总糖的测定复习过程
总糖的测定方法
总糖的测定方法（斐林氏溶液快速测定法）一、原理：酶制剂生产中需要测定发酵液中糖质原料的消耗情况，以便掌握发酵过程。
葡糖糖、果糖、麦芽糖等为醛基、酮基或半缩醛基的糖都具有还原性，能使二价铜还原为一价铜，发酵液中的糊精、淀粉经过酸水解也能成为还原糖。
可根据其还原性，用一定量的斐林氏溶液将葡萄糖完全氧化，过量的斐林氏溶液与碘化钾作用而析出碘，然后用硫代硫酸钠来滴定，查表求的发酵液中的糖含量。
二、试剂：1、3N的盐酸溶液：浓硫酸一份加蒸馏水3份。
2、6N的氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠240.06克，溶解定容至1000毫升。
3、斐林氏溶液：A液：硫酸铜（五水硫酸铜）24克定容400毫升。
B液：酒石酸钾钠75克、氢氧化钠50克定容400毫升。
C液：碘化钾60克，定容200毫升。
A液、B液、C液混合为1000毫升溶液。
注意：配制时应按顺序配制，分别充分溶解，然后混合（A+B+C)摇匀备用。
4、4N的硫酸溶液：准确吸取化学纯浓硫酸111毫升于1000毫升的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。
5、0.05N的硫代硫酸钠溶液：精确称取化学纯的硫代硫酸钠12.41克与碳酸钠0.1克，用新沸初冷蒸馏水溶解定容1000毫升。
（此溶液配置好后需隔一周才能使用，每月需标定一次）。
6、1%的酚酞指示剂：称取酚酞1克，溶于95%的乙醇中，定容至100毫升。
三、操作方法：样品：吸取0.5毫升样品（发酵滤液），放入100毫升的三角瓶中（做两只可对照），加入3N的盐酸10毫升加热3分钟，冷却后滴入酚酞指示剂2滴，用6N的氢氧化钠溶液调至红色，再加入斐林氏溶液10毫升，煮沸3分钟，冷却后加入4N的硫酸10毫升，用0.05N的硫代硫酸钠滴定至奶油色为终点（在接近终点时加1%的指示剂，使之呈紫色）。
空白：在100毫升的三角瓶中加蒸馏水10毫升，然后加入斐林氏溶液10毫升煮沸3分钟，冷却后加入4N的硫酸10毫升，用0.05N的硫代硫酸钠滴定至奶白色。
实验五_可溶性总糖的测定
实验五_可溶性总糖的测定一、实验目的1. 学习可溶性总糖的测定方法；2. 复习化学计量法的实验方法和操作技能；3. 培养准确测量和记录实验数据的能力。
二、实验原理可溶性总糖指的是能够在水中溶解的所有糖类的总和，一般包括葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖等。
在工业和农业中，可溶性总糖是一个重要的质量指标。
因此，测定可溶性总糖的含量也显得非常必要。
目前常用的测定方法包括：重铬酸盐法、酚硫酸法和硫酸亚铁法等。
本实验采用硫酸亚铁法进行测定，基本原理如下：在弱酸溶液中，硫酸亚铁可以与糖类发生还原反应，区别不同糖类的还原能力越强，反应速率越快，发生的还原反应也越强。
本实验中，使用葡萄糖标准液作为比较，计算样品中可溶性总糖的含量。
三、实验步骤1. 前期准备a. 准备好实验所需的硫酸亚铁标准液（0.05mol/L）、葡萄糖标准液（100mg/L）和蒸馏水；b. 将样品称重并加入干燥器中，加热干燥至恒定质量。
2. 样品制备a. 将称好的样品粉末加入容量瓶中，加入约100ml的蒸馏水。
注意：样品过多会导致实验误差的增大，因此加入的样品应正确控制；b. 将试管清洗干净，并使用蒸馏水冲洗干净。
用蒸馏水将等量的硫酸亚铁标准液加入试管中；c. 将试管放入加热水浴中，预热30-60秒后取出；d. 加入1ml样品溶液，并立即倒入试管中，密封试管盖，摇晃均匀，再放入加热水浴中加热约30分钟。
3. 反应终止a. 将反应物冷却至室温；b. 加入10ml饱和酸化锌溶液，摇匀，用蒸馏水冲洗实验瓶内壁，以便更好地收集浸出液。
a. 取出试管，将反应液加入移液瓶中，加入5-6滴淀粉指示剂；b. 取一只滴定管，将其充分洗净，并加入硫酸氢钾（1mol/L），加入10滴以上；c. 开始滴定，当液体从紫色变为无色时，停止滴定，记录所消耗的滴定剂的滴数。
5. 比较样品a. 重复以上实验步骤，使用葡萄糖标准液代替样品。
注意：样品和标准液的操作方法和操作条件要保持一致；b. 比较两次实验结果，计算可溶性总糖的含量。
总糖含量的测定方法
总糖含量的测定方法嘿，朋友们！今天咱就来聊聊总糖含量的测定方法。
这可真是个有趣又重要的事儿呢！你想想看，糖在我们生活中那可是无处不在呀！从甜甜的糖果到美味的糕点，从可口的饮料到日常的食物，哪哪儿都有糖的影子。
那怎么知道这里面到底有多少糖呢？这就需要我们掌握测定总糖含量的方法啦！常用的一种方法就是斐林试剂法。
这就好像是一个神奇的魔法，能把看不见的糖给变出来让我们看到。
先把样品处理好，然后加入斐林试剂，经过一系列反应，就能根据产生的现象来推算出糖的含量啦。
就像侦探在破案一样，通过一点点线索找到真相！还有一种方法是蒽酮比色法呢！这个方法也很有意思，就好像是给糖穿上了一件特别的“衣服”，让它在特定的条件下显现出来。
通过测量颜色的变化，就能知道糖有多少啦。
另外啊，还有一些其他的方法呢，就像武林中有各种不同的武功秘籍一样，各有各的厉害之处。
测定总糖含量可不仅仅是为了好玩哦，它的用处大着呢！比如在食品行业，厂家得知道自己生产的东西里糖有多少，这样才能保证产品的质量和口感呀。
不然，太甜了或者不够甜，那可不行！在科研领域，研究人员也需要准确测定总糖含量来进行各种研究，这就像是给他们的研究搭起了一座坚实的桥梁。
那有人可能会问了，测这个难不难呀？其实呀，只要掌握了方法，也没那么难啦！就像学骑自行车一样，一开始可能会摇摇晃晃，但多练习几次就熟练啦。
咱就说，要是不知道这些测定方法，那不是像在黑暗中摸索吗？所以呀，了解总糖含量的测定方法真的很重要呢！这能让我们更清楚地了解我们吃的东西，也能在很多方面帮助我们做出更好的选择。
总之，总糖含量的测定方法是个很实用的知识，大家可得好好记住哦！学会了它，就像是掌握了一把打开甜蜜世界大门的钥匙，能让我们更深入地了解糖这个奇妙的东西呢！怎么样，是不是很有意思呀？赶紧去试试吧！。
总糖的测定实验报告
总糖的测定实验报告总糖的测定实验报告引言：总糖是指食物中所有可溶性糖类的总和，包括单糖、双糖和多糖。
在食品工业中，准确测定食物中的总糖含量对于产品质量的控制和消费者的健康至关重要。
本实验旨在通过一系列实验步骤，测定某种食品中的总糖含量，并探讨不同测定方法的准确性和可行性。
实验原理：总糖的测定方法有很多种，常用的有显色法、酶解法和高效液相色谱法。
本实验采用显色法进行总糖的测定。
该方法是利用总糖与酚酞反应，生成红色络合物，通过比色测定络合物的吸光度来确定总糖的含量。
实验步骤：1. 样品制备：将待测样品加入适量的蒸馏水中，充分溶解。
2. 酚酞溶液制备：将适量的酚酞溶解于蒸馏水中，制备成0.5%的酚酞溶液。
3. 反应体系制备：取适量的样品溶液和酚酞溶液混合，加入适量的硫酸，使反应体系呈酸性。
4. 反应与显色：将反应体系加热至沸腾，保持沸腾2-3分钟，使反应充分进行。
然后冷却至室温，观察溶液颜色的变化。
5. 吸光度测定：使用分光光度计，在波长为520nm处测定反应体系的吸光度。
6. 标准曲线绘制：取一系列不同浓度的葡萄糖溶液，按照上述步骤进行显色反应，并测定吸光度。
根据吸光度与浓度的关系，绘制标准曲线。
7. 总糖含量计算：根据样品的吸光度值，利用标准曲线得出样品中总糖的含量。
结果与讨论：通过实验测定，得到了待测食品中总糖的含量为X g/100g。
这个结果表明该食品中含有较高的总糖含量，可能对于某些人群来说，摄入过多的该食品可能会导致健康问题。
总糖的测定方法中，显色法是一种简便、快速的方法。
然而，该方法对于一些特殊的食品样品可能会产生干扰，导致测定结果不准确。
因此，在实际应用中，需要根据不同的食品样品选择合适的测定方法。
此外，本实验中使用了葡萄糖作为标准物质，绘制了标准曲线。
标准曲线的制备对于准确测定样品中总糖的含量至关重要。
在实际应用中，可以根据需要选择其他合适的标准物质，并制备相应的标准曲线。
结论：通过本实验，我们成功测定了某种食品中的总糖含量，并探讨了不同测定方法的准确性和可行性。
总糖含量的测定方法
总糖含量的测定方法嘿，朋友们！今天咱们就像探险家一样，去探寻一下总糖含量的测定方法，这可就像是在糖果王国里寻找宝藏的秘密地图哦。
首先呢，有一个超级经典的方法，就是斐林试剂法。
这斐林试剂啊，就像是一个超级侦探，专门去揪出那些藏起来的糖分子。
把斐林试剂和含有糖的溶液混合在一起，就像是一场盛大的舞会开始了。
溶液里的糖分子就像一个个穿着华丽舞裙的舞者，迫不及待地要和斐林试剂中的铜离子共舞呢。
然后通过加热，这个舞会就进入了高潮，糖分子和铜离子在热热闹闹的氛围中发生反应，最后生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
这沉淀就像是舞会后留下来的精美纪念品，我们根据这个沉淀的量就能大致算出总糖的含量啦，是不是很神奇呢？就好像通过舞会后的垃圾量能算出来了多少宾客一样夸张。
还有一个方法是蒽酮比色法。
蒽酮就像是一个有着神奇魔法的小巫师，它能把糖变成有色的物质。
当把蒽酮试剂加入到含糖溶液里，就像是小巫师挥动魔法棒一样，溶液瞬间就发生了变化。
糖分子就像是被施了魔法的小木偶，乖乖地变成了一种有着特殊颜色的化合物。
然后我们把这个有色溶液放到比色计里，就像是把小木偶放在舞台上展示一样。
比色计通过检测颜色的深浅，就能知道糖的含量了，这感觉就像是看木偶戏的观众通过木偶的大小来判断它的年龄一样有趣。
另外，DNS法也很有趣哦。
DNS试剂就像是一个超级贪婪的大胃王，它遇到糖分子就“吃”个不停。
糖分子和DNS试剂发生反应后会变色，这就好比大胃王吃了不同的食物后脸上会沾上不同颜色的酱料一样滑稽。
我们再根据颜色的变化来确定总糖的含量，就像是通过大胃王脸上酱料的颜色来判断他吃了多少食物呢。
在这些测定方法里，每一个步骤都要小心翼翼的，就像走钢丝一样。
要是哪个环节出了差错，那就像是在演奏交响乐的时候突然弹错了一个音符，整个结果就会变得乱七八糟。
比如说加热的温度不对，就像是把烤箱的温度调错了，烤出来的蛋糕要么没熟要么焦了，测出来的总糖含量也就不准了。
总糖含量的测定虽然听起来有点复杂，但是当我们把它想象成一场有趣的游戏或者一个奇妙的故事，就会觉得充满乐趣啦。
实验五总糖的测定-蒽酮比色法
苯酚-硫酸法两种测量固体含糖量的方法选择一种比较适合的自己的方法两种方法可以对比下那种更好苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。
再以比色法测定。
编辑本段原理多糖在硫酸的作用下先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物。
再以比色法测定。
编辑本段试剂1．浓硫酸：分析纯，95.5%2． 80%苯酚：80克苯酚（分析纯重蒸馏试剂）加20克水使之溶解，可置冰箱中避光长期储存。
3． 6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。
（每次测定均需现配）4．标准葡聚糖（Dextran,瑞典Pharmacia）,或分析纯葡萄糖。
5． 15%三氯乙酸（15%TCA）：15克TCA加85克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
6． 5%三氯乙酸（5%TCA）：25克TCA加475克水使之溶解，可置冰箱中长期储存。
7． 6mol/L 氢氧化钠：120克分析纯氢氧化钠溶于500ml水。
8． 6mol/L 盐酸编辑本段操作1．制作标准曲线：准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
2．样品含量测定：①取样品1克（湿样）加1ml 15%TCA溶液研磨，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液于10毫升离心管中，再加少许5％TCA溶液研磨，倒上清液，重复3次。
最后一次将残渣一起到入离心管。
注意：总的溶液不要超出10毫升。
（既不要超出离心管的容量）。
②离心，转速3000转/分钟，共三次。
第一次15分钟，取上清液。
后两次各5分钟取上清液到25毫升锥形比色管中。
动物多糖--总糖的测定
1.硫酸蒽酮法（1）样品处理：称取0.1g样品（动物），以E/S比为1/25的比例，加入0.004g酸性蛋白酶定容至10mL容量瓶中，在pH=2,温度在37℃下，进行水解5h，水解后在100℃灭酶3min。
将经酶处理过的样品用5mL注射器经0.45um针孔滤膜过滤，收集滤液，并取1mL 滤液定容至50mL容量瓶中待用。
（2）紫外分光检测：准确称取0.1g葡萄糖（分析纯），溶解并用蒸馏水定容到100ml后，分别取出1ml、2ml、3ml、4ml、5ml分别加入到50的容量瓶中，并用蒸馏水定容到50ml,配成了浓度分别为20ug/ml、40ug/ml、60ug/ml 、80ug/ml、100 g/ml, 以蒸馏水做对照空白，各取1ml于试管中，再加入4ml蒽酮试剂，迅速浸入冰水中冷却，待几只试管均匀加完后，一起浸入100℃恒温水浴锅中，为防止水分蒸发，应在试管口上加塞。
自温度重新升至100℃起计时，准确保温10min后取出，用流动水冷却。
然后，于室温中平衡片刻（约10min左右），再在分光光度计上，进行光谱扫描，检测在波长620nm有最大吸收峰，选择620nm紫外检测波长，用0.5cm厚度的比色杯进行比色。
其标准曲线制作如表1.1 所示：表1.1 葡萄糖标准曲线结果标样号浓度（ug/ml）吸光度(ABS)1 20.000 0.067282 40.000 0.257233 60.000 0.438604 80.000 0.589235 100.000 0.74802多糖含量（%）=（样品浓度×稀释倍数×样品体积）/式样称重量×100%。
2．苯酚-硫酸法（1）标准曲线的制备: 准确称量干燥至恒重的葡萄糖标准品0.020g,置于体积500mL的容量瓶中定容并摇匀,得到葡萄糖的标准溶液。
以2.0mL蒸馏水作为空白样,依次取0.4mL, 0.6mL, 0.8mL, l.0mL, 1.2mL,1.4mL, 1.6mL,1.8mL 葡萄糖标准溶液,用蒸馏水补足至2.0mL,在每个样品中按顺序加入浓度为6%的苯酚溶液l.0mL,98%的浓硫酸5.0mL,静置10min后摇匀,室温下放置20min,再在分光光度计上，进行光谱扫描，检测在波长490nm有最大吸收峰，选择490nm紫外检测波长，用0.5cm厚度的比色杯进行比色，测得吸光值。
滴定法测量总糖
总糖的测定（直接滴定法）滴定, 蒸馏水, 葡萄糖, 酒石酸, 试剂1 原理样品中原有的还原糖和水解后转化的还原糖，在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液，根据消耗样液量计算总糖。
2 仪器实验室一般常用仪器。
3 试剂3．1 浓盐酸（比重1.18）。
3．2 30%氢氧化钠。
3．3 0.1%甲基红指示剂。
3．4 葡萄糖标准溶液：精确称取1.000g经过105℃烘干至恒重的葡萄糖，加水溶解后加入5mL盐酸，并用水稀释至1000mL的容量瓶中，摇匀，备用。
3．5 斐林氏试剂甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基兰，用蒸馏水溶解。
移入1000mL 棕色容量瓶中，用蒸馏水定容。
乙液：称取50g酒石酸钾钠，75g氢氧化钠及4g亚铁氰化钾，用蒸馏水溶解，移入1000mL 容量瓶中，用蒸馏水定容。
斐林氏溶液的标定：吸取斐林氏甲液和乙液各5mL于150mL三角瓶中加水10ml，从滴定管中滴加约9.5mL葡萄糖标准溶液（3.5.3.4）控制在2min内加热至沸，趁沸以1滴/2s的速度滴加葡萄糖标准溶液（3.5.3.4）。
滴定至蓝色退尽为终点。
记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。
同时平行操作三份，取其平均值计算第10mL（甲乙液各5mL）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）。
A=W*V/1000式中：A——10ml斐林氏甲乙液，相当于葡萄糖克数，g；W——称取葡萄糖克数，g；V——滴定时所消耗葡萄糖的毫升数，mL；1000——葡萄糖的稀释倍数。
4 测定步骤4．1 称取适量匀样（根据含糖量而定，要求滴定消耗样品液体积约在10mL左右。
）于250mL 容量瓶中，加水100mL，加入盐酸5mL摇匀，将容量瓶置于温度为68~70℃恒温水中转化，转化10min，取出置流动水中迅速冷却至室温，加1%甲基红指示剂2滴，用30%氢氧化钠中和至中性，用水稀释至刻度，摇匀，注入滴定管中备用。
4．2 预滴定：吸取斐林氏甲、乙液各5mL，放入150mL三角瓶中，再加入10mL水，在电炉上加热至沸，从滴定管中滴入转化好的糖液（3.5.4.1）至蓝色退尽即为终点。
总糖的测定
在加热条件下，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，酒石酸钾钠铜被还原糖还原，产生红色氧化亚铜沉淀，还原糖则被氧化和降解。反应生成的氧化亚铜沉淀。
1、测总糖
(1)原理
本次试验采用的测总糖的方法是斐林试剂法，因此直接滴定前需要在试样加入盐酸并在加热条件下使试样中非还原糖部分酸解为还原性糖。菲林试剂是由甲、乙两种溶液组成。甲液含质量分数为0.05 g/mL的硫酸铜和次甲基蓝(氧化还原指示剂)；乙液含质量分数为0.1 g/mL的氢氧化钠，酒石酸钠。
斐林试剂所消耗葡萄糖标准溶液的体积标定
A.预备试验：吸取斐林甲液、乙液及标准葡萄糖液各5mL于250mL三角瓶内，加20mL蒸馏水，摇匀，在电炉上加热，从沸腾开始计时约2min，加入亚甲基蓝溶液2滴，在沸腾状态下1min内用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失为止。记录标准葡萄糖液消耗的总体积。
B.正式试验：吸取斐林甲液、乙液及标准葡萄糖液各5mL于250mL三角瓶内，加蒸馏水20mL，滴入少于预备试验1毫升的2.5g/L的标准葡萄糖溶液，置电炉上沸腾2min，滴入亚甲基蓝2滴，沸腾状态下1min内以标准葡萄糖溶液滴定，至溶液蓝色刚好消失。记录标准葡萄糖液消耗的总体积，并做平行试验，使两次滴定结果之差在0.1mL之内。
(3)计算公式
总糖含量（以葡萄糖计，g/L）=（A-B）×0.0025×250××
式中：
A—标定10ml菲林试剂所消耗的标准葡萄糖溶液的体积，mL；
B—往10ml菲林试剂中加入5ml水解后试样消耗标准葡萄糖溶液的体积，mL；
5—定糖时，用移液管吸取5ml试样水解液的体积，mL；
2.5—实验前配制好的标准葡萄糖溶液的浓度，g/L；
总糖含量的测定
总糖含量的测定
总糖含量的测定是指测定样品中所有可溶性糖的含量，用于分析食品、饮料、蔬菜等样品中糖的含量。
通常使用能够分解样品中所有糖类物质的酸性氧化液来测定样品中总糖含量。
具体步骤如下：
1.将样品研磨成细粉状，并加入足量的热水，搅拌均匀；
2.将混合液置入电子天平中，记录样品质量，将质量称量的样品移入微量烧瓶中；
3.向样品中加入足量的酸性氧化液，搅拌均匀，使糖类物质完全被氧化，然后加入足量的还原剂，搅拌均匀；
4.将混合液加热，完全分解出所有糖类物质，再将混合液放入离心机中离心分离，将上清液收集；
5.将收集的上清液加入足量的高纯度固体糖类物质，加热溶解，然后将混合液加入蒸馏水中，使其完全溶解；
6.将溶液中的糖类物质浓度测定，并计算样品中总糖含量。
总糖、总酸的测定方法总结
总糖的测定方法及步骤：(直接滴定)取待测夜5ml于容量瓶中（两份重复）↓待测夜中加入乙酸钾（21.9%）和亚铁氯酸钾（10.6%）各5ml，蒸馏水稀释原液↓用100ml容量瓶定容，静置30min↓加入5ml盐酸恒温水解15min（恒温水浴锅温度67±1℃）↓滴入甲基红指示液↓调节pH（先加入5mlNaoH 标准溶液进行中和，调节pH值在6~7之间）↓定容于100ml容量瓶中待测↓各取5ml斐林试剂甲液和乙液于两个锥形瓶中↓用定容后待测夜匀速滴定加热沸腾的斐林试剂，记下待测夜的滴定体积为V（现象：从蓝色变为待测液本身的颜色为止，置于空气中变为紫红色为准；若至于空气变为黑绿色说明滴定过量了）总糖的计算公式:9.8总糖（%）= ——————————————* 100%5*50—————* 0.01 * V250式中：9.8 ----------斐林试剂标准浓度V -------------待测夜滴定体积0.01--------------稀释倍数总酸的测定方法及步骤：酸碱中和滴定称取W为1g待测夜两份（电子天平）↓用50ml蒸馏水稀释，记下体积为V↓取一定体积为V1的待测液加入酚酞指示液（10g/ml GB）↓用0.1mol/LNaoH标准溶液滴定,记下体积为V2（现象：从红色变为橙色为准）总酸的计算公式：式中：V——样品稀释总体积（mL）V1——滴定时取样液体积V2——消耗氢氧化钠标准液毫升数C——氢氧化钠标准液摩尔浓度W——样品重量（g）折算系数：即不同有机酸的毫摩尔质量（g/mmol），食品中的总酸度往往根据所含酸的不同，而取其中一种主要有机酸计量。
食品中常见的有机酸以及其毫摩尔质量折算系数加下：苹果酸——0.067（苹果、梨、桃、杏、李子、番茄、莴苣）醋酸——0.060（蔬菜罐头）酒石酸——0.075（葡萄）柠檬酸——0.070（柑橘类）乳酸——0.090（鱼、肉罐头、牛奶）。
总糖的测定
总糖的测定直接滴定法1、主要试剂;(1)、6mol/L盐酸溶液。
(2)、0.1%甲基红乙醇溶液称取0.1g甲基红，用60%乙醇溶解并定容到100ml.(3)、20%氢氧化钠溶液(4)、0.1%转化糖标准溶液准确称取105℃烘干至恒重纯蔗糖1.9000g，加水溶解并移入1000ml容量瓶中，定容，混匀。
取出50ml于100ml容量瓶中，加入6ml/L盐酸5ml溶液,在68—70℃水浴中加热15min,取出迅速冷却至室温，加2滴0.1%甲基红乙醇溶液，用20%氢氧化钠溶液中和至中性，加水至刻度，混匀。
此溶液每毫升含转化糖1mg.2、实验仪器100ml容量瓶、干燥滤纸、150ml锥形瓶、玻璃珠、加热器2、操作方法：（1）取一定量样品，称取2.5—5.0g固体样品，用50ml水分次溶解样品并吸入250ml容量瓶中，摇匀后慢慢注入5ml 硫酸铜和氢氧化钠溶液（不确定，书本66页），加水至刻度，摇匀，静置30min,用干燥滤纸过滤，弃初滤液，滤液备用。
吸取处理后的样液50ml，放置100ml容量瓶中，加入5ml6ml/L盐酸溶液，68—70℃水浴中加热15min,取出迅速冷却至室温，加入2滴0.1%甲基红乙醇溶液，用20%氢氧化钠溶液中和至中性，加水至刻度，混匀，（2）样品溶液预测：吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml,置于150ml锥形瓶中，加水10ml,加玻璃珠3粒，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s，趁沸以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品试液，并保持沸腾状态。
待溶液颜色变浅时，以每2s 1滴的速度继续滴加样品溶液，直至溶液的蓝色刚好褪去为终点，记录消耗样品溶液的体积。
（3）样品溶液测定吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml,置于150ml锥形瓶中，加水10ml,加玻璃珠3粒，从滴定管加入比预测时样品溶液消耗总体积少1ml的样品溶液，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s，趁沸以每2s 1滴的速度继续滴加样品溶液，直至溶液的蓝色刚好褪去为终点，记录消耗样品溶液的总体积，平行操作三次，取其平均值。
实验二 总糖和还原糖的测定1
实验二总糖和还原糖的测定1实验目的：通过化学反应，定量测定果汁、蜂蜜和其他实验样品中的总糖和还原糖含量。
实验原理：总糖是指以糖为主要成分的物质。
而还原糖是指那些具有还原性质，并能够将还原铜离子还原为沉淀的单糖和双糖类糖分。
还原糖在碱性溶液中容易还原铜离子，产生还原铜沉淀，这种化学反应叫做费林试剂反应。
2.费林试剂反应原理费林试剂是由铜离子(Cu2+)、草酰肼和钠碱组成的混合物。
在碱性条件下，草酰肼被还原成草酸，同时将 Cu2+ 还原为 Cu+ 并生成棕色的沉淀。
当样品中加入碱性费林试剂时，还原性糖分（如果糖、葡萄糖等）能够将 Cu2+ 还原为 Cu+，从而生成棕色的沉淀。
这个过程是一个可以定量的过程，衡量沉淀的多少就能够推算出溶液中还原性糖分的含量。
另外，总糖含量的计算是通过使用苏丹III试剂实现的。
实验器材：1.量筒2.移液管3.试管4.洗瓶5.恒温摇床6.温度计1.果汁2.蜂蜜3.标准葡萄糖溶液4.碳酸钠5.草酰肼6.苏丹III试剂7.浓硫酸实验步骤：1.总糖的测定：取一定量的果汁样品，用量筒量取 10 毫升到试管中，再加入 2 - 3 滴苏丹III 试剂，晃动均匀。
在搅拌下加入 5 - 10 滴浓硫酸，并再次使试管均匀地摇晃。
静止 5 分钟，颜色稳定后，在光谱计中读取样品的吸光度。
取一定量的果汁样品，用量筒量取 10 毫升入 50 毫升锥形瓶中，再加入 15 毫升碳酸钠。
轻轻振摇均匀后，再将 5 毫升草酰肼溶液滴入锥形瓶中。
接下来，用标准葡萄糖溶液调节光密度值，以达到与实验样品相同的吸光度比值。
从光谱计中记录每个样品反应的吸光度。
实验注意事项：1.实验操作要认真，保证实验片刻的稳定，确保实验数据的准确。
2.注意光源是光谱计的重要组成部分，因此要记得把光源打开，以确保性能。
总结：通过总糖和还原糖的测定，我们可以测定样品的果糖、葡萄糖等还原糖分的含量，以及样品中糖类总含量的含量。
这对于分析果汁和蜂蜜等样品非常有用，也为食品行业提供了重要的检测方法和标准。
食品中总糖的测定
食品中总糖的测定是衡量食品中糖分含量的一种方法，可以通过化学分析的方法来进行测定。
下面是总糖的测定步骤：
样品制备
将待测样品称取适量，加入适量的蒸馏水或磷酸盐缓冲液中，搅拌均匀后过滤，得到过滤液备用。
硫酸酚试剂法
将10 mL过滤液加入试管中，加入1 mL硫酸酚试剂，搅拌均匀后加入10 mL硫酸试剂，再次搅拌均匀。
将试管放入沸水中加热5分钟，冷却至室温后，加入50 mL蒸馏水，用0.1mol/L 氢氧化钠溶液滴定至橙黄色，记录用量V1。
硝酸汞法
将10 mL过滤液加入试管中，加入3 mL硝酸汞试剂，加热至沸腾，持续加热5分钟，冷却后加入50 mL蒸馏水，用0.1mol/L氢氧化钠溶液滴定至橙黄色，记录用量V2。
计算
总糖的含量C（%）=（V1-V2）×0.1×1000/样品质量（g）。
总糖含量的计算中，V1为硫酸酚试剂法所用氢氧化钠溶液的用量，V2为硝酸汞试剂法所用氢氧化钠溶液的用量，0.1为氢氧化钠溶液的摩尔浓度，1000为单位转换系数。
总糖的测定可以通过硫酸酚试剂法和硝酸汞法两种方法进行，其中硝酸汞法的测定结果更加准确。
总糖的测定对于衡量食品中糖分含量，评估食品的营养价值和安全性具有重要意义。
(推荐)总糖的测定
（推荐）总糖的测定一、糕点、糖果中还原糖的测定1、直接滴定法1）原理：样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定经标定的碱性酒石酸铜溶液，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜。
以亚甲基蓝为指示剂，在终点稍过量的还原糖将蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝，根据试样所消耗的体积计算还原糖的含量。
直接滴定法已经过多次改进，只要严格遵守实验条件，分析结果的准确度和重现性是能够满足定量分析的要求。
2）试剂①费林氏剂甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g四甲基蓝，溶于水中并稀释至1000ml。
②费林氏剂乙液：称取50g酒石酸钾钠及75gNaOH，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
③乙酸锌溶液：称取乙酸锌结晶21.9g，加3ml冰醋酸，加水溶解至100ml。
④106g/l亚铁氰化钾溶液。
⑤葡萄糖标准溶液：准确称取1.0000g经过96±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5mlHCl,并以水稀释至1000ml。
此溶液每1ml相当于1.0mg葡萄糖。
3）操作方法①样品处理：准确称取样品（粉碎后的）2.5~5.0g置于250ml 容量瓶中，加水50ml，摇匀后慢慢加入5ml乙酸锌溶液，混匀后再慢慢加入5ml亚铁氰化钾溶液，振摇，加水定容并摇匀后静置30min，用干滤纸过滤，弃去初始滤液，过滤液备用。
②标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.00ml碱性酒石酸铜甲液及5.00ml碱性酒石酸铜乙液，置于250ml锥形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠3粒，从滴定管加约9ml标准葡萄糖液，使其在2min内加热至沸。
趁热以0.5滴/s的速度继续滴加糖液，直至溶液颜色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖液的体积。
平行操作3次，得m平均消耗葡萄糖液的体积。
计算每10ml(甲、乙各5ml)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg），即m＝v×c式中m——10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）v——标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积c——葡萄糖标准溶液的浓度（mg/ml）③样品溶液的预测定：吸取费林氏甲、乙液各5ml，置于150ml 三角瓶中，加水10ml、玻璃珠2粒，控制在2min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中加样液，趁沸以0.5滴/s的速度继续滴定至蓝色刚好褪去为终点，记录消耗样液的体积。
硫酸苯酚法测定总糖原理与步骤
原理：
苯酚法测定可溶性糖的原理是：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10－100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。
步骤：
. 5%苯酚溶液：取适量苯酚(A.R)，高温蒸馏，收集180℃馏分，称取50.0g，用水溶解，最后定容于1000m1棕色容量瓶中，冷藏避光保存。
. 葡萄糖标准液(200mg/L)，精称110℃恒重的葡萄糖20.0mg，用水溶解，定容至100m1。
精密吸取2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 ml分别置于100ml量瓶中加水定容至刻度，摇匀得葡萄糖稀释液。
. 标准曲线的制备：分别精密量取上述各稀释液2 ml置具塞试管中，同时精密量取水2.0 ml置另一具塞试管中，各管分别加5%苯酚溶液（新制）1 ml，摇匀，然后迅速加入浓硫酸5.0ml，立即摇匀，于40℃水浴中保温30min，取出，置冷水浴中5 min。
以上述2.0ml 水所制得的空白溶液做参比，于490nm波长处测定各溶液吸收度，以葡萄糖稀释液的浓度（μg/ml）为横坐标，吸收度为纵坐标，绘制标准曲线。
. 样品的测定：吸取已定容的水解样（必要时可稀释到一定体积）2.0ml置于25ml 比色管中，加5%苯酚试剂1.0ml，迅速滴加5.0ml浓硫酸，摇匀后在室温下静置30min；每个样品做三个平行样。
于490nm处用空白调零测吸光度，然后代入标准曲线算出其总糖含量。
实验五.总糖的测定doc
实验五、总糖和还原糖的测定费林试剂比色法一、实验意义掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用直接滴定法测定还原糖的方法。
二、实验原理将一定量的碱性酒石酸铜甲液和乙液等体积混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀：2NaOH + CuSO4 = Cu(OH)2↓+ Na2SO4所生成的氢氧化铜沉淀与酒石酸钠反应，生成可溶性的酒石酸钾钠铜：在加热条件下，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，酒石酸钾钠铜被还原糖还原，产生红色氧化亚铜沉淀，还原糖则被氧化和降解，其反应如下：反应生成的氧化亚铜沉淀与费林试剂中的亚铁氰化钾（黄血盐）反应生成可溶性复盐，便于观察滴定终点。
Cu2O + K4Fe(CN)6 + H2O →K2Cu2Fe(CN)6 + 2KOH（氧化亚铜）（淡黄色）滴定时以亚甲基蓝为氧化－还原指示剂。
因为亚甲基蓝氧化能力比二价铜弱，待二价铜离子全部被还原后，稍过量的还原糖可使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型的亚甲基蓝，即达滴定终点。
根据样液量可计算出还原糖含量。
三、试剂和器材1、试剂①碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g亚甲基蓝，溶于蒸馏水中并稀释到1000ml。
②碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g NaOH，溶于蒸馏水中，再加入4g亚铁氰化钾［K4Fe（CN）6］，完全溶解后，用蒸馏水稀释到1000ml，贮存于具橡皮塞玻璃瓶中。
③0.1％葡萄糖标准溶液：准确称取1.000g经98～100℃干燥至恒重的无水葡萄糖，加蒸馏水溶解后移入1000ml容量瓶中，加入5ml浓HCl（防止微生物生长），用蒸馏水稀释到1000ml。
④6mol/LHCl：取250ml浓HCl（35%～38%）用蒸馏水稀释到500ml。
⑤碘－碘化钾溶液：称取5g碘，10g碘化钾溶于100ml蒸馏水中。
⑥6N NaOH：称取120gNaOH溶于500ml蒸馏水中。
总糖的测定6[技巧]
![总糖的测定6[技巧]](https://img.taocdn.com/s3/m/ea9749cfcf2f0066f5335a8102d276a2002960fd.png)
食品中总糖的测定6.3.1 第一法廉爱农法适用于甜酒和半甜酒。
6.3.1.1 方法提要费林溶液与还原糖共沸，生成氧化亚铜沉淀。
以次甲基蓝为指示液，用试样水解液滴定沸腾状态的费林溶液。
达到终点时，稍微过量的还原糖将次甲基蓝还原成无色为终点，依据试样水解液的消耗体积，计算总糖含量。
6.3.1.2 试剂（a）费林甲液：称取硫酸铜（CuSO4·5H2O）69.28 g，加水溶解并定容至1000 mL。
（b）费林乙液：称取酒石酸钾钠346 g及氢氧化钠100 g，加水溶解并定容至1000 mL，摇匀，过滤，备用。
（c）2.5 g／L 葡萄糖标准溶液：称取经103℃～105℃烘干至恒重的无水葡萄糖2.500 0 g（精确至0.000 1 g），加水溶解，并加浓盐酸5 mL，再用水定容至1000 mL。
（d）10 g／L次甲基蓝指示液：称取次甲基蓝1.0 g，加水溶解并定容至100 mL。
（e）6 mol／L盐酸溶液：量取浓盐酸50 mL，加水稀释至100 mL。
（f）1 g／L甲基红指示液：称取甲基红0.10 g，溶于乙醇并稀释至100 mL。
（g）200 g／L氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠20 g，用水溶解并稀释至100 mL。
6.3.1.4 分析步骤（a）标定费林溶液的预滴定：准确吸取费林甲、乙液各 5. 00 mL 于250 mL锥形瓶中，加水30 mL，混合后置于电炉上加热至沸腾。
滴入葡萄糖标准溶液，保持沸腾，待试液蓝色即将消失时，加入次甲基蓝指示液2滴，继续用葡萄糖标准溶液滴定至蓝色消失为终点。
记录消耗葡萄糖标准溶液的体积（V）。
（b）费林溶液的标定：准确吸取费林甲、乙液各5.00 mL于250 mL 锥形瓶中，加水30 mL。
混匀后，加入比预滴定体积（V）少1.00 mL 的葡萄糖标准溶液，置于电炉上加热至沸，加入次甲基蓝指示液2滴，保持沸腾 2 min，继续用葡萄糖标准溶液滴定至蓝色刚好消失为终）。
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2.3.2 样品溶液正式测定：吸取5.0mL斐林氏甲 液 及 5.0mL 乙 液 ( 先 加 乙 液 再 加 甲 液 ) ， 置 于 150mL锥形瓶中，加蒸馏水25mL，从滴定管中 滴 加 比 预 测 体 积 少 1~2mL 的 样 品 溶 液 ， 加 入 玻 璃珠3~5粒，控制在2min内加热至沸，然后趁沸 继续以每2秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色褪去， 出现粉红色(或浅黄色)终点，记录消耗样液的总 体积。同法平行操作2~3份，得出平均消耗体积。
➢如果滴定后样品液的颜色变浅后又再 变深，说明滴定过量，需重新滴定。
5.滴定时反应液不变色的原因及处理：
➢可能是样液含糖量过少或斐林试剂太 浓；
➢ 应加大称样量； ➢ 或减少稀释倍数； ➢ 或减少斐林试剂的用量，可各取1～
3mL， 计算时按比例折算。
2.3 样液测定 2.3.1 样品溶液预测：吸取5.0mL斐林氏甲液及 5.0mL乙液（先加乙液再加甲液），置于三角瓶中， 加蒸馏水25mL，加入玻璃珠3~5粒，控制在2min 内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管 中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液 颜色变浅时，以每秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝 色褪去，出现粉红色(或浅黄色)为终点。
实验一 总糖的测定
1. 实验原理
斐林试剂法是利用斐林试剂的甲、乙液混合后， 甲液的硫酸铜与乙液的氢氧化钠作用生成天蓝色的氢 氧化铜沉淀，该沉淀在碱性溶液中与乙液的酒石酸钾 钠反应生成复杂的化合物（酒石酸钾钠铜）。酒石酸 钾钠铜是一种氧化剂，糖类的水解物都含有具还原性 的醛基或是酮基，在碱性条件下煮沸能使斐林试剂中 的二价铜离子还原为一价的氧化亚铜。根据斐林试剂 完全还原所需的糖量，计算出样品的总糖含量。
3. 计算
X
M
m V的含量（以葡萄糖计），%； m — 10mL斐林试剂相当于还原糖（以葡萄糖计）
的质量，g； V — 测定时平均消耗样品溶液的体积，mL；
M — 样品质量，g。
4.变色过程：
➢样液由深蓝色→蓝紫色→紫红色→红 色
➢或由深蓝色→蓝紫色→黄绿色→黄红 色
2. 操作方法
2.1 样品处理：将样品在组织捣碎机中捣成匀浆，称取约10--20g样品，溶解后置于250mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度， 混匀，静置,过滤60-70mL。
2.2 样品转化：吸取处理好的样液50mL于100mL容量瓶中， 加盐酸5mL，摇匀。置水浴中加热，使溶液在2~2.5min内升 温至70℃，保持7.5~8min，使全部加热时间为10min。取出 迅速冷却至室温。用20%NaOH溶液中和（加入酚酞指示剂 1~2滴），样液至微红色为止，加蒸馏水至刻度，摇匀，注入 滴定管中。