盐酸贝那普利含量有关物质方法确认方案

1目的(Purpose)

对盐酸苯那普利USP含量有关物质分析方法进行方法确认。

2范围(Scope)

2.1含量分析法的确认内容包括方法的专属性和重现性。

2.2有关物质分析法由两个实验构成：Test 1：苯那普利杂质A，Test 2：苯那普利杂质B，C，D，E，F，和G。有关物质分析法的确认内容包括方法的专属性，方法的重现性，和定量限(LOQ)。

2.3所配含量标准溶液和样品溶液的稳定性也将予于考察。

3职责(Responsibilities)

3.1 质量管理部（QA Dept.）

QA经理负责验证方案和报告的批准；负责监督管理整个确认活动，确保确认按进度计划进行。

QA人员负责过程监督，确保按批准的方案进行，确保质量管理的原则体现在确认过程之中。

3.2 注册部

审核方案和报告与cGMP的符合性。

3.3 化验室（QC Dept.）

负责确认方案的起草，确认过程的实施，并完成验证报告。

4确认试验所用标准品和样品(Test Articles)

4.1 标准品

USP盐酸苯那普利工作对照品，或昌明自制工作对照品

USP盐酸苯那普利有关物质A，B，C，D，E，F，G工作对照品，或昌明自制工作对照品。

4.2样品

盐酸苯那普利，批号；生产厂家：浙江昌明药业有限公司

5含量分析方法确认试验（Verification For Assay method）

5.1 含量分析方法重现性

5.1.1 试验

5.1.1.1 QC检验员按照附录含量分析方法用相同批的盐酸苯那普利(批号:)配制6个盐酸苯那普利供试品溶液。

5.1.1.2 按照附录含量分析方法(HPLC)对每个样品溶液进行含量分析。按照附录含量分析方法规定的进样程序进样。每个样品溶液重复进样两针，并且每隔12针样品溶液和进样程序完成后进1针程序控制标准品溶液。

5.1.2数据有效性标准

5.1.2.1满足附录含量方法规定的系统适应性要求

5.1.2.2同一样品溶液重复进样的面积比率在0.980和1.020之间

5.1.3可接受标准

5.1.3.1 样品的分析结果都应该满足产品的质量要求

5.1.3.26个样品的含量的RSD不得超过2.0%

6有关物质分析-Test 1 方法确认（盐酸苯那普利杂质A）（Verification For Benazepril Related Compound A）

6.1专属性(Specificity):

6.1.1试验

6.1.1.1根据附录有关物质分析-Test 1 方法，准备分离度溶液(盐酸苯那普利约1.0mg/ml，杂质A约0.005mg/ml)。

6.1.1.2按附录有关物质分析-Test 1 中的色谱方法，进1针流动相（准备分离度溶液的稀释液）。

6.1.1.3按附录有关物质分析-Test 1 中的色谱方法，进1针分离度溶液。

6.1.2可接受标准

6.1.2.1盐酸苯那普利与盐酸苯那普利杂质A的分离度不小于2.0

6.1.2.2流动相（稀释液）色谱行为对盐酸苯那普利和盐酸苯那普利杂质A的色谱峰没有明显的干扰。

6.2LOQ 确认：

6.2.1试验

6.2.1.1根据附录有关物质分析-Test 1 方法.，准备稀释标准品溶液(苯那普利杂质A浓度约1µg/ml )。

6.2.1.2按附录有关物质分析-Test 1 中的色谱方法，进1针稀释标准品溶液50µl。

6.2.1.3按附录有关物质分析-Test 1 中的色谱方法，进1针稀释标准品溶液，进样体积减少到25µl。6.2.1.4从两针色谱中，计算苯那普利杂质A的信/噪比S/N 。

6.2.2接受标准

6.2.2.1当进样体积为50 µl，信噪比S/N≥10。

6.2.2.2报告进样体积为25 µl时的信噪比S/N。

6.3重现性：

6.3.1. 试验

6.3.1.1QC检验员按照附录苯那普利杂质A分析方法用相同批的盐酸苯那普利(批号：)配制3个盐酸苯那普利供试品溶液。按照附录有关物质分析-Test 1 中的色谱方法，对配制的3个盐酸苯那普利供试品溶液进行苯那普利杂质A分析(每个供试品溶液进样一针)。

6.3.1.2配制标准加入溶液：精确称取约50mg盐酸苯那普利(批号：)并移取1.0ml标准储备液置同一50ml容量瓶中。加流动相溶解并稀释到刻度，混匀。标准加入溶液中，盐酸苯那普利约为1.0 mg/ml，苯那普利杂质A约为0.001 mg/ml。按照附录有关物质分析-Test 1 中的色谱方法，对标准加入溶液重复进样6针。

6.3.2数据有效性标准

6.3.2.1满足附录有关物质分析-Test 1 中的规定的系统适应性要求

6.3.3可接受标准

6.3.3.13针盐酸苯那普利供试品溶液进样色谱图中色谱峰相对保留时间RRT和峰形相似。

6.3.3.2报告标准加入溶液重复6针进样色谱图中杂质A峰面积的RSD 。

7有关物质分析-Test 2 方法确认(盐酸苯那普利杂质B，C，D，E，F，和G) （Verification For Benazepril Related Compounds B，C，D，E，F，G）

7.1专属性Specificity

7.1.1试验

7.1.1.1根据附录有关物质分析-Test 2 中的色谱方法配制系统适应性溶液（盐酸苯那普利约400 µg /ml、杂质B约400 µg /ml）。

7.1.1.2根据附录有关物质分析-Test 2 中的色谱方法配制工作标准品溶液(杂质B, C, D, E, F, G,各约

10:g/ml)。

7.1.1.3按附录有关物质分析-Test 2 中的色谱方法进2针流动相空白。

7.1.1.4按附录有关物质分析-Test 2 中的色谱方法进工作标准品溶液。

7.1.1.5按附录有关物质分析-Test 2 中的色谱方法进系统适应性溶液。

7.1.2可接受标准

7.1.2.1盐酸苯那普利与杂质B的分离度≥1.7。

7.1.2.2流动相（稀释液）色谱行为对盐酸苯那普利和盐酸苯那普利杂质的色谱峰没有明显的干扰。7.1.2.3报告每个苯那普利有关物质相对保留时间RRT。

7.1.2.4报告已知相邻峰的分离度。

7.2LOQ (0.02%) 确认：

7.2.1试验

7.2.1.1用流动相稀释工作标准品溶液得到稀释标准品溶液（杂质B, C, D, E, F, G各约1:g/ml）。

7.2.1.2用流动相稀释系统适应性溶液得到LOQ溶液（苯那普利和杂质B各约0.2:g/ml）。

7.2.1.3稀释液，LOQ溶液和稀释标准品溶液进样。