2012-9-12 减数分裂标本的制备和观察1
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遗传学实验
实验1：小鼠减数分裂标本的制备和观察
实验2： 性染色质标本制作和观察
实验3：PTC尝味实验 实验4：数量性状的遗传分析：人类指纹的分析
东南大学医学院
赵主江
实验一 小鼠减数分裂标本的制备和观察
实验目的
了解小鼠睾丸组织减数分裂标本的制备技术
掌握减数分裂过程中各期染色体的形态特征
实验原理
实验报告
实验报告： 实验目的 实验原理 实验步骤 实验结果
1.
绘出你所看到的减数分裂图像，注明时期。
实验讨论
实验讨论
1. 请你试着分析在本实验中染色体标本制做不佳的
原因可能有哪些？
2. 本实验中，对由小鼠精巢而来的染色体标本进行
镜检时, 发现染色体数有的为40条，而有的则为 20条，为什么？拥有20条染色体的单倍体细胞会 是什么细胞？
减数分裂（Meiosis）： 是指有性生殖生物在配 子形成过程中，染色体 数目减半的细胞分裂。
Meiosis
实验原理
减数分裂
减数分裂过程中，DNA只复 制一次，细胞连续分裂两次，结 果形成的生殖细胞只含有单倍数 的染色体(n)，其数目是体细胞 的一半，故称为减数分裂。由于 这种分裂方式发生在生殖细胞形 成的成熟期， 故又称成熟分裂。 在减数分裂过程中，同源染 色体发生配对和分离，非同源染 色体重新组合，同时还会发生部 分同源染色体间的交换， 结果 使生殖细胞的遗传基础多样化， 既保证了后代染色体数目的稳定， 又使遗传基础发生许多新的变异。 减数分裂是生物遗传与变异的细 胞学基础。
实验结果
取上述制片，放在显微镜的载物台上，用低倍镜找到染色体 后，再转换高倍镜进行观察。 精原细胞有丝分裂中期相明确小鼠染色体数目40条
Leabharlann Baidu
实验结果
使用油镜找出减数分裂各期相，着重观察初级精母细
胞第一次减数分裂的形态变化。
前期I：细线期；偶线期；粗线期；双线期；终变期。 中期I：四分体排列在赤道面上； 后期I：同源染色体移向两极；
实验方法和步骤
低渗：去上清，加8ml 37℃ KCl，吹打混匀，处理15分钟。 预固定：直接加1ml固定液，吹打混匀，2000rpm离心3分钟 ， 去上清。 固定：加5ml固定液，吹打混匀，静置20分钟， 2000rpm离心3 分钟 ，去上清。 制片：加1ml固定液，吹打混匀，滴片、干燥 。 染色：Giemsa染色8分钟 。 镜检：取分散适中，染色体形态良好的分裂相观察。
末期I
细线期：染色体细长并相互缠绕，其上常
见染色粒。
偶线期：同源染色体联会，形态仍较细长。
粗线期：每条染色体由两条染色单体构成，
四分体形成，染色体变得粗短，同源染色
体开始分开，其间开始发生交叉。
双线期：染色体继续变粗变短，同源染色 体开始分离，只在交叉部位联在一起。核 仁显著变小。
终变期：染色体更粗短，相互排斥而分离， 四分体出现 “X、 +、8、0” 等形状，核仁、 核膜消失。
中期I：四分体排列在赤道面上。
后期I：同源染色体分开并移向两极。
末期I：同源染色体到达两极，新核形成，
初级精母细胞分裂形成两个次级精母细胞。
染色体数目减半。
实验结果
第二次减数分裂
第二次减数分裂是次级精母细胞分裂 形成精细胞的过程，在这一期无染色 体数目的变化（但DNA的量有变化）， 与一般的有丝分裂很相似。 （1）前期Ⅱ（ Prophase Ⅱ） （2）中期Ⅱ（Metaphase Ⅱ） （3）后期Ⅱ（Anaphase Ⅱ） （4）末期Ⅱ（TelophaseⅡ）
实验原理
哺乳动物在性成熟以后，雄
性个体精巢内的配子（精子） 分批分期相继不断地成熟。 因此，小鼠精巢进行一定技 术处理，随时都可以获得减 数分裂过程中各个时期的染 色体标本
实验方法和步骤
预固定
取材
低渗
固定
制片
染色
镜检
实验方法和步骤
① ②
③
取材： 性成熟小鼠处死前3小时注射秋水仙素。 断髓法处死，剥离睾丸，置于盛有柠檬酸钠溶液 的培养皿中，剥去外膜散出曲细精管，更换一次 柠檬酸钠溶液。 剪碎曲细精管，置于离心管中，加9ml柠檬酸钠溶 液，打匀，静置10分钟后，取上清移入另一离心 管中，2000rpm离心3分钟 。
3. 根据你本次实验的经验，请问染色体标本制作的
关键要点有哪些？
思考题
1. 2.
秋水仙素的作用 实验步骤中低渗、预固定、固定的作用
实验1：小鼠减数分裂标本的制备和观察
实验2： 性染色质标本制作和观察
实验3：PTC尝味实验 实验4：数量性状的遗传分析：人类指纹的分析
东南大学医学院
赵主江
实验一 小鼠减数分裂标本的制备和观察
实验目的
了解小鼠睾丸组织减数分裂标本的制备技术
掌握减数分裂过程中各期染色体的形态特征
实验原理
实验报告
实验报告： 实验目的 实验原理 实验步骤 实验结果
1.
绘出你所看到的减数分裂图像，注明时期。
实验讨论
实验讨论
1. 请你试着分析在本实验中染色体标本制做不佳的
原因可能有哪些？
2. 本实验中，对由小鼠精巢而来的染色体标本进行
镜检时, 发现染色体数有的为40条，而有的则为 20条，为什么？拥有20条染色体的单倍体细胞会 是什么细胞？
减数分裂（Meiosis）： 是指有性生殖生物在配 子形成过程中，染色体 数目减半的细胞分裂。
Meiosis
实验原理
减数分裂
减数分裂过程中，DNA只复 制一次，细胞连续分裂两次，结 果形成的生殖细胞只含有单倍数 的染色体(n)，其数目是体细胞 的一半，故称为减数分裂。由于 这种分裂方式发生在生殖细胞形 成的成熟期， 故又称成熟分裂。 在减数分裂过程中，同源染 色体发生配对和分离，非同源染 色体重新组合，同时还会发生部 分同源染色体间的交换， 结果 使生殖细胞的遗传基础多样化， 既保证了后代染色体数目的稳定， 又使遗传基础发生许多新的变异。 减数分裂是生物遗传与变异的细 胞学基础。
实验结果
取上述制片，放在显微镜的载物台上，用低倍镜找到染色体 后，再转换高倍镜进行观察。 精原细胞有丝分裂中期相明确小鼠染色体数目40条
Leabharlann Baidu
实验结果
使用油镜找出减数分裂各期相，着重观察初级精母细
胞第一次减数分裂的形态变化。
前期I：细线期；偶线期；粗线期；双线期；终变期。 中期I：四分体排列在赤道面上； 后期I：同源染色体移向两极；
实验方法和步骤
低渗：去上清，加8ml 37℃ KCl，吹打混匀，处理15分钟。 预固定：直接加1ml固定液，吹打混匀，2000rpm离心3分钟 ， 去上清。 固定：加5ml固定液，吹打混匀，静置20分钟， 2000rpm离心3 分钟 ，去上清。 制片：加1ml固定液，吹打混匀，滴片、干燥 。 染色：Giemsa染色8分钟 。 镜检：取分散适中，染色体形态良好的分裂相观察。
末期I
细线期：染色体细长并相互缠绕，其上常
见染色粒。
偶线期：同源染色体联会，形态仍较细长。
粗线期：每条染色体由两条染色单体构成，
四分体形成，染色体变得粗短，同源染色
体开始分开，其间开始发生交叉。
双线期：染色体继续变粗变短，同源染色 体开始分离，只在交叉部位联在一起。核 仁显著变小。
终变期：染色体更粗短，相互排斥而分离， 四分体出现 “X、 +、8、0” 等形状，核仁、 核膜消失。
中期I：四分体排列在赤道面上。
后期I：同源染色体分开并移向两极。
末期I：同源染色体到达两极，新核形成，
初级精母细胞分裂形成两个次级精母细胞。
染色体数目减半。
实验结果
第二次减数分裂
第二次减数分裂是次级精母细胞分裂 形成精细胞的过程，在这一期无染色 体数目的变化（但DNA的量有变化）， 与一般的有丝分裂很相似。 （1）前期Ⅱ（ Prophase Ⅱ） （2）中期Ⅱ（Metaphase Ⅱ） （3）后期Ⅱ（Anaphase Ⅱ） （4）末期Ⅱ（TelophaseⅡ）
实验原理
哺乳动物在性成熟以后，雄
性个体精巢内的配子（精子） 分批分期相继不断地成熟。 因此，小鼠精巢进行一定技 术处理，随时都可以获得减 数分裂过程中各个时期的染 色体标本
实验方法和步骤
预固定
取材
低渗
固定
制片
染色
镜检
实验方法和步骤
① ②
③
取材： 性成熟小鼠处死前3小时注射秋水仙素。 断髓法处死，剥离睾丸，置于盛有柠檬酸钠溶液 的培养皿中，剥去外膜散出曲细精管，更换一次 柠檬酸钠溶液。 剪碎曲细精管，置于离心管中，加9ml柠檬酸钠溶 液，打匀，静置10分钟后，取上清移入另一离心 管中，2000rpm离心3分钟 。
3. 根据你本次实验的经验，请问染色体标本制作的
关键要点有哪些？
思考题
1. 2.
秋水仙素的作用 实验步骤中低渗、预固定、固定的作用