2012-9-12 减数分裂标本的制备和观察1
植物减数分裂制片观察
汇报人：XX
目录
• 引言 • 植物减数分裂的基本知识 • 制片前的准备工作 • 制片过程详解 • 观察与记录 • 实验结果展示与讨论 • 注意事项与实验技巧
01
引言
Chapter
目的和背景
01
研究植物生殖细胞的发育过程
减数分裂是植物生殖细胞形成过程中的重要环节，通过对减数分裂的观
结果分析与讨论
染色体行为异常与遗传变异
在实验中观察到部分细胞的染色体行为异常，如染色体不分离、落后等，这些异常行为 可能导致遗传变异。
纺锤丝的作用机制
纺锤丝的形成与微管蛋白的聚合有关，其牵引力确保了染色体的正确分离。纺锤丝的异 常可能导致染色体分离错误，进而引发遗传问题。
细胞质分裂与细胞壁形成的调控
1 2
染色体形态和数量变化
在减数分裂过程中，可以观察到染色体经历了浓 缩、配对、交换、分离等一系列形态和数量上的 变化。
纺锤丝的形成与作用
纺锤丝在减数分裂过程中形成，牵引染色体向细 胞两极移动，确保染色体的正确分离。
3
细胞质分裂与细胞壁形成
在减数分裂后期，细胞质分裂，细胞壁在赤道板 位置形成，将母细胞分为两个子细胞。
其他辅助器材
根据实验需求，准备好其他辅助器材，如吸水纸、擦镜纸 、计时器等。
04
制片过程详解
Chapter
取材与固定
选择适当材料
选用分裂旺盛的植物组织，如洋葱根尖、小麦幼穗 等。
固定液选择
常用Carnoy固定液（无水乙醇:冰醋酸=3:1）或FAA 固定液（福尔马林:冰醋酸:50%乙醇=5:5:90）。
观察顺序
02
按照减数分裂的时期顺序进行观察，有助于理解整个分裂过程
小鼠减数分裂标本的制备及观察(“减数分裂”相关文档)共7张
动物生殖细胞有丝分裂过程
雌雄小鼠生殖细胞减数分裂模式对比
滴片，Giemsa染色，镜细检。线期
偶线期
2、 使用油镜找出减数分裂各时相，着重观察第一次减数分裂的形态变化。
低倍镜：目镜测微尺每格代表的长度= ×lO(μm)= μm
小甲鼠醇减 ：数冰分醋裂酸标（本3：的1制）备固及定观。察
通雌过雄小数鼠鼠生丸殖细胞的减体数外分培裂养模以式增对加比减数分裂相，获得分裂较高的标本
【实验内容】
一、标本制备过程
1. 处死动物，剥离睾丸。2. 取部分睾丸组织，匀浆取上皮细胞悬液。3. 悬液加入培 养液小瓶，置培养箱内培养24小时。4. 培养终止前4小时，加入秋水仙素。5. 收
三、计算人口取腔细上胞皮细低胞渗的核处质理比。例。6. 1000rpm离心8分钟，取沉淀。7. 甲醇：冰醋酸（3：1）固定。 后中掌期期握II减：：二数同四分源分、裂8染体.过标色排滴程体列本中片移在各向赤的，期两道G染观极面i色；上e察体m；的s形a染态特色征，镜检。 减Ex数pe分ri1m裂、e是nt二1精3倍体原生细殖细胞胞在有形丝成配分子时裂的中一种期特殊相的，细胞明分裂确形小式。鼠染色体数目40条。 中期I：2四、分体使排用列油在赤镜道找面上出；减数分裂各时相，着重观察第一次减数分裂的形态变化。 掌10握00减rp前数m离分期心裂I8过：分程钟细中，各线取期沉染期淀色。；体的偶形态线特期征 ；双线期；终变期。
Experiment 13
小鼠减数分裂标本 的制备及观察
【实验目的】
1. 理解小鼠睾丸组织减数分裂标本的制备技术
2. 掌握减数分裂过程中各期染色体的形态特征
【实验原理】
减数分裂是二倍体生殖细胞在形成配子时的一 种特殊的细胞分裂形式。通过小数鼠丸细胞的体外培 养以增加减数分裂相，获得分裂较高的标本
减数分裂观察实验注意事项
减数分裂观察实验注意事项减数分裂是细胞分裂过程中的重要一步，它在生物学研究中有着重要的应用价值。
对于减数分裂的观察实验中，我们需要注意以下几个方面：1. 实验材料的准备：选择适合的实验材料进行减数分裂观察。
比较常用的实验材料有酵母菌、果蝇、线虫、水蛭等。
根据自己的实验目的和研究对象，选择合适的实验模型。
2. 适当处理样本：要对实验材料进行适当的样本处理。
比如使用适当的培养基，控制培养条件，使得实验材料处于最佳状态，以便观察其减数分裂现象。
3. 选择合适的观察方法：根据实验材料的特点和实验目的，选择合适的观察方法。
减数分裂通常使用显微镜观察，可以使用普通显微镜或者荧光显微镜。
对于不同的实验材料，有时还需要使用特殊的染色技术来观察减数分裂过程。
4. 基本的观察过程：进行减数分裂观察时，首先需要找到合适的细胞进行观察。
可以根据细胞的特征，如大小、形状等进行初步筛选。
然后，使用显微镜对选定的细胞进行细致的观察和记录。
可以观察细胞的形态变化、细胞核的形态变化、染色体的核型变化等。
5. 数据分析和结果呈现：观察实验完成后，需要对所得的数据进行分析。
可以根据实验目的，比较不同组的观察结果，寻找规律和差异。
同时，需要合理地呈现实验结果，可以使用图表、图片等形式将结果展示给他人。
6. 注意实验的准确性和可重复性：在进行减数分裂观察实验时，需要注意实验的准确性和可重复性。
要进行多次观察，确保所得结果的可靠性。
同时，要对实验过程中的可能误差进行有效的控制，提高数据的可信度。
7. 注意安全问题：在进行实验时，要注意实验安全。
根据实验材料和操作的要求，采取相应的安全措施，确保自己和他人的安全。
8. 扩展实验内容：减数分裂是一个非常重要的细胞分裂过程，可以从不同的角度来进行研究。
可以探究减数分裂的调控机制、减数分裂异常的影响等方面，进行进一步的实验。
总之，减数分裂观察实验是生物学研究中的重要环节。
在实验过程中，我们需要注意实验材料的准备、适当处理样本、选择合适的观察方法、基本的观察过程等方面。
减数分裂制片技术及显微观察
第二次分裂： 前期Ⅱ：染色体又开始明显缩短，而其包含的两条染色单体 分得很开，只是着丝点仍然没有分裂。 中期Ⅱ：染色体整齐地排列在分裂细胞的赤道板上，出现纺 锤体。 后期Ⅱ：染色体的着丝点分裂为二，两条姐妹染色单体在纺 锤体的牵引下分别移向两极。 末期Ⅱ：染色体分别到两极后，又重新出现核仁和核膜，同 时细胞质分裂为二，从而使一个母细胞分裂为四个子细胞， 称为四分体（四分孢子），每个子细胞内只含有原来母细胞 的半数的染色体（n）。
中期II染色体呈菊花状。 后期II染色体呈四堆。
七、实验作业 1. 制作具减数分裂图象的细胞学片子至少2
张。 2. 绘制精原细胞的分裂相2个。
实验报告 封面源自实验名称 一 实验目的
二 实验材料
三 实验简要操作步骤
四 实验结果
五 讨论
注意事项：
1）染色充分 1）制片时敲打均匀。
植物花粉减数分裂图1
植物花粉减数分裂图2
蝗虫精巢生殖细胞减数分裂标本观察
雄蝗虫的二倍体细胞为23条染色体， 性染色体为XO型。精原细胞：呈圆形 或卵圆形，核大色深，染色质呈团块状， 不规则排列。 减数分裂I
第一次减数分裂可分为前期Ⅰ、中 期Ⅰ、 后期Ⅰ和末期Ⅰ。 前期I：根据核的形态变化可以划分为 细线期、偶线期、粗线期、双线期和终 变期。
中期II:
后期II:
末期II:
中期Ii 极面观
后期II:
精细胞
减数分裂完成
精细胞与精子
三、实验材料
雄蝗虫精巢
四、实验仪器及用具
多媒体显微演示系统、显微镜、电子天平、 酒精灯、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸 水纸、解剖针
实验二.植物花蕾减数分裂制片及观察
实验材料
大葱花序 2n=16
实验方法
1、取材：采集刚现蕾的花序置于固定液内固定24 小时后。分别放入95%、80%的酒精中依次脱水， 于70%的酒精中保存。 2、水洗花药：分别取大葱花序的上、中、下三朵 小花，放在培养皿中水洗。
3、取花药：取出花药放在载玻片上，用滤纸吸取多 余水分，用镊子和解剖针取出花药，每朵小花中有6 个花药，弃去其余部分。每一部位小花分别制片一张。
4、染色：在花药上滴加一滴改良苯酚品红染液，边 用镊子夹碎边染色10分钟，弃去其余残渣，盖上盖 玻片（防止气泡产生） 5、压片：用滤纸包住盖玻片和载玻片，大拇指压片 或用镊子轻匀敲片； 6、镜检：先在低倍镜找到有分裂相的细胞，再用 高倍镜仔细观察染色体的形态特征
实验作业及思考题
1、制作大葱花序减数分裂玻片（上、中、下三个 部位）。 2、画出减数分裂中期Ⅰ、后期Ⅰ 、末期Ⅰ 、中期 Ⅱ、后期Ⅱ、末期Ⅱ六个时期染色体形态图。 思考题：减数分裂过程中染色体的动态变化与遗 传 学三大规律之间的联系。
实验二 植物花蕾减数分裂制片及观察Fra bibliotek实验目的
1 学习和掌握减数分裂玻片的制备方法和 技术； 2 观察高等植物花粉形成过程中减数分裂各 个时期的特征以及染色体的动态变化。
实验原理
减数分离是生物体在性母细胞成熟时， 配子形成过程中发生的一种特殊的细胞分 裂。 染色体复制一次，细胞连续分裂两次， 子细胞染色体数目是母细胞染色体数目的 一半。 偶线期：联会 粗线期：交换 双线期：交叉
减数分裂标本的制作与观察
1.取材和固定
野外捕捉成体雄性蝗虫，浸入卡诺氏固定液中固定，或摘去头部浸泡在生理盐水内。
2.解剖精巢。取出蝗虫，用剪刀剪去头胸部，然后在腹部两侧各剪一刀，掀开背板，取出消化道背面两条黄色的团块即是精巢。它是由许多精小管组成。
3.染色及压片。
1)用镊子取一小段管状精巢（长度最好不超过1mm），置于载玻片上，用解剖针将精小管纵向挑开，滴加适量的醋酸洋红液（改良中性红液），染色15~20min。
五、作业
1. 根据减数分裂不同时期的典型细胞，侧重于染色体的动态变化，绘成见图，并加以注释。
2. 列表比较减数分裂和有丝分裂的异同。
3）依次将载玻片在酒精灯上来回移动几次轻微加热，同时用解剖针轻微拨动花药以促进着色，进一步去除残存的花药壁，滤纸吸去多余染液。
4)加盖玻片，在盖玻片上覆以滤纸，用拇指均匀用力压下，勿使盖玻片移动或压破。
4. 镜检。先在低倍镜下寻找花粉母细胞，一般花粉母细胞较大，圆形或扁圆形，细胞核大，着色较浅。而一些形状较小，整齐一致着色较深的细胞是药壁体细胞，一些形状处于中间略呈扇形的细胞是从四分体脱开后的小孢子或幼小花粉粒。如形状较大，内部较透明并具有明显外壳的细胞则是成熟的花粉粒。观察到有一定分裂相的花粉母细胞后，用高倍镜观察减数分裂各时期染色体的行为和特征。
三、实验材料、用具和药品
1. 材料 植物花及花序，性成熟的蝗虫
2．用具 显微镜 、剪刀、镊子、单面刀片、载玻片、盖玻片等
3．药品 卡诺氏固定液、醋酸洋红染色液
四、实验步骤
（一）பைடு நூலகம்药涂压法
1. 取材：选取适当大小的花蕾，是观察花粉母细胞减数分裂的关键步骤，减数分裂时的植株形态和花蕾的大小，依植物种类和品种不同，须经过实践记录，以备后来参考。通常应从最小的花蕾起试行观察，在花冠现色和花药变黄（或红、紫）之前为好。凡是白天开花的，可在上午7—10时固定。
遗传实验 减数分裂
减数分裂装片制作与观察1 引言减数分裂是有性生殖的生物形成配子时进行的一种特殊的细胞分裂形式。
减数分裂后产生的配子染色体数为体细胞的一半，称作单倍体（haploid）细胞。
有性生殖过程中雌雄配子的结合使得合子细胞的染色体数目与正常体细胞相同，从而保证了子代与亲代染色体数目的稳定。
而另一方面，减数分裂过程中，染色体配对时非姊妹染色单体发生交换，使得染色体上的基因得以重组，因而后代的表型更具多样性。
减数分裂相与又是分裂之间存在较大的差异。
减数分裂可划分为减数第一次分裂和减数第二次分裂。
减数第一次分裂具有较长的前期，可划分为细线期、偶线期、粗线期、双线期和浓缩期（终变期）。
在该时期中发生同源染色体的联会和非姊妹染色单体的交换。
2 实验材料及器材雄性蝗虫一只（每组一只）、显微镜、解剖针、解剖剪、载玻片、盖玻片、平皿、改良苯酚-品红染液、生理盐水、吸水纸3 实验步骤1.取材取雄性蝗虫，从尾部两侧剪开体壁，直至双翅基部，掀开背板露出内部器官。
可见一对淡黄色的精巢位于消化管背面。
用镊子取出精巢置于平皿中，滴数滴生理盐水以保持湿润。
用镊子或解剖针将精巢分离开，可见大量细条状的精细小管。
2.制作装片从盒中取出载玻片，尽量擦干。
用镊子夹取1-2条精细小管置于载玻片上，用吸水纸将水小心地吸干，注意不要将精细小管吸走。
在精细小管上滴加一滴改良苯酚-品红染液，室温下染色10-15min。
盖上盖玻片，在盖玻片上垫1-2层吸水纸，一手稳住载玻片和盖玻片防止发生滑动，另一只手用解剖针柄敲击盖玻片以使精细小管中的细胞分散。
3.镜检先用4倍或10倍物镜观察，当找到良好视野后换40倍物镜或100倍物镜（需要使用镜油）。
寻找和识别减数分裂各个时期的细胞。
并选择两个典型的细胞分裂相进行手绘。
4 实验结果从显微镜下寻找到减数分裂各个时期的细胞。
前期Ⅰ细线期：染色体呈细纤维样，虽然已经完成复制，但看不到成双的染色体。
偶线期：同源染色体发生联会，但此时四分体的结构并不清晰可见。
【VIP专享】小鼠精巢细胞减数分裂标本的制备与观察
小鼠细胞分裂标本的制备与观察一、实验目的a)掌握小鼠精巢染色体标本制作法。
b)观察减数分裂过程中不同时期的染色体。
c)观察腹水瘤细胞有丝分裂中不同时期的染色体形态。
二、实验原理a)减数分裂（Meiosis）是发生于生殖细胞的一种特殊的细胞分裂方式，DNA复制一次，而细胞连续分裂两次，形成单倍体的精子和卵子。
减数分裂远比有丝分裂复杂，经两次细胞分裂，分别称减数分裂Ⅰ、减数分裂Ⅱ，两次分裂间又一个较短的间期，这个间期DNA不复制。
b)雄性动物精子发生于睾丸曲精细管的生精上皮细胞，由其中的精原细胞经多次有丝分裂和生长，形成初级精母细胞，初级精母细胞经减数分裂形成次级精母细胞，次级精母细胞有丝分裂成精细胞，再经一系列变化成精子。
c)因此，通过分离曲细精管、剪碎并加入液体吹打，可使官腔各种细胞游离出来，然后经过低渗、固定、染色等过程就可制成包含减数分裂各期的标本。
三、实验试剂及仪器a)材料：成年雄性小白鼠b)用品：注射器、平皿、尖头镊子、剪刀（普通剪刀、眼科小剪刀）、吸管、离心管、离心机、玻片等。
c)试剂：1、100μg/ml秋水仙素。
2 、2％柠檬酸钠溶液3、 0.075M的KCI4、3:1甲醇:冰醋酸及1:1甲醇:冰醋酸（应现配）5、PH6.8，0.01M的PBS缓冲液6、Gimesa原液7、Gimesa工作液：1份Gimesa原液加9份PH6.8，0.01M的PBS缓冲液，混匀。
工作液应现用现稀释。
四、实验步骤a)细胞收集i.小鼠精巢细胞收集1.注射秋水仙素，增加中期分裂相。
(试验前4－5小时，小鼠腹腔注射秋水仙素0.5ml（100μg/ml）。
2.取睾丸并清洗。
断颈处死小鼠，剖开腹部，取出肾形睾丸，放入盛有4－5 ml2％柠檬酸钠溶液的平皿中，洗去污血，去掉胞外脂肪等物。
3.挑出曲细精管并剪碎。
弃污液，另加柠檬酸钠溶液1 ml，用尖头镊尖将曲细精管拉出，并用眼科剪尽量将其剪碎。
4.游离并收集细胞。
遗传学实验 减数分裂的制片与观察
实验二减数分裂的制片与观察PB12210261 徐导中国科学技术大学生命科学学院【摘要】本实验选取玉米雄花作为实验材料，首先将已固定好雄花的花药剥离出来，然后通过对花粉母细胞进行解离、染色、压片来观察细胞减数分裂的全过程。
【关键词】减数分裂细线期偶线期粗线期双线期终变期【Abstract】In this experiment, we chose Zea mays as the material. We got a lot of cells in meiosis. Then we disposed the cells in order to observe the whole processes of the meiosis.【Key words】Meiosis leptonema zygonema pachynema diplonema diakineses【实验部分】一、实验目的1、了解植物生殖细胞的形成过程；2、熟悉减数分裂各时期的特点，加深对减数分裂的认识；3、掌握植物花粉母细胞的压片技术和方法。
二、基本原理减数分裂（meiosis）,又称成熟分裂（maturation division）是在性母细胞成熟时，配子形成过程中所发生的一种特殊方式的有丝分裂。
性母细胞（2n）连续进行两次核分裂（第一次分裂和第二次分裂），形成四个染色体数目减半的配子(n)。
经过受精，雌雄配子（n）融合为合子，又恢复了体细胞染色体数目（2n）。
确保了亲代与子代间染色体数目的恒定性，从而保证了物种相对的遗传稳定性。
在适当的时候采集植物的花蕾制备染色体标本就可在显微镜下观察到植物细胞的减数分裂。
整个减数分裂可分为下列各个时期：第一次分裂前期Ⅰ减数分裂的特点之一就是前期Ⅰ特别长，而且又较复杂。
通常根据细胞核内结构变化特征又将这一期分成五个时期，即细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。
细线期（leptotene）：这是减数分裂的开始时期，染色质开始浓缩为细而长的丝状，首尾不分，且细线局部可见到念珠状颗粒，即染色粒。
细胞减数分裂制片与减数分 裂过程的观察
四川农业大学 普通遗传学课程组
一、实验目的
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学习和掌握细胞减数分裂染色体标本的制 片方法和技术。 通过观察，进一步熟悉减数分裂全过程， 了解细胞减数分裂过程中染色体的动态变 化，掌握各时期染色体的主要特点。 通过本实验，进一步理解减数分裂的生物 学意义。
v
v
二、实验原理
动 物 细 胞 减 数 分 裂 模 式 图
镜检雄蝗虫精巢细胞减数分裂各时期染色体雄蝗虫精巢细胞减数分裂各时期染色体形态特征形态特征细线期偶线期粗线期双线期终变期中期中期植物花粉母细胞减数分裂各时期染色体植物花粉母细胞减数分裂各时期染色体形态特征形态特征细线期粗线期偶线期双线期终变期中期末期前期中期末期六作业六作业
细胞减数分裂制片与减数分 裂过程的观察
v
五、实验方法与步骤
采集水稻蝗虫（水稻收割期前后） 固定（24h） 取雄蝗虫精巢 解离（3min） 染色（10min～15min） 压片 镜检
雄蝗虫精巢细胞减数分裂各时期染 色体形态特征 细线期 偶线期
偶线期
粗线期
双线期
终变期
中期Ⅰ
中期Ⅱ
精细胞
精子
六、作业
v 绘出你观察到的减数分裂典型时期的分裂
图，并制作一张减数分裂临时封存片。
v 每人写一份实验报告。
细线期
偶线期
粗线期
双线期
终变期
中期Ⅰ
后期Ⅰ
末期Ⅰ
末期Ⅰ
中期Ⅱ
后期Ⅱ
末期Ⅱ
三、实验材料
v
水稻蝗虫（Oxya intricata stal）雄虫的精巢。
雄虫2n=2x=23,XO 雌虫2n=2x=24,XX
雌性
四、实验用具及药品
vБайду номын сангаас
实验一 动物细胞制片技术及减数分裂观察
动物细胞制片技术及 减数分裂观察
一、实验目的
1.了解动物生殖细胞的形成过程，观察减 数分裂过程中染色体的动态变化；
2.学习并掌握制片和染色技术。
二、实验原理
减数分裂是一种特殊方式的细胞分裂，仅 在配子形成过程中发生。这一过程的特点：
1.连续进行两次核分裂，而染色体只复制一次， 结果形成四个核，每个核只含单倍体数的染色 体，即染色体数减少一半，所以称为减数分裂；
3.剥曲精细管: 切取较粗端，约占全长的1/31/2(粗端远离输精管,细胞分裂旺盛，细端近输精 管,多已经生成精子)，弃细端，蒸馏水冲洗，吸 干水分。
4.1NHCL解离2-5分钟,蒸馏水多次冲洗(因为HCL 影响染色)。
5.将材料放在载片上切成约1mm之几段,分置于不 同载片，滴一滴改良苯酚品红，染15-20分钟。
中期Ⅱ:
染色体排列在赤道面上，每个染色体有 一个着丝粒，两条染色单体开始分离。此时 细胞的染色体数为n，每条染色体有两条染 色单体。（减数Ⅱ-----中期）
后期Ⅱ: 两条染色单体分离，移向两极，每极含
n条染色体。（减数Ⅱ-----后期）
末期Ⅱ： 染色体逐渐解螺旋，变为细丝状，核膜
重建，核仁重新形成。胞质分裂，各成为两 个子细胞。（减数Ⅱ-----末期）图一
改良苯酚品红染液
五、实验步骤
1.采集蝗虫: 随蝗虫物种的不同，采集时间有变化。
采集方法可用手抓或用网捕捉。如短角斑腿蝗喜 温暖，可在十月左右，在晴天阳光下的草地用扫 网捕捉。
2.取材固定: 用镊子夹住雄虫尾部，向外拉。可见到一团黄色 组织块，这就是蝗虫的精巢。剔除精巢上的其他 组织，将其放到 Carnoy 固定液中固定1.5-2小时， 再放入70%酒精溶液中。
减数分裂试验观察注意事项
减数分裂试验观察注意事项减数分裂试验是生物学实验中常用的方法，用于研究细胞的有丝分裂过程。
在进行减数分裂试验时，需要注意以下几个方面：1. 细胞的选择：选择的细胞应当是已经分化的成熟细胞，例如根尖细胞、骨髓细胞等。
同时，细胞应当处于有丝分裂的活跃期，以便观察到分裂过程。
2. 细胞处理：将收集到的细胞组织放入含有适当培养基的离子溶液中，使细胞得到充分的营养和水分，保证细胞的正常生活。
3. 细胞染色：在进行减数分裂试验前，一般需要对细胞进行染色处理，以便在显微镜下更好地观察细胞的结构和行为。
常用的染色方法有吉姆萨染色法、姜黄素染色法等。
4. 显微镜观察：减数分裂试验需要使用显微镜对细胞进行观察，因此需要熟悉显微镜的使用方法，调整适当的放大倍数和焦距，以获得清晰的细胞图像。
5. 观察标记：在观察过程中，可以使用荧光标记技术对特定的细胞结构进行标记，例如使用荧光染料标记细胞核、细胞质等结构，以便更好地观察。
6. 数据记录与分析：观察到的细胞图像和其他实验数据需要及时记录下来，以备后续的数据分析和结果说明。
同时，要进行数据的统计和图表绘制，以便更好地展示实验结果。
7. 实验的重复与验证：为了增加实验结果的可信度，应该进行多次实验来验证观察到的现象，并进行统计分析。
多次实验的结果一致性较好，可以使实验结论更加可靠。
8. 安全措施：在进行实验过程中，需要注意个人和实验室的安全。
注意使用实验室的安全设施，佩戴实验室规定的防护用品，遵守实验室的操作规程，保证实验的顺利进行。
综上所述，进行减数分裂试验时需要注意细胞的选择和处理、染色处理、显微镜观察、荧光标记、数据记录与分析、实验重复与验证以及实验的安全等方面。
只有在严格遵守实验要求和注意事项的基础上，才能更好地进行减数分裂试验，并获得准确、可靠的实验结果。
实验一植物细胞减数分裂过程的观察
实验一 植物细胞的减数分裂过程的观察
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一、实验目的
1. 学习掌握制备减数分裂玻片标本的方法和技术 2. 了解高等植物的花粉形成中的减数分裂过程，观
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四、实验步骤
取材
固定
70%乙醇保存
瓶中取花序， 夹取2-3朵小花源自镊子夹碎花药加1滴染液
剥离花药
镊子夹去残渣
染色（5-10分钟） 盖片，压片
注意：冲洗载玻片时先将盖 玻片放到垃圾桶后再冲洗， 不得将盖片冲洗到水槽中。
镜检观察
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图1 玉米花粉母细胞减数分裂过程 -1
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后期Ⅰ
察其染色体的动态变化
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二、实验原理
• 减数分裂:高等生物性母细胞在形成配子时发生连续 两次的核分裂，而染色体只复制一次，最终产生四个 小孢子或精细胞，或是分别产生一个大孢子或卵细胞 及三个退化的极体。两次分裂均包括前期、中期、后 期和末期。前期Ⅰ细分为细线期、偶线期、粗线期、 双线期和终变期等5个时期
• 在分裂过程中，可以辨认染色体形态和数量上的动态 变化，为遗传学的研究提供了直接和间接的的证据
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三、实验材料、器具及试剂
1. 材料：玉米（Zea mays，2n = 20）幼穗 2. 器具：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、
盖玻片和吸水纸 3. 试剂：固定液（甲醇:冰乙酸 = 3:1）
无水乙醇、改良品红
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图1 玉米花粉母细胞减数分裂过程 -2
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作业
制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤
制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤一、引言减数分裂是细胞分裂的一种形式，它发生在生物体生殖细胞中，用于产生具有遗传变异的配子。
为了研究减数分裂过程中的细胞结构和染色体行为，需要准备减数分裂细胞标本，并进行低渗处理。
本文将详细介绍制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤。
二、准备实验材料•细胞培养基•细胞培养器•10% 碘酒溶液•70% 乙醇•石蜡刀片三、操作步骤1. 细胞培养1.1 在细胞培养器中加入适量的细胞培养基，注意保持培养基温度为37摄氏度并含5% CO2。
1.2 将待处理的细胞加入培养基中，并保持培养器内的环境稳定。
2. 收集细胞标本2.1 选取准备标本的适当时刻，确保细胞正处于减数分裂的染色体凝聚阶段。
2.2 小心倒掉培养基，注意不要损坏细胞。
3. 固定细胞标本3.1 加入10% 碘酒溶液，覆盖整个细胞标本。
3.2 将细胞标本在10% 碘酒溶液中固定4-6小时。
4. 脱水处理4.1 从固定的标本中小心倒去碘酒溶液。
4.2 加入70% 乙醇至细胞标本完全覆盖。
4.3 静置标本30分钟，以确保细胞充分脱水。
5. 石蜡渗透5.1 石蜡刀片预热至50-60摄氏度。
5.2 用滤纸吸去乙醇，保持细胞标本表面干燥。
5.3 将细胞标本放置在石蜡刀片上。
5.4 将热的石蜡滴在细胞标本上，使其完全浸润。
5.5 快速冷却，使石蜡迅速凝固。
6. 制备玻片6.1 用石蜡刀片切取凝固的细胞标本，制备成薄片。
6.2 将薄片转移到预先烘烤的玻片上。
7. 染色7.1 根据需要选择合适的染色方法进行染色处理。
7.2 标本染色后根据染色方法进行洗涤，以去除多余染色剂。
8. 覆盖玻片8.1 取一张准备好的玻片，放置在相应位置。
8.2 使用透明胶布将玻片牢固地固定在载玻片上。
9. 结语通过以上步骤，我们可以成功制备减数分裂细胞标本，并进行了低渗处理。
这些标本可以用于进一步研究减数分裂过程中的细胞结构和染色体行为，有助于对生物体遗传变异的理解和探索。
制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤
制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤引言：减数分裂是生物体繁殖中一种重要的细胞分裂方式，用于有性生殖的过程中。
为了研究减数分裂的机制和过程，科学家需要制备高质量的减数分裂细胞标本。
在制备减数分裂细胞标本时，低渗处理是一个关键步骤，它可以帮助保持细胞形态和结构的完整性。
下面将详细介绍制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤。
一、材料准备1. 细胞培养基：根据实验需要选择适当的培养基，如DMEM或RPMI-1640等。
2. 10% PBS：将PBS溶液稀释至10%浓度。
3. 磷酸缓冲液（PB）：配制1M磷酸二氢钾（KH2PO4）和1M磷酸二氢钠（Na2HPO4）溶液，并按比例混合得到pH为7.4的PB缓冲液。
4. 0.25% 吡啶蓝溶液：将0.25g吡啶蓝溶解在100ml PB缓冲液中。
5. 2% 钾氯化铷（KCl）溶液：将2g KCl溶解在100ml去离子水中。
二、细胞处理1. 细胞收集：将培养皿中的细胞用PBS洗涤一次，然后加入足够的PBS悬浮细胞。
2. 离心：将细胞悬液转移到离心管中，并以1000rpm的速度离心5分钟，倒掉上清液。
3. 固定：用10% PBS缓冲液固定细胞，将固定液滴加到细胞沉淀上，轻轻混匀，静置15分钟。
4. 再次离心：以相同的速度和时间离心，倒掉上清液。
三、低渗处理1. 加入低渗处理缓冲液：向沉淀中加入足够的0.25% 吡啶蓝溶液，使其完全浸泡细胞沉淀。
2. 低渗处理时间：根据实验需要和样本类型确定低渗处理时间。
通常情况下，10-30分钟的低渗处理时间足够保持细胞形态和结构的完整性。
3. 再次离心：以相同的速度和时间离心，倒掉上清液。
四、细胞固定1. 加入固定液：向沉淀中加入足够的2% KCl溶液，使其完全浸泡细胞沉淀。
2. 固定时间：根据实验需要和样本类型确定固定时间。
通常情况下，10-30分钟的固定时间足够保持细胞形态和结构的完整性。
01实验一 细胞减数分裂观察
四 实验内容及操作步骤
• 实验内容：
1．采集玉米大喇叭口期雄花序，经固定、解 剖、染色和压片，显微镜下观察； 2．采集蝗虫并剖取精巢，固定后，经解剖、 染色和压片，显微镜下观察。
•
操作步骤：
1. 玉米花药压片（2n = 20） ⑴ 取材：玉米抽穗前的大喇叭口期，取出花序分 枝备用； ⑵ 固定：雄花序在卡诺氏固定液中固定12～24小 时后，可用于制片。 ⑶ 染色和压片；取一枚花蕾，去除颖片，取出花 药，置于干净的载玻片上，吸去多余的固定液， 滴加一滴醋酸洋红染色液，用解剖针将花药切断 成碎段并压出花粉母细胞。静置15～20分钟。加 盖玻片，再在上面覆盖吸水纸，用大拇指压片 （切勿使盖玻片滑动），也可以用解剖针柄轻敲 盖玻片以使细胞和染色体分开。 ⑷ 镜检：低倍镜下寻找花粉母细胞，再用高倍镜 观察减数分裂各个时期染色体的形态和运动特征。
五．结果记录
1.绘图：由于减数分裂是一个连续的过程， 在一张标本玻片上可能不能同时观察到各 个分裂时期染色体的形态特征，因此尽可 能多地寻找细胞分裂相，并绘制实物图。 2.文字说明：在所绘制的图下方用必要的简 短文字加以说明。
六．析讨论
1.将你所观察到的实际情况与课堂教学和教 材所述的细胞减数分裂各个分裂时期染色 体的形态特征加以分析比较，发现有何不 同或相同之处； 2.你在标本片中观察到了哪些分裂相，没有 观察到哪些分裂相，原因何在，你有何见 解；有无新发现，你的见解； 3.分析操作中所出现的失误及其原因。
实验一 细胞减数分裂观察
一 实验目的： 1.学习并掌握细胞减数分裂玻片的制备 方法； 2.观察了解植物和动物配子形成的减数 分裂过程以及染色体的动态变化，加 深对细胞减数分裂的理解。
二 实验原理
• 减数分裂过程中，染色体变化特征如下：减数分裂 是有性繁殖生物形成配子时的一种特殊的细胞分裂 方式，减数分裂和受精作用成为多细胞生物世代间 传递的中间环节，这种分裂方式保证了生物在世代 传递过程中体细胞染色体数目的恒定不变，即都含 有两个基本染色体组（二倍体生物），又可以实现 物种内个体间遗传上的多样性。 • 减数分裂包括两次细胞分裂阶段，第一次是细胞染 色体数目减半的分裂，第二次分裂是细胞染色体数 目等数的分裂。 • 减数分裂过程中，染色体呈现出一系列特征性变化， 据此可分为不同的分裂时期。
实验一植物细胞减数分裂过程的观察
1
一、实验目的
1. 学习掌握制备减数分裂玻片标本的方法和技术 2. 了解高等植物的花粉形成中的减数分裂过程，观
察其染色体的动态变化
2
二、实验原理
• 减数分裂:高等生物性母细胞在形成配子时发生连续 两次的核分裂，而染色体只复制一次，最终产生四 个小孢子或精细胞，或是分别产生一个大孢子或卵 细胞及三个退化的极体。两次分裂均包括前期、中 期、后期和末期。前期Ⅰ细分为细线期、偶线期、 粗线期、双线期和终变期等5个时期
4
四、实验步骤
取材
固定
70%乙醇保存
镊子夹碎花药
加1滴染液
瓶中取花序， 夹取2-3朵小花
剥离花药
镊子夹去残渣
染色（5-10分钟） 盖片，压片
注意：冲洗载玻片时先将盖 玻片放到垃圾桶后再冲洗， 不得将盖片冲洗到水槽中。
镜检观察
5
么么么么方面
• Sds绝对是假的
7
图1 玉米花粉母细胞减数分裂过程 -1
8
后期Ⅰ
9
图1 玉米花粉母细胞减数分裂过程 -2
10
Hale Waihona Puke 业1. 绘制观察到的植物细胞减数分裂不同时期的典型 细胞（示染色体动态特征） 2. 简单描述各时期染色体的形态特征
11
• 在分裂过程中，可以辨认染色体形态和数量上的动 态变化，为遗传学的研究提供了直接和间接的的证 据
3
三、实验材料、器具及试剂
1. 材料：玉米（Zea mays，2n = 20）幼穗 2. 器具：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、
盖玻片和吸水纸 3. 试剂：固定液（甲醇:冰乙酸 = 3:1）
无水乙醇、改良品红
实验3 减数分裂制片技术和显微镜观察
实验3 减数分裂制片技术和显微镜观察一、实验目的1. 学习花粉母细胞涂抹制片技术，观察细胞减数分裂时期染色体变化规律及特征并绘图。
2.观察花蕾或花药长度与减数分裂时期的关系。
二、实验原理减数分裂是生物在性母细胞成熟形成配子过程中发生的一种特殊有丝分裂，它包括连续两次的细胞分裂阶段，最终分裂为染色体数目减半的四个子细胞，从而发育为雌性或雄性配子（n）。
由于植物花药取材容易，操作和鉴定比较方便，故一般都取用花粉母细胞作为减数分裂制片材料。
在生物发育的适宜时期取样、固定、涂片等程序，便可在显微镜下观察到减数分裂过程中染色体的行为变化。
三、实验材料lily百合（2n=24）四、实验步骤（一）取材lily百合：通常花蕾长度18mm（花药长度8mm）时为花粉母细胞分裂始期。
花蕾约40mm（花药长17mm）时为减数分裂终期。
采集18-40mm不同长度的花蕾，固定，保存。
（二）制片从小花中取出花药1~3 枚置于载玻片 滴一滴醋酸洋红溶液 用镊子按压花药 去尽肉眼可见残渣 染色2分钟 盖上盖玻片 在低倍镜下寻找花粉母细胞 高倍镜下观察各分裂相细胞染色体的特征及变化规律.选择典型分裂相的临时片1~2张 在酒精灯火焰上缓缓烘干（不能沸腾！） 将玻片放入液氮罐，在液氮表面冷冻1分钟 取出玻片放在白纸上，手按盖玻片一边，用刀片从另一边将盖玻片揭开置于白纸上（有材料的一面朝上） 滴一滴中性树胶在载玻片上的材料处 原位盖上盖玻片→树胶凝固后镜检。
1. 取花药1枚（截）置载玻片中央2. 加1滴染色液3.用镊子按压，并镊除可见残渣4.放上盖玻片（三）显微镜观察先在低倍镜下寻找具分裂相的花粉母细胞，然后依次转换到高倍镜观察减数分裂各个时期染色体的行为和形态特征。
区分4 类细胞：1 形状较大，圆形，核大，着色较浅的是花粉母细胞。
2 形状较小、着色较深的是花药壁体细胞。
3 形状居中略呈扇形的是四分体的小孢子。
4 形状较大，内部透明并有明显外壳的是成熟的花粉粒。
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实验结果
取上述制片，放在显微镜的载物台上，用低倍镜找到染色体 后，再转换高倍镜进行观察。 精原细胞有丝分裂中期相明确小鼠染色体数目40条
实验结果
使用油镜找出减数分裂各期相，着重观察初级精母细
胞第一次减数分裂的形态变化。
前期I：细线期；偶线期；粗线期；双线期；终变期。 中期I：四分体排列在赤道面上； 后期I：同源染色体移向两极；
遗传学实验
实验1：小鼠减数分裂标本的制备和观察
实验2： 性染色质标本制作和观察
实验3：PTC尝味实验 实验4：数量性状的遗传分析：人类指纹的分析
东南大学医学院
赵主江
验目的
了解小鼠睾丸组织减数分裂标本的制备技术
掌握减数分裂过程中各期染色体的形态特征
实验原理
实验报告
实验报告： 实验目的 实验原理 实验步骤 实验结果
1.
绘出你所看到的减数分裂图像，注明时期。
实验讨论
实验讨论
1. 请你试着分析在本实验中染色体标本制做不佳的
原因可能有哪些？
2. 本实验中，对由小鼠精巢而来的染色体标本进行
镜检时, 发现染色体数有的为40条，而有的则为 20条，为什么？拥有20条染色体的单倍体细胞会 是什么细胞？
实验原理
哺乳动物在性成熟以后，雄
性个体精巢内的配子（精子） 分批分期相继不断地成熟。 因此，小鼠精巢进行一定技 术处理，随时都可以获得减 数分裂过程中各个时期的染 色体标本
实验方法和步骤
预固定
取材
低渗
固定
制片
染色
镜检
实验方法和步骤
① ②
③
取材： 性成熟小鼠处死前3小时注射秋水仙素。 断髓法处死，剥离睾丸，置于盛有柠檬酸钠溶液 的培养皿中，剥去外膜散出曲细精管，更换一次 柠檬酸钠溶液。 剪碎曲细精管，置于离心管中，加9ml柠檬酸钠溶 液，打匀，静置10分钟后，取上清移入另一离心 管中，2000rpm离心3分钟 。
末期I
细线期：染色体细长并相互缠绕，其上常
见染色粒。
偶线期：同源染色体联会，形态仍较细长。
粗线期：每条染色体由两条染色单体构成，
四分体形成，染色体变得粗短，同源染色
体开始分开，其间开始发生交叉。
双线期：染色体继续变粗变短，同源染色 体开始分离，只在交叉部位联在一起。核 仁显著变小。
3. 根据你本次实验的经验，请问染色体标本制作的
关键要点有哪些？
思考题
1. 2.
秋水仙素的作用 实验步骤中低渗、预固定、固定的作用
减数分裂（Meiosis）： 是指有性生殖生物在配 子形成过程中，染色体 数目减半的细胞分裂。
Meiosis
实验原理
减数分裂
减数分裂过程中，DNA只复 制一次，细胞连续分裂两次，结 果形成的生殖细胞只含有单倍数 的染色体(n)，其数目是体细胞 的一半，故称为减数分裂。由于 这种分裂方式发生在生殖细胞形 成的成熟期， 故又称成熟分裂。 在减数分裂过程中，同源染 色体发生配对和分离，非同源染 色体重新组合，同时还会发生部 分同源染色体间的交换， 结果 使生殖细胞的遗传基础多样化， 既保证了后代染色体数目的稳定， 又使遗传基础发生许多新的变异。 减数分裂是生物遗传与变异的细 胞学基础。
终变期：染色体更粗短，相互排斥而分离， 四分体出现 “X、 +、8、0” 等形状，核仁、 核膜消失。
中期I：四分体排列在赤道面上。
后期I：同源染色体分开并移向两极。
末期I：同源染色体到达两极，新核形成，
初级精母细胞分裂形成两个次级精母细胞。
染色体数目减半。
实验结果
第二次减数分裂
第二次减数分裂是次级精母细胞分裂 形成精细胞的过程，在这一期无染色 体数目的变化（但DNA的量有变化）， 与一般的有丝分裂很相似。 （1）前期Ⅱ（ Prophase Ⅱ） （2）中期Ⅱ（Metaphase Ⅱ） （3）后期Ⅱ（Anaphase Ⅱ） （4）末期Ⅱ（TelophaseⅡ）
实验方法和步骤
低渗：去上清，加8ml 37℃ KCl，吹打混匀，处理15分钟。 预固定：直接加1ml固定液，吹打混匀，2000rpm离心3分钟 ， 去上清。 固定：加5ml固定液，吹打混匀，静置20分钟， 2000rpm离心3 分钟 ，去上清。 制片：加1ml固定液，吹打混匀，滴片、干燥 。 染色：Giemsa染色8分钟 。 镜检：取分散适中，染色体形态良好的分裂相观察。