常用荧光染料的激发及发射波长
常用染料的激发与发射
常用染料的激发与发射 Company Document number:WUUT-WUUY-WBBGB-BWYTT-1982GT常用荧光染料的激发和发射波长荧光染料的使用吖啶橙:吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料,它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光,DNA呈绿色荧光,RNA呈橙红色荧光。
EB:染色DNA和RNA 荧光素双醋酸酯(FDA):FAD本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。
一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。
它不能自由出入原生质膜,因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。
5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L甘露醇中.使用时,使最终浓度为%。
荧光染料Ho33342和若丹明123:活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。
一般的生物染料不能穿透细胞膜,只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性,染料才能进入细胞内。
但有些活体染料能进入活细胞,并对细胞不产生毒性作用。
荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。
Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合,若丹明123能与线粒体进行特异的结合。
采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。
荧光组化实验中应注意的几个问题:1.每种荧光染料,均有自己的最适PH值,此时荧光最强。
当pH改变时,不仅荧光强度减弱,而且波长将有所改变,因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。
2.一放荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定,温度升高常出现温度猝灭。
3.在荧光观察中,常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭,造成观察和照相困难。
为此最好用能量小的长波长光进行观察,需照相时再适当增强激发光。
4.一般荧光染液的浓度在万分之一以下,甚至亿万分之一,也能使标本着色。
在一定的限度内,荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强,但超过限度,荧光强度反而下降,这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。
荧光染料波长查询
荧光染料波长查询
荧光染料是一种能够吸收光能并发射出更长波长的荧光的染料。
每种荧光染料都有其特定的吸收和发射波长。
以下是一些常见的荧光染料及其对应的吸收和发射波长:
1. 荧光素(Fluorescein):
- 吸收波长:494-495 nm
- 发射波长:518-520 nm
2. 罗丹明B(Rhodamine B):
- 吸收波长:540-550 nm
- 发射波长:565-580 nm
3. 二甲基琼脂绿(Ethidium Bromide):
- 吸收波长:518-530 nm
- 发射波长:605-625 nm
4. 亚甲基蓝(Methylene Blue):
- 吸收波长:600-660 nm
- 发射波长:660-740 nm
需要注意的是,荧光染料的波长可能因厂商和实验条件而略有差异。
因此,在具
体实验中,最好参考相关荧光染料的技术说明书或与供应商联系以获取准确的波长信息。
常用染料的激发与发射
常用染料的激发与发射公司内部编号:(GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-常用荧光染料的激发和发射波长荧光染料的使用吖啶橙:吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料,它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光,DNA呈绿色荧光,RNA呈橙红色荧光。
EB:染色DNA和RNA荧光素双醋酸酯(FDA):FAD本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。
一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。
它不能自由出入原生质膜,因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。
5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L 甘露醇中.使用时,使最终浓度为%。
荧光染料Ho33342和若丹明123:活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。
一般的生物染料不能穿透细胞膜,只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性,染料才能进入细胞内。
但有些活体染料能进入活细胞,并对细胞不产生毒性作用。
荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。
Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合,若丹明123能与线粒体进行特异的结合。
采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。
荧光组化实验中应注意的几个问题:1.每种荧光染料,均有自己的最适PH值,此时荧光最强。
当pH改变时,不仅荧光强度减弱,而且波长将有所改变,因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。
2.一放荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定,温度升高常出现温度猝灭。
3.在荧光观察中,常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭,造成观察和照相困难。
为此最好用能量小的长波长光进行观察,需照相时再适当增强激发光。
4.一般荧光染液的浓度在万分之一以下,甚至亿万分之一,也能使标本着色。
在一定的限度内,荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强,但超过限度,荧光强度反而下降,这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。
常见荧光通道命名
在荧光成像和荧光定量分析中,常见荧光通道的命名通常与荧光染料的激发和发射波长有关。
不同的荧光染料有不同的激发和发射特性,因此它们通常被分配到特定的通道以便于识别和管理。
以下是一些常见的荧光通道命名:1. FAM (Fluorescein Amidite): FAM是一种常用的荧光染料,其激发波长通常在494-590纳米之间,发射波长在515-605纳米之间。
FAM 通道通常用于标记DNA或RNA分子。
2. VIC (Violet Invader): VIC是一种荧光染料,其激发波长在405-470纳米之间,发射波长在490-570纳米之间。
VIC通道常用于多种应用,包括细胞标记和DNA/RNA检测。
3. Cy5 (Cyanine 5): Cy5是一种荧光染料,其激发波长在649-680纳米之间,发射波长在670-705纳米之间。
Cy5通道通常用于远红外荧光成像和生物检测。
4. Cy3 (Cyanine 3): Cy3是一种荧光染料,其激发波长在554-570纳米之间,发射波长在570-605纳米之间。
Cy3通道常用于双色或多色荧光标记。
5. Alexa Fluor 488 (AF488): AF488是一种荧光染料,其激发波长在495-540纳米之间,发射波长在515-555纳米之间。
AF488通道用于绿色荧光标记。
6. Alexa Fluor 532 (AF532): AF532是一种荧光染料,其激发波长在532-580纳米之间,发射波长在540-590纳米之间。
AF532通道用于红色荧光标记。
7. Alexa Fluor 647 (AF647): AF647是一种荧光染料,其激发波长在642-685纳米之间,发射波长在655-700纳米之间。
AF647通道通常用于远红外荧光标记。
8. Pacific Blue (PB): PB是一种荧光染料,其激发波长在405-470纳米之间,发射波长在455-495纳米之间。
常用荧光染料的激发及发射波长
492
518
5-Carboxynapthofluorescein (pH 10)
512/598 563/668 Ratio Dye, pH
5-Carboxytetramethylrhodamine (5-TAMRA) 542
568
5-FAM (5-Carboxyfluorescein)
492
518
5-HAT (Hydroxy Tryptamine)
Anilin Blue Anthrocyl stearate APC (Allophycocyanin) APC-Cy7 APTRA-BTC = Ratio Dye, Zn2+ APTS Astrazon Brilliant Red 4G Astrazon Orange R Astrazon Red 6B Astrazon Yellow 7 GLL Atabrine ATTO-TAG™ CBQCA ATTO-TAG™ FQ Auramine Aurophosphine G Aurophosphine BAO 9 (Bisaminophenyloxadiazole) BCECF (high pH) BCECF (low pH) Berberine Sulphate Beta Lactamase BFP blue shifted GFP (Y66H)
荧光素名称
激发波长 发射波长 备注 (nm) (nm)
1,5 IAEDANS
336
490
1,8-ANS
372
480
4-Methylumbelliferone
385
502
5-carboxy-2,7-dichlorofluorescein
504
529
常用荧光染料的激发和发射波长
常用荧光染料的激发和发射波长荧光染料广泛应用于生物医学、材料科学、光电子学等领域,其特点是在受到激发后会发出可见光,具有较高的荧光量子产率和灵敏度。
在实际应用中,荧光染料的激发和发射波长显得尤为重要,因此本文将整理常用荧光染料的激发和发射波长,方便读者在实验或研究中的选择。
常用荧光染料1. FITC (荧光同型素-异硫氰酸酯)FITC是一种广泛应用于生物学实验的荧光染料,常用于标记蛋白质、抗体、药物等分子,其最大吸收波长和最大发射波长分别为495 nm和519 nm。
FITC的分子量小,荧光量子产率高,这使得它成为一种理想的荧光标记分子。
2. Rhodamine 123Rhodamine 123是一种阳离子荧光染料,可在细胞中标记线粒体,同时也可在许多生物学应用中标定其他细胞器。
Rhodamine 123的最大吸收波长和最大发射波长分别为507 nm和529 nm,其荧光量子产率高,荧光亮度高。
3. Texas RedTexas Red是一种常用的激发波长长达596 nm的荧光染料,在荧光共振能量转移等实验中被广泛应用。
Texas Red的最大发射波长在610 nm左右,其在荧光共振能量转移实验中能够提供强烈的荧光标记。
4. PE (腺苷酸酰基酯)PE是一种被广泛用于流式细胞仪实验中的荧光染料,其最大激发波长为488 nm,最大发射波长在575 nm左右。
PE作为一种非常亮的荧光染料,可用于标记和鉴定特定类型的细胞。
荧光染料的选择在实验或研究中,需要根据具体的情况选择合适的荧光染料。
对于激发波长和发射波长的选择,一些因素应该被考虑,如:•研究对象的荧光信号贡献;•其他染料的交叉激发和发射波长;•激发和发射波长的设备可用范围。
一般来说,应选择滤光片相对集中并且有较高吸收的荧光染料,以确保设备需要的能量和检测返回信号的量达到最大程度。
总结本文简要介绍了几种常用的荧光染料及其特性,这些荧光染料可以分别从不同角度用于生物学、光学、材料学等领域的研究和实验中。
常用染料的激发与发射
常用染料的激发与发射 IMB standardization office【IMB 5AB- IMBK 08- IMB 2C】常用荧光染料的激发和发射波长荧光染料的使用吖啶橙:吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料,它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光,DNA呈绿色荧光,RNA呈橙红色荧光。
EB:染色DNA和RNA荧光素双醋酸酯(FDA):FAD?本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。
一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。
它不能自由出入原生质膜,因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。
5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L甘露醇中.使用时,使最终浓度为%。
荧光染料Ho33342和若丹明123:活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。
一般的生物染料不能穿透细胞膜,只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性,染料才能进入细胞内。
但有些活体染料能进入活细胞,并对细胞不产生毒性作用。
荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。
Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合,若丹明123能与线粒体进行特异的结合。
采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。
荧光组化实验中应注意的几个问题:1.每种荧光染料,均有自己的最适PH值,此时荧光最强。
当pH改变时,不仅荧光强度减弱,而且波长将有所改变,因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。
2.一放荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定,温度升高常出现温度猝灭。
3.在荧光观察中,常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭,造成观察和照相困难。
为此最好用能量小的长波长光进行观察,需照相时再适当增强激发光。
4.一般荧光染液的浓度在万分之一以下,甚至亿万分之一,也能使标本着色。
在一定的限度内,荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强,但超过限度,荧光强度反而下降,这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。