cas9基因敲除原理

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cas9基因敲除原理
CRISPR-Cas9是一种基因编辑技术,可以通过切割DNA序列
来实现基因敲除。

CRISPR是“Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats”的缩写,是一种天然存在于细菌和
古细菌中的免疫系统。

Cas9则是CRISPR-Cas9系统中所使用
的酶。

CRISPR-Cas9系统通过三个主要组件来实现基因敲除:CRISPR RNA(crRNA),tracrRNA和Cas9。

首先,crRNA
和tracrRNA结合形成一个复合体,被称为单导螺旋RNA (sgRNA)。

sgRNA可以与Cas9酶结合,并引导Cas9 酶与
特定DNA序列中的目标基因相结合。

当Cas9与sgRNA定位到目标基因的特定序列时,它会切割DNA,导致基因序列中的断裂。

细胞会试图修复这个断裂,
但通常会导致不完整的修复,从而引起基因缺失或突变。

这就实现了基因敲除的目标。

此外,通过供应外源的DNA修复模板,可以利用Cas9的断
裂修复机制来进行目标基因的修复。

这种方法被称为基因敲入,可以在目标基因上插入新的基因组成部分。

总而言之,CRISPR-Cas9系统利用Cas9酶和sgRNA的组合,定位和切割特定的DNA序列,实现了基因敲除和敲入的目标。

这项技术在基因研究和治疗领域有着广泛的应用前景。

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