金银花中提取分离总黄酮的工艺研究
复合酶辅助提取金银花叶中黄酮工艺和动力学研究
复合酶辅助提取金银花叶中黄酮工艺和动力学研究摘要：为了探索采用恒温水浴法从金银花（Lonicera japonica）叶中提取黄酮的最佳试验方法及条件，采用单因素试验考察了酶种类和加入量、搅拌速度、提取温度、金银花叶粉末粒度、提取时间等因素对黄酮提取率的影响，采用正交试验获得在复合酶存在下提取金银花叶中黄酮的最佳试验条件，并用常规动力学模型进行验证。
结果表明，复合酶的加入有利于金银花叶中黄酮的提取，其最佳条件为80 ℃、纤维素酶和果胶酶各0.06 g、搅拌速度800 r/min、提取时间40 min。
当提取温度低于353 K，常规提取受动力学控制；若提取温度高于353 K，过程将不再受动力学控制。
关键词：金银花（Lonicera japonica）叶；黄酮；复合酶辅助提取；动力学金银花（Lonicera japonica）因含有多种黄酮类化合物而被用作中药材和功能食品，现代医学研究表明，黄酮类化合物可以降低心肌耗氧量，增加冠脉和脑血管血流量，具有软化血管、降血糖和降血压等功效，同时，它还是一种天然的抗氧化剂，可以清除人体中超氧离子自由基，具有抗衰老、增强机体免疫力的作用[1，2]。
目前国内外研究比较多的是从金银花中提取黄酮，提取研究较多的是用水/乙醇提取、微波辅助萃取、超声波辅助提取等方法[2]，而对于产量更大的金银花叶的研究较少，在相当长的一段时间里金银花叶被视为金银花药材的副产物而被废弃掉。
实际上，金银花叶的抑菌效果与花相同甚至高于花，叶中的黄酮含量高于花，是花中的2.78倍[3]。
广西有丰富的金银花种质资源，但金银花叶还没得到很好的开发和利用，为了寻找经济有效的提取方法，尝试了几种常规技术[4]提取金银花叶中的黄酮，发现提取方法、工艺条件对黄酮的提取率和稳定性有较大影响，比如在溶剂的选择方面，乙醇比水的提取效果好但成本较高，而在相同的条件下，超声波辅助提取黄酮的平均提取率为2.13%，而恒温水浴常规搅拌提取的提取率达到了3.27%以上，这可能是因为叶子比重小，易漂浮于溶剂表面的原因。
金银花干叶中黄酮类物质提取工艺研究概要
金银花干叶中黄酮类物质提取工艺研究【摘要】本实验以乙醇为溶剂，采用超声波法从金银花干叶中提取黄酮，并通过单因素考察和四因素三水平的正交试验确定超声波法提取金银花干叶中黄酮类物质的最佳工艺条件。
同时，运用最佳工艺条件提取金银花植物各部分的黄酮并测定其含量。
结果表明，最佳提取工艺是以70%乙醇、物料比1:10，超声波温度60℃提取20min；黄酮含量测定结果显示，金银花干花的黄酮含量比干枝、干叶和鲜枝、鲜叶高约4-6倍。
【关键词】金银花干叶；黄酮；提取工艺；正交试验；含量测定目录1前言 (1)2 仪器与材料 (3)3 实验方法 (4)3.1样品预处理 (4)3.2试剂配制 (4)3.2.1配制芦丁标准应用液 (4)3.2.2建立工作曲线 (4)3.3总黄酮的测定 (5)3.3.1铝配合物分光光度法 (5)3.3.2样品总黄酮含量测定 (5)3.4单因素试验 (5)3.4.1乙醇浓度对提取效果的影响 (5)3.4.2超声波提取时间对提取效果的影响 (5)3.4.3料液比对提取效果的影响 (5)3.4.4超声波仪温度对提取效果的影响 (6)3.5正交试验 (6)4 结果与分析 (7)4.1总黄酮的测定 (7)4.1.1绘制标准曲线 (7)4.2单因素试验结果 (8)4.2.1乙醇浓度对提取效果的影响 (8)4.2.2超声波提取时间对提取效果的影响 (8)4.2.3料液比对提取效果的影响 (9)4.2.4温度对提取效果的影响 (10)4.3正交试验结果 (10)4.4金银花各部分的黄酮提取与含量测定 (12)4.4.1实验方法 (12)4.4.2结果与分析 (13)5 结论与展望 (14)参考文献 (15)前言金银花是我国传统的中药植物，具有清热解毒、凉风散热、抗病毒、保肝利胆等功能，是主治痈肿疔疮．喉痹，丹毒，热毒血痢，风热感冒，温病发热的常用药材。
[1]金银花叶中的黄酮类化合物有木犀草、忍冬苷等。
经研究表明, 不同时期的金银花修剪各部位均含有黄酮,节部和叶片含量最高，花中次之，茎中含量较低[2]。
利用金银花蒸馏残液生物转化总黄酮工艺优化
金银花（Thunb ），亦称为双化、银花，忍冬等，是一种忍冬科半常绿藤木植物，其性甘寒、气芳香，在中医药学中多作为宣散风热、清解血毒等配方，对治疗热毒疮痈、咽喉肿痛、发疹等各种热性病具有很好的效果[1-2]。
湖北罗田县位于大别山南麓，具有典型的山地气候特征，野生金银花资源丰富，“罗田金银花”香气浓郁、挥发油含量高，2011年获批中国地理标志产品，且罗田金银花种植面积已达2.1万亩，推动了地方以金银花露加工为代表的金银花产业发展[3-5]。
金银花露加工后的蒸馏剩余物中含黄酮、绿原酸等生物活性成分[6]，本地的金银花加工企业都面临蒸馏剩余物资源化利用的问题。
现代研究表明，黄酮类化合物具有抗肿瘤[7-8]、清除自由基[9]、抗突变[10]、抗菌、抗病毒[11]、调节免疫、保肝利胆、防治血管硬化[12-13]、降血糖和抗人类疫缺陷病毒（human im munodeficiency virus ，HIV ）活性[14-15]等功能。
近年来人们越来越关注微生物转化植物次生代谢产物[16]，其在天然产物和中药活性物质成分的开发及工业化应用方面应用前景广阔[17-19]。
本试验拟以地方企业加工金银花露后的蒸馏剩余物为材料，筛选转化总黄酮的微生物并探讨其最佳转化工艺条件，从而为地方企业综合利用金银花资源提供依据。
1材料与方法1.1材料与试剂金银花蒸馏剩余物：湖北楚天舒药业有限公司提供，收稿日期：2019-02-15修回日期：2019-06-22基金项目：湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队项目（T201820）；2018年国家级大学生创新创业训练计划项目（201810514019）作者简介：鲁司卿（1997-），女，本科生，研究方向为微生物转化。
*通讯作者：向福（1977-），男，教授，博士，研究方向为生物资源利用。
利用金银花蒸馏残液生物转化总黄酮工艺优化鲁司卿1,余晨敏1,向福1,2*,熊天涵1,曹城1,胡宗涛1,周立金1(1.经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室黄冈师范学院,湖北黄冈438000;2.大别山特色资源开发湖北省协同创新中心,湖北黄冈438000)摘要：为有效利用地方企业的金银花蒸馏剩余物，利用加工金银花露后的蒸馏残液为基质，以黑曲霉（）为优选转化总黄酮菌株，以总黄酮增量为评价指标，分别考察发酵时间、接种量、发酵温度、转速等因素对黑曲霉生物转化总黄酮的影响，并利用正交设计优化其转化条件。
金银花中黄酮类物质最佳提取工艺的研究
金银花中黄酮类物质最佳提取工艺的研究研究了金银花中黄酮类物质最佳提取工艺，主要采用了乙醇、醋酸及
水提取法，并以纯度、提取效率及影响因素等为评价指标，采用正交试验
法考察不同提取条件下的提取效果。
结果表明，乙醇提取可获得最佳的提
取效果，提取条件为：以乙醇为提取溶剂，料液比10∶1，提取时间为
1.5h，提取温度为80℃，循环提取1次。
此外，还对不同提取浓度、提
取温度等提取因素进行了相关分析研究。
结果表明，随着提取浓度的增加，提取效率和纯度也有所升高，反之亦然；提取温度的增加，提取效率和纯
度均有所提高，但是超过80℃后，反而存在明显的降低。
金银花中绿原酸和黄酮的同时提取分离工艺研究
将金银花原料在 2.1 节优化的工艺条件下提取，得 绿原酸和总黄酮的浓缩液。选择聚酰胺为吸附剂，选 择不同体积分数的乙醇(1 0 %、5 0 %、9 0 %)作为洗脱 剂，通过柱层析梯度连续洗脱，得到绿原酸、水溶 性黄酮和脂溶性黄酮 3 个不同类型的洗脱物。测定结 果见图 3。
mAU
350 300 250 200 150 100
1.3.1 紫外分光光度法
1.3.1.1 芦丁标准溶液的配制
收稿日期：2009-06-11 基金项目：国家自然科学基金项目(20565003)；宁夏大学科学研究基金项目(ZR200706) 作者简介：郝凤霞(1978 －)，女，讲师，硕士，主要从事天然产物开发研究。E-mail：hfx220@
１ 材料与方法
1.1 材料与试剂 金银花采自宁夏银川市合木公司。 甲醇、磷酸、9 5 % 乙醇、氢氧化钠、硝酸铝为
分析纯 天津市科密欧化学试剂有限公司；绿原酸、 芦丁对照品 中国药品生物制品鉴定所；实验室用水为 自制蒸馏水。 1.2 仪器与设备
Agilent 1100 高效液相色谱仪 美国 Agilent 公司； UV-2450 紫外 - 可见分光光度计 日本岛津公司；AL204 型电子天平 梅特勒 - 托力多仪器有限公司；101A-1E 型电热鼓风干燥箱 上海实验仪器厂有限公司；TDL802B 型台式离心机 上海安亭科学仪器厂；KQ-250DE 型 数控超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司；SHBⅢ型循环水式多用真空泵 郑州长城科工贸有限公司。 1.3 方法
450
500
550
600
波长(nm)
图 １ 芦丁络合物吸收光谱
Fig.1 Absorption spectrum of rutin complex
金银花黄酮活性成分分离纯化与生物学效应研究
金银花黄酮活性成分分离纯化与生物学效应研究金银花为常用的传统中草药,功能清热解毒,临床上主要治疗细菌感染、感冒等症。
现代药理研究显示金银花中主要化学成分有黄酮类、有机酸类、苷类及挥发油等。
其中苷类中三萜皂苷类成分主要与金银花保肝利胆作用有关,而以绿原酸为主的有机酸类化合物和挥发油被认为与其抗菌活性相关。
但金银花黄酮是其组成中仍未经充分药理学研究的成分,其相关的生物学活性研究甚少。
对其它植物药黄酮的研究提示,该类成分多具有抗菌和抗氧化作用,因此本研究在国家自然科学基金的支持下,对金银花中黄酮类物质进行分离纯化,并考察其生物学效应,为说明金银花发挥药理作用的机制奠定实验基础。
第一部分金银花总黄酮的分离纯化及抑菌活性考察一、实验方法:1.金银花总黄酮的提取金银花总黄酮以醇提法提取,并采用均匀设计对提取条件进行优化。
2.金银花总黄酮初步分离及抑菌活性考察金银花总黄酮浸膏以DM130型大孔吸附树脂柱采用不同浓度乙醇(0,20%,40%,60%)梯度洗脱进行初步分离,对获得的分离组分按A、B、C等依序命名。
微量稀释法考察各分离组分对金黄色葡萄球菌(n=7)、肺炎克雷伯菌(n=5)、大肠杆菌(n=6)、铜绿假单胞菌(n=4)等细菌的MIC值。
3.金银花黄酮组分分离纯化及抑菌活性考察对方法2中分离所得且体外抑菌活性较好的黄酮组分采用制备型HPLC分离制备,对制备组分按A1、A2、 (1)B2等依序命名,并采用微量稀释法考察各制备组份对金黄色葡萄球菌(n=7)、肺炎克雷伯菌(n=5)、大肠杆菌(n=6)、铜绿假单胞菌(n=4)等细菌体外抑菌活性。
4.金银花黄酮抑菌活性成分结构鉴定对方法3中制备所得且体外抑菌活性较好组分采用HPLC分离提纯,并对纯化分离所得纯度较高单一成分进行LC-MS、1H NMR、13C NMR等鉴定。
二、实验结果:1.金银花总黄酮醇提法最佳提取工艺为:在10g金银花粉末(60目)中加入10倍体积50%乙醇溶液于90℃条件下提取1h。
微波提取金银花中总黄酮的研究
微波提取金银花中总黄酮的研究摘要：以水作为提取溶剂，采用微波提取的方法，从中药材金银花中提取总黄酮，以芦丁为对照品，加入显色剂后，以相应试剂作空白,用分光光度法对所提取总黄酮的含量进行了测定。
以金银花中总黄酮的含量为考察指标，讨论了微波提取料液比、提取功率、提取时间等因素对总黄酮提取效果的影响。
确定了每个因素的最佳范围。
通过正交试验，确定微波提取金银花中总黄酮的最佳工艺条件为：料液比1:20，提取功率为440W，提取时间7min。
并与传统水回流法对照，经F-检验法及t-检验法检验，测定结果没有显著性差异。
实验表明，微波法提取金银花中的总黄酮,产率较高,时间较短,提取时间由传统回流的2小时缩短为7分钟,且设备简单,操作简便,可作为提取金银花中总黄酮化合物的一种有效方法,亦可借鉴于其它中草药中有效成份的提取。
关键词：金银花；总黄酮；微波；正交实验Microwave extraction honeysuckle in the study of flavonoids Abstract：With water as a solvent extraction, microwave extraction method, extracted from Chinese herbal medicines honeysuckle total flavonoids, a reference substance for Rutin, adding reagent, to the corresponding blank reagents for use by spectrophotometry from the total of Flavonoids in the determination. Honeysuckle to the content of flavonoids in indicators for the study, discussed the microwave extract liquid than expected, from power, extraction time on the effects of flavonoids extracted. Identified the best of each factor. By orthogonal pilot, identified microwave extraction of flavonoids in the Honeysuckle the optimum conditions: feed than 1:20, the power to extract 440 W, extraction time 7 min. And return to the traditional method of water control, the t-test and F-test test, results of no significant difference. The experiments show that microwave extraction honeysuckle in the total flavonoids, a higher yield, shorter hours, the extraction time by the return of the traditional two hours shortened to seven minutes, and the equipment simple, easy to operate and can be used as extracting gold and silver Flavonoids total spent in an effective way, can also draw on other elements of Chinese herbal medicine effective in the extraction.Key words：Honeysuckle; total flavonoids; microwave; orthogonal test目录1 前言 (1)1.1 微波提取理论基础 (1)1.1.1 微波提取的原理 (1)1.1.2 微波提取的特点 (1)1.1.3 微波提取的影响因素 (1)1.2 金银花的简介 (2)1.2.1 金银花 (2)1.2.2 金银花的品种和资源分布 (2)1.2.3 金银花的药理作用 (2)1.2.4 金银花的研究进展 (3)1.3 本文的研究内容 (3)2 实验部分 (4)2.1 主要仪器和试剂 (4)2.2 实验方法 (4)2.2.1 供试样品溶液的制备 (4)2.2.2 测定波长的选择 (5)2.2.3 标准曲线的绘制 (6)2.2.4 稳定性实验 (7)2.2.5 水回流法提取和测定金银花中总黄酮 (7)2.2.6 微波法提取和测定金银花中总黄酮 (8)2.2.7 单因素实验及正交实验 (8)3 结果与讨论 (9)3.1 水回流法提取金银花中总黄酮测定结果 (9)3.2 微波方法的单因素实验 (9)3.2.1 料液比的影响 (9)3.2.2 提取时间的影响 (10)3.2.3 提取功率的影响 (11)3.3 正交实验 (12)3.3.1 正交实验方案 (12)3.3.2 正交实验结果与分析 (13)3.3.3 验证试验 (14)3.3.4 回收率试验 (14)3.3.4 两种方法测定结果的比较 (15)4 结论 (15)致谢 (16)参考文献 (17)微波提取金银花中总黄酮的研究1.前言1.1 微波提取理论基础1.1.1 微波提取的原理微波是一种波长在1~0.001m、频率在0.3~300GHz的电磁波，它具有波动性、高频性、热特性和非热特性四大基本特性[1]。
金银花总黄酮的提取
金银花总黄酮的提取作者：樊琛等来源：《江苏农业科学》2014年第10期摘要：以金银花为原料，通过正交试验探讨了乙醇浓度、料液比、超声提取时间以及提取温度等对金银花总黄酮提取率的影响。
结果表明，最佳提取条件为料液比1 g ∶200 mL、提取时间15 min、乙醇浓度30%、提取温度40 ℃。
关键词：金银花；总黄酮；超声辅助；最佳提取方法中图分类号： R284.2文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）10-0255-02收稿日期：2013-11-29基金项目：聊城大学博士科研启动基金（编号：31805）。
作者简介：樊琛（1978—），女，山东聊城人，博士，副教授，主要从事食品营养、病原体分子生物学、食品卫生学方面的研究。
E-mail：fanchen7810@。
金银花（Lonicera japonica）为忍冬科植物忍冬的花蕾[1]，是我国公布的既是食品又是药品的植物，具有清热解毒、疏风通络等功效[2]。
金银花中有挥发油、黄酮类、有机酸、三萜类、无机元素等多种化学成分[3]。
有研究表明，绿原酸类和黄酮类化合物具有抗氧化、清除自由基的作用[4-5]。
本研究以金银花为原料，运用正交试验法，以料液比、提取时间、提取液（乙醇）浓度、提取温度为因素，提取金银花中的总黄酮成分，以期为金银花的综合利用提供参考。
1材料与方法1.1材料与试剂金银花，由北京同仁堂健康药业（福州）有限公司提供；乙醇、NaNO2、芸香苷等为分析纯。
1.2仪器与设备UV-1800 紫外可见分光光度计，日本岛津公司；SK1200H超声清洗机，上海科导超声仪器有限公司；79-2双向磁力加热搅拌器，江苏省金坛市医疗仪器厂；SB-2000水浴锅，上海爱朗仪器有限公司；TD5台式多管架离心机，长沙英泰仪器有限公司。
1.3试验方法1.3.1金银花提取液的制备称取干金银花样本，用研钵研成粉末，溶于不同浓度的提取剂（乙醇）溶液中，45 W超声浸提处理15～45 min后抽滤，将滤液于3 000 r/min离心15 min 后，得到的澄清液体即为金银花提取液。
金银花提取
金银花中总黄酮化合物的提取及其抑菌活性的初步研究材料化学专业张雪峰指导教师于曙光摘要:为了获得具有抑菌活性的黄酮类化合物，本文以金银花为实验材料，以乙醇为溶剂分别采用索氏提取、微波、超声波三种方法在不同的条件下从金银花中提取总黄酮得到一系列的粗提物，通过紫外可见分光光度法对其吸光度进行测定,计算出其中总黄酮的含量和产率，通过比较得出如下结论：乙醇浓度70%，在700W的功率下用微波提取法提取5min，此条件下提取得到的黄酮含量最高。
另外，本实验利用滤纸片法对提取得到的黄酮进行了抑菌活性的初步研究，结果表明，在浓度为0.381mg/ml时，金银花中黄酮对大肠杆菌具有较强的抑制作用（平均抑菌圈直径为9mm），当浓度降低时，抑菌效果明显减弱。
当浓度为0.00381mg/ml 时，基本看不到抑菌效果。
另外对黄酮粗提液进行定性检测发现：提取液中还含有少量的酚类、多糖类、蛋白质、生物碱等物质。
关键词：金银花；微波法；抑菌活性；黄酮提取物；The Research on Extraction of Flavonoids from Flos Loniceraeand it’s Antibacterial activityStudent majoring in Marearial Chemistry Li XiaoyunTutor Yu ShuguangAbstract:In order to extract flavonoids which have antibacterial activity, the flos lonicerae were used as material and ethanol as solvent, with Soxhlet, micro-wave and ultrasonic methods to extract flavonoids. According to the absorbance of extracts measured by the Ultraviolet-Visible Spectrophotometer, the results showed that the methods with the 70% ethnol as solvent, the microwave at 700w and 5 minutes is of the best efficiency. In addition , in the research on antibacterial activity ,the results showed that when the concentration of extracts is 0.381mg/ml , we can observe visible inhibition effects on Escherichia coli ( the average dm of the antibacterial cirle is 9mm ), with the concentration decreasing ,its antibacterial activity decreased. When the concentration is 0.00381mg/ml , it hardly had no antibacterial activity .With the qualitative analysis, We found that extracts of different Solvent have different contents including Phenol, polysaccharides, proteins, alkaloids and flavonoids.Key words: Flos Lonicerae ; micro-wave technique; antibacterial activity ; extract of flavonoids1 引言金银花，又名二花，为忍冬科忍冬属植物忍冬的干燥花蕾或初开的花，在我国大部分地区均有生产，是我国传统中药材，味甘、性寒、清热解毒、凉散风热。
永州山银花总黄酮提取工艺研究及含量测定
并在此条件下黄酮的提取得率是 10.83%。
关键词：永州山银花；总黄酮；回流提取；正交试验
中图分类号：S567.9
文献标识码：A
文章编号：1673-2219（2019）05-0026-03
DOI:10.16336/43-1459/z.2019.05.010
1引言
山银花过去又名金银花，是从 2005 年版《中国药典》 金银花项下分列出来的新增品种，主要分布在长江以南的湖 南、四川、广东、贵州、广西、云南、江西、浙江及海南等 省区[1]。药典中将南方的金银花改称为山银花，北方的金银 花仍称金银花，并认为北方的金银花黄酮类成分含量较高， 皂苷含量很低；南方的山银花皂苷含量较高，黄酮类成分含 量较低，因此，山银花与金银花为两种不同的药材，但两者 的化学成分均包括：有机酸类、黄酮类、环烯醚萜类、挥发 油类、三萜皂苷类以及微量元素等等[2]。两者均具有“清热 解毒”之功效。
山银花作为中医的大宗用药，是国家重点治理的名贵中 药材之一。山银花的应用广泛，除了在制药行业被用作多种 中成药的原料外，在食品、饮料、曰化和保健品行业也发挥
着重要作用，对其需要量越来越大。
论文以永州山银花为研究对象，在前人研究的基础上， 通过野外采集和室内分析，期望探明永州山银花中黄酮的含 量及测定方法，为山银花药材的质量评价与控制提供更多的 实验依据，为山银花适宜种植区域选择提供参考，对于科学 评价及全面提升山银花药材的质量具有重大意义。
收稿日期：2019－01－09 作者简介：张卫军（1969－），男，湖南永州人，湖南 科技学院研究员，硕士，研究方向为天然产物化学与分析化
2 材料、仪器及试剂
2.1 主要材料 材料：永州野生山银花，研究小组采集后，将新鲜的山 银花阴干、电热鼓风干燥箱干燥、粉碎、过 60 目试样筛， 密封室温保存备用。 2.2 实验仪器 上海舜宇恒平科学仪器有限公司的紫外可见分光光度 计(752 型)；北京祥鹄科技发展有限公司的微波合成反应仪 （XH-MC-1）；天津市泰斯特仪器有限公司的 FW177 型粉 碎机和 WG-20 型电热鼓风干燥箱；郑州长盛实验设备有限 公司的集热式恒温加热磁力搅拌器（DF-101S）；日本岛津 的电子分析天平（AUY-120）。 2.3 实验试剂 芦丁标准品（上海强顺化学试剂有限公司）；无水乙醇、 亚硝酸钠固体、硝酸铝固体、氢氧化钠固体均为分析纯，5% 亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝、4%氢氧化钠、60%乙醇溶液均 由它们配制得来；水为去离子水。
金银花中绿原酸的提取、分离及纯化工艺研究的开题报告
金银花中绿原酸的提取、分离及纯化工艺研究的开题报告一、选题背景金银花是一种常见的中药材，具有清热解毒、解热祛病、抗菌消炎等多种功效，广泛用于传统中药的制剂中。
其中，绿原酸是金银花中的一种重要有效成分，具有较强的抗氧化、抗癌、抗炎、抗病毒等作用，是一种很有发展前景的天然药物。
目前，金银花提取绿原酸的工艺研究较少，大多数研究都是基于传统的水提法、酒精提法和乙酸乙酯提法等，这些方法都存在绿原酸回收率低、工艺复杂、有机溶剂残留等问题。
因此，本研究将探讨一种新型的金银花中绿原酸的提取、分离及纯化工艺，旨在提高绿原酸的提取效率和纯度，为金银花的开发利用提供科学依据。
二、研究内容及意义（一）研究内容：1. 金银花中绿原酸的特性研究；2. 建立绿原酸的提取、分离及纯化流程；3. 优化提取、分离及纯化工艺参数，并对提取液进行组分分析；4. 对提取液中绿原酸进行纯化和结晶，分别采用重结晶、溶剂结晶等方法进行纯化处理，得到高纯度的绿原酸；5. 对最优工艺进行评估和验证。
（二）研究意义：1. 系统掌握金银花中绿原酸的特性及提取分离纯化技术，为金银花的开发利用提供科学依据；2. 提高绿原酸的提取效率和纯度，从而增加其市场价值；3. 探索一条绿色环保的金银花中绿原酸提取分离纯化新途径，有助于推动中药现代化进程。
三、研究方法和思路（一）研究方法：1. 实验室规模的萃取实验，选用不同有机溶剂作为提取溶剂，优化不同因素对绿原酸提取率的影响；2. 对提取液进行组成分析，采用高效液相色谱仪和质谱仪检测不同组分的含量；3. 对提取液进行纯化处理，采用重结晶、溶剂结晶等方法进行纯化处理，得到高纯度的绿原酸；4. 对最优工艺进行评估和验证。
（二）研究思路：1. 研究金银花中绿原酸的特性，确定其适宜的提取、分离及纯化方法；2. 确定提取液的组成，分析其组分及含量；3. 优化提取、分离及纯化工艺参数，降低操作成本，提高提取效率和纯度；4. 对提取液中的绿原酸进行纯化处理，得到高纯度的绿原酸；5. 对最优工艺进行评估和验证，确定工业化生产技术流程。
金莲花中黄酮的提纯研究
收稿 日期 ： ２ ０ １ ４ — １ ２ — １ ０
空 干燥 一 干燥粉 末 一 溶解 一测 吸光度 一 计算黄 酮纯度 。
液 比１ ： ２ ０ 。提 纯过 程 中用Ａ Ｂ 一 ８ 大孔 树脂进 行提 纯 ，洗脱 以 乙醇浓度 、 乙醇用量 、温度 为三 因素设计 正 交试 验 ，确 定 了最佳提 纯 条件 为 ：乙醇浓度 ７ ５ ％， 乙醇用 量１ ０ 倍 ，温度３ ５ ￣ Ｃ。洗脱 率 可达 ９ １ ． ６ ％，总黄 酮纯度 为
摘 要 ： 本 文 采 用微 波 法 提 取 金 莲 花 中 黄 酮 ， 用 大 孔 树 脂 对 浸 提 液 进 行 了提 纯研 究 。 微 波 法 以微 波 时 间 、
微 波功 率 、固液 比为三 因素 ，设计 正 交试验 ，确 定 了最佳提取 条件为 ：微波 时 间８ ｍｉ ｎ ，微 波功率２ ０ ０ Ｗ ，固
者 对 金 莲 花 的研 究 除 集 中在 生 药学 、药物 化 学 方 向外 ，
质 的分 离 、净 化 目的。 大 孔吸 附树 脂 技 术在 黄 酮 及皂 苷
还进行了药效学方面的研究。２ ０ 世纪７ Ｏ 年代开始 ，国内 类化学成分 的分离纯化中被广泛应用 ，该技术在研究和
就 陆续 有 相 关报 道 。北 京 大 学生 物 系研 究 表 明 ，黄 酮 是 生产 中的应 用将 会 有更 广 阔 的空 间。
金莲花中的抑菌有效成分 ，对金黄色葡萄球菌、绿脓杆 菌 、志贺痢疾杆菌及大肠杆菌等有明显的抑菌作用 ， 。
１ 材料 与 方法
临床 观 察 发现 ，金 莲 花对 急 慢性 扁 桃体 炎 、咽 炎及 上 呼 １ ． １ 原料
吸道感染等有显著疗效 】 。因其无毒副作用，民间有将
一种金银花总黄酮提取过程中的质量评价方法[发明专利]
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专利名称：一种金银花总黄酮提取过程中的质量评价方法专利类型：发明专利
发明人：曾雪,杨元娟,杨宗发,石磊,牛晓东
申请号：CN201810441197.0
申请日：20180510
公开号：CN108645944A
公开日：
20181012
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种金银花总黄酮提取过程中的质量评价方法，属于药物提取和质量控制技术领域。
所述方法包括以下步骤：A.将干燥的金银花，粉碎成金银花粉末，加入乙醇浸泡，得到料液混合物；B.将步骤A得到的料液混合物加入超声提取装置中进行提取，得到初提物；C.首先制备对照品溶液和供试品溶液，然后分别取对照品溶液与供试品溶液各10uL，分别注入高效液相色谱仪中进行梯度洗脱，建立指纹图谱，进行相似度评价；D.将步骤B得到的初提物用大孔吸附树脂吸附后，减压浓缩成浸膏，干燥粉碎后得到金银花总黄酮浸膏粉；E.建立指纹图谱，进行相似度评价。
本发明具有精密度和准确率高以及重复性好的优点，通过对初提物和最终提取物均进行质量跟踪，可有效提高对药物检测判断的准确性。
申请人：重庆医药高等专科学校
地址：400000 重庆市沙坪坝区大学城中路82号
国籍：CN
代理机构：重庆中之信知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：谢毅
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文章标题：金银花中提取分离总黄酮的工艺研究
导言
1. 金银花是一种常见的中草药材，广泛用于食品和药物制备中。
2. 其中的总黄酮具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种药理作用，因此对其提取分离的工艺研究具有重要意义。
工艺研究方法
1. 传统提取方法：水煎、醇提等
2. 现代提取方法：超声波提取、微波提取等
3. 不同提取方法的优缺点比较
1) 传统提取方法：操作简单，成本低，但提取效率低，环境污染严重
2) 现代提取方法：提取效率高，操作简便，但设备成本较高
提取工艺优化
1. 提取溶剂的选择
1) 水、乙醇、丙酮等
2. 提取温度和时间的优化
1) 不同温度下提取总黄酮的效果对比
2) 不同提取时间下提取总黄酮的效果对比
3. 提取压力和超声波功率的优化
1) 不同压力下提取总黄酮的效果对比
2) 不同超声波功率下提取总黄酮的效果对比
分离工艺研究
1. 薄层色谱法
2. 高效液相色谱法
3. 分离效果比较
1) 薄层色谱法的分离效果
2) 高效液相色谱法的分离效果
4. 最佳分离工艺的确定
总结与回顾
1. 金银花中提取分离总黄酮的工艺研究是一项复杂但具有重要意义的
工作。
2. 通过对不同提取和分离工艺的研究，可以找到最适合的方法来提取
和分离金银花中的总黄酮。
3. 未来的研究方向可以集中在提高提取效率、降低成本、减少环境污
染等方面。
个人观点和理解
在提取分离总黄酮的工艺研究中，我认为现代提取方法具有更大的发
展潜力，可以提高提取效率、减少操作时间和成本，并减少对环境的
影响。
分离工艺研究也需要不断优化，以提高总黄酮的纯度和稳定性。
希望未来相关研究能够更加深入，为金银花的应用提供更多可能性。
结语
通过对金银花中提取分离总黄酮的工艺研究，我们可以更好地利用这
一中草药材，并发掘其更多的药理价值。
这项工作的持续深入研究将
为中药制药行业带来更多的创新和发展。
提取总黄酮的过程中，首先
需要选择合适的提取溶剂。
在传统方法中，水和醇是常用的提取溶剂，它们操作简单，成本低，但提取效率相对较低。
相比之下，现代提取
方法中的乙醇和丙酮等有机溶剂能够更好地提取总黄酮，但也存在着
环境污染的问题。
对提取溶剂的选择需要进行权衡，考虑提取效率和
环境友好性之间的平衡。
在提取温度和时间的优化方面，研究人员可以通过对比不同温度和不
同提取时间下的提取效果，找到最佳的提取条件。
在较高的温度下进
行提取可以加快总黄酮的释放速度，提高提取效率，但是也可能会导
致部分活性成分的降解。
需要权衡提取速度和总黄酮的损失程度，找
到最适宜的提取温度。
类似地，不同的提取时间也会对提取效果产生
影响，需要进行适当的探索和优化。
除了温度和时间，提取压力和超声波功率也是提取工艺中需要考虑的
因素。
在高压下进行提取可以提高总黄酮的释放速度，但过高的压力
可能会导致植物细胞破裂，影响提取液的质量。
需要进行不同压力下
的提取实验，找到合适的压力条件。
另外，超声波提取是一种常用的
现代提取方法，通过超声波的作用可以提高提取效率。
在超声波功率
的选择上，需要在提高提取效率的避免对植物材料产生不必要的破坏，找到合适的平衡点。
在总黄酮的分离工艺研究中，薄层色谱法和高效液相色谱法都是常用
的分离技术。
薄层色谱法操作简单，成本低，但分离效果相对较差；
高效液相色谱法能够对总黄酮进行更好的分离和纯化，但设备成本较高。
需要对两种方法进行分离效果的比较，并根据具体情况选择最适
合的分离方法。
金银花中提取分离总黄酮的工艺研究需要综合考虑提取和分离技术、
提取条件的优化以及环境友好性等因素。
通过不断深入的研究和实验，可以找到最适合的方法来提取和分离金银花中的总黄酮，为金银花的
应用提供更多可能性。
在个人观点和理解方面，我认为现代提取方法在金银花总黄酮的提取
过程中具有更大的发展潜力。
通过应用先进的技术和设备，可以提高
提取效率，减少操作时间和成本，并减少对环境的影响。
对于分离工
艺的研究也需要不断优化，以提高总黄酮的纯度和稳定性。
希望未来
相关研究能够更加深入，为金银花的药用和保健价值的发掘提供更多
可能性。
在结语中，通过对金银花中提取分离总黄酮的工艺研究，可以更好地
利用这一中草药材，并发掘其更多的药理价值。
深入研究将为中药制
药行业带来更多的创新和发展，为人们健康提供更多选择。
我期待着未来相关研究能够加速这一进程，提供更多高效、环保的金银花总黄酮提取和分离工艺。