HPLC 法测定桑叶中芦丁的含量

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第12卷 第5期 2010 年 5 月

辽宁中医药大学学报

JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM

Vol. 12 No. 5 May，2010

桑叶为桑科桑属植物桑Morus alba L.的干燥

叶，味苦甘、寒，归肺、肝经，具有疏散风热、清肺润燥、清肝明目之功能，用于风热感冒、肺热燥咳、头晕头痛、目赤昏花等症。在《中华人民共和国药典》

2005版中[1]

，

桑叶中芦丁的含量测定采用的是HPLC 法梯度洗脱，其操作重复性差，对实验设备要求相对较高，旨在建立以等度洗脱，采用HPLC 法测定桑叶中芦丁的含量。

1 仪器 试剂和药材

1.1 仪器 高效液相色谱仪（岛津LC-10A，日本），

KQ-100型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.2 试剂 甲醇、乙腈均为色谱纯，其他试剂为分析纯。

1.3 药材 桑叶经辽宁中医药大学植物教研室王冰教授鉴定为桑科桑属植物桑Morus alba L.的干燥叶。

2 实验方法

2.1 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅

烷键合硅胶为填充剂，甲醇-乙腈-醋酸-水（15：10：2.6：72.4）为流动相，检测波长为358nm，流速：

1mL·min -1

。理论塔板数按芦丁计算应不低于3000。芦丁与相邻成分色谱峰的分离度应不小于1.5。见图

1~2。图1 芦丁对照品溶液HPLC

色谱图

图2 桑叶供试品溶液HPLC 色谱图

2.2 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品

10.32mg，置100mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1mL 含0.1032mg 的溶液，作为芦丁对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备 精密称定桑叶1g, 置25mL 容量瓶中，甲醇超声提取30min，放冷，加甲醇至刻

HPLC 法测定桑叶中芦丁的含量

周美环1，赵书楷1，陈 淼2，张东方3

（1.沈阳东北大药房连锁店，辽宁 沈阳 110023；2.神威药业有限公司，辽宁 沈阳 110003；3.中国医科大学药学院，辽宁 沈阳 110001）

收稿日期：2009-10-05

作者简介：周美环（1975-），女，辽宁大连人，工程师，学士，主要从事药品质量管理。通讯作者：张东方（1975-），男，辽宁朝阳人，副教授，博士，研究方向：中药复方研究及新药开发。E-mail: syzdf@。

摘 要：目的：在《中华人民共和国药典》中，桑叶中芦丁的含量测定方法采用的是HPLC 法梯度洗脱，其操作

重复性差，对实验设备要求高，旨在建立以等度洗脱，采用HPLC 法测定桑叶中芦丁的含量。方法：采用HPLC 法，以甲醇-乙腈-醋酸-水（15：10：2.6：72.4）为流动相等度洗脱，以建立芦丁的含量测定方法。结果：采用HPLC 法测定桑叶中芦丁的含量稳定性良好，精密度良好，重复性良好，加样回收率良好，芦丁含量为0.46%~0.49%。结论：采用HPLC 等度洗脱测定桑叶中的芦丁方法可行。

关键词：桑叶；HPLC；芦丁

中图分类号：R927.2 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2010) 05- 0228- 02

Content of Rutin from Follium Mori is Determined by HPLC

ZHOU Mei-huan 1, ZHAO Shu-kai 1, CHEN Miao 2, ZHANG Dong-fang 3

（1.Shenyang North-East Drug Store Chain, Shenyang 110023, Liaoning, China; 2.Shenwei Pharmaceutical Company, Shenyang 110003, Liaoning, China; 3. College of Pharmaceutical

Science, China Medical University, Shenyang 110001, Liaoning, China）

Abstract：

Objective : Content of rutin from Follium Mori is determined by HPLC in China Ph.，but gradient elution is difficult to repeat and equipment is not public. Methods : HPLC was used to determined content of rutin from Follium Mori, and its mobile phase is methanol-acetonitrile-acetic acid -water（15：10：2.6：72.4）. Results : Stability, Precision, repetition of HPLC all were better .Content of rutin was 0.46%~0.49%. Conclusion : The content determination of rutin from Follium Mori are feasible.

Key words：Follium mori; HPLC; rutin DOI ：10.13194/j.jlunivtcm.2010.05.230.zhoumh.097

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度，摇匀，即得。

2.4 测定波长的选择 取芦丁对照品溶液，扫描紫

外图谱，结果在358nm 处有最大吸收，故确定检测波长为358nm。

2.5 线性范围考查 精密吸取浓度为

0.1032mg·mL -1的芦丁对照品溶液2、

4、6、8、10μL，分别进样，测定色谱峰面积，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线，回归方程

为Y = 900023.3X-22730，

r = 0.9997。测定结果提示，进样量在 0.2064~1.032μg 范围内线性关系良好。

2.6 稳定性试验 精密吸取供试品溶液5μL，于0、2、4、6、8h 时间间隔，分别进样，测定，平均色谱峰面积为912142.2，RSD 为1.7%，稳定性良好。

2.7 精密度试验 精密吸取供试品溶液5μL，连续进样6次，测定色谱峰面积992757.4，RSD 为1.1%，仪器精密度良好。

2.8 重复性试验 取同一样品依法操作6次，测定，计算含量平均值为0.463%, RSD 为1.8%.

2.9 回收率实验 分别取本品1g（含量为0.463%），6份，分别精密加入芦丁对照品溶液

（2.26mg·mL -1

）

2mL，按含量测定方法测定，计算加样回收率平均值为99.0%, RSD 为0.7%。

2.10 芦丁的含量测定 取3批不同桑叶样品，依法操作，测定，计算芦丁的含量分别为0.46%、0.49%、0.48%。

3 讨论与结论

桑叶中主要含黄酮、多糖类和生物碱类成分，在《中华人民共和国药典》（2005版）中，对芦丁进行了含量测定，其方法是采用HPLC 法梯度洗脱，操作重复性差，对实验设备要求高。采用高效液相色谱法等度洗脱，对桑叶中芦丁的含量测定进行了改进，其分离度良好，经方法学考察，精密度、稳定性、重现性和加样回收率均良好，具有推广价值。◆

参考文献

[ 1 ] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典[ M ] .北

京：化学工业出版社，2005：209.

广金钱草为豆科植物广金钱草Desmodium

styracifolium(Osb.) Merr.的干燥地上部分，收载于《中华人民共和国典》2005年版一部。具有清热除湿，利尿通淋之功，用于热淋、砂淋、石淋，小便涩痛，水

肿尿少，黄胆尿赤，尿路结石[1]

。其中广金钱草总黄

酮具有预防草酸钙结石形成、抗炎等作用[2]，但对其最佳提取方法的研究未见报道，笔者采用正交试验

法，以总黄酮提取量为考察指标，筛选最佳提取工艺，为广金钱草总黄酮的提取工艺研究提供科学依据。

1 仪器与试药

7520紫外分光光度计（上海分析仪器厂）；芦正交法优选广金钱草总黄酮提取工艺研究

王 鑫1，王 静2，袁子民2

（1.辽宁中医学院药业有限公司，辽宁 沈阳 110164；2.辽宁中医药大学，辽宁 大连 116600）

收稿日期：2009-10-05

作者简介：王鑫（1975-），女，主管中药师，学士，研究方向：中医药现代化研究。

摘 要：目的：采用正交试验法优选广金钱草中总黄酮的提取工艺。方法：以总黄酮提取量为指标，醇浓度、加

醇量、提取时间、提取次数为因素进行正交试验。结果：最佳提取艺条件为：50%乙醇为溶媒，提取3次，溶媒为 12、10、10倍量，每次1.5h。结论：提取工艺简便易行。

关键词：广金钱草；总黄酮；正交试验

中图分类号：R943 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2010) 05- 0229- 02

Optimization of Study on Extraction Process of Total Flavonoids in

Desmodium Styracifolium by Orthogonal Experimental Design

WANG Xin 1，

WANG Jing 2，YUAN Zi-min 2（1. Liaoning College of Traditional Chinese Medicine Pharmaceutical Co., Ltd, Shenyang 110164，Liaoning, China; 2.Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, Dalian 116600，Liaoning, China）

Abstract：

Objective : Use orthogonal experimental design，optimization of study on extraction process of total flavonoids in Desmodium styracifolium. Methods : Four factors including the Ethanol consistence, the quantity, the time of extraction and the number of times of extraction. Results : The optimal procedure was set as follows：50% ethanol's, 12,10,10 fold solvent and 3 times of extraction, 1.5 hour of each reflux.Conclusion : The technology is simple.

Key words：Desmodium styracifolium; total flavonoids; orthogonal experimental design