巴比妥类药物的分析

第五章巴比妥类药物的分析第五章巴比妥类药物的分析
收特征。

在酸性条件下不电离，无紫外吸收。

而含硫巴比妥在酸性、碱性条件下均有紫外吸收，据此可以区别。

内容
第一节基本结构与特征
代表性药物：
1、苯巴比妥（Phenobarbital ）
2、司可巴比妥钠（Secobarbital sodium）
3、硫喷妥钠（Thiopental sodium）
4、巴比妥、异戊巴比妥、戊巴比妥（barbital，Amobarbital，pento barbital）
一、弱酸性--与强碱成盐
二、水解反应---与碱液共沸→NH3↑
三、与重金属离子反应
与钴、铜→有色↓，与银、汞→白色↓
四、紫外吸收光谱特征
(一)、硫代巴比妥的紫外吸收
(二)、5，5-取代巴比妥的紫外吸收特征
五、显微结晶
(一)、药物本身的晶形
1、巴比妥——长方形结晶
2、苯巴比妥——球形->->花瓣状结晶
(二)、反应产物的晶形
1、巴比妥与铜-吡啶形成十字形紫色结晶
2、苯巴比妥形成浅紫色不规则或菱形结晶
其他巴比妥类与铜-吡啶不形成结晶，可区别。

第二节鉴别试验
一、丙二酰脲试验：
(一)、巴比妥类 + Na2CO3·TS+ 过量AgNO3→白色↓
(二)、巴比妥类 + 吡啶溶液 + Cu2+→紫色（↓）
（含硫巴比妥类为绿色，可与之区别）
二、钠盐的鉴别试验：（钠离子的焰色反应）
(一)、在无色火焰中燃烧，呈现黄色火焰。

三、取代基试验
(一)、苯环取代基反应：
1、硝化反应
2、亚硝酸钠-硫酸反应
3、硫酸-甲醛反应
苯巴比妥 + KNO3+H2SO4→黄色
苯巴比妥 + NaNO2+H2SO4→橙黄色
苯巴比妥 + 甲醛+ H2SO4→玫瑰红色
4、硫元素反应：
(1)、硫喷妥钠+NaOH+Pb2+ →白色↓
(2)、加热→PbS↓（黑色）
5、与香草醛反应：
(二)、不饱和取代基（烯丙基）反应：
1、司可巴比妥钠 + I2（ Br2）→碘（溴）褪色
2、或在碱性溶液中与高锰酸钾反应，使后者褪色
第三节特殊杂质检查
一、苯巴比妥的特殊杂质
(一)、酸度
(二)、溶液的澄清度
(三)、中性或碱性物质
控制酸性杂质苯丙二酰脲，利用其酸性较苯巴比妥强，能使甲基橙显红色，规定一定量供试品溶液加甲基橙后不得显红色。

利用杂质苯巴比妥酸在醇中溶解度小，观察苯巴比妥乙醇溶液的澄清度。

要求溶液澄清。

司可巴比妥钠也作此项检查，但溶剂为水
控制合成副产物或分解产物。

利用这类杂质不溶于氢氧化钠试液而溶于醚，而苯巴比妥溶于氢氧化钠试液的性质差别，将他们分离提取，挥干乙醚，称重残渣重量，确定是否超过限量。

（司可巴比妥钠也有此检查）
第四节含量测定
一、银量法
(一)、原理：在碳酸钠溶液中巴比妥类与硝酸银首先生成可溶性一银盐，继续滴定，稍过量的银离子就和巴比妥类的一银盐形成难溶性二银盐沉淀，使溶液变浑浊而指示终点。

(二)、方法的改进
1、以甲醇替代水-丙酮为溶剂，
2、电位法替代目视法指示终点，克服了温度变化影响和目视法的主观性倾向
(三)、注意事项
1、无水碳酸钠需新鲜配制，银电极使用前用硝酸浸洗，再用水洗净。

(四)、应用：苯巴比妥、异戊巴比妥等采用该法。

二、溴量法
(一)、原理：司可巴比妥钠含有不饱和双键，可与溴定量发生加成反应，中国药典采用剩余溴量法测定原料和其胶囊的含量。

(二)、方法：KBrO3 + 5KBr + HCl→3Br2（标准液1）
(三)、巴比妥类+Br2（定量过量）→加成物
(四)、Br2（剩余）+KI （过量）→I2
(五)、I2 +2Na2S2O3（标准液2）→2NaI+Na2S4O6
(六)、同时做空白试验
(七)、计算：
(1)、1molBr相当于M/2司可巴比妥钠
(2)、M=260.27
(3)、所以 T=M样品/2 ×mol / L标准液=13.01
((V空白-V样品）×F×T)/(W(mg))×100%
F=C实际/C理论
三、紫外分光光度法
(一)、直接紫外分光光度法（注射用硫喷妥钠
(1)、取相当于硫喷妥钠0.25g，用水稀释至500ml，再用0.4%氢氧化钠溶液稀释至5ug/ml。

另取硫喷妥为对照品，用0.4%氢氧化钠溶液稀释至约5ug/ml。

分别测定吸收度，计算含量。

(2)、取样量中硫喷妥钠的mg数=(A样/A对)×C对×1.091×50
(3)、1.091=硫喷妥钠分子量/硫喷妥分子量
(4)、50=（500 ×100）/1000
(二)、提取分离后紫外分光光度法（苯巴比妥钠）
(1)、酸化：苯巴比妥钠加水使溶解 + HCl →析出沉淀
(2)、提取：沉淀+ 氯仿→苯巴比妥，蒸发至近干→残渣
(3)、碱化：残渣+醇+ pH10溶液→测定溶液（发生一级电离）
(4)、测定：λ240nm处测定吸收度，以苯巴比妥为对照。

四、差示分光光度法
(一)、原理：利用被测物在两种不同溶液中吸收光谱发生了特征性变化，而共存干扰物在该两种溶液中未引起光谱变化，测定两种溶液的吸收度差值（ΔA值），根据ΔA与被测物浓度C的线性关系进行定量测定。

(二)、特点：简便、直观，具备一般分光光度法直接读数的优点，无需事先分离，又能消除干扰;提供一个近似理想的参比溶液。

(三)、方法：
(1)、取供试品一定量，做成溶液，分成2等分
(2)、1份+酸→一定体积（测定）→ A测
(3)、另1份+碱→同样体积（参比）→ A参
(4)、A测－A参=△A样
(5)、∵干扰物在两种溶液中吸收光谱无变化，即△A杂=0，
(6)、∴△A样只与样品浓度C呈线性关系。

(7)、另取对照品同法操作，得△A对，按标准对照法计算含量。

(四)、巴比妥类药物的差示光谱
1、ΔA240= A pH10 –酸性，
2、ΔA260=A pH13- A pH10
3、方法：
(1)、样品、对照--->同样操作，⊿A样、⊿A标
(2)、计算：(⊿A样/⊿A标)× C标 = C样
(3)、注意：不同pH溶液中被测物的浓度必须相等
4、作业：
(1)、根据巴比妥类药物在不同pH条件下的光谱图，设计差示光谱的几种组合。

(2)、差示光谱的目的？应用范围？
(3)、举例见教材：复方苯巴比妥散、血清中巴比妥类药物的测定
五、酸碱滴定法
(一)、醇-水混合溶剂中，用氢氧化钠溶液滴定，以麝香草酚酞为指示剂
（增加溶解度，防止滴定过程中产生的弱酸盐水解而影响终点观察）
(二)、在胶束水溶液中，用氢氧化钠溶液滴定，以麝香草酚酞为指示剂
（在表面活性剂的胶束水溶液中巴比妥类药物酸性增强，使终点明显）
(三)、非水溶液滴定：在非水溶剂“二甲基甲酰胺、甲醇、氯仿等”中，用甲醇钠-甲醇溶液等滴定（非水酸量法）
(四)、非水碱量法——在酸性溶剂中用高氯酸滴定剂滴定弱碱性药物。

1、常用溶剂——冰醋酸；
2、滴定剂——高氯酸滴定液；
3、指示剂——结晶紫；
(五)、非水酸量法——在碱性溶剂中用甲醇钠滴定剂滴定弱酸性药物。

1、常用溶剂：乙二胺、二甲基甲酰胺；
2、滴定剂：甲醇钠滴定液。

(六)、非水碱量法
1、原理:BH+·A- +HClO4→ BH+· ClO4+HA
2、滴定剂： HClO4-冰HAc溶液
3、非水溶剂：根据被测物的碱性强弱，常用的非水溶剂有冰醋酸、醋酐、两者混合物。

4、温度影响:
(1)、标准液须注明标定时温度，
(2)、标定与测定温度不一致，须校正（温差﹤10℃）或重新标定（温差﹥10℃）。

(3)、N测=N标/[1+0.0011（t测-t标）]
5、指示剂终点颜色——由电位法确定
V（ml）E（mv）
0 150
7.00 236
7.10 247
7.20; 263
7.25 278
7.30 305
7.35 380
7.40 408。