实验十一 多管发酵法测定水中大肠菌群PPT教学课件

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2)平皿分离(证实试验)
水中除大肠菌群外,尚有其它细菌可能引 起糖类发酵,因此需要进一步证实。
将初发酵管中已发酵的菌液接种于伊红美 兰培养基,37 ºC培养24 h,根据菌落特征(带 核心的、有金属光泽的深紫色菌落),挑取可 能为大肠菌群的菌落制片,经革兰氏染色,进 一步证实是否为百度文库肠菌群。
水样的稀释: 10-1与10-2
接种:分别吸取1ml 10-2 、 10-1和原水样接入装 有10ml普通浓度乳糖蛋白胨发酵管 ;另取10ml原 水样接入装有5ml三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵管 , 混匀后,37 ℃培养24 h,24 h未产气的继续培养 48 h。
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(2)平板分离 将经24 h和48 h培养后产酸产气的发酵管,分
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10ml×100 1ml×100 1ml×10-1 1ml×10-2


1支


各3支
图1 2020/12/10 多管发酵测定水中大肠菌群的操作步骤和结果解释 11
PPT教学课件
谢谢观看
Thank You For Watching
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二、实验原理
发酵法: 又称多管发酵法或三步发酵法
1) 初发酵(推测试验): 将不同稀释度的水样,分别接种于含有乳
糖等糖类的培养液中(3倍或1倍乳糖液),经 37 ºC培养24 h,观察产酸产气情况,培养基内 加有溴甲酚紫作为PH指示剂,细菌产酸后, 培养基即由原来的紫色变为黄色,以初步判 断是否有大肠菌群存在。
实验十一(综合实验)
多管发酵法测定水中大肠菌群
考查内容: 一、预习报告(包括提问) 二、操作(无菌操作,随机抽看) 三、实验报告
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多管发酵法测定水中大肠菌群
一、实验目的 二、实验原理 三、实验材料 四、实验步骤 五、实验报告
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一、实验目的
1、学习测定水中大肠菌群数量的多管发酵法。 2、了解大肠菌群的数量在饮水中的重要性。
别划线接种于伊红美蓝琼脂平板上,再于37 ℃培 养18~24 h,将符合下列特征的菌落进行染色镜 检。
深紫黑色,有金属光泽;
紫黑色,不带或略带金属光泽;
淡紫红色,中心颜色较深。
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(3)复发酵试验 将镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌株重复
初步发酵试验。并根据初发酵管试验的阳性管 查表,即得大肠菌群数。
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3) 复发酵试验(完成实验)
将上述可能为大肠菌群的菌落再次转接入 1倍乳糖培养液中,经37 ºC培养24 h,产酸产 气者即最后确证为存在大肠菌群。
产酸、产气分别记为阳性反应,不产酸、 产气则记为阴性反应;
根据阳性管数量,查表求得水体大肠菌群 的数量。
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三、实验材料
1、培养基: 乳糖蛋白胨发酵管(内有倒置小套管),三倍
浓缩乳糖蛋白胨发酵管(瓶)(内有倒置小套 管),伊红美蓝琼脂平板,灭菌水。 2、仪器或其他用具:
载玻片,灭菌带玻璃塞空瓶,灭菌吸管,灭 菌试管等。
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四、操作步骤
1.水样的采取 实验室提供水样 2.河水的检查 (1)初(步)发酵实验
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