试管婴儿的受孕过程

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大部分都知道试管婴儿可以治疗不孕不育,可是对于这种先进的辅助生殖技术,试管婴儿的受孕过程是比较复杂的,因为相关方面的专家给予了介绍。

1.控制性超排卵一般是先用一种叫GnRHA(促性腺激素释放激素激动剂,具体是达菲林和达必佳)的激素药物,它能阻止体内促卵泡激素和促黄体激素的分泌,这样外源性的激素就更能发挥作用。再用卵泡生长的激素刺激卵巢中的卵泡成长。为了使卵巢内的多个卵泡同时发育,一般患者是在月经期的第2-3天开始用促卵泡激素,这时的卵巢内一般没有大的卵泡。

依据患者对药物的反应调整药物使用剂量和使用时间,患者的年龄和对药物的反应不同,用药的剂量和用药时间也不同。待卵泡长到一定程度,卵泡内的卵子长到能够成熟的大小,再给予促卵子成熟的激素。等卵子基木成熟,但还没有排卵之前,通过手术方法把它们取出来。

对于大多数患者,需持续用药10天左右,有些可能短到8天,而长者可达15~16天。药物的种类和剂量取决于病人的具体情况(细节请读排卵药物和排卵处理章节)。

在一些治疗周期中,应用药物后排卵可能会自动发生。当自动排卵发生时,卵子可能在盆腔中丢失,这个周期为此必须取消。有些患者可能在用药几天后,卵巢仍然没有反应,即无任何卵泡生长.对于这种情况,医生也会取消这一治疗周期。

2 .卵子诱导成熟(取卵前35~36小时)

上述用药大多数情况下只能使卵子长大,但是还不能获得成熟卵。为了评价卵泡内的卵子是否具有成熟能力,医生必须用超声仪来监测卵泡的大小,并配合检查血液的雌激素水平。当2或3个以上的卵泡直径大于1.8~2厘米,雌激素水平与卵泡数量相符时,这时的卵子就具有成熟的能力了。医生便可注射人绒毛促性腺激素促使卵泡内卵子成熟。人卵子的成熟时间大约是36-40小时,注射人绒毛促性腺激素后必须在35~36小时内取出。因此,医生会安排患者的取卵时间。由于取卵手术一般是在上午进行,所以注射人绒毛促性腺激素的时间一般在前两天的下午到晚上进行。

3.取卵(胚胎的第0天) 取卵是在注射了人绒毛促性腺激素的35~36小时内进行。过早或过迟取卵都会影响卵的取出率和取出卵的质量。过早可能会使卵子未能完全成熟,有较多的未成熟卵,而过迟有可能使一些大卵泡排卵,因而取不到卵。

取卵是一个小手术,可以是在全身麻醉下或是在局部麻巢下进行。经阴道超声仪引导,将取卵针穿过阴道,直达卵巢吸取卵子后,实验室人员立即在显微镜下将吸到的卵子移到含有胚胎培养液的培养皿中,置于37℃的培养箱中培养。由于阴道内超声波吸入术是一种小手术,有些医生为了让患者节约费用只使用止痛药而不使用全身麻醉。

一般取卵时间在30分钟之内。患者取卵后只有轻微的疼痛和极少量的出血,休息1~2个小时就可以回家,不会影响日常工作和生活。由于卵泡大小不一,因此取出的卵子的成熟阶段并不完全一致。有的可能是未成熟的,而有的可能是过成熟的。刚取出的卵周围被卵丘细胞所包围,一般可以通过这些细胞的扩张程度判断出卵子的成熟情况。但是,要知道它们的准确成熟阶段,必须将这些细胞与卵子分开。一般说来,可发现有以下几种卵子:

1)成熟卵透明带下的卵周隙内有一个小的细胞,叫做第一极体,它是由卵子释放的。第一极体的释放是卵子成熟的指标。

2)未成熟卵有两种不同时期的未成熟卵。一种是在透明带下的卵周隙内没有第一极体,但卵子内有一个明显的核,叫做生发泡,这种卵叫做生发泡期卵,这是最早期的未成熟卵。另一种是卵子的卵周隙内没有第一极体,卵子内也没有一个明显的核,这是处于生发泡期卵和成熟卵之间的未成熟卵。未成熟卵是不能用于受精的,必须等到它们完全成熟后才能用来受精。

3)过成熟卵卵子成熟后必须受精。从卵子成熟到受精之间的时间一般是5~6个小时。如果在这个时间段内未能受精,卵子将会开始老化,最后死亡。由于卵子取出的时候卵泡大小不一,卵子的成熟阶段也就不可能在同一个时期。如果用时间过长,或卵子在受精前的体外时间过长都会使卵子过成熟。虽然过成熟卵能够被受精,但是由它产生的胚胎质量将会很差,胚胎移植后很难怀孕。

4)异常卵有些卵从体积上看要比正常卵大许多,卵周隙内有两个第一极体,这样的卵的染色体是异常的,通常有两套染色体,因此是不能用来受精的。有的卵可能在成熟的某一阶段细胞内有异常的形态,如空泡、质地变黑等,这些都是卵子质量不好的标志。

4.取精(胚胎的第0天)

用于体外受精的精子可以是新鲜采集的精液,也可以是冷冻保存的精液或者是从睾丸、附睾内抽取的精子。

如果是新鲜精液,采集应与取卵同时进行。实验室工作人员或护士会告诉病人注意事项和采集方法,并提供无菌的精液采集小杯。精液采集后,需马上送到实验室,实验室工作人员接照实验室方法处理精液,包括将液化的精液在加入洗涤液后离心,将精浆除去,再用上游法或密度梯度离心法将活动的精子分离出来。

如果是睾丸或附睾内抽取精子,丈夫需要做一个小手术来取得精子。如果是冷冻精子或供精(大多数是冷冻精子),精子应该在取卵前储藏在实验室,不需男性患者当天去门诊。

5.授精(胚胎的第0天)授精本身是一个非常简单的过程。如果要做常规的体外受精,取卵后4~5小时将处理后的精子在计算确定好数量后与卵子放在同一个培养皿中,共同培养14~18小时左右,然后在显微镜下观察受精情况。精子数量必须确定,精子过多或过少都会影响卵子受精的结果。精子过多将导致多精子受

精卵的产生,而精子过少将不能使卵子受精。若精子质量太差,就无法做常规的体外受精,如睾丸、附睾内抽取的精子,则必须以显微注射的方法授精(详见显微授精)。

6.受精检查(胚胎的第1天) 受精14-18小时后,必须检查卵子的受精情况。将那些受精的卵子(这时候应该叫受精卵)挑选出来在胚胎培养液中继续培养。用来受精的卵子并不一定会全部成功受精,有的可能没有受精,而有的可能是异常受精。受精卵的判断有以下几个标准:

1)未受精卵精子没有进入卵子,卵子的状态与受精前完全一样。这些卵子可能会出现一些过成熟的表现,有时很难从卵子的形态上来判断。如果重新授精,这些卵子也有受精的可能,但来源于这种卵的受精卵,胚胎的发育不是很好,如果移植这样的胚胎怀孕的机会是非常小的。

2)正常受精卵一个精子穿入卵子,并将卵子激活,卵子释放出第二极体。因而卵周隙内可以看到两个极体,卵子的分裂到此为止。卵子内这时形成两个核,称为原核,其中一个来源于卵子(雌原核),而另一个来源于精子(雄原核)。这是正常受精卵,不过这时候应当称之为胚胎。受精卵内的遗传物有一半来自卵子,另一半来自精子。准确地讲,一个真正的生命就此开始了。

3)多精受精卵如果有两个或者两个以上的精子进入卵子,卵子也能够被激活,并释放出第二极体,并形成一个来自于卵子的原核,但是每一个进入卵子的精子也能形成一个来自于精子的原核。因此,这时候的卵子内部有三个或三个以上的核。这种受精卵叫做多精受精卵。胚胎的染色体将来就不是 23对,而是多于23对。大多数情况下多精受精卵不能正常发育和着床。多精受精卵的胚胎必须废弃,不能用来移植。

多精受精卵出现有两个方面的原因:一个是卵子方面。在正常情况下,卵子成熟后.它会产生一种多精受精阻止机制,它包括卵子的膜下出现的一些含有酶的颗粒(叫做皮质颗粒)和卵子周围的透明带。当第一个精子进入卵子的时候,这些皮质颗粒的膜与卵细胞膜融合.将酶释放到卵周隙。细胞膜的变化快速地阻止了正在进入的其他精子。与此同时,皮质颗粒释放的酶将对透明带的蛋白质起作用,改变透明带的性质,使其他精子不能继续进入透明带,这样一来就达到了阻止多精受精的目的。如果卵子的成熟有问题或透明带异常,都会导致多精受精。这种情况在临床上较为少见,如果有,可以用显微受精的方法来避免。另一个是精子方面。正常受精时,一个卵子的周围不是只有一个精子,而是有数以千计的精子,这样才能保证有一个精子进入。如果卵子周围精子过少,卵子就不能被受精,而精子过多,将会导致多精受精。这时候几个精子同时进入卵子,卵子无法在短时间内阻止它们。多精受精的程度和多精受精的比例与受精时的精子浓度成正比。因此,常规的体外受精时的精子浓度必须计算准确,以减少多精受精。

4)孤雌激活卵孤雌激活卵是指卵子内只有一个来自卵子的原核,而没有来自精子的原核,也就是说只有一个核。它的出现情况比较复杂。可能是精子没有进入,卵子被自发激活,这就是纯粹的孤雌激活。也可能是精子进入了卵子并将卵子激活,但是精子的核没有变成原核。这种卵也有分裂的情况,但胚胎不能着床

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