标准操作程序(SOP)的编写

SOP普遍特征
• • • • • • 由实验室相关人员书写 实验室人员能够方便查取 所有程序要符合实验室情况 SOP由作者和/或主任签署并标明日期 可随时根据实验室变化修改 任何变动要签字
HIV检测实验室应建立以下的SOP
样本的采集、接收登记和处理 检测方法和步骤 实验中的质量控制 仪器的使用与维护 结果解释与报告 保密程序 检测数据的记录和报告 追踪和处理 实验室的清洁与消毒 实验室与操作者的安全
标准操作程序（SOP）的编写
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标准操作程序SOP
SOP ：Standard Operational Procedure 为保证某个特定活动进程的一致性而制定的详细 指令
实验室的SOP应涵盖所有的质量活动，包括检测或校准计划、管理性程序、 技术性程序、项目操作程序和记录表格等。由于影响每个实验室的质量活动 的条件和因素不一样，一个SOP只在某个实验室内有效，而不一定适用于其 他实验室。
SOP
HIV抗体确认检测 Washer 430型全自动洗板机清洗与保养
SOP总结
具体、最具操作性、使用频率最高、与实验室 的日常工作密切相关。就是第一次接触的人按 其操作也能完成并保证工作质量。 SOP不是写给人看的，是写给自己实验室人员 做的。 写你所做的，做你所写的，真实记录你已做的。 为保证按写的SOP执行。不仅要有实验室的管 理制度作保证。但最为重要的实验室技术员的 观念和意识。
• 是高质量完成检测工作的一整套详细的书面操作 指南
每一个检测项目都应该制定一份SOP，其中包含有详细的操作程序，如：实验 室实验条件(温度等)、仪器的使用和维护、试剂、质控品、校准品的使用等， 以避免或减少因不同的操作者所引起的误差。 实验人员在操作时应该严格按照SOP进行，实验室主管人员应该督查实验人员 执行SOP。必要时，SOP中的内容，如说明书或相关内容，应该在实验室主管 人员的领导下进行修订，每年至少修订一次。修订后的SOP按审批程序批准后 使用。
ELISA方法检测HIV抗体 SOP
（三） 抗体检测流程 1. 洗板程序： 2. 实验操作 (1) 取出所需酶标条，揭开封条，每孔加稀释液100ul，包括对照孔； (2) 每孔加50ul标本或对照血清，每板设6孔质控对照， 设A1,B1,C1三孔阴性对照，D1孔HIV-1阳性对照，E1孔HIV-2阳性对 照，F1为质控血清； (3) 震荡(微量振荡器900r/min)15秒后，37℃孵育60min； (4) 按洗板程序洗板机洗板，将实验板扣干后，每孔加100ul底物液，18—25℃避光孵育30min； (5) 每孔加100ul终止液终止反应，充分混匀，2小时内读取吸光度。 （四） 检测结果 读板程序：波长450nm，参考波长620nm。振板3秒钟后读取吸光度； 结果判定：实验有效 样本吸光度小于NCx + 0.100为阴性； 样本吸光度大于NCx + 0.100为阳性； 1. 打开酶标仪，进行自检；确认酶标仪、计算机均处在良好运行状态； 2. 对微孔位置确认，对酶标板编号并登记记录；可采用以下微孔分配发放 A1、B、C1 阴性对照 D1 HIV-1 阳性对照 E1 HIV-2 阳性对照 F1 质控血清 其他微孔为样品 3. 调出读板程序，读板； 4. 读板结束后，打印结果； 5. 检查打印结果，编名后存盘。吸光度值等文件名必须与该检验批批号一致。 （五）完成实验 1. 处理废弃物品：按照“传染病检测实验室安全管理作业指导书”要求进行。 2. 清理消毒工作区。 3. 关闭仪器设备。为下次实验做好准备。
操作程序文件SOP内容
质量控制 内部质控，质控品的来源？ 外部质量控制 安全操作和防护
遵循正确的生物安全步骤 废弃物பைடு நூலகம்在漂白液中至少30分钟时才能丢弃废液缸内的废弃物 检测结束后，丢弃所用的反应板。 丢弃移液枪头，手套和其它生物危险物。
操作程序文件SOP内容
参考文献，相关文件
所有文献和指南法规等 如：HIV检测技术规范
筛查试剂 筛查检测 阳性反应 原有试剂加另外一种筛查试剂 重复检测
阴性反应
均阳性反应 送确认实验室 进行确认
一阴一阳
均阴性反应
阴性报告
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2. 所有结果必须核对，并填写记录； 3. 核对填写报告单，并登记记录。
ELISA方法检测HIV抗体 SOP
（七） 质控 1. 每次实验必须做外部质控，并将质控值填入质控图； 2. 根据质控值的位移、趋势等情况，及时纠正实验偏差； 3. 如质控值超出正负2s ，本次实验应重做； 4. 质控血清有明确的标记，保存在-20℃以下，分装量够一周使用； 5. 所有仪器设备定期检查校正，并有记录； 6. 所有仪器设备如有维修，必须有维修记录。 （八）记录 1. 所有实验的原始记录存档； 2. 所有记录应规范登记在册。 七、复查和修订 每年复查、修订一次。 八、参考文件 HIV抗体检测诊断试剂盒说明书 九、相关文件 无 十、附件 无
标准操作程序文件SOP内容
目的 范围 职责和授权 定义 背景
程序
质量控制 安全操作和防护 参考文献 相关文件 附录
操作程序文件SOP内容
目的 本章讲的是什么？应用于什么？ 范围 本SOP应用于什么地方？ 职责和授权 那些人可以做本实验？ 那些人可以发报告 职责和授权
操作程序文件SOP内容
定义 解释出现英文缩写的意义。 SOP 是什么？ 背景 介绍相关知识和相关项目 程序 详细实验过程
附录
试剂保存， 仪器校准， 废物处理， 试剂说明书等
ELISA方法检测HIV抗体 SOP
标准操作规程（SOP） ××××项目 文件编码：LM-002-06 题目： ELISA方法检测HIV抗体 版本： 2.0 作者： ××× 报送日期：2005年1月 生效日期：2005年1月 页数： 3页 审批人员：××× 修订历史：×××
SOP的要求
写你所要做的
HIV: 样品的采集和运送
检测和结果分析
样品的处理和保存
结果报告和发送
做你所写的
将常现工作中所做的记录下来 检测结果、质控结果及分析 患者个人的有关信息（姓名、性别、年龄） 检测人、质检人的签字 标本接收日期、标本的状态、标本的编号 检测后的实验台面，仪器设备等的消毒与处理。 检测试剂的厂家、试剂批号、检测日期
ELISA方法检测HIV抗体 SOP
（六） 结果报告 • 血液标本验收合格后，用筛查检测试剂进行检测，如呈阴性反应，则做HIV抗体阴性报告； 筛查检测反应结果呈阳性反应的标本，须进行重复检测（复检）。 • 复检时用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的试剂重复检测。 • 如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性； • 如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进行确认。应尽可能将重新采集的受 检者血液标本和原有标本一并送检。 样品 1、筛查检测流程图
标准操作规程（SOP）
检测的每一个阶段（现场－实验室－个体）都 要求有并且遵循SOP。 在任何阶段偏离SOP都会严重影响到检测结果 的有效性。 每一个实验室及现场部门都应当接受SOP相关 的培训
– 现场人员接受的SOP培训内容包括：样本的采集、运送、以及结果的 管理。
-实验室人员接受的SOP培训内容包括：样本的处理、检测及结 果的发送。
记录你已做的
根据实际进行修订
标准操作规程（SOP）
SOP为现场及实验室的有效工作提供了保 证。 SOP能够提供明确的检测规范以及预期的 检测结果、并为现场及实验室各部门之间 带来良好的工作关系。
一个标准的SOP文件所具有的标准格式
标题和编号 编写和修改日期 编写和修订人员姓名 方法、目的和原理 相应的职业规范 检测设备和试剂 其它相关步骤 结果的解释和报告 出现问题时所采取的措 施 附录、包括相关的附加 文件如标准表格、设备 及试剂盒说明书等.
HIV检测实验室应建立以下的SOP(实例）
• • • • • • • • • • • • • • • • 1.德宏CDC HIV实验室安全管理防护标准操作程序。 2.德宏CDC HIV实验室样品管理标准操作程序。 3.德宏CDC HIV实验室HIV抗体初筛标准操作程序 {ELISA方法检测HIV抗体（梅里埃诊断试剂盒）}。 4.德宏CDC HIV实验室HIV抗体初筛标准操作程序 {ELISA方法检测HIV抗体（珠海丽珠）}。 5.德宏CDC HIV实验室HIV抗体初筛标准操作程序（Determine HIV1/2（雅 培）。 6.德宏CDC HIV实验室HIV抗体初筛标准操作程序（明胶颗粒凝集法）。 7.德宏CDC HIV实验室HIV抗体确认标准操作程序。 (GENELABS HIV BLOT 2.2试剂盒)。 8.德宏CDC HIV实验室HIV抗体确认标准操作程序(杭州澳亚)。 9.德宏CDC HIV实验室CD4/CD8T淋巴细胞检测标准操作程序 （FACSCount流式细胞仪）。 10.德宏CDC HIV实验室检测结果数据的记录、保存与保密标准操作程序。 11. 德宏CDC HIV实验室抗体质量控制标准操作规序。 12.德宏CDC HIV实验室仪器维护和校准标准操作程序。
版本号 1.0 2.0
批准日期 2003.9 2005.1
审阅人 ××× ×××
ELISA方法检测HIV抗体 SOP
一、目的 本SOP规定了HIV1+2抗体酶联免疫吸附实验的程序和相应的操作。 二、范围 HIV1+2抗体检测。 三、责任 实验室操作人员严格按要求执行。 四、定义 无 五、背景 为使实验结果准确无误，需要技术员从第一步开始就按标准操作进行。 六、程序 本程序适用于Vironostika HIV Uni-Form II plus O诊断试剂盒 （一）设备和材料 酶标仪： RADIM 洗板机： BIORED 恒温孵箱：FOTO 精确移液器： 单通道可调 5ul—50ul、200—1000ul、20ul—200ul 8通道可调50ul—300ul 专用试剂槽 高品质纯净水 （二）试剂配制 使用前将试剂盒从冰箱中取出，室温放置30min。 1） 底物溶液： 2） 洗板缓冲液： 3） 终止液：