cas9基因敲除原理

cas9基因敲除原理

CRISPR-Cas9是一种基因编辑技术，可以通过切割DNA序列

来实现基因敲除。CRISPR是“Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats”的缩写，是一种天然存在于细菌和

古细菌中的免疫系统。Cas9则是CRISPR-Cas9系统中所使用

的酶。

CRISPR-Cas9系统通过三个主要组件来实现基因敲除：CRISPR RNA（crRNA），tracrRNA和Cas9。首先，crRNA

和tracrRNA结合形成一个复合体，被称为单导螺旋RNA （sgRNA）。sgRNA可以与Cas9酶结合，并引导Cas9 酶与

特定DNA序列中的目标基因相结合。

当Cas9与sgRNA定位到目标基因的特定序列时，它会切割DNA，导致基因序列中的断裂。细胞会试图修复这个断裂，

但通常会导致不完整的修复，从而引起基因缺失或突变。这就实现了基因敲除的目标。

此外，通过供应外源的DNA修复模板，可以利用Cas9的断

裂修复机制来进行目标基因的修复。这种方法被称为基因敲入，可以在目标基因上插入新的基因组成部分。

总而言之，CRISPR-Cas9系统利用Cas9酶和sgRNA的组合，定位和切割特定的DNA序列，实现了基因敲除和敲入的目标。这项技术在基因研究和治疗领域有着广泛的应用前景。