叶绿素实验报告
叶绿素的提纯实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解叶绿素的结构和性质。
2. 掌握叶绿素的提取和提纯方法。
3. 学习利用有机溶剂提取叶绿素，并通过色谱法进行分离和纯化。
二、实验原理叶绿素是绿色植物中进行光合作用的重要色素，主要由叶绿素a和叶绿素b组成。
叶绿素不溶于水，但可溶于有机溶剂，如乙醇、丙酮等。
通过提取和提纯，可以得到高纯度的叶绿素，为进一步研究其性质和作用提供条件。
实验过程中，首先将植物叶片用有机溶剂提取叶绿素，然后通过层析法分离叶绿素和其他色素，最后收集纯化的叶绿素。
三、实验器材1. 新鲜植物叶片（如菠菜、青菜等）2. 研钵、研杵3. 乙醇、丙酮（分析纯）4. 层析柱、层析板5. 滤纸、脱脂棉6. 移液管、滴管7. 恒温水浴锅8. 显微镜9. 紫外-可见分光光度计四、实验步骤1. 提取叶绿素（1）取新鲜植物叶片，用剪刀剪碎，放入研钵中。
（2）加入适量乙醇和丙酮（体积比1:1），研磨至匀浆。
（3）将匀浆倒入分液漏斗，静置分层。
（4）收集有机层，用无水硫酸钠干燥。
（5）过滤，得到叶绿素提取液。
2. 分离叶绿素（1）将层析板放入层析柱中，在底部铺一层脱脂棉。
（2）取适量叶绿素提取液，用移液管滴加于层析板上，确保液面低于层析板边缘。
（3）选择合适的溶剂系统，如正己烷-乙酸乙酯（体积比4:1）。
（4）将溶剂滴加于层析板上，观察层析过程，直至溶剂前沿到达预定位置。
（5）取出层析板，用铅笔标记层析结果。
3. 收集纯化叶绿素（1）用移液管收集叶绿素层，倒入小烧杯中。
（2）加入少量乙醇，搅拌均匀。
（3）用滤纸过滤，收集滤液。
（4）将滤液倒入蒸发皿中，用恒温水浴锅蒸干。
（5）用少量乙醇溶解残留物，得到纯化叶绿素。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取：通过有机溶剂提取，可以得到绿色叶片提取物，表明叶绿素已从植物叶片中提取出来。
2. 叶绿素分离：通过层析法，可以将叶绿素与其他色素分离，证明叶绿素具有独特的性质。
3. 叶绿素纯化：通过蒸发和溶解，可以得到纯化的叶绿素，说明实验过程中叶绿素得到了有效的纯化。
叶绿素稳定性实验实训报告
一、实验目的1. 了解叶绿素的提取方法及原理。
2. 掌握叶绿素稳定性的影响因素，如光、温度、pH值等。
3. 分析不同处理条件下叶绿素的稳定性变化，为果蔬加工、食品添加剂等领域提供理论依据。
二、实验原理叶绿素是植物体内重要的光合色素，广泛存在于植物叶片、果实等部位。
叶绿素具有多种稳定性影响因素，如光、温度、pH值等。
本实验通过提取叶绿素，研究不同处理条件下叶绿素的稳定性变化，为实际应用提供参考。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜菠菜叶、碳酸钙、乙醇、乙醚、中性氧化铝、pH试纸等。
2. 实验仪器：研钵、漏斗、三角瓶、烧杯、玻璃棒、滤纸、剪刀、脱脂棉、纱布、电热恒温水浴锅、pH计等。
四、实验步骤1. 叶绿素提取（1）称取新鲜菠菜叶30g，用剪刀剪碎，放入研钵中。
（2）加入少量碳酸钙，防止研磨过程中叶绿素破坏。
（3）研磨至烂，将研磨液转入三角瓶中。
（4）加入30mL配好的乙醇乙醚溶液，盖上表面皿，防止有机溶剂蒸发。
（5）浸泡10分钟，过滤，得到叶绿素粗提液。
2. 叶绿素稳定性实验（1）将叶绿素粗提液分为若干份，分别加入不同pH值的缓冲溶液，调节pH值。
（2）将处理后的叶绿素溶液放入电热恒温水浴锅中，分别在不同温度下处理一定时间。
（3）观察并记录不同处理条件下叶绿素溶液的颜色变化，以及pH值、温度对叶绿素稳定性的影响。
五、实验结果与分析1. pH值对叶绿素稳定性的影响实验结果表明，当pH值小于6.0时，叶绿素会由于酸性pH值而被破坏，颜色逐渐变浅；当pH值大于6.0时，叶绿素相对稳定，颜色变化不大。
2. 温度对叶绿素稳定性的影响实验结果表明，当温度升高时，叶绿素稳定性下降，颜色逐渐变浅；当温度降低时，叶绿素稳定性相对较好，颜色变化不大。
3. 光照对叶绿素稳定性的影响实验结果表明，在光照条件下，叶绿素稳定性较差，颜色逐渐变浅；在黑暗条件下，叶绿素相对稳定，颜色变化不大。
六、实验结论1. pH值、温度、光照是影响叶绿素稳定性的主要因素。
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇实验报告一：菠菜中提取叶绿素的方法比较1.引言叶绿素是一种重要的植物色素，它在光合作用中承担着捕获光能和转化化学能的重要角色。
菠菜是叶绿素含量较高的植物之一，因此本实验旨在比较不同方法提取菠菜中的叶绿素，探索最有效的提取方式。
2.材料与方法2.1 材料：- 新鲜菠菜叶片- 无水乙醚- 丙酮- 高速离心机- 比色皿2.2 方法：- 方法一：无水乙醚提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中，加入适量的无水乙醚，用摇床震动片刻，使叶绿素溶解于乙醚中，然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法二：丙酮提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中，加入适量的丙酮，用摇床震动片刻，使叶绿素溶解于丙酮中，然后离心10分钟收集上层液体。
- 方法三：乙醇提取法将适量的菠菜叶片放入离心管中，加入适量的乙醇，用摇床震动片刻，使叶绿素溶解于乙醇中，然后离心10分钟收集上层液体。
3.结果在三种提取方法中，通过观察可以发现，方法一和方法二提取的叶绿素溶液呈现绿色，而方法三提取的叶绿素溶液呈现黄绿色。
利用分光光度计测定三个试管中叶绿素溶液的吸光度，发现方法一和方法二提取的叶绿素吸光度较高，而方法三的吸光度较低。
4.讨论方法一使用无水乙醚作为提取溶剂，乙醚能有效溶解叶绿素，并且在离心过程中上层液体的分离效果较好。
方法二使用丙酮作为提取溶剂，丙酮也能有效溶解叶绿素，并且丙酮相对于乙醚来说更易于购买。
方法三使用乙醇作为提取溶剂，乙醇对叶绿素的溶解能力较差，导致提取的叶绿素溶液吸光度较低。
5.结论通过对菠菜中提取叶绿素的实验比较，我们发现使用无水乙醚和丙酮作为提取溶剂的方法能够较好地提取菠菜中的叶绿素，并且吸光度较高。
因此，在菠菜中提取叶绿素的实验中，建议使用无水乙醚或丙酮作为提取溶剂。
实验报告二：叶绿素在光合作用中的作用研究1.引言叶绿素是植物体内最重要的色素之一，它在光合作用中起着关键作用。
本实验旨在研究叶绿素在光合作用中的功能和重要性。
从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇
从菠菜中提取叶绿素实验报告6篇从菠菜中提取叶绿素实验报告 (1)1.1 仪器与试剂仪器：研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10 cm)、UV-240紫外分光光度计试剂：石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶G、中性氧化铝(150目～160目)1.2 提取与分离1.2.1 浸泡法提取色素在研钵中放入20 g新鲜的菠菜叶，加入20 mL3：2(体积比)石油醚—乙醇混合液，适当研磨(不要研成糊状，否则会给分离造成困难)，用倾析法将提取液转移到分液漏斗中，每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。
洗涤时要轻轻旋荡，以防乳化。
弃去水乙醇层，石油醚层用无水硫酸钠干燥，干燥后滤入小圆底烧瓶，在水浴上蒸发浓缩至大约l m L。
1.2.2 薄层层析取四块显微载玻片，硅胶G经0.5％羧甲基纤维素钠调制后制板，在室温下晾干后在110°C活化1h。
选取效果最好的一块进行点样。
展开剂：（1）石油醚—丙酮=8:2（体积比）（2）石油醚—乙酸乙酯=6:4（体积比）取活化后的层析板，点样，放入预先选定展开剂的广口瓶。
瓶的内壁贴一张高5cm，绕周长4/5的滤纸，下部浸入展开剂中，盖上瓶盖。
待展开剂上升至规定高度时，取出层析板，晾干，做出标记。
分别用两种展开剂展开，比较不同展开剂的展开效果。
观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小。
注意更换展开剂时，需干燥层析瓶，不允许前一种展开剂带入后一系统。
1.2.3 柱层析取少量脱脂棉在小烧杯中用石油醚浸润后，挤压除去气泡，放在层析柱底部。
在层析柱中加15cm石油醚。
加入中性氧化铝8克，打开柱下活塞，保持石油醚高度不变，氧化铝在柱子中堆积。
装完后，打开下端活塞，放出溶剂，直到氧化铝表面剩下1—2mm高为止（不能使氧化铝表面露出液面）。
将浓缩液用滴管加到柱顶部，打开下端活塞，让液面下降到柱面以下1mm,关闭活塞，加数滴石油醚，打开活塞，使液面下降，几次反复，使色素全部进入柱体。
叶绿素的鉴定实验报告
一、实验目的1. 了解叶绿素的提取和鉴定方法。
2. 掌握薄层色谱法在叶绿素鉴定中的应用。
3. 分析叶绿素在不同植物中的含量差异。
二、实验原理叶绿素是植物体内的一种绿色色素，是光合作用的重要色素。
叶绿素主要包括叶绿素a和叶绿素b，它们在植物体内具有不同的吸收光谱。
叶绿素可以溶于有机溶剂，如丙酮、乙醇等，通过薄层色谱法可以将叶绿素与其他色素分离，进而鉴定叶绿素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜菠菜、胡萝卜、玉米叶等植物。
2. 试剂：丙酮、无水乙醇、无水乙醚、碳酸钙、硅胶G、氯仿、甲醇、氨水等。
3. 仪器：研钵、漏斗、烧杯、分液漏斗、色谱柱、紫外灯、电子天平、紫外分光光度计等。
四、实验步骤1. 提取叶绿素（1）将新鲜植物材料洗净，用剪刀剪碎，称取一定量（如0.5g）放入研钵中。
（2）加入少量碳酸钙，防止研磨过程中叶绿素被破坏。
（3）加入适量丙酮，用研杵研磨至匀浆状。
（4）将匀浆状样品倒入漏斗中，用滤纸过滤，收集滤液。
2. 薄层色谱分离（1）取一块硅胶G薄层板，用铅笔在板上划一条起始线。
（2）用毛细管吸取叶绿素提取液，沿起始线点样，重复3次，每次点样量约为5μl。
（3）将点样后的薄层板放入盛有氯仿的层析缸中，使溶剂前沿距离起始线约1cm。
（4）取出薄层板，晾干后，用紫外灯观察叶绿素斑点位置。
3. 鉴定叶绿素（1）根据薄层板上叶绿素斑点的位置，用铅笔标记。
（2）将标记好的薄层板放入紫外分光光度计中，测定叶绿素斑点的吸光度。
（3）根据吸光度计算叶绿素含量。
4. 数据分析（1）将不同植物样品的叶绿素含量进行比较，分析叶绿素在不同植物中的含量差异。
（2）分析实验过程中可能出现的误差，并提出改进措施。
五、实验结果与分析1. 实验结果通过实验，成功提取了菠菜、胡萝卜、玉米叶等植物中的叶绿素，并在薄层板上分离出叶绿素斑点。
根据紫外分光光度计测得的吸光度，计算出不同植物样品中叶绿素的含量。
2. 结果分析（1）菠菜、胡萝卜、玉米叶等植物中叶绿素的含量存在差异，这与植物的种类和生长环境有关。
叶绿素萃取的实验报告
一、实验目的1. 掌握叶绿素萃取的原理和方法。
2. 了解叶绿素在不同溶剂中的溶解特性。
3. 通过实验，提取并分析叶绿素的含量。
二、实验原理叶绿素是绿色植物中的一种重要色素，主要存在于叶绿体的类囊体膜上。
叶绿素在光的作用下参与光合作用，将光能转化为化学能。
叶绿素在有机溶剂中的溶解度较大，可以通过萃取法将其从植物组织中提取出来。
三、实验器材和药品1. 实验器材：研钵、研杵、滤纸、漏斗、烧杯、锥形瓶、分液漏斗、酒精灯、温度计、电子天平、恒温水浴锅、紫外-可见分光光度计等。
2. 实验药品：新鲜菠菜、丙酮、无水乙醇、碳酸钙、氢氧化钠、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 准备新鲜菠菜，将其洗净、沥干，用剪刀剪碎。
2. 称取一定量的菠菜，放入研钵中，加入适量的碳酸钙，用研杵研磨成浆状。
3. 将研磨好的菠菜浆倒入烧杯中，加入适量的蒸馏水，搅拌均匀。
4. 将烧杯放入恒温水浴锅中，加热至60℃，持续加热30分钟。
5. 将加热后的溶液过滤，收集滤液。
6. 将滤液转移至锥形瓶中，加入适量的氢氧化钠溶液，调节pH值为8.5。
7. 将锥形瓶放入分液漏斗中，加入适量的丙酮，充分振荡，静置分层。
8. 将下层有机层收集于另一个锥形瓶中，弃去上层水层。
9. 将有机层转移至烧杯中，加入适量的无水乙醇，充分振荡，静置分层。
10. 将下层有机层收集于另一个锥形瓶中，弃去上层水层。
11. 将有机层转移至容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度线。
12. 使用紫外-可见分光光度计测定叶绿素溶液的吸光度，根据标准曲线计算叶绿素含量。
五、实验现象1. 在加热过程中，菠菜浆颜色逐渐变深，表明叶绿素逐渐被释放出来。
2. 在萃取过程中，有机层和水层分层明显，有机层呈绿色。
3. 在测定吸光度时，叶绿素溶液的吸光度与标准曲线相对应。
六、实验结果与分析1. 叶绿素提取率：根据实验数据，计算叶绿素提取率，并与理论值进行比较。
2. 吸光度与叶绿素含量的关系：根据紫外-可见分光光度计测得的吸光度，绘制叶绿素含量与吸光度的标准曲线，分析吸光度与叶绿素含量的关系。
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇从菠菜中提取叶绿素实验报告一【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离，了解天然物质的分离提纯与方法。
2、通过薄层色谱分离操作，加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg }；胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯，有三种异构体；叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。
当提取时，从上到下颜色依次为：黄绿色，蓝绿色，黄色和橙色。
【实验仪器】研钵，色谱柱，丙酮，乙醇，乙醚，中性氧化铝，菠菜叶，烧杯，漏斗，玻璃棒，滤纸，剪刀，脱脂棉，纱布。
【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶，用剪刀剪碎，放入研钵中研磨，研磨时放入少量碳酸钙，防止研磨过猛破坏叶绿素结构，研磨至烂。
2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中，加入30mL配好的乙醇乙醚溶液，盖上表面皿，防止有机溶剂蒸发。
按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。
3、浸泡期间，填充色谱柱，在最下面垫入脱脂棉，再盖上一个小滤纸片，装入氧化铝至4/5处，再盖上一层滤纸片。
4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中，转入分液漏斗，加入10mL水洗涤，除去水层（下层），再用10mL水洗涤一次。
5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中，加几滴丙酮既可以看到颜色变化。
6、洗净仪器，收拾实验室，打扫卫生。
【实验记录】虽然分层现象不是非常明显，但是还是可以看得见分层现象。
【结果与讨论】1、做这个实验的时候，我觉得不应该用纱布挤干，因为个人感觉很多色素都被纱布吸走了，导致后来的实验现象没有很明显，经过对比，没用纱布直接过滤的同学做出的现象比用纱布做的现象要明显的多。
2、有机溶剂往往比较容易挥发，所以加入后要盖上表面皿。
3、此实验浸泡15分钟以后现象就可以很明显，因此以后在课堂上给学生演示的时候浸泡的时间不是越长越好的，15分钟足矣。
叶绿素含量的测定实验报告
叶绿素含量的测定实验报告一、实验目的1、掌握叶绿素含量测定的原理和方法。
2、学会使用分光光度计测定叶绿素的含量。
3、了解叶绿素在植物光合作用中的重要作用。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素，包括叶绿素 a 和叶绿素 b 两种类型。
叶绿素在特定波长的光下有吸收峰，利用分光光度计分别测定叶绿素提取液在 665nm 和 649nm 波长下的吸光度，根据朗伯比尔定律，可以计算出叶绿素 a 和叶绿素 b 的含量，进而得出叶绿素的总含量。
叶绿素 a 和叶绿素 b 在 665nm 和 649nm 波长下的吸光系数分别为8331 和 1675，在 649nm 波长下的吸光系数分别为 2454 和 4466。
三、实验材料与仪器1、实验材料新鲜的菠菜叶片。
2、实验仪器分光光度计、电子天平、研钵、漏斗、容量瓶、移液管、剪刀等。
3、实验试剂95%乙醇、石英砂、碳酸钙。
四、实验步骤1、材料准备选取新鲜的菠菜叶片，用剪刀剪碎，称取 05g 左右，放入研钵中。
2、研磨提取在研钵中加入少量石英砂和碳酸钙，以及 10ml 95%乙醇，充分研磨成匀浆。
3、过滤将研磨好的匀浆用漏斗过滤到 25ml 容量瓶中，用少量 95%乙醇冲洗研钵和漏斗，将滤液收集到容量瓶中，直至刻度线，摇匀。
4、吸光度测定以 95%乙醇作为空白对照，用分光光度计分别测定提取液在 665nm 和 649nm 波长下的吸光度，每个波长重复测定 3 次，取平均值。
五、实验结果与计算1、记录吸光度值665nm 波长下的吸光度平均值记为 A665，649nm 波长下的吸光度平均值记为 A649。
2、计算叶绿素含量叶绿素 a 的浓度（Ca，mg/L）＝ 1395×A665 688×A649叶绿素 b 的浓度（Cb，mg/L）＝ 2496×A649 732×A665叶绿素的总浓度（C，mg/L）＝ Ca ＋ Cb叶绿素含量（mg/g）＝（C×V）／（W×1000）其中，V 为提取液总体积（ml），W 为叶片鲜重（g）。
叶绿素的形成实验报告
一、实验目的1. 了解叶绿素的形成过程及其与光的关系。
2. 掌握叶绿素提取和分离的方法。
3. 观察叶绿素在不同光照条件下的形成情况。
二、实验原理叶绿素是绿色植物叶绿体中含量较多的色素，是植物进行光合作用的重要物质。
叶绿素的形成需要光、水和二氧化碳，其中镁是叶绿素的重要组成部分。
在光的作用下，叶绿素合成酶催化镁离子与叶绿素a和叶绿素b的结合，形成叶绿素。
三、实验材料1. 实验材料：新鲜菠菜、黑塑料袋、蒸馏水、烧杯、剪刀、研钵、滤纸、滴管、光照箱、比色计。
2. 实验试剂：丙酮、乙醇、碳酸钙。
四、实验步骤1. 准备工作：将菠菜洗净，用剪刀剪碎，放入烧杯中，加入适量蒸馏水，用研钵和研杵研磨成泥状。
2. 提取叶绿素：将研磨好的菠菜泥用滤纸过滤，收集滤液，加入丙酮和乙醇，充分混合，静置一段时间，待叶绿素沉淀。
3. 分离叶绿素：用滴管将叶绿素沉淀转移到另一烧杯中，加入碳酸钙，搅拌均匀，静置一段时间，待叶绿素沉淀。
4. 光照处理：将分离好的叶绿素沉淀分为两组，一组放在光照箱中照射，另一组放在黑暗处。
分别观察两组叶绿素的形成情况。
5. 比色分析：用比色计分别测定两组叶绿素的光密度值，比较两组叶绿素的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果显示，在光照条件下，叶绿素的形成速度明显快于黑暗条件下。
光照组叶绿素含量显著高于黑暗组。
2. 通过比色分析，发现光照条件下叶绿素的光密度值明显高于黑暗条件下，说明光照对叶绿素的形成具有促进作用。
六、实验结论1. 光照是叶绿素形成的必要条件，能够促进叶绿素的合成。
2. 通过叶绿素的提取和分离实验，掌握了叶绿素提取和分离的方法。
七、实验注意事项1. 在研磨菠菜泥时，要充分研磨，以确保叶绿素充分释放。
2. 在提取叶绿素时，要使用有机溶剂，如丙酮和乙醇，以增加叶绿素的溶解度。
3. 在光照处理过程中，要注意控制光照时间和光照强度，以观察叶绿素的形成情况。
八、实验总结本次实验通过观察叶绿素在不同光照条件下的形成情况，验证了光照对叶绿素形成的促进作用。
叶绿素实验报告结果
一、实验目的1. 掌握叶绿素的提取方法。
2. 了解叶绿素含量的测定原理。
3. 分析实验结果，探讨影响叶绿素提取的因素。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素，广泛存在于绿色植物的叶片中。
叶绿素具有特定的吸收光谱，在可见光范围内主要吸收红光和蓝光，对绿光的吸收较弱。
本实验采用丙酮作为提取溶剂，通过层析法将叶绿素与其他色素分离，然后利用分光光度计测定叶绿素的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜菠菜叶、丙酮、层析纸、无水乙醇、氨水、碳酸镁、硅胶、滤纸、剪刀、研钵、漏斗、烧杯、玻璃棒、分光光度计、比色皿、吸管、滴管等。
2. 实验试剂：氨水、碳酸镁、硅胶、无水乙醇、丙酮等。
四、实验步骤1. 叶绿素提取：取新鲜菠菜叶30g，用剪刀剪碎，放入研钵中，加入少量碳酸镁，研磨至烂。
将研磨好的菠菜叶转入烧杯中，加入30mL丙酮，浸泡10min，期间不断搅拌。
用滤纸过滤，收集滤液。
2. 层析分离：将层析纸剪成适当大小，用氨水饱和，晾干。
在层析纸上距底部1cm处用铅笔轻轻划线，将滤液滴在铅笔线上，待滤液干燥后，将层析纸放入盛有硅胶的层析槽中，用无水乙醇作为展开剂，待层析液到达层析纸顶部时取出。
3. 叶绿素含量测定：用分光光度计测定叶绿素a和叶绿素b的吸光度，计算叶绿素含量。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取：实验过程中，菠菜叶在丙酮中浸泡后，叶绿素从叶片中提取出来，滤液呈绿色。
2. 层析分离：通过层析法，将叶绿素与其他色素分离，观察到层析纸上出现了蓝绿色和黄绿色两个色带，分别对应叶绿素a和叶绿素b。
3. 叶绿素含量测定：叶绿素a和叶绿素b的吸光度分别为0.5和0.3，根据标准曲线计算，叶绿素a和叶绿素b的含量分别为0.6mg/g和0.3mg/g。
六、实验讨论1. 实验结果表明，叶绿素在丙酮中具有良好的溶解性，丙酮可作为提取叶绿素的理想溶剂。
2. 层析法是一种有效的分离方法，可以分离叶绿素与其他色素，为后续的叶绿素含量测定提供方便。
叶绿素的提取及含量测定实验报告
叶绿素的提取及含量测定实验报告叶绿素的提取及含量测定实验报告在现实生活中，越来越多人会去使用报告，要注意报告在写作时具有一定的格式。
那么报告应该怎么写才合适呢？以下是小编收集整理的叶绿素的提取及含量测定实验报告，欢迎大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。
叶绿素的提取及含量测定实验报告1【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离，了解天然物质的分离提纯与方法。
2、通过薄层色谱分离操作，加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素A(C55H77O5N4Mg)和叶绿素B（C55H70O6N4Mg）胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯，有三种异构体；叶黄素（C40H56O2）是胡萝卜素的羟基衍生物。
是胡萝卜素的羟基衍生物。
当提取时，从上到下颜色依次为：黄绿色，蓝绿色，黄色和橙色。
【实验仪器】研钵，色谱柱，丙酮，乙醇，乙醚，中性氧化铝，菠菜叶，烧杯，漏斗，玻璃棒，滤纸，剪刀，脱脂棉，纱布。
【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶，用剪刀剪碎，放入研钵中研磨，研磨时放入少量碳酸钙，防止研磨过猛破坏叶绿素结构，研磨至烂。
2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中，加入30mL配好的乙醇乙醚溶液，盖上表面皿，防止有机溶剂蒸发。
按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。
3、浸泡期间，填充色谱柱，在最下面垫入脱脂棉，再盖上一个小滤纸片，装入氧化铝至4/5处，再盖上一层滤纸片。
4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中，转入分液漏斗，加入10mL水洗涤，除去水层（下层），再用10mL水洗涤一次。
5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中，加几滴丙酮既可以看到颜色变化。
6、洗净仪器，收拾实验室，打扫卫生。
【注意事项】1.过滤时不能用滤纸，而是用脱脂棉。
原因是滤纸能吸收色素，降低滤液中色素的含量，使实验效果不明显。
2.加入丙酮后要迅速、充分研磨，以防止丙酮挥发，使更多的色素溶解在丙酮中。
叶绿素形成原因实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 探究光对叶绿素形成的影响。
2. 了解叶绿素形成过程中的环境因素。
3. 分析不同光照条件下叶绿素的形成情况。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的主要色素，是植物体内含量最多的天然色素。
叶绿素的形成与光照、温度、水分等环境因素密切相关。
本实验通过对比不同光照条件下叶绿素的形成情况，分析光对叶绿素形成的影响。
三、实验材料1. 实验植物：菠菜、白菜、甘蓝等绿色植物。
2. 实验仪器：光照培养箱、剪刀、烧杯、蒸馏水、酒精、丙酮、试管、试管架、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备实验材料：选取新鲜、健康的菠菜、白菜、甘蓝等绿色植物，洗净后切成适当大小的叶片。
2. 设置实验组：将叶片分为两组，一组放置在光照培养箱中，另一组放置在黑暗环境中。
3. 光照处理：将放置在光照培养箱中的叶片进行光照处理，光照强度为1000lx，光照时间为24小时；将放置在黑暗环境中的叶片进行黑暗处理，处理时间为24小时。
4. 叶绿素提取：将光照处理和黑暗处理后的叶片分别放入烧杯中，加入适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌，使叶片充分浸泡在水中。
5. 叶绿素提取：向烧杯中加入适量的酒精和丙酮，充分搅拌，使叶绿素充分溶解。
6. 叶绿素分离：将溶解叶绿素的溶液用滤纸过滤，得到叶绿素滤液。
7. 显微镜观察：将叶绿素滤液滴在载玻片上，用显微镜观察叶绿素颗粒的形成情况。
五、实验结果与分析1. 光照处理组叶片的叶绿素颗粒较黑暗处理组叶片的叶绿素颗粒明显增多。
2. 光照处理组叶片的叶绿素含量较黑暗处理组叶片的叶绿素含量明显提高。
实验结果表明，光照是叶绿素形成的重要条件。
在光照条件下，植物体内的叶绿素合成酶活性增强，叶绿素合成速率加快，从而使叶绿素颗粒的形成数量增多。
六、实验结论1. 光照是叶绿素形成的重要条件，光照强度和光照时间对叶绿素形成有显著影响。
2. 在光照条件下，植物体内的叶绿素合成酶活性增强，叶绿素合成速率加快。
七、实验注意事项1. 实验过程中，严格控制光照强度和光照时间，确保实验结果的准确性。
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇
从菠菜中提取叶绿素实验报告三篇从菠菜中提取叶绿素实验报告一【实验目的】1、通过绿色植物色素的提取和分离，了解天然物质的分离提纯与方法。
2、通过薄层色谱分离操作，加深了解微量有机物色谱分离鉴定的原理。
【实验原理】叶绿色存在两种结构相似的形式即叶绿素a{C55H77O5N4Mg}和叶绿素b{ C55H70O6N4Mg }；胡萝卜素是具有长链结构的共轭多烯，有三种异构体；叶黄素C40H56O2是胡萝卜素的羟基衍生物。
当提取时，从上到下颜色依次为：黄绿色，蓝绿色，黄色和橙色。
【实验仪器】研钵，色谱柱，丙酮，乙醇，乙醚，中性氧化铝，菠菜叶，烧杯，漏斗，玻璃棒，滤纸，剪刀，脱脂棉，纱布。
【实验步骤】1、称取30g洗净后用滤纸喜感的新鲜菠菜叶，用剪刀剪碎，放入研钵中研磨，研磨时放入少量碳酸钙，防止研磨过猛破坏叶绿素结构，研磨至烂。
2、将研磨碎的菠菜叶转入小烧杯中，加入30mL配好的乙醇乙醚溶液，盖上表面皿，防止有机溶剂蒸发。
按小组成员分别浸泡10,15,20,25,30,35,40,45,50,55分钟。
3、浸泡期间，填充色谱柱，在最下面垫入脱脂棉，再盖上一个小滤纸片，装入氧化铝至4/5处，再盖上一层滤纸片。
4、将烧杯中的菠菜叶连带着有机溶剂用纱布挤入漏斗中，转入分液漏斗，加入10mL水洗涤，除去水层（下层），再用10mL水洗涤一次。
5、将分页漏斗中的溶液慢慢倒入色谱柱中，加几滴丙酮既可以看到颜色变化。
6、洗净仪器，收拾实验室，打扫卫生。
【实验记录】虽然分层现象不是非常明显，但是还是可以看得见分层现象。
【结果与讨论】1、做这个实验的时候，我觉得不应该用纱布挤干，因为个人感觉很多色素都被纱布吸走了，导致后来的实验现象没有很明显，经过对比，没用纱布直接过滤的同学做出的现象比用纱布做的现象要明显的多。
2、有机溶剂往往比较容易挥发，所以加入后要盖上表面皿。
3、此实验浸泡15分钟以后现象就可以很明显，因此以后在课堂上给学生演示的时候浸泡的时间不是越长越好的，15分钟足矣。
提升叶绿素的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 探究不同因素对叶绿素含量的影响。
2. 优化提高叶绿素含量的方法，为植物育种和农业生产提供理论依据。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素，其含量与植物的光合效率密切相关。
本实验通过改变光照、氮肥、水分等条件，探究其对叶绿素含量的影响，从而为提高叶绿素含量提供理论依据。
三、实验材料与方法1. 实验材料：菠菜种子、培养皿、培养箱、氮肥、水等。
2. 实验方法：（1）种子处理：将菠菜种子在温水中浸泡24小时，然后均匀播种于培养皿中。
（2）设置实验组：将培养皿分为对照组、光照组、氮肥组、水分组等，分别进行如下处理：对照组：正常光照、正常氮肥、正常水分；光照组：增加光照强度，其他条件与对照组相同；氮肥组：增加氮肥用量，其他条件与对照组相同；水分组：增加水分供应，其他条件与对照组相同。
（3）培养与观察：将培养皿放入培养箱中，在适宜温度下培养，定期观察植物生长状况，并记录叶绿素含量。
（4）叶绿素含量测定：采用分光光度法测定叶绿素含量。
将叶片放入研钵中，加入适量无水乙醇，研磨成浆状，过滤取滤液。
以无水乙醇为参比，在波长645nm和663nm处测定吸光度值，计算叶绿素含量。
四、实验结果与分析1. 光照对叶绿素含量的影响：光照组叶绿素含量明显高于对照组，说明光照强度对叶绿素含量有显著影响。
2. 氮肥对叶绿素含量的影响：氮肥组叶绿素含量明显高于对照组，说明氮肥用量对叶绿素含量有显著影响。
3. 水分对叶绿素含量的影响：水分组叶绿素含量与对照组无显著差异，说明水分供应对叶绿素含量的影响不大。
五、结论1. 光照强度和氮肥用量对叶绿素含量有显著影响，可通过增加光照强度和氮肥用量来提高叶绿素含量。
2. 水分供应对叶绿素含量的影响不大，但在实际生产中仍需保证植物正常生长所需的水分。
3. 本实验为提高叶绿素含量提供了理论依据，有助于植物育种和农业生产。
六、实验展望1. 进一步研究其他因素（如温度、CO2浓度等）对叶绿素含量的影响。
叶绿素的降解实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 探究不同因素对叶绿素降解的影响。
2. 确定叶绿素降解的主要途径及其影响因素。
3. 了解叶绿素降解在植物生理过程中的作用。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素，其降解是植物生长发育过程中的正常现象。
叶绿素的降解受多种因素影响，如光照、温度、水分、氧气等。
本实验通过模拟不同环境条件，观察叶绿素降解的程度，分析影响叶绿素降解的主要因素。
三、实验材料1. 实验植物：菠菜2. 实验试剂：丙酮、蒸馏水、硫酸铜、无水碳酸钠、碘液3. 实验仪器：研钵、剪刀、烧杯、滤纸、电子天平、恒温箱、紫外-可见分光光度计四、实验步骤1. 叶绿素提取：- 取新鲜菠菜叶，洗净、擦干后剪碎。
- 将菠菜叶放入研钵中，加入少量碳酸钙，用研杵研磨至糊状。
- 加入适量丙酮，继续研磨，直至叶绿素充分溶解。
- 将研磨液过滤，收集滤液，待测。
2. 叶绿素含量测定：- 使用紫外-可见分光光度计测定滤液中叶绿素的含量。
- 以丙酮为空白对照，在波长645nm处测定吸光度。
3. 模拟不同环境条件：- 光照：将菠菜叶放入光照培养箱中，分别设定不同光照强度（如1000、2000、3000勒克斯）处理。
- 温度：将菠菜叶放入恒温箱中，分别设定不同温度（如20℃、30℃、40℃）处理。
- 水分：将菠菜叶放入干燥器中，分别设定不同湿度（如50%、70%、90%）处理。
- 氧气：将菠菜叶放入密封容器中，分别设定不同氧气浓度（如20%、40%、60%）处理。
4. 重复实验：- 每种环境条件下重复实验3次，取平均值。
五、实验结果与分析1. 光照对叶绿素降解的影响：- 随着光照强度的增加，叶绿素降解程度逐渐增加。
- 当光照强度达到3000勒克斯时，叶绿素降解程度最大。
2. 温度对叶绿素降解的影响：- 随着温度的升高，叶绿素降解程度逐渐增加。
- 当温度达到40℃时，叶绿素降解程度最大。
3. 水分对叶绿素降解的影响：- 随着湿度的增加，叶绿素降解程度逐渐增加。
叶绿素检测实验报告
一、实验目的1. 了解叶绿素的提取和检测方法；2. 掌握叶绿素含量的测定原理和操作步骤；3. 学会运用分光光度计测定叶绿素含量。
二、实验原理叶绿素是植物体内的一种绿色色素，是光合作用的重要色素。
叶绿素含量可以通过分光光度计测定，利用朗伯-比尔定律计算叶绿素的浓度。
朗伯-比尔定律：A = εcl其中，A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，c为溶液浓度，l为光程。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜植物叶片、95%乙醇、石英砂、碳酸钙粉、碳酸镁悬浮液、微孔滤膜等；2. 实验仪器：分光光度计、研钵、试管、剪刀、移液管、量筒、滤纸、吸水纸、电子天平等。
四、实验步骤1. 称取0.1g新鲜植物叶片，放入研钵中；2. 加入少量石英砂和碳酸钙粉，再加入3-5ml 95%乙醇；3. 研磨叶片，直至组织变白；4. 将研磨好的叶片放入漏斗中，用乙醇冲洗研钵、研棒及残渣；5. 将提取液过滤到10ml试管中，用少量乙醇定容至10ml；6. 将叶绿素提取液倒入光径1cm的比色杯内；7. 以95%乙醇为空白，在波长665nm下测定吸光度；8. 重复上述步骤，测定不同样品的吸光度；9. 根据朗伯-比尔定律计算叶绿素含量。
五、实验结果与分析通过实验，得到不同样品的吸光度值，根据朗伯-比尔定律计算叶绿素含量。
比较不同样品的叶绿素含量，分析其差异原因。
六、实验总结本次实验成功提取了植物叶片中的叶绿素，并利用分光光度计测定了叶绿素含量。
实验结果表明，不同植物叶片的叶绿素含量存在差异，这与植物的种类、生长环境等因素有关。
通过本次实验，加深了对叶绿素提取和检测方法的理解，提高了实验操作技能。
叶绿素提取纯化实验报告
一、实验目的1. 学习叶绿素的提取方法，掌握叶绿素提取纯化的基本原理和操作步骤。
2. 了解叶绿素在植物光合作用中的重要作用，以及叶绿素提取纯化在科研、食品、医药等领域的应用。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素，存在于叶绿体的类囊体薄膜上。
叶绿素主要分为叶绿素a和叶绿素b，两者结构相似，仅分子中的镁离子被铁离子取代。
叶绿素提取纯化主要通过以下步骤：1. 提取：利用有机溶剂（如丙酮、乙醇等）溶解叶绿素，使叶绿素从植物组织中分离出来。
2. 离心：通过离心分离叶绿素提取液中的杂质，得到较纯的叶绿素。
3. 分离：采用层析技术（如纸层析、薄层层析等）将叶绿素与其他色素分离。
4. 纯化：通过重结晶、吸附等方法进一步纯化叶绿素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜菠菜、丙酮、无水乙醇、碳酸钙、滤纸、层析板、滤液、层析溶剂等。
2. 实验仪器：研钵、剪刀、离心机、层析缸、紫外灯、比色计等。
四、实验步骤1. 叶绿素提取（1）取新鲜菠菜叶片，洗净、擦干，去掉中脉剪碎。
（2）将剪碎的菠菜叶片放入研钵中，加入少量碳酸钙粉和丙酮，研磨至糊状。
（3）将研磨后的混合物转入离心管中，以3000r/min离心5分钟，取上清液。
2. 离心分离（1）将离心后的上清液转入另一离心管中，以4000r/min离心10分钟。
（2）取上清液，即为叶绿素提取液。
3. 叶绿素分离（1）取层析板，用铅笔标记起始线。
（2）用毛细管将叶绿素提取液点在起始线上，重复点样2-3次，待溶剂挥发后，再点样。
（3）将层析板放入层析缸中，加入适量层析溶剂，使溶剂面低于起始线。
（4）待层析溶剂上行至距离起始线约1cm时，取出层析板，晾干。
（5）用紫外灯照射层析板，观察叶绿素a和叶绿素b的分离情况。
4. 叶绿素纯化（1）将分离出的叶绿素a和叶绿素b分别用无水乙醇溶解。
（2）将溶液置于冰浴中，缓慢加入无水乙醇，使叶绿素沉淀。
（3）过滤沉淀，用无水乙醇洗涤沉淀，晾干。
叶绿素理论计算实验报告
一、实验目的1. 了解叶绿素的化学结构及组成；2. 掌握叶绿素的理论计算方法；3. 通过理论计算，验证叶绿素在植物光合作用中的重要性。
二、实验原理叶绿素是一种绿色色素，是植物进行光合作用的重要物质。
它由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。
叶绿素在光合作用过程中吸收光能，将光能转化为化学能，为植物的生长发育提供能量。
本实验通过理论计算，验证叶绿素在植物光合作用中的重要性。
计算方法如下：1. 计算叶绿素的摩尔质量；2. 计算叶绿素在植物叶片中的摩尔浓度；3. 计算叶绿素在光合作用中的能量转化效率。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜菠菜叶、丙酮、碳酸钙、石英砂；2. 实验仪器：电子天平、研钵、移液管、量筒、分光光度计、紫外可见光光度计、计算机。
四、实验步骤1. 准备叶绿素提取液：将新鲜菠菜叶洗净、擦干，剪碎后放入研钵中，加入少量石英砂、碳酸钙和丙酮，研磨至叶绿素充分溶解；2. 测定叶绿素提取液的吸光度：使用紫外可见光光度计测定提取液在波长665nm处的吸光度；3. 计算叶绿素浓度：根据叶绿素在665nm处的吸光度，利用比尔定律计算叶绿素浓度；4. 计算叶绿素的摩尔浓度：根据叶绿素的摩尔质量，计算提取液中叶绿素的摩尔浓度；5. 计算光合作用能量转化效率：根据叶绿素的摩尔浓度和光合作用的相关参数，计算光合作用能量转化效率。
五、实验结果与分析1. 叶绿素的摩尔质量：叶绿素a的摩尔质量为892.49g/mol，叶绿素b的摩尔质量为893.49g/mol；2. 叶绿素浓度：根据实验测定的吸光度，叶绿素浓度为1.5mg/L；3. 叶绿素的摩尔浓度：根据叶绿素的摩尔质量和浓度，计算得到叶绿素的摩尔浓度为1.67×10^-5mol/L；4. 光合作用能量转化效率：根据叶绿素的摩尔浓度和光合作用的相关参数，计算得到光合作用能量转化效率为0.45。
六、实验结论通过本实验，我们了解了叶绿素的化学结构及组成，掌握了叶绿素的理论计算方法。
关于叶绿素的实验报告
一、实验目的1. 了解叶绿素的提取方法；2. 掌握叶绿素的鉴定方法；3. 探究叶绿素在不同植物组织中的含量差异。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素，主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。
叶绿素易溶于有机溶剂，如乙醇、丙酮等，因此可用有机溶剂提取。
叶绿素在紫外光下呈现绿色荧光，可用于鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜菠菜、新鲜小麦、新鲜胡萝卜；2. 仪器：研钵、剪刀、漏斗、100ml三角瓶、酒精灯、紫外灯、比色皿、吸管、滴管、天平。
四、实验步骤1. 叶绿素提取：（1）将新鲜菠菜、小麦、胡萝卜分别洗净，剪碎；（2）将剪碎的植物材料放入研钵中，加入少量石英砂和碳酸钙；（3）加入2-3 mL 95%乙醇，研磨至糊状；（4）将研磨好的植物材料倒入100ml三角瓶中，过滤，收集滤液；（5）将滤液倒入比色皿中，用紫外灯照射，观察叶绿素荧光。
2. 叶绿素鉴定：（1）将提取的叶绿素溶液与已知浓度的叶绿素标准溶液进行比色；（2）记录吸光度值，计算叶绿素含量。
3. 叶绿素含量差异探究：（1）分别对菠菜、小麦、胡萝卜提取的叶绿素溶液进行比色；（2）记录吸光度值，计算叶绿素含量；（3）比较不同植物组织中叶绿素含量的差异。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取：实验成功提取了菠菜、小麦、胡萝卜中的叶绿素，且在紫外光下呈现绿色荧光。
2. 叶绿素鉴定：通过比色实验，确定提取的叶绿素溶液中叶绿素含量。
3. 叶绿素含量差异探究：实验结果表明，菠菜、小麦、胡萝卜中的叶绿素含量存在差异。
菠菜中叶绿素含量最高，小麦次之，胡萝卜最低。
六、实验结论1. 成功提取了菠菜、小麦、胡萝卜中的叶绿素；2. 掌握了叶绿素的鉴定方法；3. 不同植物组织中叶绿素含量存在差异，其中菠菜中叶绿素含量最高。
七、实验反思1. 实验过程中，要注意研磨充分，以确保叶绿素充分提取；2. 实验过程中，要注意操作规范，避免污染；3. 实验结果受多种因素影响，如植物品种、生长环境等，需进一步研究。
叶绿素测试实验报告
1. 学习叶绿素提取和测定的方法。
2. 掌握叶绿素含量测定的原理和步骤。
3. 了解叶绿素在植物生长过程中的重要作用。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素，其中叶绿素a和叶绿素b是主要的叶绿素类型。
叶绿素不溶于水，但易溶于有机溶剂。
本实验采用丙酮作为提取溶剂，通过测定叶绿素在特定波长下的吸光度，计算出叶绿素的含量。
三、实验器材与试剂1. 实验器材：研钵、漏斗、三角瓶、移液管、比色杯、分光光度计、电子天平、剪刀、滤纸等。
2. 试剂：丙酮、碳酸钙、无水乙醇、叶绿素标准溶液、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 准备样品：选取新鲜绿色植物叶片，用剪刀剪碎，称取0.1g左右放入研钵中。
2. 添加试剂：向研钵中加入少量碳酸钙和3～5ml丙酮，研磨至组织变白。
3. 提取叶绿素：将研磨好的样品转移至三角瓶中，加入适量丙酮，振荡使叶绿素充分溶解。
4. 定容：用移液管将提取液转移至比色杯中，用丙酮定容至10ml。
5. 测定吸光度：将比色杯放入分光光度计中，在波长665nm处测定吸光度。
6. 计算叶绿素含量：根据叶绿素标准溶液的吸光度，绘制标准曲线，根据样品的吸光度从标准曲线上查得叶绿素含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果：本实验测得样品中叶绿素含量为XXmg/g。
2. 结果分析：通过测定叶绿素含量，可以了解植物叶片的生长状况和光合作用能力。
在本实验中，叶绿素含量较高，说明样品叶片生长良好，光合作用能力强。
1. 影响叶绿素含量的因素：温度、光照、水分、土壤等环境因素都会影响叶绿素的含量。
2. 叶绿素提取方法的选择：本实验采用丙酮作为提取溶剂，原因在于丙酮对叶绿素的溶解性好，且易于挥发，便于后续操作。
3. 叶绿素含量的测定误差：本实验中，叶绿素含量测定误差主要来源于样品制备、试剂添加、操作步骤等环节。
七、实验结论本实验成功提取并测定了植物叶片中的叶绿素含量，为研究植物生长状况和光合作用能力提供了实验依据。
通过本实验，加深了对叶绿素提取和测定的原理和方法的理解，提高了实验操作技能。
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- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
一、实验目的：
1、了解植物组织中叶绿素分布及性质。
2、掌握测定叶绿素含量的原理和方法。
3、了解紫外分光光度计的用法。
4、了解一阶导数的含义。
5、了解如何如何排除互相干扰。
二、实验原理：
叶绿体中的色素都能够溶解于有机溶剂丙酮中，所以，可以用丙酮提取叶绿体中的色素。
层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。
根据叶绿体中的四种色素在层析液中的溶解度不同来进行分离，溶解度高的在滤纸上扩散的快，溶解度低的扩散地慢。
溶解度最高的是胡萝卜素，它随层析液在滤纸上扩散得最快，叶黄素和叶绿素a的溶解度次之；叶绿素b的溶解度最低，扩散速度最慢。
这样，四种色素就在扩散过程中分离开来。
叶绿素a和叶绿素b的分子结构相似，它们的吸收光谱、荧光激发光谱和发射光谱重叠，用常规分光光度法和荧光方法难以实现其同时测定。
但利用一阶导数光谱技术和同步荧光技术，消除了叶绿素a和叶绿素b的光谱干扰，可以同时测定它们的含量。
在600~700之间胡萝卜素一阶导数为零，没有吸收，在某个特定波长下，叶绿素a有一定的导数值，而叶绿素b的导数为零；同理，在另一个特定波长下，叶绿素b有一定的导数值，而叶绿素a的导数值为零。
这样可以实现叶绿素b和叶绿素b的同时测定，又不受胡萝卜素的干扰。
三、实验材料：
1、仪器
干燥的定性滤纸、烧杯（100ml）、研钵、玻璃漏斗、分液漏斗、剪刀、小试管、试剂瓶、药勺、量筒（10ml)、天平、试管架、载玻片、铅笔、
直尺、棉花、移液管、洗耳球、毛细吸管、铁架台、胶头滴管、紫外分光
光度计。
2、药品
新鲜的菠菜叶、石英砂、碱式碳酸镁、90％丙酮、层析液（石油醚：丙酮：苯=20:2:1）
四、实验方法与步骤：
1．提取叶绿素中的色素
（1）取几片绿叶，去掉主脉，用天平称取20g叶片，剪碎，放入研钵。
（2）向研钵中加入少许二氧化硅和碳酸钙，进行充分的研磨。
用量筒量取15ml丙酮。
倒入研钵中，迅速充分研磨。
（3）将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中进行过滤。
将滤液收集到一个小试管中，及时用棉塞将试管塞紧。
2.制备过滤纸
取一块预先干燥处理过的定性滤纸，将滤纸剪成长6cm，宽1cm的滤纸条，
在距滤纸条一端1cm处用铅笔画一条细的横线。
3.画滤纸细线
用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀画出一条细而直的滤液细线。
待滤液干后，再画2~3次。
4.分离叶绿体中的色素
将25ml层析液倒入烧杯中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）略微斜靠着烧杯的内壁，轻轻地插入到层析液中，随后用培养皿盖盖上烧杯。
五、注意事项
1、叶绿体色素对光、温度、氧气、酸碱及其他氧化剂都非常敏感。
色素的提取和分析一般都要在避光、低温及无干扰的情况下进行。
提取液不易长期存放，必要时应抽干充氮避光保存。
2、在导数分光光度法测定时，各组测得的最大吸收波长和一阶导数测定波长可能略有不同，应以自己测得的为准。
3、色素提取液可能含有不溶物（如植物组织），色谱分析时必须出去。
4、每完成一种试液分析后，应用丙酮等溶剂将比色皿和胶头滴管彻底清洗干净，否则会引起样品残留，影响下一个样品的分析。
叶绿素a和叶绿素b含量的测定
六、思考题
1,、画滤液细线时要细而直，而且要重复几次，为什么要这样操作？
答：画滤液细线时细而直，是为了避免分离后的色素带之间发生重叠；重复画是为了增加色素带的含量，使分离后的色素带更清晰
2、为什么一定不能让滤纸上的滤液细线接触到层析液？
答：应为层析液会溶解色素，如果滤液线接触到层析液，滤液线上的色素就会溶解在层析液中，而无法分离。