植株全氮、全磷的测定

植株全氮、全磷的测定

测N仪器操作

一、测定方法：

1、称样前过100目筛，然后将试管洗净，排号，烘干。

2、称样品0.5000g，并做好记录，称K2SO4 4.5g ,CuSO4*5H2O 0.5g ，或者将两种药品按比例混好过筛后，一次性加入 5 g 混合药品。

不论是先加药品还是称样，都必须在其后将两者摇匀，还要求称好的样全部送至试管底部，加了10 ml 硫酸后继续摇匀，在放到机子上去消煮，否则误差较大。

3、消煮：插上电源后按开关---执行---等40 min后420℃时放样---将水开到最大---打开风机和电动风阀（1 h）。

4、消煮后先放到架子上冷却，再将上面的盖子取下冷却至无白雾。

5、硼酸：1 %：50g溶于5000 ml 水，将配好的35ml甲基红试剂和50ml溴甲酚绿加入5000ml硼酸。甲基红和溴甲酚绿都是称 1 g溶解到1000ml无水乙醇中。

6、NaOH：一瓶默认500g + 1250ml水。

7、0.1mol/L的标准酸：吸取15ml浓硫酸定容到5000ml,即约为0.0558 mol/L的硫酸，换算为标准酸约为0.1116mol/L 的标准酸。

8、标准酸的标定：取少许无水碳酸钠于烧杯，在180--200℃下烘4—6小时，取出放干燥瓶冷却至室温，然后称取约0.22 g 于250毫升锥形瓶中，加50毫升水溶解，各加1--2滴甲基红和溴甲酚绿指示剂，用配好的标准酸滴定，在出现红色后加热一些、冷却，反复直至红色不退去为止，记录用量V。

滴定做三个重复还有一个空白。标准酸浓度计算：C=0.22/（0.05299*V）

标定好的标准酸浓度约为0.1115---0.1117mol/L的H+浓度，开机后可以按右上方的∟● 键，输入计算好的标准酸浓度即可。

二、仪器操作：1、开机按钮：按回车键等几分钟，机子自检完成---self-fest-按手型设置键----定到Receiver---回车键，等颜色（中间瓶）与硼酸颜色相同时将机子盖打开。

2、按empty uwrette (排气)，再按回车（反复操作几次至排尽气）

3、拿出标准酸的管，按filling uwritte(充气)，回车，反复几次放气，充气，将管插入充液。

4、按（§§）蒸馏键，将程序按到KJ-5，results 打到recovery,重量—0.0000g ，将守门拉下即可进行清洗，拿空管进行清洗2次，清洗第二次时不用换管，直接按回车键。

5、空白:将程序按到KJ-1,result---blank, weight ---0.0000 g,拉下守门。

6、测N：程序按到KJ-1，将result—% Nitrotion, weight—输入样品重量，拉下守门。

7、关机：关机前用空管按照清洗程序清洗2遍，机子擦干净，用洗瓶加水至中间的滴定管，淹没最上面的短电极，关机。

本仪器要求测氮时空白小于0.2 ml,一般当天消煮的空白为0.065左右，消煮好隔

夜测定的空白为0.1215左右，空白管要求无称药前无灰尘，加硫酸和消煮前都必须摇匀，消煮也要严格控制时间和温度。还有本机“落下守门”相当于蒸馏开关的作用，守门现在不灵敏，优势落下时不蒸馏，就要再让它感应一下，千万不要拿起守门，否则测定出错，而且已经加了水和碱，再放上测定时机子继续加液，数据偏高且溶液太多蒸馏很危险。在水压不够或者水龙头开关被关掉时，也会发生不蒸馏现象。

凯氏定氮法原理

实验原理：样品用浓硫酸消化，硫酸在高温下分解为SO2、H2O和[O],所形成的[O]具有高度的氧化能力，在高温时能够氧化有机质形成CO2。糖类等不含氮的有机质被硫酸分解成CO2 和H2O。蛋白质在硫酸的作用下分解成氨基酸，氨基酸与硫酸作用形成NH3，CO2，SO2和H2O。氨在酸性下与硫酸结合，形成硫酸铵。为了加速消化过程的进行，可在硫酸内加入硫酸钾和硫酸铜的混合粉。消化后的硫酸铵在加入过量的浓NaOH（40%）时，作用生成NH3，将NH3蒸馏出来，收集在一定得硼酸中，然后用标准酸（HCI）滴定，由用去的标准酸可以计算出氮的含量。

仪器设备：研钵，凯氏定氮仪，凯氏烧瓶（50ml），样品粉碎机，消煮炉，分析天平，通风橱，容量瓶（50ml），移液管（25ml，10ml，5ml，1ml），半微量滴定管，粗天平，小漏斗等。

试剂配制方法:1、浓硫酸（比重1.84）2、硫酸钾与硫酸铜合粉的比例10：1 3、0.01的盐酸溶液：先配制约0.1N的盐酸溶液，标定其准确当量浓度，然后吸取10ml于100ml的容量瓶中，加水定容至100ml。

4、1%的硼酸溶液：1g硼酸溶于100ml不含CO2 的蒸馏水当中（煮沸通常用的蒸馏水一直到原体积的1/4-1/5,就可得不含CO2的蒸馏水）。

5、40%的NaOH溶液。

6、混合指示剂：a.甲基红酒精溶液（称取0.1g甲基红于研钵中，先加1ml 95%酒精研磨后，再加74ml 95%j酒精中）。零用时，将a、b两液按2：1比例混合即成，此指示剂在P H5.5时溶液无色，小于或大于5.5时，溶液则呈紫红色或绿色。

实验结果计算N%=（V1-V2）*N*14*50*100%/W(1-M%)*V

公式中：V1————指定样品所用的HCI的毫升数V2——为滴定空白所用的HCI毫升数

N-----HCI的当量浓度14----每毫克当量N的重量（mg）

W-----试样风干重（mg）50----定容的容量瓶毫升数

M%----水分百分率（测定称样的同时称一份测水分）

V-----从消化液中取出供蒸馏的溶液毫升数。

H2SO4—H2O2消煮，钼锑抗比色法

一、待测液的制备（H2SO4—H2O2消煮法）

1 H2SO4—H2O2消煮原理