量 瓶中, 蒸干, 放冷。 残渣用 % ・?7’ 醋酸镁7甲醇溶液溶 3 % ) ( , 解并定容, 以醋酸镁7甲醇溶液为空白对照品, 在’ %$ ( 波长 处测定吸光度, 计算样品中总蒽醌的含量。由此总蒽醌含量减 去游离蒽醌含量, 即得结合蒽醌含量, 结果详见表 ’ 。 表! & ’ (!
何首乌炮制前后成分含量的变化
何首乌炮制前后成分含量的变化中药制剂二班余舒乐邹莉【实验目的】1.掌握何首乌的炮制方法。
2.通过对何首乌炮制前后成分的含量测定,了解何首乌炮制以后功效改变及泻下作用减弱的原理。
【实验路线】本实验采用紫外分光光度法测定何首乌炮制后游离蒽醌及结合蒽醌的含量变化。
【实验材料】1.仪器:压力锅,电炉,分析天平,托盘天平,721型分光光度计,烧杯,容量瓶(25ml,10个),移液管(1ml,2ml,5ml),量筒,索氏提取器,圆底烧瓶,漏斗,滤纸,玻璃棒,脱脂棉。
2.药品:生首乌片,黑豆,0.5%醋酸镁甲醇液,氯仿,乙醚,2.5mol/L硫酸,1mol/L硫酸,大黄素标准品。
【实验内容】1.何首乌的炮制:取首乌片,用25%黑豆汁拌匀,至于非铁质的适当容器内,炖至汁液吸尽并呈棕褐色时取出,干燥(每100g首乌片,用黑豆10g)。
黑豆汁制法:取黑豆10kg,加水适量,约煮4h,熬汁约15kg,黑豆渣加水煮约3h,熬汁约10kg,合并之。
2.炮制前后何首乌中蒽醌类成分的测定:(1).标准曲线的绘制精密称取 2.5mg的大黄素置于25ml容量瓶中,加乙醚溶解稀释至刻度,配置成浓度为0.1mg/ml的标准溶液。
精密吸取0.40,0.80,1.20,1.60,2.00,2.50,3.00,3.50ml上述溶液,分别置于25ml容量瓶中,在水浴上蒸去乙醚,残渣用醋酸镁甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,于513nm处测定吸收度,以醋酸镁甲醇液作为空白对照,绘制吸收度-浓度曲线。
(2)何首乌游离蒽醌的测定精密称取生,制首乌粉末各0.4g,置于索氏提取器中,加氯仿30ml回流约一小时,回收氯仿至干,残渣用少量醋酸镁甲醇液溶解,并转移至25ml的容量瓶中定容,摇匀,于513nm处测定其吸收度,由标准曲线查得其浓度,并计算其百分含量。
(3)何首乌中结合蒽醌的含量测定精密称取生,制首乌各0.3g,分别置于烧杯中,加1mol/L硫酸4ml,放置,过滤,将滤液弃去,并挤干残渣中的酸液,将滤渣与滤纸同置于索氏提取器中,按测定游离蒽醌含量的方法测定。
炮制方法及提取溶剂对何首乌中主要成分含量的影响
炮制方法及提取溶剂对何首乌中主要成分含量的影响目的:研究不同炮制方法及不同提取溶剂对何首乌中主要成分含量的影响。
方法:采用黑豆汁蒸法和清蒸法对生何首乌进行炮制,分别用水、50%乙醇、70%乙醇、90%乙醇对生何首乌、黑豆汁制何首乌、清蒸制何首乌和市售制何首乌4种饮片进行提取,采用高效液相色谱法同时测定各样品中4种主要成分没食子酸、二苯乙烯苷、大黄素、大黄素甲醚的含量。
结果:3种何首乌炮制品的4种提取液中4种主要成分的含量均较生品中更高;没食子酸以水提时含量最高,二苯乙烯苷以90%乙醇提取时含量最低,大黄素和大黄素甲醚以50%和70%乙醇提取时含量较高。
结论:不同炮制方法和提取溶剂能明显影响何首乌中主要成分的含量;各炮制品中各成分的含量变化未呈现一定的规律性。
ABSTRACT OBJECTIVE:To study the effects of different processing methods and extraction solvents on the contents of major components in Polygonum multiflorum. METHODS:Decoction of black soybean and water were used to steam the raw P. multiflorum. Water,50% ethanol,70% ethanol and 90% ethanol were used to extract the raw,black soybean steamed,water steamed and commercial processed P. multiflorum respectively. HPLC method was used to detect the contents of gallic acid,2,3,5,4′ -tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside (THSG),emodin and physcion. RESULTS:The contents of 4 major components in 4 kinds of extracts from 3 kinds of processed P. multiflorum were higher than raw sample;the content of gallic acid extracted with water was the highest;the content of THSG extracted with 90% ethanol was the lowest;the contents of emodin and physcione extracted with 50% and 70% ethanol were the higher. CONCLUSIONS:Different processing methods and different extraction solvents had effect on the contents of the main compounds of P. multiflorum. The contents of each components in the processing products didn’t show certain regularity.KEYWORDS Polygonum multiflorum;Processing method;Extraction solvent;Gallic acid;2,3,5,4′ -tetrahydroxystilbene-2- O-β-D-glucoside;Emodin;Physcion;Content何首乌首载于《开宝本草》,为蓼科植物何首乌(Polygonum multiflorum Thunb.)的干燥块根,临床使用有生熟之分,生何首乌苦、甘、涩,微温,功能为解毒消痈、截疟、润肠通便。
何首乌不同炮制品的质量标准研究
何首乌不同炮制品的质量标准研究实验目的:1、比较何首乌不同炮制品中二苯乙烯苷含量变化。
2、掌握何首乌制品中二苯乙烯苷的提取方法。
3、掌握而苯乙烯苷的含量测定方法。
实验原理:何首乌的炮制:按照《中国药典》2000 年版一部制首乌项下的炮制方法, 分别采用清蒸、黑豆汁拌蒸、黑豆汁炖等方法进行炮制。
何首乌中二苯乙烯苷的含量目前已经成为何首乌药材的专属性指标。
何首乌中有效成分主要有蒽醌类化合物、磷脂及四羟基二苯乙烯苷类。
上世纪70年代何首乌中成药标准中大多以蒽醌类含量作为检测指标。
而蒽醌类成分如大黄素、大黄酚等在同属大黄、虎杖等药材中也含有。
随着对水溶性成分二苯乙烯苷的深入研究, 二苯乙烯苷成为何首乌中不容忽视的重要功能性组分。
2000 年中国药典!规定, 何首乌药材中四羟基二苯乙烯苷含量不得低于1. 0% [ 29] 。
同时二苯乙烯苷的测定方法也得到了较为深入的发展。
目前用于测定何首乌中二苯乙烯苷的方法有薄层扫描法、高效液相色谱法、紫外分光光度法、荧光分光光度法、酶化学发光法和高效毛细管电泳法等。
目前较为准确的二苯乙烯苷的测定方法是高效液相色谱法。
周庆华等[ 30] 采用高效液相色谱法测定了何首乌不同炮制品中二苯乙烯苷的含量, 为何首乌及其不同炮制品的质量评价提供了有效的方法, 已广泛用于何首乌原材料、炮制后何首乌及何首乌制品中二苯乙烯苷的测定。
高效液相色谱法准确性高, 灵敏度好, 是目前较为好的测定方法。
目前已发现何首乌有多种药效成分, 这些物质各具功效, 主要包括蒽醌类、二苯乙烯类化合物、卵磷脂、氨基酸、微量元素等。
其中二苯乙烯苷是何首乌中特有的生物活性成分,同时具有抗氧化清除自由基,降低胆固醇,保肝等多重功能,作为抗衰老的标的组分极具研究的价值。
本实验采用二苯乙烯苷的含量作为何首乌的质量指标性成分。
二苯乙烯苷(全称为2 ,3 ,5 ,4’2 四羟基二苯乙烯222O2β2D2葡萄糖苷) 为白色无定形粉末,易溶于水、甲醇、乙醇, 相对分子质量为分子量为406. 39[ 1],结构式为: 为白色无定形粉末, 易溶于水、甲醇及乙醇,。
不同炮制方法对何首乌有效成分的影响
不同炮制方法对何首乌有效成分的影响【摘要】何首乌是一种常用的中药材,其有效成分在不同炮制方法下可能会有所变化。
本文通过对水炮制、蒸炮制、油炒炮制和炙炒炮制这四种常见的炮制方法对何首乌有效成分的影响进行了研究。
研究发现,不同炮制方法对何首乌中的有效成分有着不同程度的影响,其中水炮制可能导致某些成分的流失,而蒸炮制则可能促进某些成分的释放。
油炒炮制和炙炒炮制则可能改变何首乌的化学结构,影响其药效。
综合分析表明,不同炮制方法对何首乌有效成分的影响是复杂且多样的,未来的研究可以进一步探讨如何优化炮制方法,提高何首乌的药效,为临床应用提供更好的参考依据。
【关键词】何首乌、炮制方法、有效成分、影响、水炮制、蒸炮制、油炒炮制、炙炒炮制、研究、结论、展望1. 引言1.1 研究背景何首乌,是一种常用的中药材,具有补血益肝、延缓衰老、增强免疫等多种功效,被广泛应用于中医临床。
不同于其他中草药,何首乌在炮制过程中有多种方法,如水炮制、蒸炮制、油炒炮制和炙炒炮制等。
这些不同的炮制方法会对何首乌中的有效成分产生影响,从而影响其药效。
探讨不同炮制方法对何首乌有效成分的影响,有助于更好地应用和开发何首乌的药用价值。
随着现代科学技术的进步,人们对中草药的炮制方法和药效进行了深入研究,但对于何首乌的炮制方法与药效之间的关系仍知之甚少。
本文旨在通过对何首乌不同炮制方法的有效成分进行分析和比较,探讨其对药效的影响机制,为何首乌的合理应用提供科学依据。
部分将重点介绍何首乌的药用历史、炮制方法及其对何首乌中有效成分的影响,为后续研究的展开奠定基础。
1.2 研究目的研究目的是为了探究不同炮制方法对何首乌有效成分的影响,从而为何首乌的合理炮制提供科学依据。
目前,虽然关于何首乌的炮制方法已有很多文献报道,但各种炮制方法对何首乌有效成分的影响并不完全清楚。
通过本研究,我们希望可以系统性地比较水炮制、蒸炮制、油炒炮制和炙炒炮制等常见炮制方法对何首乌有效成分的影响,揭示其机制。
炮制方法对何首乌有效成分影响的研究
炮制方法对何首乌有效成分影响的研究【关键词】何首乌;,,高效液相色谱法;,,醋酸镁比色法摘要:目的考察炮制时间对何首乌中有效成分2,3,5,4四羟基二苯乙烯2OβD葡萄糖苷(简称二苯乙烯苷)和蒽醌类化合物含量的影响。
方法何首乌分别采用黑豆汁拌蒸0,2,4,6,8,10 h。
HPLC测定炮制饮片中二苯乙烯苷的含量;醋酸镁比色法分别测定炮制饮片中游离蒽醌和总蒽醌的含量。
结果用黑豆汁拌蒸的何首乌饮片10 h内二苯乙烯苷含量随炮制时间先逐渐上升而后下降,以6 h为峰;游离蒽醌含量逐渐升高,总蒽醌含量没有显著性变化。
结论应规范何首乌饮片的炮制时间。
关键词:何首乌;高效液相色谱法;醋酸镁比色法Influence of Process Methods on Contents of Chemical Componentin Radix Polygoni MultifloriAbstract:ObjectiveTo investigate the effects of different time of processing Radix Polygonum Mutiflorum on the contents of chemical components 2,3,5,4-stilbene glucoside and anthraquinone were investigated .MethodsSteamed with black bean sauce for 0,2,4,6,8,10h respectively. HPLC was used to determine the content of 2,3,5,4-stilbene glucoside. The colorimetry with magnesium acetate as color-developing reagent was applied.The content of free and total anthraquinone were determined. ResultsIn the process of black bean sauce stewing,the content of 2,3,5,4-stilbene glueoside increased with processing time,6h reached the most and then decreased. The content of free anthraquinone increased with processing time and total anthraquinone almost unchanged. ConclusionThe processing of Radix Polygonum Mutiflorum should be standardized to avoid significant variation of chemical contents.Key words:Radix Polygoni Multiflori; HPLC; Magnesium acetate colorimetry spectrophotometric method何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根,为常用中药。
不同炮制工艺对制首乌有效成分含量的影响
不同炮制工艺对制首乌有效成分含量的影响研究目的1.掌握何首乌的炮制方法2.通过对制首乌有效成分含量的测定,比较不同炮制工艺对制首乌有效成分含量的影响立体依据何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根,为常用中药。
生品具有解毒、消痈、润肠通便之功效。
制首乌具有补肝肾、益精血、乌须发、增强免疫力、改善记忆障碍及抗衰老等功效。
何首乌中主要有效成分为蒽醌类和二苯乙烯化合物。
结合蒽醌具有泻下作用,何首乌经炮制后结合蒽醌逐渐转为无泻下作用的游离蒽醌。
二苯乙烯苷具有抗衰老、降低胆固醇、提高免疫功能、防治动脉硬化及保肝等作用,在何首乌中的含量较高,是制首乌抗氧化、抗衰老的主要有效成分。
本实验选取2.3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C20H22O9)作为制首乌有效成分的指标,比较药典收录的三种不同炮制工艺(黑豆汁蒸、酒蒸、清蒸)对有效成分含量的影响。
实验材料1.仪器:铁锅、电炉、紫外分光光度计、烧杯(300ml)、容量瓶(10、50、100ml)、移液管(0.5、1、2、5ml)、量筒(50、100ml)、分析天平及称量瓶、索氏提取器、溶剂回收装置、打粉机、吸管、圆底烧瓶、漏斗、锥形瓶(250ml)、滤纸、玻璃棒、脱脂棉。
2.药品:95%乙醇、白藜芦醇苷标准品、生首乌片、黑豆、黄酒。
路线方案1.黑豆汁蒸:取黑豆10kg,加适量水,约煮四小时,熬汁约15kg;黑豆渣再加水煮约3小时,敖汁约10kg,合并之,得约25kg黑豆汁。
取净何首乌块,用25%黑豆汁拌匀,置于铁锅内,炖至汁液吸尽并呈棕褐色是取出,干燥(每100kg何首乌,用黑豆10kg),打粉。
2.酒蒸:取100:25比例的黄酒浸泡何首乌(黄酒的量只要能浸润何首乌即可)30分钟。
加入清水煮约3小时。
待黄酒吃尽、何首乌成棕褐色即可。
取出,干燥,打粉。
3.清蒸:取何首乌,稍润,置蒸锅内密闭,隔水蒸至药物内外呈棕褐色,取出,干燥,打粉。
不同炮制方法对何首乌有效成分的影响
不同炮制方法对何首乌有效成分的影响作者:闫丽丽来源:《农业科技与装备》2019年第05期摘要:何首乌是传统的中药,炮制方法对何首乌有效成分具有一定的影响。
在查阅、收集近几年国内相关研究文献的基础上,总结采用不同炮制方法时何首乌中有效成分含量的变化情况,以期为进一步开展何首乌研究提供参考。
关键词:何首乌;有效成分;炮制方法;影响中图分类号:R282.2; ; 文献标识码:A; ; 文章编号:1674-1161(2019)05-0066-02何首乌(Polygonum multiflorum Thunb)为蓼科植物何首乌的干燥根,其味苦、甘、涩。
何首乌生品具有解毒、消痈、润肠通便等功效,制何首乌具有补肝肾、乌须发、益精血、化浊降脂、强筋骨等功效。
现代研究表明:何首乌的有效成分主要有二苯乙烯甘、蒽醌、大黄素、儿茶素、没食子酸、没食子酸酯等。
本课题在查阅收集大量文献的基础上,综述近几年不同炮制方法对何首乌有效成分含量的影响,旨在为何首乌规范化加工生产提供科学依据。
1 九蒸九晒炮制(古法炮制)对何首乌有效成分的影响明代《本草纲目》中记载:用何首乌赤白各一斤,竹刀刮去粗皮,米泔浸一夜,切片,用黑豆三斗,每次用三升三合三勺,以水泡过,砂锅内铺豆一层,首乌一层,重重铺尽,蒸之,豆熟,取出去豆,将何首乌晒干,再以豆蒸,如此九蒸九晒,乃用。
此法为经典的古法炮制,一直沿用至今。
杨磊等人采用HPLC法测定经典九蒸九晒与药典两种炮制方法下何首乌中二苯乙烯苷、游离蒽醌及结合蒽醌的含量,分析变化规律。
结果表明:九蒸九晒炮制品中,二苯乙烯苷的含量从3.021%下降至0.905%,结合蒽醌含量从0.401%下降至0.015%,总蒽醌含量从0.681%下降至0.445%,游离蒽醌含量从0.281%上升至0.432%;药典炮制品与传统九蒸九晒炮制品在化学成分上存在较大区别。
杨文宇等人探索何首乌传统九蒸九晒炮制过程中质量指标的变化。
采用传统的黑豆共蒸法(隔水蒸)进行九蒸九晒,测定二苯乙烯苷、游离蒽醌、水分及醇溶性浸出物的含量。
第一组 何首乌设计性试验
何首乌不同炮制品的总蒽醌含量研究【实验目的】1.掌握何首乌的不同炮制方法。
2.通过对何首乌炮制前后所含总蒽醌含量的变化研究,了解何首乌炮制以后功效改变以及泻下作用减弱的原理。
【实验原理】何首乌为蓼科植物何首乌 Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根。
生首乌能解毒,散结,滑肠致泻。
炮制后味变甘苦,性温,功效长于补肝肾,强筋骨,益精血,所以其制品为常用滋补药之一。
现代研究表明,何首乌含蒽醌类、二苯乙烯苷类、磷脂类、糖类等化合物,其中蒽醌类化合物为其主要有效活性成分,具有降血脂、抗衰老、增强免疫功能等药理作用。
制首乌为生首乌经蒸法炮制晒干后所得的炮制品。
其中生品中结合蒽醌具有泻下作用,经炮制之后结合蒽醌水解生成游离蒽醌,从而使其泻下作用降低。
目前生首乌和制首乌在临床上的用量均较大,两者性味相似但功效主治却有很大差别,炮制常会使药材的有效成分及其含量发生变化。
为考察何首乌炮制前后主要有效成分总蒽醌的变化,本文采用紫外分光光度法测定其炮制前后总蒽醌的含量,为首乌药材的质量控制及临床应用提供实验依据。
【实验材料】1.仪器紫外可见分光光度计、电子分析天平、超声波清洗仪、高速离心机、烧杯、电炉、25ml容量瓶、量筒、烧杯、不锈钢容器、移液管(0.5ml、1ml、5ml)、洗耳球2.药品1,8 -二羟基蒽醌对照品、生首乌、黑豆、95%乙醇【实验内容】一、何首乌的炮制1.生首乌:去原药材,除去泥沙,杂质,洗净,切厚片或者块状,干燥。
2.黑豆制首乌:取何首乌片10克,用黑豆汁拌匀,置非铁质的适宜容器内,炖至汁液吸尽并呈棕褐色时,取出干燥。
3.蒸首乌:取何首乌10克,置非铁质的容器中,隔水清蒸至内外均呈棕褐色,取出干燥。
(黑豆汁的制备:取黑豆10kg,加水适量,约煮4个小时,熬汁约15kg;黑豆渣再加水煮3个小时,熬汁约10kg,合并约25kg)二、炮制前后何首乌中总蒽醌类成分的测定1、对照品溶液的制备和标准曲线的绘制精密称取干燥至恒重的1,8-二羟基蒽醌对照品2.5mg,置25mL 容量瓶中,加95%乙醇溶解,并定容至刻度,得含1,8 -二羟基蒽醌浓度为0.1mg /mL 的对照品溶液,备用。
紫光光度计实验报告小结
一、实验背景紫光光度计是一种常用的分析仪器,主要用于物质的定量和定性分析。
本实验旨在通过紫外分光光度法,对何首乌炮制前后的蒽醌类和二苯乙烯苷含量进行测定,探究炮制前后主要成分的变化。
二、实验目的1. 掌握紫外分光光度计的基本操作方法。
2. 学习紫外分光光度法测定物质的原理。
3. 通过实验,探究何首乌炮制前后蒽醌类和二苯乙烯苷含量的变化。
三、实验原理紫外分光光度法是一种基于物质对紫外光吸收特性进行分析的方法。
当物质分子中的某些化学键或电子处于激发态时,会吸收紫外光,产生相应的吸收光谱。
根据吸收光谱的特征,可以确定物质的组成和含量。
本实验采用紫外分光光度法测定何首乌炮制前后蒽醌类和二苯乙烯苷的含量。
首先,配制大黄素和二苯乙烯苷对照品溶液,绘制其吸收光谱。
然后,测定何首乌炮制前后的样品溶液,通过比较吸收光谱,确定其含量。
四、实验仪器与试剂1. 仪器:紫外分光光度计、电热恒温水浴锅、电子读数天平、电光分析天平、大黄素对照品、二苯乙烯苷对照品、药材何首乌、制何首乌、醋酸镁、氯仿、甲醇。
2. 试剂:醋酸镁、氯仿、甲醇。
五、实验步骤1. 对照品溶液的配制:精密称取大黄素2.0 mg于10 mL量瓶中,用甲醇溶解、稀释并定容至刻度,得大黄素溶液;精密称取二苯乙烯苷2.5 mg于10 mL量瓶,用95%的乙醇溶解、稀释并定容至刻度,得二苯乙烯苷对照品溶液。
2. 吸收光谱的绘制:精密量取大黄素0.5 mg于10 mL量瓶中,用0.5%Mg(AC)2溶液显色,并加0.5%Mg(AC)2至刻度;在紫外分光光度计上,以0.5%Mg(AC)2为空白对照,测定大黄素的吸收光谱。
3. 何首乌样品溶液的制备:精密称取何首乌样品,用氯仿提取,得到样品溶液。
4. 炮制前何首乌样品溶液的测定:按照上述方法,测定炮制前何首乌样品溶液的吸收光谱。
5. 炮制后何首乌样品溶液的测定:按照上述方法,测定炮制后何首乌样品溶液的吸收光谱。
6. 结果分析:通过比较炮制前后样品溶液的吸收光谱,确定其含量。
不同溶剂所制何首乌浸膏中所含游离蒽醌的含量比较
不同溶剂所制何首乌浸膏中所含游离蒽醌的含量比较
陈小蕾;吴立强;陈小雨
【期刊名称】《海南医学》
【年(卷),期】2003(014)012
【摘要】目的观察不同溶剂所制何首乌浸膏中所含游离蒽醌的含量变化.方法以醋酸镁显色,用754分光光度计在波长498nm处测定A值,从而求得游离蒽醌的含量.结果 A组(90%乙醇)平均游离蒽醌的含量为0.1495%,B组(70%乙醇)为
0.0673%,C组(水)为0.0084%,A组含量显著高于B组和C组(P<0.05).结论 A组方案可首先用于何首乌浸膏中游离蒽醌的提取.
【总页数】2页(P119-120)
【作者】陈小蕾;吴立强;陈小雨
【作者单位】海南省中医院,海口,570203;武警海南省总队医院,海口,570203;武警海南省总队医院,海口,570203
【正文语种】中文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.两种不同溶剂提取大黄中游离蒽醌化合物的比较实验 [J], 胡聪;张书锋;秦葵;连佳芳;屈磊
2.生大黄与酒炙大黄不同溶剂提取液中游离蒽醌、结合蒽醌的含量比较 [J], 孟兆青;杨中林
3.制何首乌的含量测定及不同来源制何首乌的含量比较 [J], 李如敏
4.复合辅料炮制何首乌对二苯乙烯苷和游离蒽醌的影响 [J], 李润虹;甘国兴;龙国斌;朱卫星;周国彦;张永钜
5.制何首乌在复方汤剂中配伍变化对游离蒽醌溶出率的影响 [J], 吴荣才;张成栓;孙曼春;姚丽娜;杨飏
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
炮制设计实验
设计实验何首乌炮制作用的研究以测定何首乌中游离蒽醌含量变化为标准【实验目的】1. 掌握何首乌的炮制方法2. 通过对何首乌炮制前后游离蒽醌的含量测定,了解何首乌炮制以后功效改变及泻下作用的原理。
【实验原理】何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb. 的块根。
生乌能解毒,散结,滑肠致泻。
炮制后味变甘苦,性温,功效长于补肝肾,益精血,所以起制品为常用滋补药之一。
何首乌的成分主要是羟基蒽醌衍生物卵磷脂,其中结合蒽醌具有泻下的作用,何首乌经过炮制,使部分结合蒽醌衍生物水解物无致泻作用的游离蒽醌衍生物,从而大大地减弱了泻下的作用,所以何首乌炮制后会消除其泻下的作用。
本实验应用比色法测定何首乌炮制前后游离蒽醌含量变化。
【实验材料】1.仪器压力锅、电炉、紫外分光光度计、烧杯(300ml)、容量瓶(10,25,50ml)、移液管(0.5,1,2.5ml)、量筒、称量瓶、索氏提取器、溶剂回收装置、吸管、圆底烧瓶(30,100ml)、漏斗、分液漏斗、锥形瓶(250ml)、滤纸、玻璃棒、脱脂棉。
2.药品氯仿(AR)、大黄素标准品、生首乌片、黑豆汁(黑豆汁制取的时间较长,希望实验室提供)、0.5%MgAc2-MeoH溶液、乙醚。
【实验内容】1.何首乌的炮制(1)生何首乌:取原材料,除去泥沙、杂质,洗净,切厚片或块,干燥。
(2)黑豆制首乌:取净首乌片或块,用25%黑豆汁拌匀,置于非铁质的适量容器内,炖至汁液吸尽并呈棕褐色是取出,干燥(每100kg首乌片,用黑豆10kg)2. 炮制前后何首乌中游离蒽醌的含量测定(1)标准曲线的制备精密称取2.5mg的大黄素置于25ml容量瓶↓乙醚稀释至刻度0.1mg/ml标准溶液↓精密吸取0.40、0.80、1.20、1.60、2.00、2.50、3.00上述溶液↓25ml容量瓶中↓水浴蒸去乙醚残渣用0.5%MgAc2-MeoH溶液稀释至刻度↓摇匀于513nm处测定吸收度,以0.5%MgAc2-MeoH溶液作空白对照绘制标准曲线(2)何首乌中游离蒽醌的测定精密称取生何首乌、制何首乌粉末0.4g↓分别置于30ml索氏提取器中氯仿30ml回流提取至无色(约1h)↓回收氯仿用少量0.5%MgAc2-MeoH溶液溶解↓转移至25ml容量瓶中,稀释,摇匀于513nm处,以0.5%MgAc2-MeoH溶液对照由标准曲线查得浓度,并计算其百分含量计算式:含量%=(C×T)/(W×1000)×100%式中:C:由标准曲线求得的样品的浓度(mg/ml)T::稀释度W:样品的重量(g)。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
【摘要】比较用相同方法炮制的不同产地何首乌中蒽醌类含量的差异。
[方法]采用紫外分光光度法,以0.5%醋酸镁-甲醇溶液显色测定蒽醌含量,采用hplc方法测定大黄素的含量。
[结果]炮制后,何首乌中结合蒽醌类成分明显降低,总蒽醌类含量有所升高,但结合蒽醌占总蒽琨的比例明显降低;结合大黄素含量明显降低,总大黄素含量有所升高,但结合大黄素占总大黄素的比例明显降低。
[结论]炮制对何首乌中蒽醌类成分的含量有影响。
相比生首乌,制首乌中结合蒽醌含量明显降低,而总蒽醌含量有所上升;临床发现生首乌具有一定毒性而制首乌毒性较小,这可能和炮制后结合蒽醌含量降低有关系。
【关键词】何首乌;大黄素;结合蒽醌;总蒽醌;毒性
何首乌(polygonummultiflorumthunb.)为常用中药,药用历史悠久。
生、制首乌性味相同,功效主治不同。
有研究表明生首乌和制首乌相比,生首乌结合蒽醌含量高,游离蒽醌含量低;生首乌的泻下作用主要是由结合蒽醌引起的,经炮制后,结合蒽醌水解成为游离蒽醌,故其泻下作用明显降低,临床功效也发生了变化[1]。
本实验采用相同的炮制方法对不同产地的何首乌进行处理,比较炮制前后不同产地的何首乌中蒽醌类成分含量的变化情况,为临床生制首乌的不同应用提供实验依据。
1 仪器和材料
仪器:中药粉碎机(dj-041,上海);紫外分光光度计(lambada 12型,德国);药材:何首乌药材分别购自:①浙江中医药大学中药饮片厂(批号:20080815;产地:浙江);②北京同仁堂(批号:20080716;产地:四川);③胡庆余堂(批号:20081015;产地:贵州);④方回春堂(批号:20080621;产地:广东)。
对照品:1,8-二羟基蒽醌对照品(含量测定用,批号:0829-9702,中国药品生物制品检定所);大黄素(含量测定用,批号:110756-200110,中国药品生物制品检定所)。
2 实验方法
2.1 uv-vis法测定总蒽醌和游离蒽醌的含量
(1)制首乌的制备:取四个产地的何首乌各250g,参照中药材炮制规范,采用蒸法炮制所得[2]。
(2)对照品的配制:精密称取置五氧化二磷干燥器12小时的1,8-二羟基蒽醌对照品3.62mg,以甲醇溶解制成0.1448mg/ml的对照品溶液。
(3)供试品溶液的配制:取以上炮制好的制首乌和生何首乌各0.3g,精密称定,置圆底烧瓶中,精密加入甲醇50ml,称定重量,水浴加热1h,取出,放冷,擦干再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,过滤,取续滤液,即得供试品溶液。
(4)游离蒽醌供试品的配制:取上述供试品溶液10ml,用氯仿萃取至无色,每次20ml,合并氯仿层,回收溶剂,备用。
(5)总蒽醌供试品配制:取上述供试品溶液10ml,置100ml的圆底烧瓶中,挥干甲醇,加8%盐酸溶液10ml,超声2min,加氯仿20ml回流2h,放冷,用氯仿萃取3次,每次20ml,合并氯仿层,回收溶剂,备用。
(6)最大吸收波长的选择:取对照品溶液2ml和样品溶液1ml,置10ml容量瓶中,挥干甲醇液,加0.5%醋酸镁-甲醇溶液,定容至刻度,显色20min,于400-700nm扫描,样品和对照品的最大吸收波长在506-511nm,且峰形平缓,综合考虑,选择509nm作为测定波长。
(7)线性范围:精密移取对照品溶液0.25、0.5、0.75、1.0、1.25 ml,置10ml容量瓶中,挥干甲醇,加0.5%醋酸镁-甲醇溶液,定容至刻度,显色20min,在509nm波长下测定吸光度。
以浓度(μg/ml)为横坐标(x),吸光度为纵坐标(y),绘制标准曲线,得回归方程为:y=0.0505x-0.026,r2=0.9975。
见图1。
(8) 含量测定参照蒽醌类成分的醋酸镁比色法,考察确定以0.5%醋酸镁-甲醇溶液为显色剂,显色20min,在509nm波长下测得蒽醌含量,结果见表2。